检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2012年第11期28卷 1019-1022,1031页

作者：李慧黄景阳袁中瑞山东大学医学院病理生理学教研室济南250012

目的:探讨减少脑组织冰冻切片脱片和增加脑组织冰冻切片免疫组织化学染色结果准确性的方法,为脑组织冰冻切片的广泛使用进一步奠定实验基础。方法:在保证实验真实性和科学性的前提下,将现有的脑组织冰冻切片技术结合在脑组织冰冻切片过... 详细信息

目的:探讨减少脑组织冰冻切片脱片和增加脑组织冰冻切片免疫组织化学染色结果准确性的方法,为脑组织冰冻切片的广泛使用进一步奠定实验基础。方法:在保证实验真实性和科学性的前提下,将现有的脑组织冰冻切片技术结合在脑组织冰冻切片过程中所遇到的问题,以明胶硫酸铬钾处理载玻片,预冷的NS和4%多聚甲醛灌注固定组织,液氮速冻脑组织进行冰冻切片。结果:明胶硫酸铬钾处理载玻片的方法减少了冰冻切片脱片,预冷的NS和4%多聚甲醛提高了脑组织灌流固定效果,液氮速冻脑组织减少了冰晶产生。结论:此方法使脑组织冰冻切片脱片情况下降,冰晶产生减少,提高了脑组织冰冻切片免疫组织化学染色结果的准确性,该方法值得在临床和科研实验室中积极推广使用。

关键词：脑组织冰冻切片防脱片免疫组化操作技巧

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海马神经元Toll样受体4的髓样细胞分化因子非依赖途径在神经炎症中的作用

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中国老年学杂志 2014年第6期35卷 1636-1639页

作者：张贵萍周爱玲张国霞胡亚娥茅家慧南通大学医学院病理生理学教研室江苏南通226001

目的探讨海马神经元Toll样受体4(TLR4)介导的髓样细胞分化因子88 (MyD88)非依赖途径在神经炎症中的作用.方法构建3对针对MyD88基因的特异siRNA序列,经脂质体途径转染入体外培养的海马神经元,通过免疫荧光检测转染效率和RT-qPCR选择最... 详细信息

目的探讨海马神经元Toll样受体4(TLR4)介导的髓样细胞分化因子88 (MyD88)非依赖途径在神经炎症中的作用.方法构建3对针对MyD88基因的特异siRNA序列,经脂质体途径转染入体外培养的海马神经元,通过免疫荧光检测转染效率和RT-qPCR选择最佳siRNA序列,并优化转染条件,达到沉默MyD88基因而保留MyD88非依赖途径的目的;将体外培养海马神经元随机分成4组:空白对照组(Control)、阴性对照组(NC)、LPS组和siRNA组.采用RT-qPCR分别测定TLR相关分子(TRAM)、TLR4相关的干扰素活化子(TRIF) mRNA的表达;Western印迹检测TRIF蛋白水平;ELISA技术测量培养上清中TRAM、干扰素诱导蛋白-10 (IP-10)和白细胞介素-1β3(IL-1β)浓度.结果 siRNA转染成功,siRNA2的沉默效果最佳,效率达94.3％,且最适转染浓度和时长分别为30 nmol/L和48 h.空白对照组和阴性对照组可观察到TRAM、TRIF mRNA以及TRIF蛋白的表达,同时上清液中也可以检测到TRAM、IP-10和IL-1β;LP刺激组,上述检测指标的表达量均明显增高;siRNA组,在阻断MyD88基因的前提下加LPS刺激,与空白对照组和阴性对照组相比,上述检测指标的水平均显著增高,但在上清液中,IL-1β的浓度低于LPS组.结论 siRNA序列能够成功转染入体外培养的海马神经元,发挥很强的沉默效率,达到理想的阻断MyD88依赖型途径的作用;海马神经元有TLR4的MyD88非依赖途径的存在的证据,当激动该途径时,相应炎症因子的表达上调;TLR4激活所致的MyD88非依赖途径活化可能是神经退行性疾病的发病机制之一.

