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2017年全国传染病流行病学学术会议暨第十届晋冀鲁豫流行病学学术会议

作者：黄悦宋巧巧郭小怡王晗喻欢卫飞雪李廷栋吴婷葛胜祥张军 361102 厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心

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转录组测序技术研究进展

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中国生化药物杂志 2017年第6期37卷 443-448页

作者：洪奇阳毕行建王大宁李子真俞海夏宁邵李少伟厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院福建厦门361102 厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院福建厦门361102

伴随高通量测序技术的快速发展,转录组测序（RNA-Seq）技术在各个研究领域已经得到广泛的运用.RNA-Seq通过分析不同细胞或者组织转录组的表达情况来揭示细胞的基因表达情况,结构特点和调控规律.近年来基于高通量测序技术的RNA-Seq分析... 详细信息

伴随高通量测序技术的快速发展,转录组测序（RNA-Seq）技术在各个研究领域已经得到广泛的运用.RNA-Seq通过分析不同细胞或者组织转录组的表达情况来揭示细胞的基因表达情况,结构特点和调控规律.近年来基于高通量测序技术的RNA-Seq分析方法发展迅速,涌现出一大批相关的分析方法和工具,如何根据实际需求选择合适的工具和分析流程,成为广大科研人员面临的问题.本文参照近几年在RNA-seq技术研究领域发表的文献,综述了RNA-Seq应用实际过程中涉及的分析方法、软件工具及其选用标准,为相关的研究和应用提供信息和参考.

关键词：转录组高通量测序数据处理与分析

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人乳头瘤病毒疫苗的临床免疫学研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第7期36卷 534-539页

作者：黄悦王林苏迎盈黄守杰吴婷厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院361100

人乳头瘤病毒（ human papillomavirus,HPV）的持续性感染是导致宫颈癌的主要病因,接种HPV疫苗已成为预防宫颈癌和癌前病变的首选。 HPV特异性抗体水平可间接反映疫苗的保护性,因此在HPV疫苗临床评价过程中,其免疫原性分析至关重要。目... 详细信息

人乳头瘤病毒（ human papillomavirus,HPV）的持续性感染是导致宫颈癌的主要病因,接种HPV疫苗已成为预防宫颈癌和癌前病变的首选。 HPV特异性抗体水平可间接反映疫苗的保护性,因此在HPV疫苗临床评价过程中,其免疫原性分析至关重要。目前世界范围内已有3种HPV疫苗上市,但尚无统一的免疫原性评价方法,现行的检测方法主要为假病毒中和试验、酶联免疫吸附试验和单表位中和单抗竞争法。本文对这3种检测方法的特点,以及3种HPV疫苗的免疫原性、免疫持久性及其在不同人群中的免疫应答水平和特点进行综述。

关键词：人乳头瘤病毒疫苗免疫原性宫颈癌

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磷酸钙纳米颗粒在疫苗佐剂中的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第1期36卷 66-71页

作者：林雅华王鑫赵勤俭厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院361102

佐剂作为疫苗的关键成分，能增强疫苗抗原特异的免疫原性、改变免疫应答类型、减少抗原用量从而以备疾病大流行之需，并降低疫苗价格。随着纳米技术的快速发展，纳米材料应用于开发有效、安全的疫苗佐剂方面的研究，也逐渐获得进展。磷... 详细信息

佐剂作为疫苗的关键成分，能增强疫苗抗原特异的免疫原性、改变免疫应答类型、减少抗原用量从而以备疾病大流行之需，并降低疫苗价格。随着纳米技术的快速发展，纳米材料应用于开发有效、安全的疫苗佐剂方面的研究，也逐渐获得进展。磷酸钙纳米颗粒凭借其良好的生物学性质：颗粒均一性和稳定性、生物相容性、生物可降解性、刺激机体产生体液免疫／细胞免疫等，并易于开展商业化规模制备，有潜力被开发成为疫苗佐剂。本文阐述了磷酸钙纳米颗粒作为一种新型佐剂在疫苗中的效应及其表面修饰的研究进展，为研发高效、安全的疫苗佐剂提供新的思路。

关键词：磷酸钙纳米颗粒佐剂活性疫苗佐剂免疫增强

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寨卡病毒病毒学特征及其引发异常免疫应答机制的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第4期36卷 316-320页

作者：曹璐王鑫张志刚赵勤俭厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院361102

由寨卡病毒感染引起的寨卡病毒病是一种自限性急性传染病，主要通过伊蚊叮咬传播，也可以垂直传播，最近也有性传播的一些证据。随着寨卡病毒的暴发，对寨卡病毒的认识具有重要的意义。本文就寨卡病毒的传播与暴发史、病原学特征、诊断... 详细信息

