检索结果-内蒙古大学图书馆

分子细胞生物学报 2006年第2期39卷 169-176页

作者：赵春红李祺福李智星陈晋安厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室厦门大学生命科学学院分析测试中心厦门361005

HMBA诱导处理人成骨肉瘤MG-63细胞分化后,选择性抽提核基质蛋白,经双向凝胶电泳技术分析．共有12个蛋白点表达发生变化,经肽指纹图谱分析鉴定了9个蛋白质,其中,MHCⅡ类抗原、IFN刺激的基因因子3α蛋白、DKFZp434M2221．1蛋白、8-羟基-... 详细信息

HMBA诱导处理人成骨肉瘤MG-63细胞分化后,选择性抽提核基质蛋白,经双向凝胶电泳技术分析．共有12个蛋白点表达发生变化,经肽指纹图谱分析鉴定了9个蛋白质,其中,MHCⅡ类抗原、IFN刺激的基因因子3α蛋白、DKFZp434M2221．1蛋白、8-羟基-鸟嘌呤糖基化酶同功酶oggl和波形蛋白表达上调,hnRNP A2/B1和肌动蛋白表达下调,60S核糖体蛋白L21和ST2蛋白仅在分化的MG-63细胞中表达。研究结果表明肿瘤细胞增殖分化过程中伴随核基质蛋白表达的变化,并为深入揭示核基质蛋白与细胞癌变和逆转的关系以及阐明细胞增殖分化的基因表达调控原理提供了依据。

关键词：核基质蛋白细胞分化人成骨肉瘤细胞 HMBA

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假单胞菌(Pseudomonas sp. cn 4902)甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因克隆及表达

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海洋与湖沼 2004年第2期35卷 183-188页

作者：刘广发谭静陈启伟刘广发谭静陈启伟厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室，厦门361005

参照几种生物的甘露醇 1 磷酸脱氢酶基因 (mtlD)的序列设计引物 ,以极端耐盐的假单胞菌 (Pseudomonassp cn 4 90 2 )的总DNA为模板 ,采用PCR扩增、构建重组高效表达载体以及生物信息学研究等方法 ,进行基因克隆、表达及功能定性等研究... 详细信息

参照几种生物的甘露醇 1 磷酸脱氢酶基因 (mtlD)的序列设计引物 ,以极端耐盐的假单胞菌 (Pseudomonassp cn 4 90 2 )的总DNA为模板 ,采用PCR扩增、构建重组高效表达载体以及生物信息学研究等方法 ,进行基因克隆、表达及功能定性等研究。结果表明 ,克隆获得一长为 114 9bp的基因。经蛋白质保守区域研究 ,初步判别该基因为mtlD结构基因。将该基因与pBV2 2 0质粒构建成高效表达原核重组载体pBH。SDS PAGE电泳表明 ,含pBH的转化子产生特异的、分子量约为 4 1kD的蛋白带 ,表达量约占菌体可溶性蛋白 6 7%。转化子的耐盐水平比对照提高了约 1/5。在含 0 9mol/LNaCl的液体培养基中 ,转化子培养 2 4h后其生物量约是对照的 10 2倍 ,甘露醇含量约是对照的 4 1倍。可见 ,假单胞菌的甘露醇 1 磷酸脱氢酶基因是一个重要的耐盐相关基因 ,该基因已在GenBank登记 ,代号为AY112 6 96。

关键词：假单胞菌甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因克隆

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铜绿微囊藻Microcystis aeruginosa PCC7820 ATP含量和细胞分裂昼夜节律的研究

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高技术通讯 2008年第10期18卷 1081-1087页

作者：徐虹林重阳黄晶厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

为了研究铜绿微囊藻 Microcystis aeruginosa PCC7820中是否存在内源昼夜节律,检测了其细胞中的三磷酸腺苷(ATP)含量和细胞分裂的日变化规律。通过生物发光法检测的细胞内 ATP 含量变化结果表明,在12h光/12h暗(L/D)周期环境下该藻的 ATP... 详细信息