关键词：海马神经元 TLR4 MyD88 siRNA 炎症神经退行性疾病

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血管扩张刺激磷蛋白的磷酸化位点突变对PDGF-BB诱导细胞迁移的影响

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中国病理生理杂志 2010年第1期26卷 32-36页

作者：张亚辉张德玲欧阳静萍武汉大学医学院病理生理学教研室湖北武汉430071 郧阳医学院病理生理学教研室湖北十堰442000

目的:探讨血管扩张刺激磷蛋白(VASP)Ser157、Ser239位点的磷酸化对血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导细胞迁移的影响及其作用差异。方法:构建VASPSer157和Ser239位点突变的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/VASP-S157A和pcDNA3.1(+)/VASP-S239A,分别转染ECV304细胞,并筛选出它们的稳定表达细胞株,通过Transwell小室跨膜迁移实验检测2种细胞株的迁移速度。结果:经PDGF-BB作用后,2种稳定表达细胞株的跨膜迁移数量明显少于对照组(P<0.05),而2种细胞株之间无显著差异(P>0.05)。结论:VASPSer157和Ser239磷酸化位点突变减弱了PDGF-BB诱导的细胞迁移,Ser157和Ser239磷酸化位点对VASP的功能均具有重要影响。

关键词：血管扩张刺激磷蛋白细胞运动血小板源性生长因子

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不同进食量对小鼠功能活动和生化指标的影响

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中国病理生理杂志 2003年第4期19卷 487-489页

作者：张齐好陆大祥付咏梅王华东戚仁斌暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的 :探讨不同进食量在不同时间内对小鼠体重、记忆力、平衡耐力和相应生化指标的影响。方法 :预先计算小鼠每天平均进食量 ,按照 10 0 %食量 ,75 %食量、5 0 %食量、2 5 %食量及 0 %食量分为A、B、C、D、E组。实验过程中每 3d测试记... 详细信息

目的 :探讨不同进食量在不同时间内对小鼠体重、记忆力、平衡耐力和相应生化指标的影响。方法 :预先计算小鼠每天平均进食量 ,按照 10 0 %食量 ,75 %食量、5 0 %食量、2 5 %食量及 0 %食量分为A、B、C、D、E组。实验过程中每 3d测试记忆力、平衡耐力和体重 1次 ,第 10d取血检测相应生化指标。结果 :实验第 3d ,E组体重、平衡耐力下降 ;实验第 6d和第 9d ,A组、B组、C组体重明显上升 ,A组、D组动物的记忆力低于B组和C组 ;实验第 10d ,D组血糖显著下降 ,总胆固醇及甘油三酯随进食量的减少而显著下降。结论 :适度减少进食量能维持正常体力和血糖水平 ,保持良好的记忆力 ,并有助于降低血中总胆固醇和甘油三酯。

关键词：进食量小鼠功能活动生化指标影响体重记忆力平衡耐力总胆固醇甘油三酯类肥胖

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甘氨酸对小鼠体重及脂质代谢的影响

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中国病理生理杂志 2005年第6期21卷 1143-1146页

作者：刘靖陆大祥王华东戚仁斌付咏梅王彦平暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:观察甘氨酸(Gly)对正常饮食和高脂饮食小鼠体重及血脂代谢的影响。方法:健康成年昆明种小鼠80只,雌雄各半,随机分4组:对照组、高脂饮食组(HF)、Gly组、Gly+HF组,按各组要求分别给予正常饲料和高脂饲料喂养。以Gly等药物定量腹腔注... 详细信息

目的:观察甘氨酸(Gly)对正常饮食和高脂饮食小鼠体重及血脂代谢的影响。方法:健康成年昆明种小鼠80只,雌雄各半,随机分4组:对照组、高脂饮食组(HF)、Gly组、Gly+HF组,按各组要求分别给予正常饲料和高脂饲料喂养。以Gly等药物定量腹腔注射处理。连续12d,观察体重变化,实验末取血测定血脂4项(TC、TG、HDL-C、LDL),摘取雄性小鼠附睾周围脂肪垫和肾周脂肪垫,摘取雌性鼠腹部脂肪垫和肾周脂肪垫,称重并记录,留取肝脏组织并观察病理变化。结果:HF组体重明显低于对照组,体脂含量无明显差异;Gly组的体重和体脂含量均明显低于对照组;Gly+HF组体重和体脂含量均明显低于HF组;Gly组血清TC和TG的含量显著低于对照组;Gly+HF组血脂4项与HF组相比没有显著差异;光镜下HF组肝组织可见弥漫性脂肪变性,Gly+HF组肝组织脂肪变性少,肝细胞内脂滴小且少。结论:Gly对正常饮食和高脂饮食的小鼠都有降低体重和体脂含量的作用,并能降低血脂,有预防肝脂肪变的作用。

关键词：甘氨酸膳食脂肪类体重脂质代谢肝脂肪变

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柴葛解肌汤对家兔白细胞致热原性发热效应及脑脊液cAMP含量的影响

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中国病理生理杂志 1990年第6期6卷 429-431页

