检索结果-内蒙古大学图书馆

中国食品学报 2016年第1期16卷 61-68页

作者：赵蕊倪辉洪清林肖安风蔡慧农朱艳冰集美大学生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021 厦门市食品与生物工程技术研究中心福建厦门361021 绿麒(厦门)海洋生物科技有限公司福建厦门361021

【目的】分离海洋来源的琼胶酶产生菌,确定其分类地位,研究其所产琼胶酶粗酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性,为琼胶酶的进一步开发应用提供理论依据。【方法】利用以琼胶为唯一碳源的筛选培养基筛选分离产琼胶酶的菌株;采用16S r RN... 详细信息

【目的】分离海洋来源的琼胶酶产生菌,确定其分类地位,研究其所产琼胶酶粗酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性,为琼胶酶的进一步开发应用提供理论依据。【方法】利用以琼胶为唯一碳源的筛选培养基筛选分离产琼胶酶的菌株;采用16S r RNA基因序列分析确定菌株的分类地位;研究菌株所产琼胶酶粗酶的酶学性质;通过测定酶解产物的还原能力和清除自由基ABTS·+的能力,分析酶解产物的抗氧化活性。【结果】分离到一株产胞外琼胶酶的菌株JMUAZ5,根据16S r RNA基因序列分析,该菌株归属于弧菌属(Vibrio sp.);菌株JMUAZ5琼胶酶粗酶具有良好的底物专一性;最适反应温度为40°C,在20°C和25°C条件下稳定;最适反应p H值为8.0,在p H 6.0~10.0范围内稳定;Ca^(2+)和Al^(3+)对酶活性具有强烈促进作用,而Zn^(2+)和Fe^(3+)对酶具有强烈抑制作用;琼胶酶粗酶对测试的抑制剂、去垢剂和变性剂均具有好的抗性;酶解产物琼胶低聚糖具有还原能力和清除ABTS·+的能力。【结论】海洋细菌弧菌属JMUAZ5可产胞外琼胶酶,酶解产物有一定的抗氧化活性,具有潜在应用价值。

关键词：弧菌属琼胶酶酶学性质抗氧化活性

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聚乙二醇法提取江蓠琼脂中的琼脂糖

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中国食品学报 2015年第9期15卷 110-116页

作者：孙宁倪辉杨远帆张秋俊杨依青陈申如集美大学生物工程学院福建厦门361021 福建省水产品深加工工程技术研究中心福建厦门361021 厦门南方海洋中心经济海藻资源化利用及深加工实验室福建厦门361021

琼脂是重要的海洋生物制品,我国主要利用江蓠为原料生产琼脂。琼脂糖是一种高附加值的琼脂深加工产品,目前普遍利用石花菜琼脂为原料生产琼脂糖,尚未建立江蓠琼脂生产琼脂糖的技术。本文用江蓠琼脂生产琼脂糖并测定其品质特征,探索江蓠... 详细信息

琼脂是重要的海洋生物制品,我国主要利用江蓠为原料生产琼脂。琼脂糖是一种高附加值的琼脂深加工产品,目前普遍利用石花菜琼脂为原料生产琼脂糖,尚未建立江蓠琼脂生产琼脂糖的技术。本文用江蓠琼脂生产琼脂糖并测定其品质特征,探索江蓠琼脂的深加工技术。采用聚乙二醇法从江蓠琼脂中提取琼脂糖。在前期研究基础上,用正交试验优化得到琼脂糖的制备工艺:料液比1∶20,提取温度80℃,聚乙二醇浓度0.96 mol/L。在此条件下提取琼脂糖,其硫酸根含量0.33%,凝胶强度1 575 g·cm-2,透明度63.4%,凝固温度39℃,融化温度87℃,结晶紫电泳距离3.4 cm,聚乙二醇电泳距离0.6 cm,与Sigma琼脂糖的理化指标接近。该工艺原料来源广泛、工艺简单,对我国建立和发展琼脂糖工业具有重要的参考价值。

关键词：琼脂糖江蓠琼脂聚乙二醇法工艺品质

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响应面优化微泡菌ALW1产褐藻胶裂解酶的发酵条件

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发酵科技通讯 2016年第2期45卷 75-80页

作者：李永幸杨帆姜泽东倪辉杨秋明肖安风集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021

采用单因素和响应面法对产褐藻胶裂解酶菌种Microbulbifer ***1发酵产酶的培养条件进行优化。通过单因素实验,得到发酵条件如下:培养基初始pH 7.5,接种量5%,装液量50 m L,温度25℃,最大酶活力达到117.1 U/m L。在单因素实验的基础上,通... 详细信息

