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病毒学报 2020年第5期36卷 822-828页

作者：陈洁柳欣林徐琴王大宁夏宁邵李少伟厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院厦门361102 厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院厦门361102 厦门万泰沧海生物技术有限公司厦门361005

高危型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的持续感染与宫颈癌、阴道癌、口腔癌等恶性疾病的发生相关,目前主要通过基于L1蛋白的HPV疫苗进行预防。而假病毒(Pseudovirus,PsV)的高效稳定生产是相关预防性疫苗免疫保护性评价的重要... 详细信息

高危型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的持续感染与宫颈癌、阴道癌、口腔癌等恶性疾病的发生相关,目前主要通过基于L1蛋白的HPV疫苗进行预防。而假病毒(Pseudovirus,PsV)的高效稳定生产是相关预防性疫苗免疫保护性评价的重要环节。为初步探究PsV生产过程中各质粒的配比关系对不同型别PsV制备的影响。本实验采用人乳头瘤病毒的16型(HPV16)和18型(HPV18)两种型别的相应质粒转染细胞,编码L1蛋白的质粒转染质量固定为10μg,分别改变编码L2蛋白质粒与EGFP报告质粒的转染比例,通过计算PsV的TCID50值、测定L1蛋白含量以及PsV的感染率对不同质粒转染配比下的假病毒进行评估。结果显示在HPV16PsV模型中,L1与L2转染质量比为10μg∶2μg时,可以得到TCID50较高的PsV,而当HPV18 PsV达到最大TCID50时,L1与L2的配比为10μg∶1μg,其TCID50略大于10μg∶2μg组;L1与L2比例为10μg∶2μg时两种PsV皆可达到最大感染率;PsV模型对EGFP配比变化并不如L2敏感,L1与EGFP质量比在0.5~1之间时两种PsV均可获得较高TCID50,然而EGFP配比改变造成的感染率差异并不具有统计学意义。本研究探究了HPV16、HPV18 PsV生产的一般规律,为其他型别PsV高效生产提供指导,继而为疫苗保护性评价及结构生物学样品制备奠定基础。

关键词：人乳头瘤病毒16 人乳头瘤病毒18 假病毒制备

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《人乳头瘤病毒疫苗的研究进展》(百年校庆专辑)回顾

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厦门大学学报（自然科学版） 2022年第3期61卷 376-376页

作者：李少伟王致萍池鑫陈洁李婷婷顾颖张军夏宁邵厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)广泛感染人类,能够导致宫颈癌等恶性肿瘤的发生,严重危害人类的健康.HPV疫苗能够有效阻止HPV感染及其导致的疾病,世界卫生组织正在实施全球消除宫颈癌的计划.本文结合厦门大学在HPV疫苗研发中取... 详细信息

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)广泛感染人类,能够导致宫颈癌等恶性肿瘤的发生,严重危害人类的健康.HPV疫苗能够有效阻止HPV感染及其导致的疾病,世界卫生组织正在实施全球消除宫颈癌的计划.本文结合厦门大学在HPV疫苗研发中取得的研究成果,综述了HPV及其疫苗研究领域的进展,包括HPV的生物学和流行病学特征、预防性疫苗的研究现状和应用、基于结构的新一代多价疫苗设计和治疗性疫苗的研究进展等,阐述我国HPV疫苗研发从跟跑、并跑到领跑的研究历程,并展望未来HPV疫苗研究的主要方向.

关键词： HPV疫苗预防性疫苗人乳头瘤病毒疫苗百年校庆治疗性疫苗疫苗研究展望未来流行病学特征

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HPV-16/18血清中和抗体阳性率及其与宫颈病变相关性研究

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病毒学报 2021年第6期37卷 1355-1362页

作者：胡芳芳姚星妹阴建陈祺苏迎盈潘秦镜张询陈汶吴婷乔友林厦门大学公共卫生学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室医用生物制品省部共建协同创新中心厦门361102 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院北京100021 中国医学科学院北京协和医学院群医学及公共卫生学院北京100730

高危型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)持续感染可导致癌前病变,以HPV-16/HPV-18型感染最为常见,但HPV感染所产生的中和抗体(Neutralizing Antibody,nAb)对宫颈癌及癌前病变的相关关系尚不明确。本研究旨在探索HPV-16/HPV-18在... 详细信息