作者：蔡群李弘邓志坚程少冰李楚杰暨南大学医学院病理生理学教研室暨大校医室

本研究选用65只新西兰白兔,观察经口灌入柴葛解肌汤(柴葛汤)对家兔白细胞致热原(LP)性发热效应及脑脊液cAMP含量的影响。结果表明:(1)柴葛汤经口灌入对家兔正常体温没有明显影响(P>0.05)。(2)单独静脉注射LP组,体温上升0.93±0.0... 详细信息

本研究选用65只新西兰白兔,观察经口灌入柴葛解肌汤(柴葛汤)对家兔白细胞致热原(LP)性发热效应及脑脊液cAMP含量的影响。结果表明:(1)柴葛汤经口灌入对家兔正常体温没有明显影响(P>0.05)。(2)单独静脉注射LP组,体温上升0.93±0.07℃,静注LP前1小时经灌口注柴葛汤,体温上升仅0.29±0.07℃,两组均数比较有非常显著的差异(p<0.01),说明柴葛汤具有明显的解热作用。(3)静注LP 1小时(LP性发热高峰期),脑脊液cAMP含量为141.18±23.04pmol/ml,静注LP前1小时经口灌入柴葛汤,脑脊液cAMP含量为94.37±6.20pmol/ml,两者比较有显著差异(P<0.05)。相关检验表明,柴葛汤+LP组的体温上升高度与脑脊液cAMP含量变化呈明显正相关。表明柴葛汤不仅抑制LP引起的发热反应,而且明显低降LP引起的脑脊液cAMP含量增多。根据这些实验绪果,作者推论,柴葛汤可能是通过降低脑内上升的cAMP含量而导致解热效应的。

关键词：发热致热原环腺苷酸柴葛汤

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Pyrin分子家族与遗传性周期热

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中国病理生理杂志 2003年第11期19卷 1561-1562页

作者：颜亮李楚杰暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

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高糖促进成年大鼠心脏成纤维细胞periostin表达及其信号转导机制

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生理学报 2010年第3期62卷 247-254页

作者：邹平吴立玲吴丹凡栋崔晓兵周允王程李丽北京大学医学部生理学与病理生理学系教育部分子心血管病重点实验室北京100191 泸州医学院病理生理学教研室泸州646000

心肌纤维化是糖尿病心肌病时心室舒缩功能障碍的主要机制之一。心脏成纤维细胞分泌的一种细胞外基质蛋白periostin与心肌纤维化及间质重塑密切相关。本研究旨在观察高糖对心脏成纤维细胞periostin表达的影响及其相关信号转导机制。在离... 详细信息

心肌纤维化是糖尿病心肌病时心室舒缩功能障碍的主要机制之一。心脏成纤维细胞分泌的一种细胞外基质蛋白periostin与心肌纤维化及间质重塑密切相关。本研究旨在观察高糖对心脏成纤维细胞periostin表达的影响及其相关信号转导机制。在离体培养的成年大鼠心脏成纤维细胞,采用低糖(5.5mmol/L)和高糖(25mmol/L)干预,RT-PCR检测periostinmRNA表达,免疫印迹法检测periostin蛋白表达,荧光法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量。结果显示,高糖刺激12h可使periostin mRNA表达增加117.26%,刺激24h可使其蛋白表达上调93.12%,高糖刺激30min可显著促进心脏成纤维细胞内ROS的产生,蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂白屈菜红碱可减少高糖诱导的ROS生成增加。高糖诱导的periostin蛋白表达增加可被白屈菜红碱或ROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)所抑制。高糖刺激30和60min可显著增加磷酸化c-Jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal protein kinase,JNK)的含量,应用白屈菜红碱或NAC可抑制高糖诱导的磷酸化JNK含量增加。JNK抑制剂SP600125预孵育明显抑制了高糖诱导的periostin蛋白表达增加。上述结果提示,高糖刺激可促进periostin的mRNA和蛋白表达,激活PKC/ROS/JNK通路介导高糖诱导的periostin表达增加。

关键词：高糖心脏成纤维细胞 periostin 信号通路

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甘氨酸对脂多糖诱导LBP/CD14 mRNA表达的影响

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中国病理生理杂志 2001年第8期17卷 802-803页

