检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2010年第4期26卷 772-777页

作者：张国广李东霄张辉煌董美陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 漳州师范学院生物系福建漳州363000 河南科技学院生物科学院河南新乡453003

疫苗接种是控制禽流感发生的主要措施之一,利用病毒保守的M2蛋白开发具有交叉免疫保护力的基因工程亚单位疫苗。将M2蛋白的膜外区(M2e表位)与HBcAg采用重叠延伸PCR技术构建融合基因M2eHBc+,然后将融合基因进行原核表达并检测了表达产物... 详细信息

疫苗接种是控制禽流感发生的主要措施之一,利用病毒保守的M2蛋白开发具有交叉免疫保护力的基因工程亚单位疫苗。将M2蛋白的膜外区(M2e表位)与HBcAg采用重叠延伸PCR技术构建融合基因M2eHBc+,然后将融合基因进行原核表达并检测了表达产物的动物免疫效果。结果表明,融合基因M2eHBc+能在原核系统中高效表达,表达蛋白能够被M2抗体识别,具有良好的抗原性,纯化出的重组蛋白可以自主包装成病毒样颗粒结构,能诱导小鼠产生M2e特异性抗体。M2e表位在重组蛋白颗粒中得到有效展示,为开发具有交叉保护力的禽流感亚单位疫苗打下了基础。

关键词：禽流感病毒 M2e表位乙肝核心抗原基因免疫原性

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灰绿曲霉-葡萄糖苷酶的分离纯化及性质研究

灰绿曲霉-葡萄糖苷酶的分离纯化及性质研究

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中国生物化学与分子生物学会农业分会第二届全国代表大会暨第九次学术研讨会

作者：马素娟陶毅明许鑫琦龙闽南陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门 361005 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门 361005 厦门大学能源研究院厦门361005

灰绿曲霉(Aspergillus glaucus)XC9发酵液经离心、硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析、Phenyl Seplxarose Fast Flow疏水柱层析等步骤，分离得到电泳单一纯的-葡萄糖苷酶(BG)，比活力为9.7U／mg。SDS-PAGE测定表明该酶单亚基分子量... 详细信息

灰绿曲霉(Aspergillus glaucus)XC9发酵液经离心、硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析、Phenyl Seplxarose Fast Flow疏水柱层析等步骤，分离得到电泳单一纯的-葡萄糖苷酶(BG)，比活力为9.7U／mg。SDS-PAGE测定表明该酶单亚基分子量约为23.5 kDa，Sephadex G-100凝胶柱层析法测得全酶分子量约为92.5 kDa，说明该酶由4个亚基组成。该酶反应最适温度在60℃且在65℃以内有较好稳定性，最适反应pH值为3.6且在pH 2.2～7.5区间稳定。该酶水解水杨苷的Km为2.58 mmol／L。测定不同化合物对酶活力的影响，结果表明金属离子K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Ba2+对酶活力无影响;Mn2+、Fe2+可以促进酶活;Zn2+可轻微抑制酶的活性;Cu2+、pb2+、Cd2+可不同程度的抑制酶活;SDS和EDTA较大程度抑制酶的活性，而酶对脲有较大抗性。

关键词：灰绿曲霉-葡萄糖苷酶分离纯化酶学性质

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LTB融合禽流感病毒M2e基因在毕氏酵母中的表达

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云南民族大学学报（自然科学版） 2010年第3期19卷 193-197页

作者：张国广张辉煌董美陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 漳州师范学院生物系福建漳州363000

禽流感病毒一直是家禽和家畜健康养殖的巨大威胁,之前的研究表明,原核系统中表达的LTB和M2eHBc+融合基因的产物能有效诱导免疫动物对禽流感病毒M2e多肽产生特异性的粘膜免疫应答.酵母作为生物反应器应用于生物制品生产具有独特的优点.... 详细信息

禽流感病毒一直是家禽和家畜健康养殖的巨大威胁,之前的研究表明,原核系统中表达的LTB和M2eHBc+融合基因的产物能有效诱导免疫动物对禽流感病毒M2e多肽产生特异性的粘膜免疫应答.酵母作为生物反应器应用于生物制品生产具有独特的优点.本研究构建了pPIC9K-LBM2eHBc+酵母表达载体并对酵母GS115进行了遗传转化,甲醇诱导表达结果表明LBM2eHBc+融合基因在酵母细胞中得到表达,表达出的融合蛋白能够被M2抗体识别.

