检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2018年第3期38卷 161-168页

作者：林雪张伟赵敏郑子峥夏宁邵厦门大学、分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室、国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 361102 厦门大学公共卫生学院 361102 厦门大学生命科学学院 361102

目的筛选识别呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）核蛋白（N）的单克隆抗体，并对其性质进行鉴定。方法使用大肠杆菌表达系统原核表达重组N蛋白，蛋白质纯化后免疫BALB/c小鼠。通过脾脏免疫、融合获得杂交瘤细胞，结合... 详细信息

目的筛选识别呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）核蛋白（N）的单克隆抗体，并对其性质进行鉴定。方法使用大肠杆菌表达系统原核表达重组N蛋白，蛋白质纯化后免疫BALB/c小鼠。通过脾脏免疫、融合获得杂交瘤细胞，结合有限稀释法亚克隆细胞株，间接酶联免疫吸附试验（ELISA）对单克隆抗体株进行筛选，并通过蛋白质免疫印迹法（Western blot）、ELISA和间接免疫荧光技术对最终筛选的单克隆抗体进行性质鉴定，根据正交试验的结果挑选捕获能力和检测效果较好的抗体进行诊断试剂的初步调试。结果成功构建N-pTO-T7原核表达载体，并成功表达、纯化得到高纯度重组N蛋白用于小鼠免疫，最终筛选获得24株N蛋白的单克隆抗体，24株抗体均具有较好的ELISA反应性，5A2等8株抗体有较好的Western blot检测特性，11H8等13株抗体可用于间接免疫荧光检测，并获得能够实现在病毒上检测N蛋白的优选配对12F2/11H8-HRP和12F2/15A8-HRP。结论本研究成功筛选出可用于N蛋白特异性检测的单克隆抗体及抗体配对，为RSV感染机制的研究及诊断试剂的研发提供实验资料。

关键词：呼吸道合胞病毒 N蛋白单克隆抗体

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HIV-1 CAP2NC蛋白的表达及体外自组装

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生物工程学报 2018年第4期34卷 586-593页

作者：白诗梦张芝晴乔佳明沈鸿霖黄芳高双全李少勇李少伟夏宁邵顾颖厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102 厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102

构建并表达HIV-1 CAP2NC蛋白,探索其体外自组装条件。通过PCR技术扩增HIV-1(NL4-3毒株)CAP2NC基因片段,并将其连接到原核表达载体pTO-T7,获得重组质粒pTO-T7-CAP2NC,然后转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经疏水层析纯化后获得重组蛋白CAP2N... 详细信息

构建并表达HIV-1 CAP2NC蛋白,探索其体外自组装条件。通过PCR技术扩增HIV-1(NL4-3毒株)CAP2NC基因片段,并将其连接到原核表达载体pTO-T7,获得重组质粒pTO-T7-CAP2NC,然后转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经疏水层析纯化后获得重组蛋白CAP2NC。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白CAP2NC可在大肠杆菌可溶高效表达,经纯化后纯度约为95%。ELISA检测表明重组蛋白CAP2NC可被HIV-1衣壳蛋白特异性单克隆抗体识别,具有较好反应活性。重组蛋白透析后在非原性SDS-PAGE中呈现为多种聚体形式。分子筛排阻层析分析CAP2NC蛋白透析后可进行组装,负染电镜进一步观察显示CAP2NC蛋白在RNA存在条件下,可形成空心管状颗粒,其形态结构与HIV-1病毒衣壳体外自组装形成的类似。上述结果表明HIV-1 CAP2NC蛋白具有体外自组装的性质,为进一步在体外研究非成熟病毒样颗粒结构奠定基础。

关键词： HIV-1 CAP2NC蛋白自组装

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分子对接预测病毒表位的研究进展

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中国病毒病杂志 2019年第4期9卷 296-302页

作者：李子真黄洋俞海李少伟夏宁邵厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102 厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102

分子对接技术是基于相互作用分子的结构特征,预测蛋白质或酶与配体相互作用细节和反应机制的方法。与一般的实验方法比较,其具有快捷、自动化、高通量、低成本和信息丰富等特点。至今,由于局限于有限的结构信息,特别是分子的相互作用,... 详细信息

