检索结果-内蒙古大学图书馆

Aptima HPV E6/E7mRNA技术检出宫颈癌及癌前病变的临床效果研究

中国妇产科临床杂志 2018年第4期19卷 341-344页

作者：李莉王林李志芳李婷媛乔友林朱琳陈汶新疆医科大学公共卫生学院乌鲁木齐830011 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院流行病学研究室厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室、国家传染病诊断试剂及疫苗工程技术研究中心、公共卫生学院长治医学院预防医学与公共卫生系新疆医科大学附属肿瘤医院

目的评估Aptima HPV E6/E7 mRNA检测技术在宫颈癌筛查人群和临床就诊患者中检出宫颈癌及癌前病变的效果。方法选取我国山西省长治市3个三甲医院参加宫颈癌筛查的21-70岁妇女及门诊病人共557人作为研究对象,采用LBC与HPV E6/E7 mRNA检测... 详细信息

目的评估Aptima HPV E6/E7 mRNA检测技术在宫颈癌筛查人群和临床就诊患者中检出宫颈癌及癌前病变的效果。方法选取我国山西省长治市3个三甲医院参加宫颈癌筛查的21-70岁妇女及门诊病人共557人作为研究对象,采用LBC与HPV E6/E7 mRNA检测技术对宫颈细胞学标本进行检测,以病理学结果作为诊断金标准,评价两种方法检测宫颈癌及癌前病变的临床效果。结果 HPV E6/E7 mRNA阳性率随着细胞学和病理病变级别的升高而升高。在CIN2＋/CIN3＋中,HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏度与特异度均高于LBC检测;HPV E6/E7mRNA检测的ROC曲线下面积均大于LBC检测。结论 HPV E6/E7 mRNA检测出宫颈癌及癌前病变的能力相比于LBC检测更具优越性。

关键词： HPV E6/E7 mRNA 液基细胞学(LBC) 宫颈上皮内瘤变(CIN)

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人类免疫缺陷病毒1型gp140包膜蛋白三聚体在哺乳动物细胞中的高效表达及其性质鉴定

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病毒学报 2017年第4期33卷 541-549页

作者：杨超张芝晴沈鸿霖高双全李少勇李少伟夏宁邵顾颖厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门361102 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102

本研究目的是通过优化1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)gp140编码基因的密码子和克隆设计,从而实现在293T哺乳动物细胞中高效表达,并对纯化获得的gp140蛋白进行抗原性质鉴定。在本研究中选择HIV-1B亚型NL4-3全基因序列为模板进行gp140克隆构... 详细信息

本研究目的是通过优化1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)gp140编码基因的密码子和克隆设计,从而实现在293T哺乳动物细胞中高效表达,并对纯化获得的gp140蛋白进行抗原性质鉴定。在本研究中选择HIV-1B亚型NL4-3全基因序列为模板进行gp140克隆构建,通过密码子优化、信号肽替换、增加柔性linker、三聚体折叠序列等方法优化设计。通过HIV-1转录反式激活因子tat共转HEK293T细胞进行gp140蛋白表达,采用镍柱纯化。SDS-PAGE、Western blot、ELISA、负染电镜等结果显示目的蛋白纯度高于70%,每升培养基可获得0.5mg gp140蛋白,并且具有良好的抗原活性,电镜下呈现三聚体结构。通过弗氏佐剂与目的蛋白混合免疫Balb/c小鼠,检测小鼠免疫血清显示gp140蛋白能有效刺激机体产生免疫应答。本研究通过优化表达获得B亚型HIV-1NL4-3gp140蛋白,为HIV-1病毒包膜蛋白结构和重组疫苗研究奠定基础。

关键词：人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) 包膜糖蛋白gp140 真核表达密码子优化

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新城疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的初步建立

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中国人兽共患病学报 2017年第6期33卷 481-485,512页

作者：王明睿钟建平李睿王国松陈毅歆厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院厦门361102 厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院厦门361102

目的制备新城疫病毒(NDV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(单抗),并用于建立一种可定量检测NDV病毒含量的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测方法(NDV NP ELISA)。方法基于NDV病毒株F48E9获得NP基因,经原核表达方式制备出重组抗原rNP;免疫小鼠制备N... 详细信息