由寨卡病毒感染引起的寨卡病毒病是一种自限性急性传染病，主要通过伊蚊叮咬传播，也可以垂直传播，最近也有性传播的一些证据。随着寨卡病毒的暴发，对寨卡病毒的认识具有重要的意义。本文就寨卡病毒的传播与暴发史、病原学特征、诊断与治疗、寨卡病毒感染与新生儿小头症的潜在相关性、引发细胞自噬等异常免疫应答的研究进展进行了综述。

关键词：寨卡病毒垂直传播新生儿小头症细胞自噬

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人免疫缺陷病毒包膜蛋白V3多肽与白喉毒素无毒突变体CRM197结构域A融合蛋白的免疫原性分析及单克隆抗体筛选

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中国生化药物杂志 2017年第4期37卷 1-4页

作者：邵佳张芝晴齐家龙未祥乔佳明李少伟夏宁邵顾颖厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102

目的评估CRM197-HIV-V3作为HIV表位疫苗的潜力,以此筛选HIV单克隆中和抗体,为后续疫苗和治疗性抗体的研究奠定基础。方法将HIV-1 NL4-3 V3肽（299~328 aa）展示在白喉毒素无毒突变体A结构域（CRM197-A）上,利用大肠杆菌原核表达系统... 详细信息

目的评估CRM197-HIV-V3作为HIV表位疫苗的潜力,以此筛选HIV单克隆中和抗体,为后续疫苗和治疗性抗体的研究奠定基础。方法将HIV-1 NL4-3 V3肽（299~328 aa）展示在白喉毒素无毒突变体A结构域（CRM197-A）上,利用大肠杆菌原核表达系统进行表达。纯化后的融合蛋白免疫6~8周龄的雌性Balb/c小鼠,免疫3针后,进行脾脏免疫加强,后将小鼠的脾细胞与小鼠杂交瘤细胞进行融合实验。利用基于免疫斑点印迹法（ELISPOT）的HIV中和筛选平台筛选单克隆抗体,对获得的单抗进行抗原性的分析。结果构建克隆后,成功表达了NL4-3 HIV V3肽融合蛋白（CRM197-A-V3）,免疫小鼠的多抗血清对NL4-3株HIV病毒的中和效价约为103,ELISA检测多抗血清结合CRM197-A-V3抗原效价达到105。通过融合筛选和单细胞克隆化获得8株单克隆抗体。ELISA结果显示与NL4-3-gp120蛋白有较好的结合活性。中和实验结果显示抗体对NL4-3株HIV病毒有很好的中和能力,NC50为0.02μg/m L。结论本研究将HIV V3表位展示在CRM197-A上,成功刺激小鼠产生免疫反应,筛选获得特异性针对NL4-3株HIV的中和单抗。

关键词：人免疫缺陷病毒包膜蛋白V3多肽白喉毒素无毒突变体A结构域表位展示中和单抗

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霍乱毒素B亚基展示HIV-1 gp41 MPER表位的研究

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中国生化药物杂志 2017年第6期37卷 1-5页

作者：未祥张芝晴邵佳黄芳齐家龙高双全李少勇李少伟夏宁邵顾颖厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102 厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102

目的评价霍乱毒素B亚基融合HIV-1 gp41 MPER表位的免疫效果.方法利用霍乱毒素的B亚基（CTB）作为载体展示靶向于MPER的广谱中和抗体2F5和4E10的表位.表达纯化后的融合蛋白与弗氏佐剂混合乳化后免疫小鼠,免疫4次后对小鼠的血清进行综... 详细信息

目的评价霍乱毒素B亚基融合HIV-1 gp41 MPER表位的免疫效果.方法利用霍乱毒素的B亚基（CTB）作为载体展示靶向于MPER的广谱中和抗体2F5和4E10的表位.表达纯化后的融合蛋白与弗氏佐剂混合乳化后免疫小鼠,免疫4次后对小鼠的血清进行综合评价.ELISA法评价融合蛋白的免疫原性;检测免疫血清中IgA类抗体分析小鼠黏膜免疫应答;对小鼠血清中的不同类型的抗体量进行分析,通过流式细胞仪检测PBMC细胞因子IFN-γ和IL-4用以分析小鼠免疫激活途径;病毒中和实验检测免疫血清对病毒感染细胞的抑制能力.结果 CTB作为载体蛋白具有很好的免疫原性,能够诱导免疫系统产生针对MPER表位的抗体,刺激小鼠产生黏膜免疫应答,诱导针对MPER表位的IgA抗体.同时,融合蛋白可以刺激机体的IgG1,IgG2a和IgG2b类抗体的产生和刺激小鼠体内的Th2类免疫途径.中和实验结果显示,CTB-4E10免疫后的血清可以抑制NL4-3病毒对细胞的感染.结论 CTB融合蛋白具有强免疫原性,可以刺激体液免疫反应,黏膜免疫反应和Th2类免疫途径,并且CTB-4E10蛋白免疫血清能够抑制NL4-3病毒感染细胞.本研究为HIV-1 gp41 MPER作为候选疫苗的探索奠定基础.