采用单因素和响应面法对产褐藻胶裂解酶菌种Microbulbifer ***1发酵产酶的培养条件进行优化。通过单因素实验,得到发酵条件如下:培养基初始pH 7.5,接种量5%,装液量50 m L,温度25℃,最大酶活力达到117.1 U/m L。在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken设计和响应面分析,得到最佳的发酵培养条件:培养基初始pH 8.0,接种量6.5%,装液量50m L,温度23℃,褐藻胶裂解酶活力达到130 U/m L,比基础培养条件下提高16.5%。

关键词：微泡菌ALW1 褐藻胶裂解酶响应面分析条件优化

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褐藻胶裂解酶发酵工艺优化及其中试放大

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集美大学学报（自然科学版） 2016年第3期21卷 184-190页

作者：陈艳红杨帆肖安风倪辉朱艳冰蔡慧农集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品与生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021

对产微球茎菌(Microbulbifer sp.)ALW1发酵产褐藻胶裂解酶5 L罐发酵工艺进行优化,建立褐藻胶裂解酶的高产发酵工艺。结果表明:海藻酸钠质量浓度为1 g/L时效果最好,浓度减半或加倍都会使酶活力下降;25℃比20℃更利于产酶;p H值控制在7.5... 详细信息

对产微球茎菌(Microbulbifer sp.)ALW1发酵产褐藻胶裂解酶5 L罐发酵工艺进行优化,建立褐藻胶裂解酶的高产发酵工艺。结果表明:海藻酸钠质量浓度为1 g/L时效果最好,浓度减半或加倍都会使酶活力下降;25℃比20℃更利于产酶;p H值控制在7.5时比自然条件下发酵产酶高峰提前,产酶量变化不大;在此基础上,对罐上工艺进行中试放大,20 L发酵罐酶活力最高为57.0 U/m L,200 L罐酶活力最高为43.5 U/m L,500 L罐酶活力最高为38.3 U/m L,分别是小试水平的39.6%、30.2%、26.5%。

关键词：产微球茎菌ALW1 褐藻胶裂解酶发酵工艺优化中试放大

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重组褐藻胶裂解酶酶解工艺的优化及产物分析

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集美大学学报（自然科学版） 2016年第5期21卷 338-344页

作者：王新侠乔超超倪辉肖安风蔡慧农朱艳冰集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021

为探索假交替单胞菌(Pseudomonas syringae)重组褐藻胶裂解酶降解褐藻胶的动态过程变化,采用DNS法和苯酚-硫酸法分别测定体系还原糖和总糖,根据二者比例,得出酶解产物随时间变化的平均聚合度,从而研究各因素对褐藻胶降解过程的影响,确... 详细信息

为探索假交替单胞菌(Pseudomonas syringae)重组褐藻胶裂解酶降解褐藻胶的动态过程变化,采用DNS法和苯酚-硫酸法分别测定体系还原糖和总糖,根据二者比例,得出酶解产物随时间变化的平均聚合度,从而研究各因素对褐藻胶降解过程的影响,确定褐藻胶酶解工艺条件。结果表明,重组褐藻胶裂解酶降解褐藻胶的适宜工艺条件为:水解温度25℃,p H 7.5,初始底物质量浓度7 g/L,加酶量0.48 U,静置条件下酶解反应210 min。在此工艺条件下,产生的还原糖的质量浓度达0.878 g/L,平均聚合度为3。酶解终产物的质谱鉴定结果显示为单糖、二糖和四糖。

关键词：褐藻胶酶解工艺优化褐藻胶寡糖聚合度

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产微球茎菌琼胶酶基因的克隆及生物信息学分析

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集美大学学报（自然科学版） 2016年第4期21卷 261-268页

作者：高贺王新侠倪辉肖安风蔡慧农朱艳冰集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品与生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门市南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021

以琼脂为唯一碳源的培养基分离出一株产琼胶酶的海洋菌株AG1,16S rRNA基因序列分析显示,该菌株为产微球茎菌(Microbulbifer sp.)。以菌株AG1的基因组为模板,使用琼胶酶特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至p MD18-T载体后进行测序。... 详细信息

