检索结果-内蒙古大学图书馆

厦门大学学报（自然科学版） 2004年第B8期43卷 24-27页

作者：谢晓兰王勤陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

以南美白对虾为材料,分离提纯N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶,研究产物NAG及产物类似物glu、gal、fru等对该酶催化水解pNp β D GlcNAc活力的影响.抑制强度次序为:NAG>gla>glu>suc>fru.研究抑制作用动力学,结果表明:NAG对酶的... 详细信息

以南美白对虾为材料,分离提纯N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶,研究产物NAG及产物类似物glu、gal、fru等对该酶催化水解pNp β D GlcNAc活力的影响.抑制强度次序为:NAG>gla>glu>suc>fru.研究抑制作用动力学,结果表明:NAG对酶的抑制作用表现为反竞争型,其抑制常数KIS为11.4mmol/L/;gal、glu、fru对酶的作用表现为竞争型抑制,抑制常数KI分别为0.709、0.747和2.94mol/L;suc对酶的抑制作用表现为非竞争型,抑制常数KI=KIS=2.58mol/L.

关键词：南美白对虾 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶产物类似物抑制作用养殖

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pBR322-Red介导的***染色体基因敲入、位点及表达研究

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遗传 2006年第1期28卷 71-77页

作者：陈伟李山虎于梅王鸣刚周建光军事医学科学院生物工程研究所北京100850 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

应用pBR322-Red介导的重组工程系统,kan/sacB选择反选择系统,双链线性DNA重组技术和重叠引物介导的DNA重组技术,将长度为1 653 bp的luc报告基因分别敲入到*** 3110染色体lacZ,lacY和lacA基因的位置,建立了一系列具有新遗传表型的菌株:C... 详细信息

应用pBR322-Red介导的重组工程系统,kan/sacB选择反选择系统,双链线性DNA重组技术和重叠引物介导的DNA重组技术,将长度为1 653 bp的luc报告基因分别敲入到*** 3110染色体lacZ,lacY和lacA基因的位置,建立了一系列具有新遗传表型的菌株:CWL2、CWL4和CWL6。荧光素酶分析表明,外源报告基因luc能在这3个结构基因处有效的组成型表达。为了进一步确定外源基因的表达情况,用霍乱毒素B亚单位基因ctxb替换了lacZ基因,构建了新菌株CWD1。证明了以单拷贝形式存在在大肠杆菌染色体CWD1上的ctxb基因能有效的表达CTB蛋白并能将其分泌至细胞外培养液中。结果初步确定了大肠杆菌染色体上的lac操纵子结构基因位点适合外源基因的敲入和表达。

关键词： pBR322-Red 重组工程基因敲入霍乱毒素B亚单位

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光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的FTIR谱的研究

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生物物理学报 2001年第2期17卷 267-274页

作者：龙敏南苏文金 S P J Albracht 张凤章许良树厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 E C Slater Institute

光合细菌Chromatiumvinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶。氧化态可溶性氢酶在红外光谱区(1860 -2140cm -1)有四个特征吸收峰 (2103.7 ,2086.2,2054.8和1962.5cm -1)。其中1962.5cm -1处吸收带的位置与已知的NiFe -氢酶活性中... 详细信息

光合细菌Chromatiumvinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶。氧化态可溶性氢酶在红外光谱区(1860 -2140cm -1)有四个特征吸收峰 (2103.7 ,2086.2,2054.8和1962.5cm -1)。其中1962.5cm -1处吸收带的位置与已知的NiFe -氢酶活性中心 -CO基团所产生的吸收带位置相近 ;另外三条吸收带的位置与已知的NiFe -氢酶活性中心 -CN基团所产生的吸收带的位置相近。以2 ,6 -二氯酚靛酚 (DPIP)氧化可溶性氢酶时 ,四条吸收谱带的位置基本上没有发生变化。可溶性氢酶被Na2S2O4 充分还原时,-CO基团的吸收带移至1946.8cm -1 ,而 -CN基团的三条吸收带中的两条分别移至2076.8cm-1 和2093.1cm-1 处 ,另一条则消失了。还原态可溶性氢酶与CO反应后 ,其红外光谱显示七条吸收带 ,在 -CO基团红外光谱区和 -CN基团红外光谱区各产生了两条新的吸收带。研究表明 ,***可溶性氢酶的活性中心的结构类似于其它已知的NiFe -氢酶 ,但与活性中心金属原子相连的可能包括三个 -CN基团和一个 -CO基团 ,结合可溶性氢酶的EPR谱特征 ,推测***可溶性氢酶活性中心的结构可能为Ni(CN)Fe(CN)2(CO)。

