检索结果-内蒙古大学图书馆

中国新药杂志 2017年第20期26卷 2369-2375页

作者：陈思伊张彩黄小芬王鑫赵勤俭厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学生命科学学院厦门大学公共卫生学院

疫苗储存运输要遵循冷链运输(cold chain,CC)的要求,这很大程度上限制了疫苗的接种和普及,尤其是在那些贫困偏远地区。为扩大疫苗可及性,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)于2012年首次提出了受控温度链(controlled temperat... 详细信息

疫苗储存运输要遵循冷链运输(cold chain,CC)的要求,这很大程度上限制了疫苗的接种和普及,尤其是在那些贫困偏远地区。为扩大疫苗可及性,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)于2012年首次提出了受控温度链(controlled temperature chain,CTC)法规,即在政府部门和WHO的监管下,在有充分热稳定性数据支持的前提下,若申报CTC的疫苗在不低于40℃下存放至少3 d后仍能保证效力,则该疫苗在免疫供应链后期无需冷链运输。CTC法规已成功应用在包括MenAfriVac在内的4个商品化疫苗上。本文介绍了CTC法规的内容和应用情况,通过科学监管提高疫苗可及性,减少不必要的浪费。

关键词：疫苗科学监管受控温度链可及性接种推广

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人类免疫缺陷病毒1型gp140包膜蛋白三聚体在哺乳动物细胞中的高效表达及其性质鉴定

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病毒学报 2017年第4期33卷 541-549页

作者：杨超张芝晴沈鸿霖高双全李少勇李少伟夏宁邵顾颖厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门361102 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102

本研究目的是通过优化1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)gp140编码基因的密码子和克隆设计,从而实现在293T哺乳动物细胞中高效表达,并对纯化获得的gp140蛋白进行抗原性质鉴定。在本研究中选择HIV-1B亚型NL4-3全基因序列为模板进行gp140克隆构... 详细信息

本研究目的是通过优化1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)gp140编码基因的密码子和克隆设计,从而实现在293T哺乳动物细胞中高效表达,并对纯化获得的gp140蛋白进行抗原性质鉴定。在本研究中选择HIV-1B亚型NL4-3全基因序列为模板进行gp140克隆构建,通过密码子优化、信号肽替换、增加柔性linker、三聚体折叠序列等方法优化设计。通过HIV-1转录反式激活因子tat共转HEK293T细胞进行gp140蛋白表达,采用镍柱纯化。SDS-PAGE、Western blot、ELISA、负染电镜等结果显示目的蛋白纯度高于70%,每升培养基可获得0.5mg gp140蛋白,并且具有良好的抗原活性,电镜下呈现三聚体结构。通过弗氏佐剂与目的蛋白混合免疫Balb/c小鼠,检测小鼠免疫血清显示gp140蛋白能有效刺激机体产生免疫应答。本研究通过优化表达获得B亚型HIV-1NL4-3gp140蛋白,为HIV-1病毒包膜蛋白结构和重组疫苗研究奠定基础。

关键词：人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) 包膜糖蛋白gp140 真核表达密码子优化

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基于酶联免疫斑点技术的丙型肝炎病毒中和抗体检测平台的建立

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厦门大学学报（自然科学版） 2017年第1期56卷 79-84页

作者：熊丽霞刘永亮刘洋葛胜祥厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学生命科学学院厦门大学公共卫生学院福建厦门361102

为建立血清中丙型肝炎病毒(HCV)中和抗体检测及评价手段,运用HCV核心区特异性抗体17H11及链霉亲和素-生物素放大系统,建立了基于酶联免疫斑点(ELISPOT)技术的HCV中和抗体检测平台.结果显示,该平台计数点清晰,可实现阴阳性分开,并能有效... 详细信息

为建立血清中丙型肝炎病毒(HCV)中和抗体检测及评价手段,运用HCV核心区特异性抗体17H11及链霉亲和素-生物素放大系统,建立了基于酶联免疫斑点(ELISPOT)技术的HCV中和抗体检测平台.结果显示,该平台计数点清晰,可实现阴阳性分开,并能有效地检测并评价HCV抗体阳性病人血清的中和作用,表明该平台可实现HCV中和抗体的检测,将有利于HCV疫苗研制中的免疫效果评价.

