检索结果-内蒙古大学图书馆

兰州大学学报（自然科学版） 2006年第2期42卷 25-28页

作者：苏勇波邵寒娟沈明山王鸣刚陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

人角质细胞生长因子(KGF)有3个外显子,2个内含子．以人 DNA 为模板,PCR 扩增获得角质细胞生长因子外显子2和外显子3；合成单链的寡核苷酸,经链延伸和 PCR 扩增从而获得外显子1．应用延伸 PCR 将3个外显子连接得 KGF 编码序列,并连接 CaM... 详细信息

人角质细胞生长因子(KGF)有3个外显子,2个内含子．以人 DNA 为模板,PCR 扩增获得角质细胞生长因子外显子2和外显子3；合成单链的寡核苷酸,经链延伸和 PCR 扩增从而获得外显子1．应用延伸 PCR 将3个外显子连接得 KGF 编码序列,并连接 CaMV35S 启动子和 NOS 终止子后克隆至植物表达质粒 pBI 1301．

关键词：角质细胞生长因子植物表达载体重叠延伸法

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外源基因的导入对Synechococcus ***7942SOD活性和同工酶谱的影响

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厦门大学学报（自然科学版） 2004年第3期43卷 398-401页

作者：徐虹章军谭维娜林鉴刘仁海周克夫厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

外源DNA导入***7942后,通过NBT光化还原和PAGE电泳检测发现转基因藻Syne ***7942的SOD活性和同工酶谱发生了改变.若外源基因整合在受体细胞染色体DNA上,根据整合位点的不同则能提高或减弱***7942的SOD活性,同时增加同工酶谱带.若外源基... 详细信息

外源DNA导入***7942后,通过NBT光化还原和PAGE电泳检测发现转基因藻Syne ***7942的SOD活性和同工酶谱发生了改变.若外源基因整合在受体细胞染色体DNA上,根据整合位点的不同则能提高或减弱***7942的SOD活性,同时增加同工酶谱带.若外源基因不是整合在染色体上而是以质粒的形式存在,则只改变***7942SOD活性而不影响其同工酶谱.

关键词：外源基因基因导入 Synechococcus sp.PCC7942 SOD 超氧化物歧化酶同工酶转基因

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有机溶剂对南美白对虾N-乙酰-βD-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

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厦门大学学报（自然科学版） 2005年第5期44卷 693-696页

作者：林建城谢晓兰龚敏王悦陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

研究了几种有机溶剂对南美白对虾(Penaeus vannamei)N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、乙二醇和丙三醇对NAGase的作用均表现为低浓度时对酶有激活作用,随着浓度的升高,激活作用减弱... 详细信息

研究了几种有机溶剂对南美白对虾(Penaeus vannamei)N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、乙二醇和丙三醇对NAGase的作用均表现为低浓度时对酶有激活作用,随着浓度的升高,激活作用减弱并速转为抑制作用;二甲亚砜和二氧六环对酶的抑制作用呈现明显的浓度效应,随浓度增大酶活力迅速下降.进一步研究二甲亚砜的抑制作用动力学,结果表明:二甲亚砜对酶的抑制作用是一种可逆过程,抑制机理表现为混合型抑制类型,抑制常数KI=0.27 mol/L,KIS=2.05 mol/L.

关键词：南美白对虾 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶有机溶剂酶活力动力学

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文蛤多肽对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

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厦门大学学报（自然科学版） 2007年第5期46卷 593-597页

作者：冷波康劲翮贺量范成成王勤陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

研究了文蛤多肽对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用,结果表明,经5.0μg/mL文蛤多肽处理的体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721)生长缓慢,倍增时间延长,细胞生长抑制率达89.4%;处理后的癌细胞形态发生明显改变,处于G0/G1期的细胞明... 详细信息

研究了文蛤多肽对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用,结果表明,经5.0μg/mL文蛤多肽处理的体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721)生长缓慢,倍增时间延长,细胞生长抑制率达89.4%;处理后的癌细胞形态发生明显改变,处于G0/G1期的细胞明显增多,而S期和M期细胞减少,出现明显的凋亡峰,凋亡率为22.3%.实验结果表明,文蛤多肽能有效地抑制体外培养肝癌细胞的增殖活动,可通过改变肝癌细胞的形态及细胞周期而明显抑制细胞的增殖.

