检索结果-内蒙古大学图书馆

厦门大学学报（自然科学版） 2005年第2期44卷 276-278页

作者：赵扬张娜李博文黄秋陈奕欣厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

分别从银口凹螺(Chlorostoma argyrostoma)、朝鲜花冠小月螺(Lunella coronata coreensis)及杂色鲍(Haliotis di versicolor)提取海藻解壁酶,利用3,5 二硝基水杨酸(DNS)法测定不同来源的海藻解壁酶中琼胶酶、木聚糖酶及纤维素酶的活力.... 详细信息

分别从银口凹螺(Chlorostoma argyrostoma)、朝鲜花冠小月螺(Lunella coronata coreensis)及杂色鲍(Haliotis di versicolor)提取海藻解壁酶,利用3,5 二硝基水杨酸(DNS)法测定不同来源的海藻解壁酶中琼胶酶、木聚糖酶及纤维素酶的活力.实验结果显示,银口凹螺与朝鲜花冠小月螺的3种解壁酶成分的比活力除前者的琼胶酶比活力大于后者的(p<0.05),两种螺的木聚糖酶和纤维素酶的比活力无显著差异(p>0.05),并且这两种螺的 3 种解壁酶成分的比活力都大于杂色鲍的解壁酶(p<0.05).实验结果表明,银口凹螺和朝鲜花冠小月螺较之杂色鲍更适合作为制备坛紫菜单细胞和原生质体的酶源生物.

关键词：海藻解壁酶银口凹螺朝鲜花冠小月螺杂色鲍紫菜 3,5-二硝基水杨酸

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角化细胞生长因子的获得及植物表达载体的构建

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厦门大学学报（自然科学版） 2004年第1期43卷 124-127页

作者：邵寒娟林涛苏勇波陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

从鼠肺中提取RNA,设计相应的引物,经RT PCR扩增出角化细胞生长因子cDNA序列;插入pMD18 T载体,经DNA测序证实为KGF基因.将KGF基因经酶切后连接于植物CaMV35S启动子和NOS终止子之间,单酶切插入pBI1301植物双元表达载体,转化大肠杆菌,阳性... 详细信息

从鼠肺中提取RNA,设计相应的引物,经RT PCR扩增出角化细胞生长因子cDNA序列;插入pMD18 T载体,经DNA测序证实为KGF基因.将KGF基因经酶切后连接于植物CaMV35S启动子和NOS终止子之间,单酶切插入pBI1301植物双元表达载体,转化大肠杆菌,阳性克隆提取质粒后转化农杆菌EHA105,实现KGF植物表达载体的构建,为KGF的进一步研究奠定基础.

关键词：角化细胞生长因子基因克隆植物表达载体 KGF基因有丝分裂剂

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僧帽牡蛎碱性磷酸酶功能基团的研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2004年第5期43卷 702-705页

作者：陈巧廖金花王勤陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

采用化学修饰法研究僧帽牡蛎碱性磷酸酶活性功能基团性质.酶经0.4mmol·L-1PCMB修饰30min后活力仍然保持不变,提示巯基与酶的活力无关;用二巯基苏糖醇(DTT)对酶进行修饰,当DTT浓度达到2.5mmol·L-1时,酶活力丧失98%,表明硫硫... 详细信息

采用化学修饰法研究僧帽牡蛎碱性磷酸酶活性功能基团性质.酶经0.4mmol·L-1PCMB修饰30min后活力仍然保持不变,提示巯基与酶的活力无关;用二巯基苏糖醇(DTT)对酶进行修饰,当DTT浓度达到2.5mmol·L-1时,酶活力丧失98%,表明硫硫键与酶活力有密切的关系;以N 溴代琥珀酰亚胺(NBS)修饰酶的色氨酸残基,酶的修饰失活呈一级反应,当NBS浓度达到0.65mmol·L-1时,酶活力丧失100%,并辅以紫外吸收光谱的变化分析,表明色氨酸残基是酶催化活力所必需的;醋酸酐、马来酸酐、甲醛等氨基试剂对酶的修饰作用显示氨基是酶的必需基团.