关键词：丙型肝炎病毒酶联免疫斑点中和抗体

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利什曼病疫苗的研究现状

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017年第5期35卷 499-502,508页

作者：蔡雅霜张志刚王鑫赵勤俭分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门361105 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361105 厦门大学生命科学学院厦门361105 厦门大学公共卫生学院厦门361105

利什曼病是由利什曼原虫引起的一种人兽共患寄生虫病,分布于全球90多个国家,每年新发利什曼病患者130多万,有2万~3万例死亡,给全球尤其是发展中国家带来沉重的社会经济及医疗负担。目前针对利什曼病的防治措施主要为控制传染源和药物治... 详细信息

利什曼病是由利什曼原虫引起的一种人兽共患寄生虫病,分布于全球90多个国家,每年新发利什曼病患者130多万,有2万~3万例死亡,给全球尤其是发展中国家带来沉重的社会经济及医疗负担。目前针对利什曼病的防治措施主要为控制传染源和药物治疗,但均无法消除利什曼病。疫苗接种是行之有效的并具社会经济效益的控制利什曼病的防治手段。因此,利什曼病疫苗的研发具有十分重要的现实意义。本文重点就利什曼原虫致病机制及各类利什曼病疫苗的研究现状进行综述。

关键词：利什曼原虫利什曼病疫苗

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肠道病毒68型新型中和试验方法的建立及其初步应用

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病毒学报 2017年第5期33卷 661-667页

作者：万俊凯王玮侯汪衡李姝璇赵欢郑清炳何水珍程通夏宁邵国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学生命科学学院厦门361102 分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门大学公共卫生学院厦门361102 厦门市疾病预防与控制中心厦门361021

针对肠道病毒68型(EV-D68)建立一种新型快速、高效的中和试验方法,并初步评价其在EV-D68流行病学研究中的应用价值。以灭活EV-D68病毒免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备其单克隆抗体;筛选反应性好、特异性强的抗EV-D68单克隆抗体作为... 详细信息

针对肠道病毒68型(EV-D68)建立一种新型快速、高效的中和试验方法,并初步评价其在EV-D68流行病学研究中的应用价值。以灭活EV-D68病毒免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备其单克隆抗体;筛选反应性好、特异性强的抗EV-D68单克隆抗体作为检测抗体,基于酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT)建立EV-D68高效中和试验方法;进一步比较该方法与传统中和试验方法 Nt-CPE的一致性,并使用该方法对临床血清样本进行检测。共获得10株分泌抗EV-D68单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取一株性能最优的15C5进行生产纯化,鉴定其为IgG3亚型;以15C5为检测抗体,建立了快速检测EV-D68中和抗体的Nt-ELISPOT方法;与Nt-CPE方法比较,Nt-ELISPOT方法将检测时间由5~7d缩短至1d以内,并且两种方法检测结果一致性良好;应用所建立的Nt-ELISPOT方法对厦门地区146份人群血清样本进行检测,显示血清样本EV-D68中和抗体阳性率为98.6%(144/146),提示厦门地区可能存在过EV-D68的流行。本研究基于ELISPOT建立的新型EV-D68中和试验方法快速可靠,适合通量检测,可以应用于EV-D68中和抗体水平的血清学调查,为EV-D68感染的防控工作提供帮助。

关键词：肠道病毒68型(EV-D68) 中和试验中和抗体血清检测

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计算机模拟预测治疗性抗体聚集倾向性的进展及应用

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中国医药工业杂志 2017年第6期48卷 795-801页

作者：毕行建洪奇阳俞海李少伟夏宁邵厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102

由于具有靶向性高、不良反应少等优势,治疗性抗体已成为生物技术产业的重要研究领域。诸多重大疾病如肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、糖尿病、老年性痴呆等都有望用抗体药物进行治疗,以抗体为基础的分子设计和靶向治疗也是近年生物... 详细信息

由于具有靶向性高、不良反应少等优势,治疗性抗体已成为生物技术产业的重要研究领域。诸多重大疾病如肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、糖尿病、老年性痴呆等都有望用抗体药物进行治疗,以抗体为基础的分子设计和靶向治疗也是近年生物医药产业的最大增长点。但目前在抗体药物的研发和生产过程中仍然存在一些问题亟待解决。其中,抗体分子聚集是影响药物成药性的关键因素之一,筛选和设计稳定高效的抗体药物是药物研发早期阶段的重要目标。相较于传统筛选方法,应用计算机模拟技术预测蛋白质的聚集倾向为抗体药物的稳定性和高度可溶性提供了重要参考信息,将有效地提高药物的研发效率。本文重点介绍了已成功应用于治疗性抗体领域的聚集预测方法,并对这些方法的原理与应用前景进行总结,为基于计算机模拟的抗体研究提供参考。