关键词：文蛤多肽肝癌细胞增殖抑制

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氨基酸对鲍鱼碱性磷酸酶活力的影响

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厦门大学学报（自然科学版） 2004年第B08期43卷 8-11页

作者：林丽蓉廖金花陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

选用L Ala、L Val、L Leu等15种氨基酸为效应物,研究它们对杂色鲍(Haliotisdiversicolor)碱性磷酸酶(EC.3.1.3.1)催化pNPP水解反应的影响.结果表明:上述这些氨基酸对鲍鱼碱性磷酸酶均有一定程度的抑制作用,抑制程度随着试剂浓度增大而加... 详细信息

选用L Ala、L Val、L Leu等15种氨基酸为效应物,研究它们对杂色鲍(Haliotisdiversicolor)碱性磷酸酶(EC.3.1.3.1)催化pNPP水解反应的影响.结果表明:上述这些氨基酸对鲍鱼碱性磷酸酶均有一定程度的抑制作用,抑制程度随着试剂浓度增大而加剧.当浓度为10.0mmol/L时,分别可以使酶活力下降:7.77%、36.75%、22.79%、39.86%、16.16%、19.33%、94.77%、20.19%、17.02%、40.15%、31.08%、17.52%、30.56%、36.77%和12.59%.尤其以L Cys对酶的抑制作用最为显著(抑制率为94.77%),其次是L Ile和L His,它们均能使酶活力下降40%;对酶抑制率在30%以上的氨基酸还有L Val、L Trp、L Phe和L Lys,其它选用的氨基酸对酶的抑制率小于25%.选择对杂色鲍ALP具有较明显的抑制作用的氨基酸L Val、L Ile、L Trp和L Cys等氨基酸为研究对象,研究它们对酶催化pNPP水解反应的抑制作用机理,并测定其抑制常数.结果表明L Cys的抑制作用为混合型效应,其KI和KIS值分别为0.042mmol/L和0.139mmol/L;而L Val、L Ile、L Trp为反竞争性,其KIS分别为9.56、8.55、8.09mmol/L.

关键词：氨基酸鲍鱼碱性磷酸酶活力抑制作用机理

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菜青虫不同生长期相关蛋白的蛋白质组学研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2008年第A02期47卷 79-82页

作者：石艳林祥明张茜贺量林建峰王勤陈清西厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院福建厦门361005

以不同生长阶段的菜青虫五龄幼虫、预蛹和蛹为材料,通过对3个不同生长阶段的菜青虫双向电泳图谱的比较找到18个差异较明显的蛋白质斑点,并通过质谱分析技术和数据库信息检索最终鉴定出8个蛋白,包括4个代谢相关蛋白(氧化还原酶、组氨酸... 详细信息

以不同生长阶段的菜青虫五龄幼虫、预蛹和蛹为材料,通过对3个不同生长阶段的菜青虫双向电泳图谱的比较找到18个差异较明显的蛋白质斑点,并通过质谱分析技术和数据库信息检索最终鉴定出8个蛋白,包括4个代谢相关蛋白(氧化还原酶、组氨酸乙酰转运酶、多胺氧化酶和支酸变位酶)、3个调控蛋白(锌指类蛋白、转座酶、与RNA甲基化酶有关的假想蛋白)和1个与结构E-钙粘附蛋白相似的蛋白,其余10个蛋白质功能皆不明确.本文的结果为进一步研究菜青虫发育相关蛋白奠定基础,同时也为研发以这些差异蛋白为作用靶点的新型生物农药提供理论依据.

关键词：蛋白组学差异蛋白菜青虫功能

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RP-6启动子连接的IPT基因的双元载体构建

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第3期45卷 432-435页

作者：张红心李晓星苏勇波黄维雪陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

以含有IPT基因的中间载体pSG516为基础,采用酶切的方法获得IPT-Nos核酸片段,以水稻品种9311为材料,采用PCR的方法克隆出种子中特异表达的醇溶谷蛋白RP-6基因启动子,并将此启动子连接到pCAMBIA1300上,构建pCAMBIA1300-pRP-6载体,将IPT-No... 详细信息

以含有IPT基因的中间载体pSG516为基础,采用酶切的方法获得IPT-Nos核酸片段,以水稻品种9311为材料,采用PCR的方法克隆出种子中特异表达的醇溶谷蛋白RP-6基因启动子,并将此启动子连接到pCAMBIA1300上,构建pCAMBIA1300-pRP-6载体,将IPT-Nos核酸片段插入到pCAMBIA1300-pRP-6,构建了pCAMBIA1300-pRP-6-IPT-Nos双元表达载体.