关键词：碱性磷酸酶活性牡蛎残基性功能巯基色氨酸酶活力浓度功能基团变化分析

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响应面法优化南强菌素发酵培养基

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厦门大学学报（自然科学版） 2009年第4期48卷 585-589页

作者：张伟黄耀坚郑忠辉宋思扬沈月毛厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

从海洋真菌Phomopsis sp.A123分离得到的南强菌素(Deacetylmycoepoxydiene)是2003年新发现的具有抗肿瘤活性化合物.采用单因素筛选方法,筛选得到影响该化合物产生的4个因素,分别为葡萄糖、维生素B1、马铃薯和甘露醇.在此基础上,采用响... 详细信息

从海洋真菌Phomopsis sp.A123分离得到的南强菌素(Deacetylmycoepoxydiene)是2003年新发现的具有抗肿瘤活性化合物.采用单因素筛选方法,筛选得到影响该化合物产生的4个因素,分别为葡萄糖、维生素B1、马铃薯和甘露醇.在此基础上,采用响应面法对4个因素最佳水平范围进行研究,利用Design-Expert软件进行2次回归分析,在培养基中葡萄糖、维生素B1、马铃薯和甘露醇的含量分别为87,0.005,170和14 g/L时,南强菌素的产量从35 mg/L提高到200 mg/L.

关键词：海洋真菌抗肿瘤化合物南强菌素响应面法

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锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶在甲醛溶液中的失活动力学研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第1期45卷 98-101页

作者：谢进金张继平王勤杨学敏林建成陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

研究甲醛对锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase EC 3.2.1.52)活力的影响,结果表明:随着甲醛浓度的增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的甲醛浓度(失活半衰期,IC50)为0.60 mol/L.酶在低浓度甲醛溶液中的失活过程显示为可逆失活.... 详细信息

研究甲醛对锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase EC 3.2.1.52)活力的影响,结果表明:随着甲醛浓度的增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的甲醛浓度(失活半衰期,IC50)为0.60 mol/L.酶在低浓度甲醛溶液中的失活过程显示为可逆失活.用底物反应动力学方法考察酶在甲醛溶液中的失活动力学,测定游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)在甲醛溶液中失活的微观速度常数,并比较游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的正向反应的微观失活速度常数k+0>k′+0,表明底物对酶被甲醛的失活作用有一定的保护作用.正向的失活速度常数k+0和k′+0随着甲醛浓度的增大而增大,而逆向的速度常数k-0随着甲醛浓度的增大而减小,表明随着甲醛浓度的增大,酶变性越来越快,而活力恢复越来越难.

关键词：锯缘青蟹 N-乙酰氨基葡萄糖苷酶甲醛失活动力学

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耐低温杜氏藻突变株的诱变和鉴定

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台湾海峡 2006年第4期25卷 498-502页

作者：周韬刘广发黄瑞芳陈昱厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

采用紫外线辐射的方法对巴氏杜氏藻(Dunaliella bardawil)进行诱变.经过低温(5±1℃)筛选,得到一耐低温的突变株,命名为Dunaliella bardawilvar.L-5 Zhou&Liu(简称L-5).研究表明,在5±1℃光照培养箱中光强1 100 lx培养57 d,... 详细信息

采用紫外线辐射的方法对巴氏杜氏藻(Dunaliella bardawil)进行诱变.经过低温(5±1℃)筛选,得到一耐低温的突变株,命名为Dunaliella bardawilvar.L-5 Zhou&Liu(简称L-5).研究表明,在5±1℃光照培养箱中光强1 100 lx培养57 d,L-5仍继续处于对数生长期,而对照组早已进入生长平衡期,此时L-5藻细胞密度为对照的2.59倍.蛋白质SDS-PAGE电泳表明,在大约36和158 kDa处L-5比对照各多出一条新的蛋白带,同时在大约27和29 kDa处L-5出现比对照高得多的两条蛋白表达带.RAPD分析表明两者的遗传相似系数为0.768.由此作者初步认为L-5确为一耐低温的杜氏藻突变株.

关键词：细胞生物学杜氏藻诱变耐低温遗传相似系数

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胸腺素α原基因的克隆及在大肠杆菌中的融合表达

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第5期45卷 722-725页

作者：李俊燕周克夫厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

胸腺素α原(ProTα)作为一种免疫增强剂,对各种免疫缺陷疾病、病毒感染以及肿瘤都具有一定的作用.此外ProTα可以作为核蛋白参与细胞增殖,在肿瘤的预测、诊断及治疗中有一定应用.根据人胸腺素α原已发表的核苷酸序列,设计了一对特异性引... 详细信息

