检索结果-内蒙古大学图书馆

分子细胞生物学报 2006年第2期39卷 169-176页

作者：赵春红李祺福李智星陈晋安厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室厦门大学生命科学学院分析测试中心厦门361005

HMBA诱导处理人成骨肉瘤MG-63细胞分化后,选择性抽提核基质蛋白,经双向凝胶电泳技术分析．共有12个蛋白点表达发生变化,经肽指纹图谱分析鉴定了9个蛋白质,其中,MHCⅡ类抗原、IFN刺激的基因因子3α蛋白、DKFZp434M2221．1蛋白、8-羟基-... 详细信息

HMBA诱导处理人成骨肉瘤MG-63细胞分化后,选择性抽提核基质蛋白,经双向凝胶电泳技术分析．共有12个蛋白点表达发生变化,经肽指纹图谱分析鉴定了9个蛋白质,其中,MHCⅡ类抗原、IFN刺激的基因因子3α蛋白、DKFZp434M2221．1蛋白、8-羟基-鸟嘌呤糖基化酶同功酶oggl和波形蛋白表达上调,hnRNP A2/B1和肌动蛋白表达下调,60S核糖体蛋白L21和ST2蛋白仅在分化的MG-63细胞中表达。研究结果表明肿瘤细胞增殖分化过程中伴随核基质蛋白表达的变化,并为深入揭示核基质蛋白与细胞癌变和逆转的关系以及阐明细胞增殖分化的基因表达调控原理提供了依据。

关键词：核基质蛋白细胞分化人成骨肉瘤细胞 HMBA

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优化分离与鉴定蓝斑背肛海兔口腔神经节蛋白质组

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高等学校化学学报 2006年第7期27卷 1257-1261页

作者：陈东仕黄河清吴韩志蔡宗苇厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 厦门大学固体表面物理化学国家重点实验室

采用双向凝胶电泳技术优化分离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)蛋白质组,并获得约300个蛋白质斑点.用组合基质辅助激光解吸电离化飞行时间(MALD I-TOF)质谱技术和胶内酶解技术测... 详细信息

采用双向凝胶电泳技术优化分离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)蛋白质组,并获得约300个蛋白质斑点.用组合基质辅助激光解吸电离化飞行时间(MALD I-TOF)质谱技术和胶内酶解技术测定BG蛋白质组中的96个蛋白质斑点的肽指纹(Peptide m ass fin-gerprint,PMF)图谱.经数据库检索与比对后,发现96种蛋白质中仅有4种蛋白质可获得较高的匹配率,它们分别是微管蛋白(Tubu lin)、肌动蛋白(Actin)和两个1,5-二磷酸核酮糖-羧化酶/加氧酶(R ibu lose-1,5-b i-sphosphate carboxylase/oxygenase,R ibu lose),均属于神经细胞骨架蛋白质;同时还发现一种交配信号肽前体(Peptide m ating pheromone precursor).利用LOC trees软件和分类法对56种蛋白质进行亚细胞定位与分类.

关键词：海兔口腔神经节蛋白质组双向凝胶电泳质谱

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锯缘青蟹NAGase在DMSO溶液中的失活动力学

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台湾海峡 2006年第1期25卷 19-24页

作者：张继平陈清西细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院

以二甲亚砜(DMSO)为效应物,研究其对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.结果表明,酶的剩余活力随着DMSO浓度增高而迅速下降,当DMSO浓度达4.0 mol/dm3时,酶活力几乎完全丧失.该酶在低于2 mol/dm3的DM-SO溶液中的失... 详细信息

以二甲亚砜(DMSO)为效应物,研究其对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.结果表明,酶的剩余活力随着DMSO浓度增高而迅速下降,当DMSO浓度达4.0 mol/dm3时,酶活力几乎完全丧失.该酶在低于2 mol/dm3的DM-SO溶液中的失活作用表现为可逆过程.导致酶活力丧失50%的DMSO浓度(IC50)为0.75 mol/dm3.应用酶失活过程的底物反应动力学方法测定了游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)在不同浓度DMSO溶液中的微观失活速度常数k+0和k+′0,k+0明显大于k+′0,说明游离酶较酶-底物络合物对DMSO更为敏感,底物对酶被DMSO失活有保护作用.随着DMSO浓度增加,逆向微观复活速度常数k-0不断下降,这说明NAGase在高浓度DMSO中失活的可逆性减弱.