为了研究铜绿微囊藻 Microcystis aeruginosa PCC7820中是否存在内源昼夜节律,检测了其细胞中的三磷酸腺苷(ATP)含量和细胞分裂的日变化规律。通过生物发光法检测的细胞内 ATP 含量变化结果表明,在12h光/12h暗(L/D)周期环境下该藻的 ATP 含量呈现明显的近似24h 的昼夜周期性变化,且这种周期性变化在连续光照条件下能至少持续运行3个周期,周期长度具有温度补偿效应,而光照和温度的改变能重置昼夜节律的时相,这说明铜绿微囊藻 ATP 含量的昼夜节律变化受到内源生物钟的控制。通过对细胞数、细胞大小和细胞分裂素含量的检测发现,传代时间为38.4h 的铜绿微囊藻的细胞分裂也呈现受生物钟调控的昼夜节律性,这种昼夜节律变化可能是生物钟通过一种门控机制调控 *** PCC7820的细胞分裂时相而产生的。

关键词：铜绿微囊藻昼夜节律 ATP含量细胞分裂

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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术研究人血清转铁蛋白稳定性及裂解产物

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分析化学 2007年第6期35卷 791-796页

作者：卓慧钦金宏伟黄河清黄慧英蔡宗苇厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院附属中山医院临床检验中心香港浸会大学化学系

制备质谱纯人血清转铁蛋白(HTF),供分子结构分析。选用SDS-PAGE、胶外酶解、基质辅助激光解吸/电离质谱技术(MALDI-TOF)、数据库检索和比对技术鉴定铁饱和HTF、双铁HTF(HTF-2Fe3+)、单铁HTF(HTF-Fe3+)和脱铁HTF(apoHTF)的稳定性和裂解... 详细信息

制备质谱纯人血清转铁蛋白(HTF),供分子结构分析。选用SDS-PAGE、胶外酶解、基质辅助激光解吸/电离质谱技术(MALDI-TOF)、数据库检索和比对技术鉴定铁饱和HTF、双铁HTF(HTF-2Fe3+)、单铁HTF(HTF-Fe3+)和脱铁HTF(apoHTF)的稳定性和裂解产物。以乙腈溶液作为洗脱相,发现铁饱和HTF在RP-HPLC分离纯化过程中产生裂解现象。铁饱和HTF和HTF-2Fe3+经乙腈处理后均能产生不同分子量的短肽裂解产物,指出HTF结构稳定性与络合铁离子数量有关。铁组分改善了HTF分子结构的稳定性。采用比对法,研究在乙腈作用下HTF裂解成为各种各样短肽的规律,初步阐明其裂解机理。在乙腈作用下,HTF可能通过蛋白质去折叠途径,形成不同多聚态HTF或多肽裂解产物。推测目前用于临床诊断先天性糖基化紊乱(CDG)和慢性酒精滥用(CAA)疾病低准确率的起因可能是受HTF裂解产物或多聚体的干扰。

关键词：血清转铁蛋白基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱胶内酶解反相高效液相色谱标志蛋白质

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海洋真菌Diaporthe sp.产真菌环氧二烯发酵条件的优化

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微生物学通报 2006年第5期33卷 6-11页

作者：王若宇黄耀坚郑忠辉苏文金沈月毛细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院厦门361005

从海洋木栖真菌HLY-2分离得到的真菌环氧二烯(Mycoepoxydiene)是新发现的高抗肿瘤活性化合物。通过正交设计,改良普通半海水PD培养基的配方,比较固体和液体两种发酵方法,得到了使该化合物产量大幅提高的最佳培养条件:在固体发酵条件下土... 详细信息

从海洋木栖真菌HLY-2分离得到的真菌环氧二烯(Mycoepoxydiene)是新发现的高抗肿瘤活性化合物。通过正交设计,改良普通半海水PD培养基的配方,比较固体和液体两种发酵方法,得到了使该化合物产量大幅提高的最佳培养条件:在固体发酵条件下土豆250g/L,海水300mL/L,葡萄糖30g/L,乳糖50g/L,磷酸二氢钾0·65mmol/L,硫酸铵1g/L,产量高达543mg/L,比普通的PD培养基提高了43倍,也比液体发酵的最高产量提高了近15倍。同时还对固体发酵和液体发酵造成的产量差异进行了分析。并检验了发酵产物的抗肿瘤活性。

关键词：海洋真菌抗肿瘤化合物真菌环氧二烯发酵条件优化

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一种新型广谱的原核型分泌表达载体的建立及人表皮生长因子的表达