胸腺素α原(ProTα)作为一种免疫增强剂,对各种免疫缺陷疾病、病毒感染以及肿瘤都具有一定的作用.此外ProTα可以作为核蛋白参与细胞增殖,在肿瘤的预测、诊断及治疗中有一定应用.根据人胸腺素α原已发表的核苷酸序列,设计了一对特异性引物(P1/P2),应用RT-PCR法从中国人外周血中克隆到ProTα基因,将扩增产物连接到pMD18-T载体中并转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组质粒进行序列测定;同时用EcoRI和BamHI双酶切PCR产物,将该基因片断插入经同样双酶切的质粒pGEX 6P-1中,转化大肠杆菌BL21中进行表达.结果表明,克隆到的ProTα基因与参考的氨基酸同源性为99.70%;原核表达产物经过SDS-PAGE电泳分析,融合蛋白分子量为37 ku,主要以可溶形式存在.

关键词：胸腺素α原克隆融合表达

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杂色鲍碱性磷酸酶在DMSO溶液中的活力与构象变化的研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2005年第6期44卷 836-838页

作者：陈巧洪燕飞廖金花陈清西细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院福建厦门361005

以二甲亚砜(DMSO)为效应物,研究其对杂色鲍碱性磷酸酶(ALP)活力的影响,结果表明:该酶的剩余活力随着DMSO浓度增大而迅速下降,当DMSO浓度达40%,酶活力几乎完全丧失.说明DMSO对杂色鲍ALP有明显的失活作用.导致酶活力丧失50%的DMSO浓度为1... 详细信息

以二甲亚砜(DMSO)为效应物,研究其对杂色鲍碱性磷酸酶(ALP)活力的影响,结果表明:该酶的剩余活力随着DMSO浓度增大而迅速下降,当DMSO浓度达40%,酶活力几乎完全丧失.说明DMSO对杂色鲍ALP有明显的失活作用.导致酶活力丧失50%的DMSO浓度为17%.在较低DMSO浓度(<20%)的失活是可逆的反应过程.动力学研究表明,该酶的失活过程属于混合型.进一步测定游离酶(E)和酶底物络合物(ES)与DMSO的结合常数(KI和KIS),结果表明KI

关键词：杂色鲍碱性磷酸酶失活作用构象 DMSO

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GFP-mut2植物表达载体的构建及在甜菊愈伤组织中的表达

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厦门大学学报（自然科学版） 2002年第5期41卷 546-550页

作者：熊玲媛陈亮沈明山黄胤怡陈睦传厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

构建了GFP mut2的植物表达载体 ,在农杆菌的介导下使GFP mut2基因整合到甜菊核基因组中并得到了表达 ,从而建立了以绿色荧光蛋白基因为报告基因的根癌农杆菌介导的甜菊转基因系统 .

关键词： GFP-mut2 植物表达载体甜菊愈伤组织绿色荧光蛋白基因遗传转化基因表达载体构建转基因系统

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E-cadherin前体蛋白抗体的制备与鉴定

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厦门大学学报（自然科学版） 2011年第1期50卷 97-100页

作者：王继峰叶志云林舒勇厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

E-cadherin是一种重要的肿瘤转移抑制因子,它的功能异常能够导致肿瘤细胞的转移.细胞内成熟的E-cadherin由其前体蛋白剪切而成,目前还没有针对该前体蛋白的特异性抗体.为了得到能用于检测内源性E-cadherin前体蛋白(E-cadherin pre)的抗... 详细信息

E-cadherin是一种重要的肿瘤转移抑制因子,它的功能异常能够导致肿瘤细胞的转移.细胞内成熟的E-cadherin由其前体蛋白剪切而成,目前还没有针对该前体蛋白的特异性抗体.为了得到能用于检测内源性E-cadherin前体蛋白(E-cadherin pre)的抗体,对E-cadherin基因用限制性内切酶PstⅠ和PvuⅡ进行双酶切,获取E-cadherin基因的N-端片段,将其重组入原核表达载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达重组蛋白,经谷胱甘肽-琼脂糖珠子纯化后,得到较高纯度的E-cadherin前体抗原.用该抗原免疫新西兰兔,获得抗血清,进一步纯化血清得到抗E-cadherinpre的多克隆抗体.用Western blot检测了外源性和内源性E-cadherin pre,发现该抗体效价高且特异性强;免疫荧光实验表明该抗体可以用于细胞染色,为深入研究E-cadherin pre在细胞内的功能奠定了基础.

关键词： E-cadherin pre 抗体 pGST E-cadherin pre

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