关键词：霍乱毒素B亚基免疫应答

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预防接种,不应动摇

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中国科学：生命科学 2016年第6期46卷 782-784页

作者：吴婷张军赵勤俭夏宁邵厦门大学公共卫生学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门361102

预防接种毫无疑问是最具成本效益的公共卫生措施.预防接种在世界各地的推广已使上亿人免于传染病的痛苦,并拯救了上百万人的生命.新中国成立后,得益于预防接种的有力推动,我国在20世纪60年代初消灭了牛痘.自1978年起我国开始实施计划免... 详细信息

预防接种毫无疑问是最具成本效益的公共卫生措施.预防接种在世界各地的推广已使上亿人免于传染病的痛苦,并拯救了上百万人的生命.新中国成立后,得益于预防接种的有力推动,我国在20世纪60年代初消灭了牛痘.自1978年起我国开始实施计划免疫,对全部儿童免费接种可预防6种疾病的4种疫苗,2007年进一步将可预防15种传染病的疫苗纳入国家免疫规划，有效地控制了疫苗可预防传染病的发生和传播，对保障儿童身体健康和生命安全、维护社会稳定起到了不容低估的作用．

关键词：疫苗接种免费接种公共卫生人的生命疫苗冷链第二类疫苗水痘减毒活疫苗亿人国家免疫规划脊髓灰质炎疫苗

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重组人乳头瘤病毒疫苗临床评价研究进展

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中华流行病学杂志 2016年第6期37卷 904-908页

作者：何文刚赵骏黄守杰吴婷厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 361102

HPV感染除能引起尖锐湿疣等良性病变外，还能引起宫颈等生殖器部位恶性肿瘤。目前国外已有3个HPV疫苗上市。临床试验数据表明HPV疫苗对成年年轻女性均具较好的保护性，能预防90％～100％疫苗相关型别HPV感染所致疾病。年长女性接种该疫... 详细信息

HPV感染除能引起尖锐湿疣等良性病变外，还能引起宫颈等生殖器部位恶性肿瘤。目前国外已有3个HPV疫苗上市。临床试验数据表明HPV疫苗对成年年轻女性均具较好的保护性，能预防90％～100％疫苗相关型别HPV感染所致疾病。年长女性接种该疫苗的有效性虽低于成年年轻女性，但仍可受益。在未成年女性中进行的桥接试验表明，9～14岁者接种2针次HPV疫苗的免疫应答非劣效于成年女性接种3针次该疫苗。HPV疫苗能减少高度宫颈上皮内瘤变（CIN2＋）患者手术后复发，对非疫苗型别HPV感染也有一定交叉保护作用。HPV疫苗的安全性已被广泛认可，可在适龄女性人群中推广使用。

关键词：人乳头瘤病毒疫苗临床试验宫颈癌

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杆状病毒-昆虫细胞系统表达的戊型肝炎病毒衣壳蛋白p495的纯化、结构解析以及免疫原性分析

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病毒学报 2016年第3期32卷 342-348页

作者：林庆山蒋婕李婷婷张玉云张振勇郑明华王凯航郑清炳俞海顾颖夏宁邵李少伟厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院福建厦门361102 厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院福建厦门361102

本研究目的是利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统建立戊型肝炎病毒(HEV)p495蛋白的高效稳定表达和可放大纯化的方法,研究其理化性质和解析三维结构,与上市戊肝疫苗益可宁(Hecolin)进行免疫原性的比较。本研究选择基因1型HEV毒株的开放读码框... 详细信息

本研究目的是利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统建立戊型肝炎病毒(HEV)p495蛋白的高效稳定表达和可放大纯化的方法,研究其理化性质和解析三维结构,与上市戊肝疫苗益可宁(Hecolin)进行免疫原性的比较。本研究选择基因1型HEV毒株的开放读码框2(ORF2)的aa112-606片段构建杆状病毒,感染昆虫细胞进行重组蛋白的表达,经过PEG沉淀和阴离子交换层析的纯化,获得纯度为95%以上的p495蛋白,每升细胞培养液最终获得15mg的目的蛋白。经ELISA、分析超离、分子排阻色谱和电镜负染等分析显示p495蛋白具有良好的抗原性且呈现为均一的病毒样颗粒(VLP),沉降系数为51.3S,颗粒直径约20nm。冷冻电镜三维结构解析获得分辨率为3.8的三维结构,揭示p495形成了T=1的等二十面体结构,与已报道的晶体结构相一致。小鼠免疫实验表明p495蛋白与益可宁中p239抗原的免疫原性相当。本研究为进一步开展HEV的受体鉴定、表位结构研究以及疫苗改进等奠定良好的基础。

关键词：戊型肝炎病毒病毒样颗粒真核表达系统 HEVP495蛋白冷冻电镜三维重构免疫应答

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