目的制备新城疫病毒(NDV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(单抗),并用于建立一种可定量检测NDV病毒含量的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测方法(NDV NP ELISA)。方法基于NDV病毒株F48E9获得NP基因,经原核表达方式制备出重组抗原rNP;免疫小鼠制备NDV NP特异性单抗;单抗经HRP标记和配对筛选,建立NDV NP ELISA,分析其特异性、灵敏度、精密度、准确度和检测线性,并分析本方法定量检测的NP含量与PFU病毒滴度的定量相关性。结果建立基于单抗3C10和4E7的NDV NP ELISA,其定量检测NDV rNP的最佳线性范围为0.015~0.250μg/ml(R2=0.9974),回收率在88.4%~106.01%,变异系数小于3.4%;该方法具有良好特异性;该方法定量检测NDV抗原含量与PFU病毒感染滴度有较好的相关性(R2=0.9209)。结论建立NDV NP ELISA,可准确定量检测NDV病毒中的NP抗原含量,为NDV病毒含量的测定提供一种可靠简便的分析方法。

关键词：新城疫病毒核蛋白单克隆抗体定量检测酶联免疫吸附测定

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白细胞介素21作为治疗性药物的研究进展

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中国新药与临床杂志 2017年第10期36卷 565-573页

作者：高大蕊范恒江劳万斌刘狄彤林雅华赵勤俭厦门大学公共卫生学院福建厦门361102 厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心/分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102

白细胞介素21(IL-21)是一种具有多效免疫调节活性的细胞因子,参与先天性免疫反应和适应性免疫反应的多个环节,与自身免疫性疾病、肿瘤、病毒感染等疾病的发病过程相关。研究表明,在动物模型中通过增强或抑制IL-21的生物学功能对多种疾... 详细信息

白细胞介素21(IL-21)是一种具有多效免疫调节活性的细胞因子,参与先天性免疫反应和适应性免疫反应的多个环节,与自身免疫性疾病、肿瘤、病毒感染等疾病的发病过程相关。研究表明,在动物模型中通过增强或抑制IL-21的生物学功能对多种疾病具有治疗意义,多项以重组人IL-21为受试药物的临床试验已经开展。本文就IL-21的生物学功能,以及IL-21作为生化药物在临床治疗中的研究进展和应用前景进行阐述。

关键词：白细胞介素21 细胞因子类临床试验免疫调节重组

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基于酶联免疫斑点技术的丙型肝炎病毒中和抗体检测平台的建立

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厦门大学学报（自然科学版） 2017年第1期56卷 79-84页

作者：熊丽霞刘永亮刘洋葛胜祥厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学生命科学学院厦门大学公共卫生学院福建厦门361102

为建立血清中丙型肝炎病毒(HCV)中和抗体检测及评价手段,运用HCV核心区特异性抗体17H11及链霉亲和素-生物素放大系统,建立了基于酶联免疫斑点(ELISPOT)技术的HCV中和抗体检测平台.结果显示,该平台计数点清晰,可实现阴阳性分开,并能有效... 详细信息

为建立血清中丙型肝炎病毒(HCV)中和抗体检测及评价手段,运用HCV核心区特异性抗体17H11及链霉亲和素-生物素放大系统,建立了基于酶联免疫斑点(ELISPOT)技术的HCV中和抗体检测平台.结果显示,该平台计数点清晰,可实现阴阳性分开,并能有效地检测并评价HCV抗体阳性病人血清的中和作用,表明该平台可实现HCV中和抗体的检测,将有利于HCV疫苗研制中的免疫效果评价.

关键词：丙型肝炎病毒酶联免疫斑点中和抗体

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利什曼病疫苗的研究现状

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017年第5期35卷 499-502,508页

作者：蔡雅霜张志刚王鑫赵勤俭分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门361105 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361105 厦门大学生命科学学院厦门361105 厦门大学公共卫生学院厦门361105

利什曼病是由利什曼原虫引起的一种人兽共患寄生虫病,分布于全球90多个国家,每年新发利什曼病患者130多万,有2万~3万例死亡,给全球尤其是发展中国家带来沉重的社会经济及医疗负担。目前针对利什曼病的防治措施主要为控制传染源和药物治... 详细信息