关键词： pRP-6 IPT pCAMBIA1300-pRP-6-IPT-Nos 特异表达

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Eptifibatide的固相合成及分离纯化

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厦门大学学报（自然科学版） 2007年第1期46卷 100-103页

作者：熊瑛王宇陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

Eptifibatide是一种血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂,临床研究结果显示其医用上的产业前景良好.采用Rink-Am-Resin树脂作为固相载体,Fmoc为保护策略固相合成了Eptifibatide.以DMF为反应溶剂,Piperidine-DMF脱去Fmoc保护基团,以TBTU/HOB... 详细信息

Eptifibatide是一种血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂,临床研究结果显示其医用上的产业前景良好.采用Rink-Am-Resin树脂作为固相载体,Fmoc为保护策略固相合成了Eptifibatide.以DMF为反应溶剂,Piperidine-DMF脱去Fmoc保护基团,以TBTU/HOBt/DIEA作为肽键缩合试剂进行接肽反应,用TFA/EDT/TIS/H2O定量地从树脂上切除,制备型高效液相色谱分离纯化粗肽.同时对产品进行色谱分析和质谱鉴定.实验结果表明Fmoc合成策略中各步的缩合率均在95%以上,多数在99%以上.粗肽纯度为86.8%,产率为55%.分离纯化后的产物纯度达到98.5%,MOLDI-TOF质谱测得的m/z与理论值相符.为化学合成Eptifibatide及其分离纯化提供了一条切实可行的路线.

关键词： Eptifibatide 固相合成 Fmoc法

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联苯基甲醛与联苯基甲酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

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厦门大学学报（自然科学版） 2004年第2期43卷 249-252页

作者：柯莉娜王勤陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

报道了联苯基甲醛与联苯基甲酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制效应.研究结果表明:联苯基甲醛与联苯基甲酸对蘑菇酪氨酸酶均有明显的抑制作用,导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为86.5和860.0mmol/L,前者的抑制作用强度是后者的10倍.这两... 详细信息

报道了联苯基甲醛与联苯基甲酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制效应.研究结果表明:联苯基甲醛与联苯基甲酸对蘑菇酪氨酸酶均有明显的抑制作用,导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为86.5和860.0mmol/L,前者的抑制作用强度是后者的10倍.这两种抑制剂对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用均表现为可逆过程,联苯基甲醛对酶的抑制作用为非竞争性,而联苯基甲酸是混合型.本文进一步测定它们的抑制常数KI和KIS,并加以比较.

关键词：联苯基甲醛联苯基甲酸蘑菇酪氨酸酶抑制作用黑色素杀虫剂

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利用酵母双杂交研究铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiB的自身相互作用

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海洋科学 2006年第8期30卷 41-45页

作者：郑锦乾徐虹章军王靖朱斌琳厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

从铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)PCC7820中克隆了生物钟基因kaiB,并将其克隆入酵母双杂交系统的两个质粒pGADT7和pGBKT7中。经测序验证后,将重组质粒pGADT7-kaiB和pGBKT7-kaiB转化酵母菌AH109进行自激活性和自身相互作用的检测和... 详细信息

从铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)PCC7820中克隆了生物钟基因kaiB,并将其克隆入酵母双杂交系统的两个质粒pGADT7和pGBKT7中。经测序验证后,将重组质粒pGADT7-kaiB和pGBKT7-kaiB转化酵母菌AH109进行自激活性和自身相互作用的检测和验证。结果表明,铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiB无自激活性,KaiB蛋白自身能发生相互作用。因此,可用KaiB蛋白为诱饵利用酵母双杂交系统筛选文库钓取与KaiB发生相互作用的蛋白。

关键词：铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa) 生物钟蛋白KaiB 酵母双杂交自身相互作用

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