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高技术通讯 2007年第11期17卷 1192-1197页

作者：郝春芳徐虹章军刘仁海厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

通过Cyanobase藻类学数据库查询,从集胞藻6803转译后加工过程中的某些蛋白的分泌信号序列得到了可以用于分泌型表达的信号序列,进一步通过SignalP3.0Server分析软件预验证,从集胞藻6803得到4种不同蛋白的信号序列A、B、C、D,将这些信号... 详细信息

通过Cyanobase藻类学数据库查询,从集胞藻6803转译后加工过程中的某些蛋白的分泌信号序列得到了可以用于分泌型表达的信号序列,进一步通过SignalP3.0Server分析软件预验证,从集胞藻6803得到4种不同蛋白的信号序列A、B、C、D,将这些信号序列插入pET-His-EGF表达载体hegf基因上游,得到了带有分泌型信号的pS-X系列分泌型表达载体,人表皮生长因子（hEGF）在其中的pS-A载体中实现了分泌型表达,hEGF分泌到周质空间的相对表达量约为1%,在其它3个载体中未见表达。获得的pS-A分泌型表达载体是一种新型分泌型表达载体,它利用蓝藻信号序列作为分泌表达的信号肽,实现了hEGF多肽在大肠杆菌中分泌表达,通过融合白亚细胞定位法处理得到的hEGF多肽在胞质、周质空间和培养基中表达的比例为85∶33∶25（density intensity/mm^2）,利用渗透休克处理方法得到的比例为50∶37∶25。由于A信号序列本身是集胞藻6803膜蛋白（ID：s110172/NCBI-GI：1001433）的分泌信号肽,说明pS-A载体是一种广谱的原核型分泌表达载体。这一结果为实现hEGF在螺旋藻中的分泌型表达奠定了基础。

关键词：人表皮生长因子(hEGF) 信号肽序列分泌型表达载体蓝藻

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白菜细胞核雄性不育花药的细胞化学观察

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实验生物学报 2004年第4期37卷 295-302页

作者：谢潮添杨延红朱学艺田惠桥细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院厦门361005

对一种由一对隐性基因控制的白菜细胞核雄性不育和可育株的花药进行了细胞学和组织化学研究。种子播种后,有1/4植株为不育株,其余的为可育株。通过对不育株和可育株花药发育的细胞学观察,确认不育花粉的败育发生在小孢子发育时期。用组... 详细信息

对一种由一对隐性基因控制的白菜细胞核雄性不育和可育株的花药进行了细胞学和组织化学研究。种子播种后,有1/4植株为不育株,其余的为可育株。通过对不育株和可育株花药发育的细胞学观察,确认不育花粉的败育发生在小孢子发育时期。用组织化学的方法研究了可育株和不育株花药发育过程中的多糖和脂类的分布动态,发现在减数分裂前,可育花药和不育花药的药隔细胞中都储藏了大量的淀粉粒。二者的差异仅是不育花药的绒毡层细胞液泡化明显。在减数分裂后的小孢子发育时期,可育花药的绒毡层细胞具有将药隔细胞中的淀粉粒多糖吸收并转化成脂类的功能,小孢子及以后的二胞花粉中也积累了大量的脂类储藏物质在不育花药中,虽然减数分裂后药隔细胞中的淀粉粒也都消失,但绒毡层细胞中的脂类物质相比很少,同时绒毡层细胞显示了明显的多糖反应,表明不育花药的绒毡层细胞将糖类转化为脂类的功能受阻。在小孢子的表面有些脂类物质,但在细胞质中却没有脂类积累。这一结果暗示在该种白菜细胞核雄性不育株中,由于花药绒毡层细胞转换多糖为脂类的功能失常,导致了小孢子的败育。

关键词：白菜核雄性不育小孢子发生细胞化学高等植物

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在镉盐胁迫下扇贝鳃组织应激蛋白的研究

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高等学校化学学报 2010年第3期31卷 507-513页

作者：方财王黄清育凌雪萍柯才焕黄河清厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室厦门大学化学化工学院化学生物学系厦门361005

采用透射电子显微镜观察了虾夷盘扇贝(Patinopecten yessoensis)鳃组织细胞的超微结构,发现镉盐能胁迫鳃组织中的腮丝、细胞核和线粒体产生病变.利用双向凝胶电泳(2D-PAGE)优化分离扇贝鳃组织的全蛋白,获得约800个蛋白质斑点,并筛选出3... 详细信息