分子对接技术是基于相互作用分子的结构特征,预测蛋白质或酶与配体相互作用细节和反应机制的方法。与一般的实验方法比较,其具有快捷、自动化、高通量、低成本和信息丰富等特点。至今,由于局限于有限的结构信息,特别是分子的相互作用,人们对诸多病毒被受体识别并感染细胞过程和产生免疫保护仍然缺乏详细的理论基础,同时许多病毒导致的疾病仍缺乏有效的疫苗或药物。另一方面利用实验方法进行病原体的研究需要消耗大量的资源和时间,如何加速病毒学相关的基因组学信息分析和新发突发病毒的药物开发等过程,分子对接技术起到了不可或缺的作用。本文主要概述了分子对接技术的理论、搜索算法、打分函数、准确性及其在病毒表位预测中的应用,为计算机模拟的病毒表位预测及疫苗或药物研发提供参考。

关键词：分子对接搜索算法打分函数表位预测肽疫苗病毒表位

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戊型肝炎病毒衣壳蛋白特异性人源单克隆抗体的筛选与鉴定

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中国免疫学杂志 2018年第5期34卷 703-707页

作者：张旭温桂平唐自闽王思令陈佳昕应东刘畅郑子峥(指导) 夏宁邵厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院厦门361102

目的:建立从外周血快速筛选戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)衣壳蛋白特异性人源抗体的方法,从疫苗免疫者外周血中筛选出相应抗体并进行鉴定。方法:采用分选型流式细胞仪获得外周血中HEV衣壳蛋白特异性的记忆B细胞,通过单细胞RT-PC... 详细信息

目的:建立从外周血快速筛选戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)衣壳蛋白特异性人源抗体的方法,从疫苗免疫者外周血中筛选出相应抗体并进行鉴定。方法:采用分选型流式细胞仪获得外周血中HEV衣壳蛋白特异性的记忆B细胞,通过单细胞RT-PCR的方法获得抗体序列,并进行重组表达,最后对获得的人源单克隆抗体进行初步性质鉴定。结果:成功筛选到识别HEV衣壳蛋白的6株人源单克隆抗体,6株抗体均具有抗原结合活性,4株抗体具有中和活性。结论:成功获得HEV衣壳蛋白特异性人源单克隆抗体序列,并进行真核表达,对抗体的性质进行初步鉴定,为后期研究疫苗免疫的人体内的抗体演化打下基础。

关键词：戊型肝炎病毒衣壳人源单克隆抗体流式细胞分选单细胞RT-PCR

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抗体应答研究技术在非人灵长类感染与免疫模型中的应用

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病毒学报 2018年第3期34卷 448-456页

作者：王一文罗文新夏宁邵厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院公共卫生学院

近年来,随着单个B细胞抗体筛选技术与深度测序（Deep Sequencing）的发展,相应技术被广泛应用于人体内抗体应答研究中。但该类技术在非人灵长类（Non-Human Primates,NHPs）抗体应答研究中的应用较为有限。而NHPs由于与人类具有较为相... 详细信息

近年来,随着单个B细胞抗体筛选技术与深度测序（Deep Sequencing）的发展,相应技术被广泛应用于人体内抗体应答研究中。但该类技术在非人灵长类（Non-Human Primates,NHPs）抗体应答研究中的应用较为有限。而NHPs由于与人类具有较为相似的免疫系统,二者在感染或免疫后可以激起相似的获得性免疫应答,尤其是对NHPs产生的针对病原体感染或疫苗的NHP抗体应答谱研究,可以为人类免疫学研究、疫苗设计及生物药物临床转化提供关键信息。本文对目前常用非人灵长类抗体筛选技术的研究进展与应用实例进行了综述,以期为生物大分子药物研究者提供较为完备的参考。

关键词：非人灵长类抗体应答单个B细胞重组技术

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人乳头瘤病毒样颗粒组装研究进展

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病毒学报 2018年第2期34卷 252-258页

作者：史晶洁宋硕王大宁李智海夏宁邵李少伟厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院厦门361102 厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院厦门361102

