目前全球约有2.57亿慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者,是当前最为突出的公共卫生问题之一.HBV感染的肝细胞内稳定存在的共价闭合环状DNA(cccDNA)是造成HBV感染持续、抗病毒治疗停药后病毒反弹的重要原因.现有Anti-HBV药...
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目前全球约有2.57亿慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者,是当前最为突出的公共卫生问题之一.HBV感染的肝细胞内稳定存在的共价闭合环状DNA(cccDNA)是造成HBV感染持续、抗病毒治疗停药后病毒反弹的重要原因.现有Anti-HBV药物难以有效清除或直接抑制肝内cccDNA是慢性乙肝难以治愈的关键瓶颈.缺乏简单易行的cccDNA定量检测方法,影响了靶向cccDNA的Anti-HBV新药研发进展,也阻碍了这一指标在慢性乙肝患者临床管理实践中的应用.Southern blot被认为是目前cccDNA实验室检测的"金标准",但其操作复杂且灵敏度低,不适合于高通量药物筛选及临床应用.基于PCR的cccDNA检测方法相对操作简单、检测灵敏度更高,但其可靠性仍有待考验.本文系统整理分析了cccDNA样品提取和测定方法的研究现状与进展,希望通过综合比较不同cccDNA检测技术的性能和特点,为cccDNA相关基础研究、药物发展与临床研究提供方法学参考.
人乳头瘤病毒（ human papillomavirus,HPV）的持续性感染是导致宫颈癌的主要病因,接种HPV疫苗已成为预防宫颈癌和癌前病变的首选。 HPV特异性抗体水平可间接反映疫苗的保护性,因此在HPV疫苗临床评价过程中,其免疫原性分析至关重要。目...
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人乳头瘤病毒（ human papillomavirus,HPV）的持续性感染是导致宫颈癌的主要病因,接种HPV疫苗已成为预防宫颈癌和癌前病变的首选。 HPV特异性抗体水平可间接反映疫苗的保护性,因此在HPV疫苗临床评价过程中,其免疫原性分析至关重要。目前世界范围内已有3种HPV疫苗上市,但尚无统一的免疫原性评价方法,现行的检测方法主要为假病毒中和试验、酶联免疫吸附试验和单表位中和单抗竞争法。本文对这3种检测方法的特点,以及3种HPV疫苗的免疫原性、免疫持久性及其在不同人群中的免疫应答水平和特点进行综述。
广泛有效的体外感染模型的缺乏限制了抗戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗体及血清定量化中和效价的评估,从而阻碍了对HEV相关抗体应答及免疫机制的深入研究。本研究首先通过在HEV低效复制细胞系HepG2肝癌细胞株上进行了HEV感染细...
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广泛有效的体外感染模型的缺乏限制了抗戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗体及血清定量化中和效价的评估,从而阻碍了对HEV相关抗体应答及免疫机制的深入研究。本研究首先通过在HEV低效复制细胞系HepG2肝癌细胞株上进行了HEV感染细胞后的连续监测,直到第13d到达病毒载量的检测下限,验证了该细胞系建立感染模型的可行性,进一步采用96孔多通道平行感染、核酸提取及实时荧光定量PCR对五株抗HEV的鼠源单克隆抗体及四位戊肝疫苗接种者的接种前、后血清样本进行了细胞中和试验。结果显示应用该模型能够实现对不同中和能力的单抗及接种疫苗前后的血清进行中和效价的定量化评估。表明本研究已成功建立了HEV体外高通量中和评价模型,同时也显示出该模型在HEV疫苗及抗体应答表位研究中所具有的潜在价值。
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