关键词：海洋生物 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶实验研究锯缘青蟹二甲亚砜失活动力学

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海洋真菌Diaporthe sp.产真菌环氧二烯发酵条件的优化

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微生物学通报 2006年第5期33卷 6-11页

作者：王若宇黄耀坚郑忠辉苏文金沈月毛细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院厦门361005

从海洋木栖真菌HLY-2分离得到的真菌环氧二烯(Mycoepoxydiene)是新发现的高抗肿瘤活性化合物。通过正交设计,改良普通半海水PD培养基的配方,比较固体和液体两种发酵方法,得到了使该化合物产量大幅提高的最佳培养条件:在固体发酵条件下土... 详细信息

从海洋木栖真菌HLY-2分离得到的真菌环氧二烯(Mycoepoxydiene)是新发现的高抗肿瘤活性化合物。通过正交设计,改良普通半海水PD培养基的配方,比较固体和液体两种发酵方法,得到了使该化合物产量大幅提高的最佳培养条件:在固体发酵条件下土豆250g/L,海水300mL/L,葡萄糖30g/L,乳糖50g/L,磷酸二氢钾0·65mmol/L,硫酸铵1g/L,产量高达543mg/L,比普通的PD培养基提高了43倍,也比液体发酵的最高产量提高了近15倍。同时还对固体发酵和液体发酵造成的产量差异进行了分析。并检验了发酵产物的抗肿瘤活性。

关键词：海洋真菌抗肿瘤化合物真菌环氧二烯发酵条件优化

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维甲酸诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中核基质构型及其蛋白质组成变化观察

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第B05期45卷 6-10页

作者：赵妍唐剑赵春红石松林李祺福厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析维甲酸诱导处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化,以及核基质蛋白表达变化.实验结果显示MG-63细胞核基质和中间纤维数量较少、分布不均匀,核... 详细信息

应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析维甲酸诱导处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化,以及核基质蛋白表达变化.实验结果显示MG-63细胞核基质和中间纤维数量较少、分布不均匀,核纤层为薄厚不一结构,与两类纤维联系不密切.经1μmol/L维甲酸处理后,细胞核基质纤维和中间纤维数量增多、结构层次丰富、单丝成分多,分布均匀并相互交织成规则网络,两类纤维通过薄层均一的核纤层发生密切联系,形成贯穿整个细胞核质区域的完整体系.此外,核基质蛋白表达也发生显著变化.表明经维甲酸诱导处理后MG-63的核基质-中间纤维系统产生了与正常细胞相似的恢复性改变,并且伴有核基质蛋白表达的差异.这些变化是癌细胞恶性表型逆转的重要特征和功能表现,对于揭示核基质构型及其蛋白组成与细胞癌变和逆转的关系和阐明细胞增殖分化的基因表达调控原理,均具有重要意义.

关键词：核基质-中间纤维核基质蛋白人成骨肉瘤细胞维甲酸

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丹参酮ⅡA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第B05期45卷 1-5页

作者：郑燕彬王国红洪琛梁盈李祺福厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

应用细胞培养、台盼蓝拒染计数、光学显微镜观察、流式细胞仪检测及免疫细胞化学等技术研究中药有效成分丹参酮ⅡA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制作用.实验结果显示,丹参酮ⅡA处理MG-63细胞后,细胞增殖活动受到抑制,抑制率为52.10%,细... 详细信息

应用细胞培养、台盼蓝拒染计数、光学显微镜观察、流式细胞仪检测及免疫细胞化学等技术研究中药有效成分丹参酮ⅡA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制作用.实验结果显示,丹参酮ⅡA处理MG-63细胞后,细胞增殖活动受到抑制,抑制率为52.10%,细胞倍增时间由对照组的48 h延长至65 h;细胞发生G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞比例由对照组的47.5%上升到59.5%,S期细胞比例则由对照组的20.0%下降至9.0%;并出现细胞形态规则、大小趋于一致、细胞体积增大、核质比例减小等变化;MG-63细胞增殖分化调控相关的癌基因c-fos和c-myc表达活性降低.结果表明,丹参酮ⅡA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖有显著抑制作用,其作用可能与干预c-fos和c-myc等癌基因表达从而调控细胞周期有关.

关键词：人成骨肉瘤细胞抑制作用丹参酮ⅡA

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金属离子对锯缘青蟹NAGase活力的影响

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台湾海峡 2006年第3期25卷 343-347页

作者：杨学敏谢进金张继平林建成陈清西厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院

本文研究了几种金属离子对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.其结果表明:Li+、Na+和K+对酶活力没有明显影响,Mg2+、Ca2+和Ba2+对该酶均有激活作用,激活程度依次为Ca2+>Ba2+>Mg2+.A l3+、Fe3... 详细信息

本文研究了几种金属离子对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.其结果表明:Li+、Na+和K+对酶活力没有明显影响,Mg2+、Ca2+和Ba2+对该酶均有激活作用,激活程度依次为Ca2+>Ba2+>Mg2+.A l3+、Fe3+、Cd2+、Pb2+和Hg2+对该酶具有一定的抑制作用,2.0μmol/dm3的Hg2+可以使酶活力完全丧失.Co2+对酶的效应是先激活后抑制,Mn2+对酶仅有轻微的激活作用.Cd2+和Fe3+对锯缘青蟹NAGase的抑制作用都呈竞争性-反竞争性混合Ⅱ型效应,Cd2+的抑制常数KI和KIS分别为23.9、5.0 mmol/dm3,Fe3+的抑制常数KI和KIS分别为395.5、135.6μmol/***>KIS,说明酶-底物络合物(ES)与抑制剂的亲和力比游离酶(E)与抑制剂的亲和力大.