关键词：禽流感病毒 LTB M2e表位毕氏酵母表达

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LBM2eHBc+融合基因植物表达载体构建及对番茄的转化研究

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漳州师范学院学报（自然科学版） 2010年第1期23卷 96-100页

作者：张国广张辉煌董美陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 漳州师范学院生物科学与技术系福建漳州363000

禽流感病毒一直是家禽和家畜健康养殖的巨大威胁,甚至威胁着人类的健康,人们也一直在研究各种形式的疫苗来应对禽流感病毒的威胁.番茄作为生物反应器应用于动物疫苗生产具有独特的优点,本研究优化了番茄子叶的再生体系,同时构建了LBM2eH... 详细信息

禽流感病毒一直是家禽和家畜健康养殖的巨大威胁,甚至威胁着人类的健康,人们也一直在研究各种形式的疫苗来应对禽流感病毒的威胁.番茄作为生物反应器应用于动物疫苗生产具有独特的优点,本研究优化了番茄子叶的再生体系,同时构建了LBM2eHBc+融合基因的植物表达载体并对番茄进行了遗传转化.结果表明在玉米素(Zt)浓度为0.5 mg/L时番茄子叶外植体的芽再生率达到93.33%;测序结果证明植物表达载体pBI121-LBM2eHBc+构建成功;利用农杆菌介导的转化方法获得再生抗性苗34株,经PCR检测,阳性率为75.0%,本研究结果为进一步开发禽流感口服疫苗奠定了基础.

关键词：禽流感病毒 LTB M2eHBc+ 转基因番茄

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不同产地绞股蓝皂苷分析及其微生物转化研究

不同产地绞股蓝皂苷分析及其微生物转化研究

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中国生物化学与分子生物学会农业分会第二届全国代表大会暨第九次学术研讨会

作者：陈良华秦江明艳林童庆宣陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门 361005 厦门华侨亚热带植物引种园厦门市引种检疫和植物源产物重点实验室福建厦门 361002 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门 361005 厦门华侨亚热带植物引种园厦门市引种检疫和植物源产物重点实验室福建厦门 361002

绞股蓝皂甙是绞股蓝发挥其药效作用的主要物质基础。本文针对湖北、福建、广西、云南、浙江和陕西等6处产地的绞股蓝，比较分析绞股蓝总皂甙含量，利用HPLC分析绞股蓝所含的皂甙类型的差异，同时用微生物灰绿曲霉进行绞股蓝总皂苷转化... 详细信息

绞股蓝皂甙是绞股蓝发挥其药效作用的主要物质基础。本文针对湖北、福建、广西、云南、浙江和陕西等6处产地的绞股蓝，比较分析绞股蓝总皂甙含量，利用HPLC分析绞股蓝所含的皂甙类型的差异，同时用微生物灰绿曲霉进行绞股蓝总皂苷转化研究。结果表明：6种产地湖北、福建、广西、云南、浙江和陕西的绞股蓝总皂甙含量依次为10.94％、7.29％、10.79％、6.12％、8.52％、4.95％，绞股蓝总皂苷含量最高为湖北房县，其次为广西大瑶山，而不同产地绞股蓝所含皂苷类型也有很大差异，利用微生物对福建绞股蓝进行转化产生系列新的皂苷类型。

关键词：绞股蓝皂苷微生物转化灰绿曲霉

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人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析

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生物工程学报 2009年第7期25卷 1082-1087页

作者：谢明辉李少伟沈文通李仲艺庄玉娣莫小兵顾颖吴婷张军夏宁邵厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361005

利用大肠杆菌表达系统可溶性表达人乳头瘤病毒18型(HPV18)L1蛋白,经过纯化和重组装过程获得HPV18病毒样颗粒(VLPs),研究其免疫原性和诱发中和抗体生成的水平。首先,提取HPV18的基因组DNA,通过PCR扩增获得HPV18 L1基因片段,将其插入pTrx... 详细信息