病毒样颗粒（Virus-like particles,VLPs）作为一种形态结构与真病毒高度相似的空心颗粒,具有真病毒类似特性,在机体内能刺激免疫系统产生高滴度的中和抗体,又因为其缺乏核酸无法复制,近年来一直被作为理想的候选疫苗蛋白。目前上市的... 详细信息

病毒样颗粒（Virus-like particles,VLPs）作为一种形态结构与真病毒高度相似的空心颗粒,具有真病毒类似特性,在机体内能刺激免疫系统产生高滴度的中和抗体,又因为其缺乏核酸无法复制,近年来一直被作为理想的候选疫苗蛋白。目前上市的三种人类乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）疫苗都是属于基因工程VLP疫苗。对于HPV VLP组装的研究能够更好的为疫苗研发方面提供更多的优化手段。该文旨在总结这十几年人乳头瘤病毒VLP组装的研究进展,为HPV以及其它病毒的基因工程疫苗研发提供更多有价值的信息,为人类健康作出贡献。

关键词：人乳头瘤病毒(HPV) 主要衣壳蛋白L1 病毒样颗粒(VLPs) 疫苗组装

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MenAfriVac~接种推广对我国进一步扩大疫苗接种的启示

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中国生物制品学杂志 2019年第1期32卷 124-128页

作者：陈思伊黄小芬吴婷张军夏宁邵赵勤俭厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 厦门大学生命科学学院福建厦门361102 厦门大学公共卫生学院福建厦门361102

疫苗是人类对抗传染性疾病的有力武器,其对人类疾病的预防模式产生了重要影响,从爱德华詹纳使用牛痘脓包作为免疫原预防天花以来,许多疫苗被研制出来以对抗各种传染性疾病^[1]。据世界卫生组织(world Health Organization,WHO)估计,接... 详细信息

疫苗是人类对抗传染性疾病的有力武器,其对人类疾病的预防模式产生了重要影响,从爱德华詹纳使用牛痘脓包作为免疫原预防天花以来,许多疫苗被研制出来以对抗各种传染性疾病^[1]。据世界卫生组织(world Health Organization,WHO)估计,接种疫苗每年可挽救全球200万~300万人生命,若疫苗接种率进一步提升,每年将额外有150万人幸免于难^[2]。

关键词： A群脑膜炎疫苗接种推广监管科学 MenAfriVac^■

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广西柳州地区大学生人乳头瘤病毒感染自然史的前瞻性研究

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病毒学报 2018年第4期34卷 515-521页

作者：卫飞雪崔雪莲郭蒙殷凯黎明强黄守杰苏迎盈吴婷厦门大学公共卫生学院、分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室、国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102 广西壮族自治区柳州市疾病预防控制中心柳州545027

研究广西柳州地区男女性大学生人乳头瘤病毒（HPV）感染的自然史。2014年6月至7月在广西科技大学招募161名有性生活史的大学生,基线访视收集其人口学及性行为信息,之后每隔6个月进行随访,共随访2次。每次访视均采集女性阴道、外阴和肛... 详细信息

研究广西柳州地区男女性大学生人乳头瘤病毒（HPV）感染的自然史。2014年6月至7月在广西科技大学招募161名有性生活史的大学生,基线访视收集其人口学及性行为信息,之后每隔6个月进行随访,共随访2次。每次访视均采集女性阴道、外阴和肛周部位的标本,采集男性外生殖器和肛周部位脱落细胞标本,并对所有标本进行HPV DNA分型检测。使用Kaplan-Meier法分析男女性大学生HPV累积感染和清除的风险差异,采用Logistic回归、Cox比例风险回归和WLW-Cox比例风险回归分别分析HPV基线感染、新发感染和清除的影响因素。男性和女性大学生基线HPV感染率分别为7.7%和16.3%,男性感染率更低[OR（95%CI）=0.23（0.06-0.89）;P=0.03]。大学生HPV新发感染率为7.6（95%CI：3.8-15.2）/1 000人月,未发现性别差异（P=0.69）。平均随访12.5个月后,70.6%（12/17）的感染被清除,清除的中位时间为6.6个月,且男性清除的速度更快[HR（95%CI）=4.37（1.26-15.12）;P=0.02]。广西柳州地区女性大学生HPV感染率高于男性,且HPV感染在女性大学生中清除速度低于男性。