以琼脂为唯一碳源的培养基分离出一株产琼胶酶的海洋菌株AG1,16S rRNA基因序列分析显示,该菌株为产微球茎菌(Microbulbifer sp.)。以菌株AG1的基因组为模板,使用琼胶酶特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至p MD18-T载体后进行测序。结果显示,克隆基因的大小为1302 bp,预测编码含有433个氨基酸残基的蛋白质。对该蛋白质进行生物信息学分析,结果表明,该蛋白质序列与来自耐热微泡菌(Microbulbifer thermotolerans)的琼胶酶氨基酸序列相似性为100%,预测本研究克隆的基因编码琼胶酶。该琼胶酶的理论分子质量大小为48.2 ku,理论等电点为5.42。采用同源建模法建立Microbulbifer ***1琼胶酶的三维结构,富含β-折叠。

关键词：产微球茎菌琼胶酶克隆生物信息学

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琼胶酶水解工艺条件的优化及产物分析

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中国食品学报 2015年第12期15卷 99-106页

作者：肖琼肖安风姚德恒朱艳冰倪辉蔡慧农集美大学生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021

为探讨琼胶酶水解琼胶的动态过程变化,采用DNS法测定还原糖,结合苯酚-硫酸法测定体系总糖,根据二者比例,得出体系总糖随时间变化的平均聚合度,从而得出各因素对琼胶水解过程的影响。结果表明,来源于厦门红树林的海洋弧菌JMUAZ6菌株产生... 详细信息

为探讨琼胶酶水解琼胶的动态过程变化,采用DNS法测定还原糖,结合苯酚-硫酸法测定体系总糖,根据二者比例,得出体系总糖随时间变化的平均聚合度,从而得出各因素对琼胶水解过程的影响。结果表明,来源于厦门红树林的海洋弧菌JMUAZ6菌株产生的琼胶酶,其水解琼胶的适宜工艺条件为:水解温度40℃,p H 7.0,初始底物质量浓度12 g/L,加酶量25%,在120 r/min振荡条件下酶解反应90 min。此工艺条件下产生还原糖的质量浓度2.179 g/L,平均聚合度最低值(DP)3。通过20 L罐放大试验验证小试优化工艺条件具有良好的重现性。采用薄层色谱分析酶解产物的降解情况,结果显示:反应48 h后,终产物为二糖及少量的四糖。

关键词：琼胶酶水解工艺优化聚合度琼胶寡糖

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一株产卡拉胶酶细菌的分离鉴定及其酶学性质

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微生物学报 2015年第2期55卷 140-148页

作者：许彩云朱艳冰倪辉蔡慧农李利君肖安风集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021

【目的】从红树林土壤腐叶中分离出能够产生卡拉胶酶的菌株,对其进行鉴定,并研究其酶学性质。【方法】利用以卡拉胶为唯一碳源的培养基,分离出产卡拉胶酶的菌株;通过形态学观察、16S r DNA序列分析对其进行种属鉴定;对该菌株所产卡拉胶... 详细信息

【目的】从红树林土壤腐叶中分离出能够产生卡拉胶酶的菌株,对其进行鉴定,并研究其酶学性质。【方法】利用以卡拉胶为唯一碳源的培养基,分离出产卡拉胶酶的菌株;通过形态学观察、16S r DNA序列分析对其进行种属鉴定;对该菌株所产卡拉胶酶进行纯化并采用DNS测酶活的方法测定酶学性质。【结果】从红树林土壤腐叶中分离出1株高产κ-卡拉胶酶的菌株ASY5,经鉴定该菌株为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas ***5)。纯化得到的κ-卡拉胶酶的分子量约为30 k Da;酶学性质试验表明,其最适反应温度和p H分别为60℃和7.5,在50℃以下酶的稳定性较好,在p H 7.0-9.0范围内酶活力较稳定,对κ-卡拉胶具有良好的底物特异性,以κ-卡拉胶为底物时Km值和Vmax值分别为2.28 mg/m L和147.06μmol/(min·mg),Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Al3+等对酶活有显著的促进作用,而Ag+、Zn2+、Cd2+及SDS对酶活有强烈的抑制作用。【结论】分离到的细菌假交替单胞菌Pseudoalteromonas ***5产生的κ-卡拉胶酶在较高的温度和碱性条件下均具有较高的酶活性,为利用卡拉胶水解酶产生卡拉寡糖的研究和应用奠定了基础。