利用大肠杆菌表达系统可溶性表达人乳头瘤病毒18型(HPV18)L1蛋白,经过纯化和重组装过程获得HPV18病毒样颗粒(VLPs),研究其免疫原性和诱发中和抗体生成的水平。首先,提取HPV18的基因组DNA,通过PCR扩增获得HPV18 L1基因片段,将其插入pTrxFus表达载体,在大肠杆菌中可溶性表达HPV18 L1蛋白;其次,通过硫酸铵沉淀、离子交换层析和疏水相互作用层析获得高纯度的HPV18 L1蛋白,而后透析去除预先加入的还原剂DTT,使HPV18 L1蛋白自发组装成VLPs;最后,通过动态光散射技术和透射电子显微镜鉴定HPV18 VLPs的大小和形态,利用假病毒细胞中和实验评价HPV18 VLPs在实验动物体内的免疫原性和中和抗体生成水平。结果表明,HPV18L1蛋白可以在大肠杆菌表达系统中以可溶形式表达,经过纯化的HPV18 L1蛋白可以自发组装成为半径约为29.34nm、与HPV病毒外观相似的VLP。该VLPs在小鼠体内的中和抗体半数有效剂量为0.006μg,在兔及山羊体内诱导中和抗体滴度高达107。总之,本研究利用原核表达系统可简便高效地获得具有高度免疫原性的HPV18 VLPs,为HPV18预防性疫苗的开发奠定了基础,具有重要的应用意义。

关键词：大肠杆菌表达系统人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒免疫原性中和抗体

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人参皂甙Rg1、肉桂酸与丹参酮ⅡA组合对体外人成骨肉瘤MG-63细胞形态结构和终末分化指标的影响

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解剖学报 2009年第1期40卷 13-19页

作者：李祺福王国红石松林马宗源林昌健荆光军厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 厦门大学化学化工学院固体表面物理化学国家重点实验室福建厦门361005

目的研究中药有效成分人参皂甙Rg1、肉桂酸和丹参酮ⅡA组合（RCT）对人成骨肉瘤MG-63细胞的形态与超微结构改变和终末分化的影响，鉴定其对人成骨肉瘤细胞终末分化的诱导作用。方法以中药有效成分组合（33mg／L人参皂甙Rg1＋2mmol／L肉... 详细信息

目的研究中药有效成分人参皂甙Rg1、肉桂酸和丹参酮ⅡA组合（RCT）对人成骨肉瘤MG-63细胞的形态与超微结构改变和终末分化的影响，鉴定其对人成骨肉瘤细胞终末分化的诱导作用。方法以中药有效成分组合（33mg／L人参皂甙Rg1＋2mmol／L肉桂酸＋0．3mg／L丹参酮ⅡA）处理MG-63细胞7d，对照组与处理组样本各3次重复，免疫细胞化学检测及光镜与电镜观察系统研究RCT组合对MG-63细胞的细胞生物学效应。环六亚甲基双乙酰胺（HMBA）处理MG-63细胞作为分化诱导效果的阳性对照。结果免疫细胞化学检测显示，成骨肉瘤细胞终末分化指标I型胶原、骨黏素、骨钙蛋白的表达呈强阳性，并观察到钙化糖原颗粒增多与典型骨结节的形成；光镜与电镜观察结果显示，处理后的MG-63细胞产生了细胞形态规则，大小-致，细胞铺展体积增大，核质比例减小，核内核仁数目减少，细胞器丰富发达等趋向正常细胞特征的显著改变。结论RCT组合能显著改变MG．63细胞形态与超微结构恶性特征，并促进终末分化标志物的表达，从而对人成骨肉瘤MG-63细胞的终末分化具有显著诱导作用。

关键词：人参皂甙Rg1 肉桂酸丹参酮ⅡA 人成骨肉瘤MG-63细胞免疫细胞化学电镜

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Nucleophosmin在人参皂甙Rg1组合诱导肿瘤细胞分化过程中的表达变化

Nucleophosmin在人参皂甙Rg1组合诱导肿瘤细胞分化过程中的表达变...

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肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会

作者：石松林李祺福刘庆榕唐剑梁盈宋建晔厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室

为阐明中药有效成分人参皂甙Rg1组合(简称RCT)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化的机制,本文以2-D PAGE、MS、Western和激光扫描共聚焦显微镜观察等方法,对nucleophosmin(NPM)在中药有效成分组合RCT诱导MG-63细胞分化前后核基质中的存在、分... 详细信息