利什曼病是由利什曼原虫引起的一种人兽共患寄生虫病,分布于全球90多个国家,每年新发利什曼病患者130多万,有2万~3万例死亡,给全球尤其是发展中国家带来沉重的社会经济及医疗负担。目前针对利什曼病的防治措施主要为控制传染源和药物治疗,但均无法消除利什曼病。疫苗接种是行之有效的并具社会经济效益的控制利什曼病的防治手段。因此,利什曼病疫苗的研发具有十分重要的现实意义。本文重点就利什曼原虫致病机制及各类利什曼病疫苗的研究现状进行综述。

关键词：利什曼原虫利什曼病疫苗

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大肠杆菌可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原的制备及应用

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生物技术通报 2017年第9期33卷 252-258页

作者：陈春野刘剑朱瑞李姝璇叶江辉王玮潘德全徐飞海程通夏宁邵厦门大学公共卫生学院分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102 厦门万泰凯瑞生物技术有限公司厦门361003

旨在建立基于大肠杆菌表达系统的高效可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)方法,获得具有较好活性的重组SCCAg抗原并应用于建立抗原检测方法。基于pGEX-6P-1载体和大肠杆菌***2566菌株开展重组SCCAg抗原可溶性表达纯化方法研究,评价... 详细信息

旨在建立基于大肠杆菌表达系统的高效可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)方法,获得具有较好活性的重组SCCAg抗原并应用于建立抗原检测方法。基于pGEX-6P-1载体和大肠杆菌***2566菌株开展重组SCCAg抗原可溶性表达纯化方法研究,评价纯化抗原活性,筛选特异性单克隆抗体,初步建立并评价SCCAg抗原检测方法。结果显示,pGEX-6P-1载体和***2566菌株可用于建立较高效的可溶性表达和纯化SCCAg抗原的方法,获得了具有较高纯度和活性的重组SCCAg抗原,筛选获得特异性单克隆抗体并初步建立了SCCAg管式化学发光检测方法。建立了有效的基于大肠杆菌表达系统的可溶性表达和纯化SCCAg的方法。

关键词：人鳞状上皮细胞癌抗原大肠杆菌表达系统可溶性表达单克隆抗体

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肠道病毒68型新型中和试验方法的建立及其初步应用

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病毒学报 2017年第5期33卷 661-667页

作者：万俊凯王玮侯汪衡李姝璇赵欢郑清炳何水珍程通夏宁邵国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学生命科学学院厦门361102 分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门大学公共卫生学院厦门361102 厦门市疾病预防与控制中心厦门361021

针对肠道病毒68型(EV-D68)建立一种新型快速、高效的中和试验方法,并初步评价其在EV-D68流行病学研究中的应用价值。以灭活EV-D68病毒免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备其单克隆抗体;筛选反应性好、特异性强的抗EV-D68单克隆抗体作为... 详细信息

针对肠道病毒68型(EV-D68)建立一种新型快速、高效的中和试验方法,并初步评价其在EV-D68流行病学研究中的应用价值。以灭活EV-D68病毒免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备其单克隆抗体;筛选反应性好、特异性强的抗EV-D68单克隆抗体作为检测抗体,基于酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT)建立EV-D68高效中和试验方法;进一步比较该方法与传统中和试验方法 Nt-CPE的一致性,并使用该方法对临床血清样本进行检测。共获得10株分泌抗EV-D68单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取一株性能最优的15C5进行生产纯化,鉴定其为IgG3亚型;以15C5为检测抗体,建立了快速检测EV-D68中和抗体的Nt-ELISPOT方法;与Nt-CPE方法比较,Nt-ELISPOT方法将检测时间由5~7d缩短至1d以内,并且两种方法检测结果一致性良好;应用所建立的Nt-ELISPOT方法对厦门地区146份人群血清样本进行检测,显示血清样本EV-D68中和抗体阳性率为98.6%(144/146),提示厦门地区可能存在过EV-D68的流行。本研究基于ELISPOT建立的新型EV-D68中和试验方法快速可靠,适合通量检测,可以应用于EV-D68中和抗体水平的血清学调查,为EV-D68感染的防控工作提供帮助。

关键词：肠道病毒68型(EV-D68) 中和试验中和抗体血清检测

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计算机模拟预测治疗性抗体聚集倾向性的进展及应用

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中国医药工业杂志 2017年第6期48卷 795-801页

作者：毕行建洪奇阳俞海李少伟夏宁邵厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102

由于具有靶向性高、不良反应少等优势,治疗性抗体已成为生物技术产业的重要研究领域。诸多重大疾病如肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、糖尿病、老年性痴呆等都有望用抗体药物进行治疗,以抗体为基础的分子设计和靶向治疗也是近年生物... 详细信息