关键词：可溶性氢酶 FTIR谱光合细菌

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胃癌细胞SGC-7901双向电泳系统的建立及优化

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第B05期45卷 149-151页

作者：贺量冷波康劲翮陈清西厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室福建厦门361005

文蛤抗癌活性多肽对多种癌细胞有抑制效应,具有良好的药物开发前景.双向电泳技术的进步为药物的开发提供了理想的技术平台.我们通过对胃癌细胞SGC-7901总蛋白双向电泳技术的建立以及初步优化对一些环节如样品处理的方法、上样量的选择... 详细信息

文蛤抗癌活性多肽对多种癌细胞有抑制效应,具有良好的药物开发前景.双向电泳技术的进步为药物的开发提供了理想的技术平台.我们通过对胃癌细胞SGC-7901总蛋白双向电泳技术的建立以及初步优化对一些环节如样品处理的方法、上样量的选择、电泳参数的设置、凝胶浓度和SDS凝胶电泳染色方法等进行了优化得到了分辨率较好的胃癌细胞的蛋白图谱,为进一步的文蛤抗癌多肽抑制胃癌细胞作用的蛋白组学研究提供实验工作的基础.

关键词：胃癌双向电泳条件优化

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青霉葡萄糖氧化酶的分离纯化及性质研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2009年第1期48卷 99-102页

作者：张茜傅婉辉康劲翮陈清西石艳厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门363005

从青霉（Penicillium amagasakiense）发酵液中分离纯化葡萄糖氧化酶（简称GOD），通过DEAE-32离子交换柱层析、Sephacryl S-200分子筛凝胶过滤柱层析纯化，获得比活力为472U／mg电泳单一纯酶制剂，采用SDS-PAGE电泳，表明该酶含有两个... 详细信息

从青霉（Penicillium amagasakiense）发酵液中分离纯化葡萄糖氧化酶（简称GOD），通过DEAE-32离子交换柱层析、Sephacryl S-200分子筛凝胶过滤柱层析纯化，获得比活力为472U／mg电泳单一纯酶制剂，采用SDS-PAGE电泳，表明该酶含有两个同型的亚基，分子量为150ku．酶学性质研究表明：该酶催化葡萄糖氧化酶反应的最适pH为5．6，最适温度为40℃．酶的热稳定性研究表明：该酶在pH5．5～8．5区间和温度低于50℃下稳定．金属离子对酶活力的影响表明：Na^＋、K^＋、Ca^2＋、Pb^2＋、Mn^2＋等对酶活力基本没有影响；Al^＋、Zn^2＋对酶有一定的激活作用；Ag^＋、Hg^2＋、Mg^2＋、Cd^2＋、Cu^2＋、Co^2＋等对该酶活力有不同程度的抑制作用．该酶以葡萄糖为底物的米氏常数Km值为122．6mmol／L，Vm为25．52#mol／（L·min）（pH7．0．37℃）．

关键词：葡萄糖氧化酶青霉分离纯化酶学性质

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酿酒葡萄内生真菌群落及抗菌活性测定

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厦门大学学报（自然科学版） 2010年第4期49卷 564-569页

作者：王增福林筱钱晓鸣沈月毛厦门大学生命科学学院厦门大学医学院福建厦门361005 细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室(厦门大学)

从酿酒葡萄(Vitis vinifera.L)植株的各组织中共分离得到462株内生真菌,通过形态鉴定、排重、按比例缩取从中选取出64株内生真菌.采用ITS排序、系统树构建的方法对64株真菌的种属地位及发育关系进行了研究,并对植物病原真菌生长抑制能... 详细信息

从酿酒葡萄(Vitis vinifera.L)植株的各组织中共分离得到462株内生真菌,通过形态鉴定、排重、按比例缩取从中选取出64株内生真菌.采用ITS排序、系统树构建的方法对64株真菌的种属地位及发育关系进行了研究,并对植物病原真菌生长抑制能力进行了测定.系统发育树分析表明酿酒葡萄内生真菌分布于20个属,其中交链孢霉(Alternaria)17.24%,青霉(Penicillium)15.52%,镰刀菌(Fusarium)10.34%,曲霉(Aspergillus)、Discostroma、赤霉菌(Gibberella)、Passalora、Pestalotiopsis各5.17%,交链孢霉、青霉、镰刀菌是其中的优势种群.对植物病原真菌有抗性的菌株分布于15个属,其中镰刀菌属的6株菌对3种指示菌均有抑制作用,镰刀菌是酿酒葡萄植株主要抗植物病原真菌的活性物质来源之一.