高危型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)持续感染可导致癌前病变,以HPV-16/HPV-18型感染最为常见,但HPV感染所产生的中和抗体(Neutralizing Antibody,nAb)对宫颈癌及癌前病变的相关关系尚不明确。本研究旨在探索HPV-16/HPV-18在不同的中和抗体与DNA感染状态下的年龄分布及其和宫颈组织学病变的相关性。通过横断面研究,本研究于2012年11月至2013年4月招募7 372名18~45岁健康女性。收集每个受试者血清用假病毒中和抗体定性检测HPV-16和HPV-18中和抗体;采集宫颈细胞学样本用于液基细胞学诊断,并用HPV SPF_(10)PCR-DEIA-LiPA_(25)分型检测系统及HPV-16/HPV-18型特异性DNA酶联免疫测定法联合检测HPV-16/HPV-18 DNA;召回细胞学异常的受试者在阴道镜下采集组织学标本进行病理诊断。结果显示,HPV-16和HPV-18中和抗体(nAb)阳性率为12.56%,4.94%,DNA阳性率为2.69%和0.92%,nAb与DNA的一致率较低。HPV-16和HPV-18DNA-/nAb+人群在27~45岁的大龄组女性中比例均高于18~26岁女性。DNA+/nAb+和DNA+/nAb-人群在18~26岁和27~45岁年龄组中比例无统计学差异。多因素分析结果显示,与DNA-/nAb-人群相比,HPV-16 DNA+/nAb-人群发生宫颈高度病变CIN2+的风险较高,而DNA+/nAb+则风险更高,调整OR分别为33.80(95%CI:16.50~69.23)和63.86(95%CI:36.57~111.52);HPV-18呈现相同的规律,调整OR分别为5.39(95%CI:1.14~25.56)和7.83(1.61~38.14)。HPV-16或HPV-18 DNA阳性的女性是宫颈组织学病变的高危人群,而若DNA阳性伴有同型抗体阳性的人群则风险更高,这对于探究宫颈病变的自然发病机理具有一定意义。

关键词：人乳头瘤病毒(HPV) 中和抗体 DNA 宫颈病变

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新型冠状病毒抗体检测试剂的临床性能评估方案

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病毒学报 2020年第4期36卷 541-548页

作者：黄悦吴婷杜珩葛胜祥陈毅歆夏宁邵龚文峰张军厦门大学公共卫生学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室医用生物制品省部共建协同创新中心厦门361102 比尔及梅琳达•盖茨基金会北京100027

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)已在全球形成大流行,目前其确诊主要依靠病毒核酸检测,但核酸检测存在漏诊及对检测条件要求较高等不足。与核酸检测相比,抗体检测通常具有普及面广、样品采集便捷、容易实现高通量、成本低等优点,与核酸检测... 详细信息

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)已在全球形成大流行,目前其确诊主要依靠病毒核酸检测,但核酸检测存在漏诊及对检测条件要求较高等不足。与核酸检测相比,抗体检测通常具有普及面广、样品采集便捷、容易实现高通量、成本低等优点,与核酸检测联合应用可有效弥补核酸检测的缺陷。本研究设计了评价新型冠状病毒(SARSCoV-2)抗体检测试剂盒的详细方案,包括对研究对象、样本量评估、纳入及排除标准、盲法设计、实验标本、伦理、研究管理及质量控制、数据管理与统计分析、结果报告的具体内容和考量,旨在帮助使用者在大规模应用抗体检测试剂前系统地评估抗体检测试剂的灵敏度、特异度等关键临床性能,以根据各自的检测目的在不同抗体检测试剂中做出合理的选择提供参考。

关键词：新型冠状病毒SARS-CoV-2 COVID-19 抗体血清学试剂临床评估

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基于体外组装核糖核蛋白形式的CRISPR/Cas9基因编辑方法研究进展