作者：单于陆大祥暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州 510632

目的:内毒素是位于革兰氏阴性杆菌(G-)细胞壁外膜中具有高度生物学活性的以脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)为主的成分.LBP(lipopolysaccharide-binding protein)/CD14(cluster of differentiation 14)系统在识别和调控LPS作用方面起着关键作用.甘氨酸是体内固有的最简单的氨基酸,本教研室在先前的研究中发现甘氨酸对LPS的致热性有良好的拮抗作用,体外研究发现甘氨酸能破坏内毒素的构型,抑制内毒素诱导单核/巨噬细胞分泌TNF、IL-1等细胞因子.本研究是在前面研究的基础上进一步探讨甘氨酸对内毒素体内作用过程的影响,从而为研制有效的内毒素拮抗剂提供理论依据.方法:用RT-PCR技术检测大鼠肝组织LBP mRNA表达水平,并在此基础上观察甘氨酸对内毒素诱导大鼠肝组织LBP mRNA表达的影响.用原位杂交方法检测小鼠腹腔巨噬细胞CD14 mRNA表达水平,并在此基础上观察甘氨酸对内毒素诱导小鼠腹腔巨噬细胞CD14 mRNA表达的影响.结果:比较5组大鼠肝组织LBP mRNA的表达水平,内毒素组显著高于其他各组(P＜0.01),甘氨酸拮抗组显著低于内毒素组(P＜0.01),但甘氨酸拮抗组仍高于对照组.比较5组小鼠腹腔巨噬细胞的CD14 mRNA表达水平,内毒素组小鼠腹腔巨噬细胞CD14 mRNA表达水平显著高于其他各组(P＜0.01),甘氨酸拮抗组显著低于内毒素组(P＜0.01).结论:(1)内毒素可诱导大鼠肝组织LBP mRNA的表达.(2)甘氨酸可抑制内毒素诱导大鼠肝组织LBP mRNA的表达.(3)内毒素可诱导小鼠腹腔巨噬细胞CD14 mRNA的表达.(4)甘氨酸可抑制内毒素诱导小鼠腹腔巨噬细胞CD14 mRNA表达.

关键词：甘氨酸能脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞内毒素诱导大鼠肝组织表达水平拮抗作用革兰氏阴性杆菌原位杂交方法基础生物学活性作用过程细胞因子细胞分泌体外研究体内技术检测关键作用细胞壁拮抗剂

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胆盐对大鼠胰腺腺泡细胞功能状态的影响

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中国病理生理杂志 2007年第4期23卷 734-738页

作者：张红李永渝陕西中医学院病理生理学教研室陕西咸阳712046 同济大学医学院病理生理学教研室上海200092

目的:研究脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SDOC)刺激时大鼠胰腺腺泡细胞功能状态的变化并探讨其可能的信号转导途径。方法:胶原酶法分离大鼠胰腺腺泡细胞,经不同浓度的SDOC或正常培养液处理,在不同的时点(30 min、1 h、4 h、10 h)采用... 详细信息

目的:研究脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SDOC)刺激时大鼠胰腺腺泡细胞功能状态的变化并探讨其可能的信号转导途径。方法:胶原酶法分离大鼠胰腺腺泡细胞,经不同浓度的SDOC或正常培养液处理,在不同的时点(30 min、1 h、4 h、10 h)采用MTT法检测不同时点胰腺腺泡细胞的活性;采集上清液检测其中丙二醛含量以及超氧化物歧化酶的活性;另外细胞经Fluo-3/AM负载后,在无钙或含生理钙离子浓度的培养液中以灌流的方式加入不同浓度SDOC,采用激光共聚焦显微镜观察单个胰腺腺泡细胞[Ca2+]i。结果:SDOC导致胰腺腺泡细胞的存活率降低、且呈时间及浓度依赖性(P<0.05),1 mmol/L依他酸(egtazic acid,EGTA)使SDOC诱发的腺泡细胞损伤程度明显减轻(P<0.05);在无钙且含1 mmol/L EGTA的培养液中SDOC未见引起胞浆[Ca2+]i的变化,再次恢复培养液中的钙离子浓度至生理水平,SDOC引发胞浆[Ca2+]i迅速升高;腺泡细胞内[Ca2+]i的变化明显先于细胞培养上清中的生化改变和腺泡细胞的损伤;与对照组相比,SDOC组胰腺腺泡细胞上清液中丙二醛含量增加(P<0.05),超氧化物歧化酶活性明显降低(P<0.05)。结论:SDOC可致胰腺腺泡损伤,且对刺激时间、刺激剂浓度及胞浆钙离子具有依赖性;SDOC通过促进胞外Ca2+的内流导致胰腺腺泡胞浆内钙超载。钙超载作为早期的病理事件通过过氧化反应参与腺泡细胞损伤的发生,钙稳态失衡是SDOC致胰腺细胞损伤的主要因素之一。

关键词：脱氧胆酸胰腺钙

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