关键词：治疗性抗体聚集倾向性成药性计算机模拟药物研发 DNA重组技术生物信息学

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水痘-带状疱疹病毒糖蛋白N的单克隆抗体制备及初步研究

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病毒学报 2017年第3期33卷 380-388页

作者：付文锟王玮刘剑潘德全蔡琳俐叶江辉朱桦程通夏宁邵国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学生命科学学院厦门361102 分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门大学公共卫生学院厦门361102 微生物学与分子遗传学系罗格斯大学新泽西医学院美国纽瓦克070101

水痘-带状疱疹病毒(VZV)是水痘和带状疱疹的共同致病原,其糖蛋白N(gN)在子代病毒的组装、成熟和出胞过程中发挥重要作用。但是目前关于VZV gN的研究还很少,其蛋白性质和具体分子功能仍不清楚。本研究目的是制备抗VZV gN的单克隆抗体,对... 详细信息

水痘-带状疱疹病毒(VZV)是水痘和带状疱疹的共同致病原,其糖蛋白N(gN)在子代病毒的组装、成熟和出胞过程中发挥重要作用。但是目前关于VZV gN的研究还很少,其蛋白性质和具体分子功能仍不清楚。本研究目的是制备抗VZV gN的单克隆抗体,对该蛋白在VZV感染细胞和人皮肤组织内的表达和分布情况进行初步探究。本研究选择抗原性和亲水性较强的gN区段基因,构建rGST-gN融合蛋白的原核表达质粒,将鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,经亲和层析柱纯化rGST-gN融合蛋白后使用PSP酶切除GST标签,将获得的重组蛋白rgN免疫BALB/c小鼠,使用杂交瘤技术制备其单克隆抗体;共获得24株稳定分泌抗VZV gN单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取其中一株性能最优的12E10进行单克隆抗体生产纯化和抗体鉴定;单克隆抗体12E10为IgG2a亚型,其ELISA效价达到1∶10 000;通过Western blot、免疫荧光及免疫组织化学染色方法鉴定,该抗体能够特异性识别细胞和组织中表达的VZV gN;本研究应用该抗体首次确定了gN在VZV感染细胞中的反式高尔基体定位,并且确定了gN在VZV感染人皮肤组织中的表达。以上工作为今后深入研究VZV gN功能奠定了基础。

关键词：水痘-带状疱疹病毒糖蛋白N 单克隆抗体

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联合雷特格韦用于HIV-1初次治疗有效性和安全性的Meta分析

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中华疾病控制杂志 2017年第5期21卷 504-509页

作者：张峰张芝晴白诗梦高双全田金辉顾颖曲成毅厦门大学公共卫生学院福建厦门361102 分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102 厦门大学生命科学学院福建厦门361102 兰州大学循证医学中心甘肃兰州730000 山西医科大学公共卫生学院流行病学教研室山西太原030001

目的评价联合雷特格韦治疗方案用于人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)初次抗病毒治疗的安全性和有效性。方法检索联合雷特格韦用于HIV-1感染者初次抗病毒治疗的临床随机对照试验(randomized controlled trial,R... 详细信息

目的评价联合雷特格韦治疗方案用于人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)初次抗病毒治疗的安全性和有效性。方法检索联合雷特格韦用于HIV-1感染者初次抗病毒治疗的临床随机对照试验(randomized controlled trial,RCT),采用Rev Man 5.2软件和Stata 12.0进行Meta分析。结果纳入17个RCT,Meta分析结果:以血浆病毒载量<50拷贝/ml为治疗有效。在治疗48周及96周,试验组有效率分别为84.21%、87.30%,与对照组相比差异均无统计学意义(均有P>0.05);治疗240周,试验组有效率高于对照组(70.2%和61.5%),合并效应量(RR=1.15,95%CI:1.03~1.28,P=0.010)。试验组与对照组在腹泻、恶心、头晕、头痛、失眠等常见不良反应差异均无统计学意义(均有P>0.05);其中96周及144/156周时脂质代谢异常增高合并效应量RR(95%CI)分别为:低密度脂蛋白0.16(0.05~0.49)、0.20(0.08~0.48),甘油三酯0.12(0.02~0.59)、0.12(0.03~0.59),总胆固醇0.04(0.00~0.40)、0.04(0.00~0.34)。脂质代谢指标异常增高发生率,试验组均少于对照组,差异均有统计学意义(均有P<0.05)。结论雷特格韦联合核苷类逆转录酶抑制剂、非核苷类逆转录酶抑制剂或蛋白酶抑制剂可以作为HIV-1/艾滋病初次抗病毒治疗的可选方案,与目前推荐的抗病毒治疗方案疗效相当,且安全性较好,其中脂质代谢异增高常明显减少,但受纳入研究对象的限制,需要更多研究进一步证验证。