由于具有靶向性高、不良反应少等优势,治疗性抗体已成为生物技术产业的重要研究领域。诸多重大疾病如肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、糖尿病、老年性痴呆等都有望用抗体药物进行治疗,以抗体为基础的分子设计和靶向治疗也是近年生物医药产业的最大增长点。但目前在抗体药物的研发和生产过程中仍然存在一些问题亟待解决。其中,抗体分子聚集是影响药物成药性的关键因素之一,筛选和设计稳定高效的抗体药物是药物研发早期阶段的重要目标。相较于传统筛选方法,应用计算机模拟技术预测蛋白质的聚集倾向为抗体药物的稳定性和高度可溶性提供了重要参考信息,将有效地提高药物的研发效率。本文重点介绍了已成功应用于治疗性抗体领域的聚集预测方法,并对这些方法的原理与应用前景进行总结,为基于计算机模拟的抗体研究提供参考。

关键词：治疗性抗体聚集倾向性成药性计算机模拟药物研发 DNA重组技术生物信息学

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宫颈细胞内p16/Ki67表达与宫颈癌及癌前病变的关系及其用于HPV阳性人群分流的诊断价值

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中国肿瘤 2018年第4期27卷 311-315页

作者：李莉王林李菊晓李志芳乔友林陈汶朱琳新疆医科大学公共卫生学院新疆乌鲁木齐830001 国家癌症中心、中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院北京100021 厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室、国家传染病诊断试剂及疫苗工程技术研究中心福建厦门361100 华中科技大学同济医学院湖北武汉430000 长治医学院预防医学与公共卫生系山西长治046000 新疆医科大学附属肿瘤医院新疆乌鲁木齐830001

[目的]探讨p16/Ki67双染技术对宫颈癌及癌前病变的检出能力,比较其用于HPV阳性人群分流的诊断价值。[方法]选取2016年9月至2017年5月山西长治三家三甲医院21～70岁参加宫颈癌筛查的妇女及门诊患者共计497例,所有入组研究对象均进行HPV E... 详细信息

[目的]探讨p16/Ki67双染技术对宫颈癌及癌前病变的检出能力,比较其用于HPV阳性人群分流的诊断价值。[方法]选取2016年9月至2017年5月山西长治三家三甲医院21～70岁参加宫颈癌筛查的妇女及门诊患者共计497例,所有入组研究对象均进行HPV E6/E7m RNA检测、液基细胞学检测（LBC）与p16/Ki67双染。[结果 ]p16/Ki67双染的阳性率随细胞学诊断及病理诊断的严重程度的增加而升高（P〈0.05）;p16/Ki67对62例宫颈上皮内瘤变2级及以上（CIN2＋）研究对象检出的灵敏度、特异性分别为69.4%、83.6%,HPV E6/E7m RNA检测分别为82.3%、74.6%,LBC检测分别为80.6%、65.2%。对49例CIN3＋研究对象检出的灵敏度、特异性分别为69.4%、81.9%,HPV E6/E7m RNA检测分别为85.7%、73.3%。在CIN2＋/CIN3＋病例中p16/Ki67的灵敏度与LBC均衡可比,但其特异性明显高于LBC和HPV E6/E7m RNA检测。在HPV E6/E7m RNA检测阳性人群中p16/Ki67双染对CIN2＋检出的灵敏度和特异性分别为82.4%和56.9%,LBC检测为90.2%和29.4%;p16/Ki67双染对CIN3＋检出的灵敏度和特异性分别为81.0%和53.2%,LBC检测为88.1%和27.0%。p16/Ki67双染中对CIN2＋及CIN3＋检出的灵敏度与LBC检测相比均无明显差异（P〉0.05）,但其特异性明显高于LBC检测（P〈0.001）。[结论]p16/Ki67双染技术用于HPV阳性人群的分流具有优于LBC的特异性和与LBC检测相似灵敏度的特性。在经济条件允许或者缺乏病理医生的地区,可以考虑使用p16/Ki67代替细胞学用于宫颈癌的初筛或HPV阳性人群的分流。

关键词： p16/Ki67双染 HPV E6/E7mRNA检测 LBC检测宫颈上皮内瘤变

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