关键词：酿酒葡萄内生真菌生物活性

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患红体病的凡纳滨对虾外壳膜NAGase基本性质的改变

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应用与环境生物学报 2008年第2期14卷 207-210页

作者：杜娟谢晓兰石艳黄乾生陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 泉州师范学院化学与生命科学学院福建泉州362000

分别以健康和患红体病的凡纳滨对虾(Litopenaeus vanname)外壳膜为材料,抽提其N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,简称NAGase),测定分析两种来源对虾的外壳膜NAGase的活力和性质的差异.测得健康对虾NA-Gase的活力为34·80Umg-1... 详细信息

分别以健康和患红体病的凡纳滨对虾(Litopenaeus vanname)外壳膜为材料,抽提其N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,简称NAGase),测定分析两种来源对虾的外壳膜NAGase的活力和性质的差异.测得健康对虾NA-Gase的活力为34·80Umg-1,而患红体病对虾的活力为38·32Umg-1.结果表明:两种来源对虾的NAGase活力、基本酶学性质等均存在差异.表明对虾患红体病后,外壳膜NAGase的活力、催化反应动力学常数Km和Vm值、活化能均较高,但其最适温度较低,pH稳定性及热稳定性较差.

关键词：凡纳滨对虾 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶学性质红体病

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戊型肝炎病毒ORF2片段在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定

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湖南师范大学自然科学学报 2005年第2期28卷 57-61页

作者：刘如石邱义兰杨坤宇梁良张军夏宁邵湖南师范大学生命科学学院生物化学与分子生物学系中国长沙410081 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室中国厦门361005

　为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎病毒基因工程疫苗,利用Pichiapastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2基因.利用PCR扩增HEVORF2基因,然后将ORF2基因按正确的阅读框融合到Pichiapastoris分泌型表达载体pPIC9K的а因子信... 详细信息

　为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎病毒基因工程疫苗,利用Pichiapastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2基因.利用PCR扩增HEVORF2基因,然后将ORF2基因按正确的阅读框融合到Pichiapastoris分泌型表达载体pPIC9K的а因子信号肽编码序列3′端,重组表达载体在电击转化毕赤酵母,经过含G418的营养缺陷型培养基(RDB)筛选、重组酵母基因组总DNA进行PCR鉴定后,证实HEVORF2基因已经整合到酵母基因组中并得到重组转化子.表型鉴定后对G418具有不抗性的重组菌株诱导表达,用双抗体夹心法ELISA筛选了表达外源蛋白的重组菌株,再经SDS PAGE与Westernblot证实ORF2基因在Pichiapastoris中实现了分泌表达,而且重组蛋白具有较强的特异性与生物学活性;同时用双抗体夹心法证实在Pichiapastoris表达的上清中存在衣壳蛋白聚体.

关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白重组毕赤酵母

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几种核受体核浆穿梭与调控机制

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细胞生物学杂志 2005年第4期27卷 363-368页

作者：林晓峰吴乔厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

许多核受体属于核转录因子,它们在胞浆合成后快速地转运入核,同时还能够在核浆之间穿梭以行使其特定的生物学功能。核受体的核浆转运主要通过核膜上的核孔复合体,依靠运输载体Importins和Exportins介导以及Ran-GDP提供能量。现对糖皮质... 详细信息

许多核受体属于核转录因子,它们在胞浆合成后快速地转运入核,同时还能够在核浆之间穿梭以行使其特定的生物学功能。核受体的核浆转运主要通过核膜上的核孔复合体,依靠运输载体Importins和Exportins介导以及Ran-GDP提供能量。现对糖皮质激素受体(GR)、雄激素受体(AR)和雌激素受体(ER)等核受体在核浆穿梭转运和调控机制等方面的研究进展进行综述,同时也介绍我们实验室最近发现的视黄素X受体(RXR)核浆穿梭转运的新功能。

关键词：核受体配体核浆穿梭核定位信号核输出信号调控机制穿梭糖皮质激素受体核浆转运核转录因子

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嗜水气单胞菌蛋白质组分子解剖图谱的初步建立

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厦门大学学报（自然科学版） 2003年第2期42卷 139-143页

作者：王三英吴谋胜陈晋安陈子珺彭宣宪厦门大学生命科学学院生物学系细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

采用蛋白质组学技术,建立了嗜水气单胞菌PPD(134/91)在稳定期的蛋白质组分子解剖图谱.将嗜水气单胞菌接种于LB培养基28℃培养18h,取菌总蛋白进行2 DPAGE.从2 DPAGE图谱中随机选取124个蛋白质点进行肽质量指纹图谱鉴定,检索发现其中10个... 详细信息

采用蛋白质组学技术,建立了嗜水气单胞菌PPD(134/91)在稳定期的蛋白质组分子解剖图谱.将嗜水气单胞菌接种于LB培养基28℃培养18h,取菌总蛋白进行2 DPAGE.从2 DPAGE图谱中随机选取124个蛋白质点进行肽质量指纹图谱鉴定,检索发现其中10个确定为数据库中收录的嗜水气单胞菌的基因或蛋白,其比例约为1/12.实验结果对嗜水气单胞菌菌株之间的比较研究和功能蛋白质组研究具有重要参考价值.

关键词：嗜水气单胞菌蛋白质组学分子解剖图谱肽质量指纹图诺分子生物学

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