关键词： HIV 获得性免疫缺陷综合征 Meta分析随机对照试验

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人免疫缺陷病毒包膜蛋白V3多肽与白喉毒素无毒突变体CRM197结构域A融合蛋白的免疫原性分析及单克隆抗体筛选

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中国生化药物杂志 2017年第4期37卷 1-4页

作者：邵佳张芝晴齐家龙未祥乔佳明李少伟夏宁邵顾颖厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102

目的评估CRM197-HIV-V3作为HIV表位疫苗的潜力,以此筛选HIV单克隆中和抗体,为后续疫苗和治疗性抗体的研究奠定基础。方法将HIV-1 NL4-3 V3肽（299~328 aa）展示在白喉毒素无毒突变体A结构域（CRM197-A）上,利用大肠杆菌原核表达系统... 详细信息

目的评估CRM197-HIV-V3作为HIV表位疫苗的潜力,以此筛选HIV单克隆中和抗体,为后续疫苗和治疗性抗体的研究奠定基础。方法将HIV-1 NL4-3 V3肽（299~328 aa）展示在白喉毒素无毒突变体A结构域（CRM197-A）上,利用大肠杆菌原核表达系统进行表达。纯化后的融合蛋白免疫6~8周龄的雌性Balb/c小鼠,免疫3针后,进行脾脏免疫加强,后将小鼠的脾细胞与小鼠杂交瘤细胞进行融合实验。利用基于免疫斑点印迹法（ELISPOT）的HIV中和筛选平台筛选单克隆抗体,对获得的单抗进行抗原性的分析。结果构建克隆后,成功表达了NL4-3 HIV V3肽融合蛋白（CRM197-A-V3）,免疫小鼠的多抗血清对NL4-3株HIV病毒的中和效价约为103,ELISA检测多抗血清结合CRM197-A-V3抗原效价达到105。通过融合筛选和单细胞克隆化获得8株单克隆抗体。ELISA结果显示与NL4-3-gp120蛋白有较好的结合活性。中和实验结果显示抗体对NL4-3株HIV病毒有很好的中和能力,NC50为0.02μg/m L。结论本研究将HIV V3表位展示在CRM197-A上,成功刺激小鼠产生免疫反应,筛选获得特异性针对NL4-3株HIV的中和单抗。

关键词：人免疫缺陷病毒包膜蛋白V3多肽白喉毒素无毒突变体A结构域表位展示中和单抗

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霍乱毒素B亚基展示HIV-1 gp41 MPER表位的研究

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中国生化药物杂志 2017年第6期37卷 1-5页

作者：未祥张芝晴邵佳黄芳齐家龙高双全李少勇李少伟夏宁邵顾颖厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102 厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102

目的评价霍乱毒素B亚基融合HIV-1 gp41 MPER表位的免疫效果.方法利用霍乱毒素的B亚基（CTB）作为载体展示靶向于MPER的广谱中和抗体2F5和4E10的表位.表达纯化后的融合蛋白与弗氏佐剂混合乳化后免疫小鼠,免疫4次后对小鼠的血清进行综... 详细信息

目的评价霍乱毒素B亚基融合HIV-1 gp41 MPER表位的免疫效果.方法利用霍乱毒素的B亚基（CTB）作为载体展示靶向于MPER的广谱中和抗体2F5和4E10的表位.表达纯化后的融合蛋白与弗氏佐剂混合乳化后免疫小鼠,免疫4次后对小鼠的血清进行综合评价.ELISA法评价融合蛋白的免疫原性;检测免疫血清中IgA类抗体分析小鼠黏膜免疫应答;对小鼠血清中的不同类型的抗体量进行分析,通过流式细胞仪检测PBMC细胞因子IFN-γ和IL-4用以分析小鼠免疫激活途径;病毒中和实验检测免疫血清对病毒感染细胞的抑制能力.结果 CTB作为载体蛋白具有很好的免疫原性,能够诱导免疫系统产生针对MPER表位的抗体,刺激小鼠产生黏膜免疫应答,诱导针对MPER表位的IgA抗体.同时,融合蛋白可以刺激机体的IgG1,IgG2a和IgG2b类抗体的产生和刺激小鼠体内的Th2类免疫途径.中和实验结果显示,CTB-4E10免疫后的血清可以抑制NL4-3病毒对细胞的感染.结论 CTB融合蛋白具有强免疫原性,可以刺激体液免疫反应,黏膜免疫反应和Th2类免疫途径,并且CTB-4E10蛋白免疫血清能够抑制NL4-3病毒感染细胞.本研究为HIV-1 gp41 MPER作为候选疫苗的探索奠定基础.

关键词：霍乱毒素B亚基免疫应答

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