为阐明中药有效成分人参皂甙Rg1组合(简称RCT)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化的机制,本文以2-D PAGE、MS、Western和激光扫描共聚焦显微镜观察等方法,对nucleophosmin(NPM)在中药有效成分组合RCT诱导MG-63细胞分化前后核基质中的存在、分布变化及其与相关基因产物的共定位关系进行了研究。实验结果证实了NPM存在于MG-63细胞核基质蛋白组分中,并在RCT处理后细胞核基质蛋白中表达下调。NPM在MG-63细胞中与c-fos、c-myc、RB、p53等基因产物具有共定位关系,并在RCT处理后其共定位区域发生了变化,提示其可能具有相互作用。NPM在RCT诱导人成骨肉瘤MG-63分化过程中的表达与分布变化及其与相关癌基因、抑癌基因的关系显然对MG-63细胞分化具有重要影响,这为深入揭示中药有效成分诱导肿瘤细胞分化的机制提供了重要科学依据和深入探索的新方向。

关键词： Nucleophosmin 核基质人成骨肉瘤细胞诱导分化

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Nuc I eophosm in在人参皂甙Rg1组合诱导肿瘤细胞分化过程中的表达变化

Nuc I eophosm in在人参皂甙Rg1组合诱导肿瘤细胞分化过程中的表...

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2009年肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会

作者：石松林李祺福刘庆榕唐剑梁盈宋建晔厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室，细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室，厦门 361005

为阐明中药有效成分人参皂甙Rg1组合(简称RCT)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化的机制，本文以2-D PAGE、MS、Western和激光扫描共聚焦显微镜观察等方法，对nucleophosmin(NPM)在中药有效成分组合RCT诱导MG-63细胞分化前后核基质中的存在、... 详细信息

为阐明中药有效成分人参皂甙Rg1组合(简称RCT)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化的机制，本文以2-D PAGE、MS、Western和激光扫描共聚焦显微镜观察等方法，对nucleophosmin(NPM)在中药有效成分组合RCT诱导MG-63细胞分化前后核基质中的存在、分布变化及其与相关基因产物的共定位关系进行了研究。实验结果证实了NPM存在于MG-63细胞核基质蛋白组分中，并在RCT处理后细胞核基质蛋白中表达下调。NPM在MG-63细胞中与c-fos、c-myc、RB、p53等基因产物具有共定位关系，并在RCT处理后其共定位区域发生了变化，提示其可能具有相互作用。NPM住RCT诱导人成骨肉瘤MG-63分化过程中的表达与分布变化及其与相关癌基因、抑癌基因的关系显然对MG-63细胞分化具有重要影响，这为深入揭示中约有效成分诱导肿瘤细胞分化的机制提供了重要科学依据和深入探索的新方向。

关键词：人参皂甙核基质人成骨肉瘤细胞诱导分化

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维甲酸对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞形态结构和分化标志物表达的影响

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现代生物医学进展 2009年第3期9卷 407-409,F0002页

作者：张秀艳梁盈李祺福赵振利荆光军厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

目的:观察维甲酸对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞形态与超微结构及其相关标志物表达的影响,以鉴定其对神经母细胞瘤细胞终末分化的诱导作用。方法:1μmol/L维甲酸处理SK-N-SH细胞,光镜、电镜和免疫细胞化学检测研究SK-N-SH细胞处理前后细... 详细信息

目的:观察维甲酸对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞形态与超微结构及其相关标志物表达的影响,以鉴定其对神经母细胞瘤细胞终末分化的诱导作用。方法:1μmol/L维甲酸处理SK-N-SH细胞,光镜、电镜和免疫细胞化学检测研究SK-N-SH细胞处理前后细胞形态、超微结构变化和神经元相关标志物的表达变化。结果:光镜与电镜观察结果显示,SK-N-SH细胞经1μmol/LRA处理后,细胞形态和超微结构产生了细胞呈极性状、伸出多个轴突树突状突起、细胞逐渐变小变圆并融合在一起形成类似神经节样结构、细胞表面微绒毛减少、核仁变少变小、常染色质增多、细胞器丰富发达等显著变化;免疫细胞化学检测显示经RA处理后SK-N-SH细胞NSE、MAP2、Synaptophysin的表达较对照组细胞明显加强。结论:维甲酸能改变SK-N-SH细胞形态和超微结构恶性表型特征,并促进与神经细胞相关的终末分化指标的表达,从而对人神经母细胞瘤细胞的终未分化具有显著的诱导作用。

关键词：维甲酸细胞分化神经母细胞瘤细胞细胞形态与超微结构终末分化指标

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