关键词：大学生人乳头瘤病毒(HPV) 自然史

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人乳头状瘤病毒DNA恒温扩增技术在宫颈癌筛查中的应用价值

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中华肿瘤杂志 2018年第4期40卷 313-318页

作者：王林姜明月秦宇李莉吴泽妮李婷媛吴婷陈汶厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心公共卫生学院 361102 国家癌症中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院流行病学研究室 100021 新疆医科大学公共卫生学院乌鲁木齐830011

目的评价人乳头状瘤病毒（HPV）DNA恒温扩增检测技术Isomega应用在高危型别HPVDNA检测及宫颈病变诊断中的可行性及有效性。方法招募2774名30-64岁来自内蒙古自治区健康妇女进行宫颈癌筛查。采用Isomega和cobas4800HPV检测技术进行HPVDN... 详细信息

目的评价人乳头状瘤病毒（HPV）DNA恒温扩增检测技术Isomega应用在高危型别HPVDNA检测及宫颈病变诊断中的可行性及有效性。方法招募2774名30-64岁来自内蒙古自治区健康妇女进行宫颈癌筛查。采用Isomega和cobas4800HPV检测技术进行HPVDNA检测，应用线性探针法（INNO-LiPA）对两种检测方法结果不一致的标本进行分型检测。以病理诊断为金标准，评价Isomega和cobas4800方法检出宫颈上皮内瘤变（CIN）2级及以上病变的有效性和准确性。结果Isomega与cobas4800检出HPVDNA的总一致率为94．84％（Kappa=0．82），检出HPVl6、HPVl8型和其他型别HR-HPV的一致率分别为99．68％（Kappa=0．95）、99．78％（Kappa=0．91）和94．34％（Kappa=0．76）。与INNO-LiPA校正结果比较，Isomega检出HPVl6、HPVl8和其他型别HR-HPV的一致率分别为99．71％（Kappa=0．95）、99．86％（Kappa=0．94）和95．76％（Kappa=0．87）；cobas4800的一致率分别为99．82％（Kappa=0．97）、99．86％（Kappa=0．94）和97．51％（Kappa=0．90）。Isomega检出CIN2＋（包括CIN2、CIN3和鳞癌）的敏感度和特异度分别为87．76％和82．94％，cobas4800分别为89．80％和85．06％。结论Isomega与cobas4800HPV检测方法的一致性较好，检测HPVl6和18型的准确性高，具有较高的敏感度和特异度．可用于临床检测和大规模人群的宫颈癌筛查。

关键词：人乳头状瘤病毒宫颈肿瘤筛查

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B族链球菌疫苗研究现状及展望

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中国生物制品学杂志 2018年第11期31卷 1274-1278,1282页

作者：殷晓辰林雅华王鑫赵勤俭厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 厦门大学生命科学学院福建厦门361102 厦门大学公共卫生学院福建厦门361102

B族链球菌(group B streptococcus,GBS)主要危害新生儿、孕妇以及免疫力低下人群,能够引发早产、死产,还能引起脓毒症、菌血症和脑膜炎等多种疾病。使用抗生素是预防GBS的主要手段,但随着抗生素耐药性的逐渐增强,急需发展一种安全、有效... 详细信息

B族链球菌(group B streptococcus,GBS)主要危害新生儿、孕妇以及免疫力低下人群,能够引发早产、死产,还能引起脓毒症、菌血症和脑膜炎等多种疾病。使用抗生素是预防GBS的主要手段,但随着抗生素耐药性的逐渐增强,急需发展一种安全、有效的GBS疫苗,用于预防GBS感染。目前已有部分GBS候选疫苗进入临床试验阶段,同时也有部分疫苗处于临床前研究阶段。本文就这些具有临床使用潜力的GBS疫苗的研究现状进行综述。

关键词： B族链球菌疫苗临床试验临床前研究

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