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中国生物工程杂志 2019年第1期39卷 71-76页

作者：潘海峰杨晗于思远李廷栋葛胜祥厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院厦门361005

CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas(CRISPR-associated)系统是近年来发展起来的新型的基因编辑技术,在生物医学领域得到广泛应用。CRISPR/Cas9系统需要在gRNA存在的条件下通过Cas9蛋白实现对基因组的定点编辑,通常情况下以慢病毒感染或质粒转染等方式提供Cas9和gRNA。但是,这些方式容易引起免疫反应及基因片段不可控插入,存在一定的风险,限制了CRISPR/Cas9技术在机体的应用。近年来发展起来的基于体外组装的核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)转导入胞的策略由于快捷安全、编辑的脱靶率低等优势引起广泛关注。对Cas9 RNP的转导方式及其应用进行了总结,并就其目前存在的问题进行探讨,以期为CRISPR/Cas9技术的进一步发展提供依据,为拓展其应用奠定基础。

关键词： CRISPR/Cas9 核糖核蛋白 CPP-RNP

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轮状病毒反向遗传学研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第7期39卷 544-550页

作者：赵毕妍曾渊君李廷栋葛胜祥厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心361102

反向遗传学技术可直接在基因水平上对病毒的基因组进行操作,从而快速直接的对病毒复制、致病等机制进行详细的研究。目前,呼肠孤病毒科的多种病毒,例如,哺乳动物正呼肠孤病毒(mammalian orthoreovirus,MRV)、蓝舌病毒(bluetongue virus,... 详细信息

反向遗传学技术可直接在基因水平上对病毒的基因组进行操作,从而快速直接的对病毒复制、致病等机制进行详细的研究。目前,呼肠孤病毒科的多种病毒,例如,哺乳动物正呼肠孤病毒(mammalian orthoreovirus,MRV)、蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)等均已利用反向遗传学技术这一有力工具,在病毒各项基础研究中取得了较大进展。但是,对于呼肠孤病毒科轮状病毒属成员,反向遗传学操作系统的构建进展缓慢。自2006年成功建立依赖于辅助病毒的反向遗传学系统开始,直到2017年才成功建立完全只依赖于质粒的反向遗传学系统。本文将对轮状病毒反向遗传学发展过程作一简要综述,并对未来轮状病毒反向遗传学研究方向作一展望,以期为加快轮状病毒的感染机制等基础研究提供技术支撑。

关键词：轮状病毒反向遗传学呼肠孤病毒科感染性克隆辅助病毒

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植物源多糖联合铝佐剂在水痘-带状疱疹亚单位疫苗中的免疫佐剂活性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第6期39卷 454-459页

作者：聂梅凤李宜珂黄小芬程通赵勤俭厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心361102

目的评价枸杞多糖、当归多糖、甘草多糖及菊粉多糖单独或者联合铝佐剂对水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)糖蛋白E(glycoprotein, gE)的免疫佐剂活性。方法4种植物源多糖单独或联合铝佐剂配伍重组蛋白VZV gE后,分别在第0... 详细信息

目的评价枸杞多糖、当归多糖、甘草多糖及菊粉多糖单独或者联合铝佐剂对水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)糖蛋白E(glycoprotein, gE)的免疫佐剂活性。方法4种植物源多糖单独或联合铝佐剂配伍重组蛋白VZV gE后,分别在第0、2周对BALB/c小鼠进行肌肉免疫。ELISA法检测小鼠血清抗体滴度与亚型;CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖;ELISA法检测脾细胞上清中IFN-γ和IL-4的含量;流式细胞术检测T细胞亚群。结果4种植物源多糖联合铝佐剂对重组蛋白VZV gE显示出良好的佐剂活性,其中甘草多糖联合铝佐剂可提高IgG2类抗体水平,促进脾淋巴细胞增殖和细胞因子IFN-γ以及IL-4的分泌,此外,还能提高CD3+CD4+和CD3+CD8+ T细胞的百分比。结论4种植物源多糖联用铝佐剂可提高抗体水平,其中甘草多糖联用铝佐剂可能会对机体细胞免疫应答具有一定的刺激作用。

关键词：水痘-带状疱疹病毒疫苗植物源多糖铝佐剂免疫刺激效果

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轮状病毒VP4~*高聚体的制备及其免疫保护性评价

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生物工程学报 2019年第2期35卷 281-289页

作者：李毅坚罗国兴杨晗贾连智曾渊君赵毕妍李廷栋葛胜祥厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 厦门大学公共卫生学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102