采用透射电子显微镜观察了虾夷盘扇贝(Patinopecten yessoensis)鳃组织细胞的超微结构,发现镉盐能胁迫鳃组织中的腮丝、细胞核和线粒体产生病变.利用双向凝胶电泳(2D-PAGE)优化分离扇贝鳃组织的全蛋白,获得约800个蛋白质斑点,并筛选出37个由于镉盐胁迫而产生的差异蛋白质斑点.选用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱(MALD I-TOF MS)技术和数据库检索鉴定差异蛋白,结果发现7个与镉毒性密切相关的蛋白质,即热休克蛋白70和β-淀粉酶等上调蛋白质及原肌球蛋白、肌动蛋白和钙活化核苷酸酶1等下调蛋白质.此外,还发现转录调节子Crp/Fnr家族为低表达蛋白质,而ABC转运子为高表达蛋白质.在这些差异蛋白中,部分蛋白质适合作为连续监测流动海水中镉污染程度及评价其危害性的蛋白指示物.

关键词：蛋白质组学虾夷盘扇贝鳃镉胁迫应激蛋白

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视黄酸诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化过程中核基质蛋白组成的变化

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第10期24卷 957-967页

作者：梁盈张秀艳李祺福石松林赵振利陈晋安教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室厦门大学生命科学学院厦门361005

在鉴定视黄酸(retinoic acid,RA)诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化的基础上,应用免疫细胞化学、选择性抽提和蛋白质组学分析技术,对SK-N-SH细胞诱导分化过程中核基质蛋白组成变化进行了系统研究.实验结果显示,经1μmol/L RA处理后SK-N... 详细信息

在鉴定视黄酸(retinoic acid,RA)诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化的基础上,应用免疫细胞化学、选择性抽提和蛋白质组学分析技术,对SK-N-SH细胞诱导分化过程中核基质蛋白组成变化进行了系统研究.实验结果显示,经1μmol/L RA处理后SK-N-SH细胞呈极性状,伸出较长的轴突样突起,胞体逐渐变小变圆.免疫细胞化学结果显示,处理后神经细胞特异表达的蛋白synaptophysin、NSE、MAP2的表达量都较对照组有明显增强.双向凝胶电泳分析显示,在RA诱导SK-N-SH细胞分化前后存在52个差异表达的核基质蛋白,经质谱分析,鉴定了其中的41个蛋白.蛋白印迹杂交进一步确证了诱导分化差异表达核基质蛋白中nucleophosmin和prohibitin等的表达变化.研究结果表明,1μmol/LRA对SK-N-SH细胞具有显著的诱导分化作用,在SK-N-SH细胞分化过程中,其核基质蛋白组成发生了明显变化.这些变化对于揭示人神经母细胞瘤细胞癌变与逆转机制和肿瘤细胞增殖与分化调控机理均有十分重要的意义,从而为研究神经系统正常发育过程及神经系统疾病的发病机理提供科学依据.

关键词：核基质蛋白诱导分化人神经母细胞瘤视黄酸

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视黄素受体介导的视黄素(retinoids)抗癌作用

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厦门大学学报(自然科学版) 2001年第2期40卷 611-619页

作者：吴乔陈正明刘苏苏文金厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室

对近年来视黄素受体介导视黄素抗癌作用机理的研究进展作一综述，主要有：1)视黄素受体；2)视黄素受体与细胞生长；3)视黄素受体与孤生受体的相关性；4)视黄素受体对AP-1活性的抑制作用；5)视黄素受体介导的信号转导途径．通过研究，对... 详细信息

对近年来视黄素受体介导视黄素抗癌作用机理的研究进展作一综述，主要有：1)视黄素受体；2)视黄素受体与细胞生长；3)视黄素受体与孤生受体的相关性；4)视黄素受体对AP-1活性的抑制作用；5)视黄素受体介导的信号转导途径．通过研究，对于探讨视黄素受体的功能、阐明视黄素的抗癌机理、合成更多的受体选择性视黄素具有重要的现实意义．

关键词：视黄素受体细胞生长孤生受体 AP-1活性信号转导

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