关键词：海洋生物 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶锯缘青蟹酶活力金属离子抑制机理

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酪氨酸酶的研究进展

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第5期45卷 731-737页

作者：陈清西宋康康厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1)是一种含铜的氧化还原酶,它广泛存在于动植物和微生物中,与生物体合成色素直接相关.在人体中,它与色素障碍性疾病及恶性黑色素肿瘤的发生与治疗有关.因此对编码酪氨酸酶基因的结构、表达及其调控,以及酪氨酸酶的... 详细信息

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1)是一种含铜的氧化还原酶,它广泛存在于动植物和微生物中,与生物体合成色素直接相关.在人体中,它与色素障碍性疾病及恶性黑色素肿瘤的发生与治疗有关.因此对编码酪氨酸酶基因的结构、表达及其调控,以及酪氨酸酶的抑制剂和激活剂的研究,引起国内外的广泛重视.目前,对酪氨酸酶活性中心及其催化功能的研究比较透彻,但对酪氨酸酶蛋白的立体结构尚不清楚.

关键词：酪氨酸酶黑色素色素障碍性疾病基因活性中心

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霍乱弧菌CTB基因的克隆、表达及重组蛋白活性分析

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中国生物工程杂志 2006年第10期26卷 13-17页

作者：张国广曾雅明李东霄张红心陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

霍乱弧菌CTB蛋白具有免疫佐剂活性。根据已发表CTB基因的序列设计一对引物，从一株霍乱弧菌中扩增出CTB基因，测序后发现该基因全长375bp，与国内分离的六株CTB基因的同源性达96．0％-99．2％。将该基因与pTWIN1连接构建了原核表达载体p... 详细信息

霍乱弧菌CTB蛋白具有免疫佐剂活性。根据已发表CTB基因的序列设计一对引物，从一株霍乱弧菌中扩增出CTB基因，测序后发现该基因全长375bp，与国内分离的六株CTB基因的同源性达96．0％-99．2％。将该基因与pTWIN1连接构建了原核表达载体pTWIN1-CTB，重组表达载体转化BL21（DE3）表达菌株，0．8mmol／LIPTG诱导4h后，收获的细菌总蛋白SDS—PAGE电泳显示CTB在原核表达系统中得到表达，融合蛋白大小与理论值符合，蛋白产量占细菌总蛋白的20％左右，主要以包涵体形式存在，Western杂交和GM1-ELISA结果表明重组蛋白具有免疫原性和粘膜佐剂活性。

关键词：霍乱弧菌CTB基因原核表达粘膜佐剂活性

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从深海沉积物中筛选具有抗菌、抗肿瘤活性的海洋真菌

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第3期45卷 419-423页

作者：熊枫郑忠辉黄耀坚宋思扬徐庆妍苏文金厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

从西太平洋近赤道区采集到的18个深海沉积物样品中分离到83株海洋真菌,采用滤纸片琼脂扩散法和MTT法分别对其发酵液乙酸乙酯抽提物的抗菌、抗肿瘤活性进行筛选.结果显示,有37株菌株对至少一种指示菌有抑制作用;有29株菌株对KB或Raji肿... 详细信息

从西太平洋近赤道区采集到的18个深海沉积物样品中分离到83株海洋真菌,采用滤纸片琼脂扩散法和MTT法分别对其发酵液乙酸乙酯抽提物的抗菌、抗肿瘤活性进行筛选.结果显示,有37株菌株对至少一种指示菌有抑制作用;有29株菌株对KB或Raji肿瘤细胞具有显著的抑制活性,分别占总供测菌株的44.6%和34.9%.在抗肿瘤活性菌株中,WP-M-1、DY-G-2、DY-C-2、WP-K-3和WP-Q-2等5株菌具有很高的活性,其发酵液乙酸乙酯抽提物对Raji细胞的IC50分别为5.000、1.064、2.796、1.920、0.520μg/mL.研究结果表明,海洋沉积物来源的真菌中蕴藏着丰富的抗菌及抗肿瘤活性代谢产物产生菌,是开发抗菌和抗肿瘤药物的宝贵资源.

关键词：海洋沉积物海洋真菌抗菌活性抗肿瘤活性

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