关键词： κ-卡拉胶酶分离鉴定酶学性质

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κ-卡拉胶酶的中试放大、分离纯化及生物信息学分析

κ-卡拉胶酶的中试放大、分离纯化及生物信息学分析

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中国食品科学技术学会第十二届年会暨第八届中美食品业高层论坛

作者：许彩云肖安风吴昌正倪辉蔡慧农集美大学食品与生物工程学院福建省食品微生物与酶工程重点实验室厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室

【目的】对菌株Pseudoalteromonas ***5产κ-卡拉胶酶的发酵工艺进行中试放大实验;κ-卡拉胶酶经纯化后对其进行生物信息学分析。【方法】对产κ-卡拉胶酶的发酵工艺进行了7 L、20L、200 L的中试放大实验;通过硫酸铵沉淀、离子交换层析... 详细信息

【目的】对菌株Pseudoalteromonas ***5产κ-卡拉胶酶的发酵工艺进行中试放大实验;κ-卡拉胶酶经纯化后对其进行生物信息学分析。【方法】对产κ-卡拉胶酶的发酵工艺进行了7 L、20L、200 L的中试放大实验;通过硫酸铵沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析、SDS-PAGE对κ-卡拉胶酶进行分离纯化并对得到的纯酶进行质谱分析;采用NCBI、Expasy、Motif scan等多种在线生物软件对κ-卡拉胶酶蛋白基因进行生物信息学分析。【结果】发酵放大后,7 L、20 L和200 L罐上发酵产酶规律与摇瓶发酵基本一致,其酶活力最高分别为4428 U/mL、2700 U/mL、918 U/mL;κ-卡拉胶酶纯化后在SDS-PAGE凝胶上得到单一的条带;基于蛋白质的氨基酸序列从蛋白质的理化性质、亲(疏)水性、跨膜区、信号肽、细胞定位、二级结构、结构域和功能域等方面进行生物信息学分析。【结论】随发酵工艺放大κ-卡拉胶酶活呈下降趋势,但依然保持较高的酶活力;生物信息学分析为阐明κ-卡拉胶酶的蛋白结构及作用机理提供了理论基础。

关键词： κ-卡拉胶酶中试放大分离纯化生物信息学分析

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酶解龙须菜粗多糖硫酸基工艺优化

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集美大学学报（自然科学版） 2015年第3期20卷 173-178页

作者：殷勤肖安风朱艳冰蔡慧农倪辉杨秋明集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021

为探索重组芳香基硫酸酯酶水解龙须菜粗多糖的动态过程变化,同时为重组酶的应用提供基础数据,以p ET-28a为表达载体,在大肠杆菌(***)中诱导表达获得能特异性水解硫酸酯的重组芳香基硫酸酯酶.并利用重组芳香基硫酸酯酶水解海藻龙须菜中... 详细信息

为探索重组芳香基硫酸酯酶水解龙须菜粗多糖的动态过程变化,同时为重组酶的应用提供基础数据,以p ET-28a为表达载体,在大肠杆菌(***)中诱导表达获得能特异性水解硫酸酯的重组芳香基硫酸酯酶.并利用重组芳香基硫酸酯酶水解海藻龙须菜中的硫酸基团,以硫酸基含量和硫酸基脱除率为指标,利用单因素试验研究各因素对龙须菜粗多糖硫酸基水解过程的影响.试验确定了脱除龙须菜粗多糖硫酸基团的工艺条件,结果表明,重组芳香基硫酸酯酶水解龙须菜粗多糖的适宜工艺条件为:水解温度40℃,p H值7.0,初始底物5 g/L,加酶量108.14 U,振荡速率120 times/min,酶解反应2 h,在此工艺条件下脱除了78.4%的硫酸基团,凝胶强度提高2.1倍,凝固温度、融化温度分别为38.4℃和91.3℃.重组芳香基硫酸酯酶在酶解过程中水解龙须菜粗多糖中硫酸酯表现出较高的活力.

关键词：重组芳香基硫酸酯酶酶解工艺龙须菜粗多糖硫酸基

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