在前期工作中发现,截短的轮状病毒VP4~*蛋白(aa26–476)在大肠杆菌中能够以可溶形式表达,且在小鼠模型中具有较高的免疫原性和免疫保护性。本研究通过颗粒化进一步提高VP4~*蛋白的免疫保护性。通过37℃水浴加热处理24h使VP4~*蛋白多聚化... 详细信息

在前期工作中发现,截短的轮状病毒VP4~*蛋白(aa26–476)在大肠杆菌中能够以可溶形式表达,且在小鼠模型中具有较高的免疫原性和免疫保护性。本研究通过颗粒化进一步提高VP4~*蛋白的免疫保护性。通过37℃水浴加热处理24h使VP4~*蛋白多聚化,通过高效液相色谱、透射电镜、分析超离等分析VP4~*蛋白颗粒化程度,通过酶联免疫吸附试验分析颗粒化对VP4~*蛋白与中和抗体反应性的影响;通过差示量热法分析VP4~*高聚体的热稳定性;最后,通过小鼠母传抗体模型研究颗粒化对VP4~*免疫原性和免疫保护性的影响。结果表明,VP4~*蛋白高聚体结构均一,并且相比三聚体,具有更高热稳定性和中和抗体结合活性;在内毒素<20 EU/mg的条件下,与铝佐剂混合,刺激小鼠产生更高滴度的中和抗体;对轮状病毒导致的腹泻具有更高的免疫保护性。综上所述,VP4~*高聚体的研究为轮状病毒基因工程亚单位疫苗的研制提供了更广阔的思路。

关键词：轮状病毒基因工程疫苗 VP4^*高聚体中和抗体免疫保护性

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疫苗接种后炎症反应的发生机制及其对免疫原性的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第9期39卷 705-709页

作者：庄春兰苏迎盈吴婷张军厦门大学公共卫生学院厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室361100

疫苗接种每年减少数百万例由传染病导致的发病和死亡,是人类最伟大的发明之一,随着免疫接种覆盖率的不断提高,疫苗安全性引起广泛关注。疫苗接种后常见的一般不良反应主要由炎症引起,但由于疫苗接种引发的免疫应答过程极其复杂,相关免... 详细信息

疫苗接种每年减少数百万例由传染病导致的发病和死亡,是人类最伟大的发明之一,随着免疫接种覆盖率的不断提高,疫苗安全性引起广泛关注。疫苗接种后常见的一般不良反应主要由炎症引起,但由于疫苗接种引发的免疫应答过程极其复杂,相关免疫机制及其引起的生物学损伤机制目前均未完全明确。探索疫苗接种后炎症反应与免疫原性之间的关系,对疫苗上市后的监测与管理具有重要意义。本文对疫苗接种后炎症反应的发生机制及其对免疫原性的潜在影响展开综述。

关键词：疫苗不良反应炎症反应免疫原性上市后监测

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溶瘤病毒T-Vec应用于肿瘤治疗的临床研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2019年第4期26卷 468-473页

作者：姚星妹潘莉莉吴婷厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102

T-Vec(talimogene laherparepvec)是由Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)改造而来的一种溶瘤病毒,能够选择性地在恶性肿瘤细胞中复制而不伤及其他正常细胞。T-Vec在治疗晚期黑色素瘤患者的Ⅲ期临床试验中显示出良好的安全性和肿瘤治疗效果,已于2... 详细信息

T-Vec(talimogene laherparepvec)是由Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)改造而来的一种溶瘤病毒,能够选择性地在恶性肿瘤细胞中复制而不伤及其他正常细胞。T-Vec在治疗晚期黑色素瘤患者的Ⅲ期临床试验中显示出良好的安全性和肿瘤治疗效果,已于2015年经美国FDA批准用于治疗晚期黑色素瘤。为了提高T-Vec的疗效,扩大其应用范围,T-Vec联合其他抗肿瘤疗法以及应用于其他肿瘤的临床试验仍在陆续开展。近期,T-Vec联合免疫检查点抑制剂在治疗晚期黑色素瘤的临床试验中取得新进展,临床数据显示T-Vec联合疗法具有更强的抗肿瘤活性。此外,T-Vec在治疗头颈癌、胰腺癌、肝癌等肿瘤的临床研究中也取得了一定进展。本文对近年来T-Vec治疗肿瘤的临床试验的相关研究进展做一综述。

关键词：溶瘤病毒 T-Vec 黑色素瘤临床试验疗效

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