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西北植物学报 2010年第9期30卷 1721-1727页

作者：郭迟鸣毛倩杨晓坡郭立佳王丽娟陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

为探索水稻PR10蛋白在水稻抗细菌性条斑病中的作用,构建了XIOsPR10基因的植物过量表达载体p1301-XIOsPR10及RNAi表达载体pDS1301-XIOsPR10,通过农杆菌介导分别转化水稻愈伤组织,获得了相应的再生植株。经GUS检测和PCR分析,证实XIOsPR10... 详细信息

为探索水稻PR10蛋白在水稻抗细菌性条斑病中的作用,构建了XIOsPR10基因的植物过量表达载体p1301-XIOsPR10及RNAi表达载体pDS1301-XIOsPR10,通过农杆菌介导分别转化水稻愈伤组织,获得了相应的再生植株。经GUS检测和PCR分析,证实XIOsPR10基因以及RNAi片段分别整合到水稻再生植株基因组中;半定量RT-PCR分析显示,过量表达植株中XIOsPR10基因的表达量高于对照,而RNAi转基因植株中XIO-sPR10基因的表达被抑制。

关键词： XIOsPR10 过量表达载体 RNAi表达载体水稻

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酪氨酸酶抑制剂的研究进展

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厦门大学学报（自然科学版） 2007年第2期46卷 274-282页

作者：陈清西林建峰宋康康厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1,PPO),是一种含铜糖蛋白,广泛存在于自然界中.它是生物体合成黑色素的关键酶,而且与果蔬褐化、昆虫表皮鞣化、人的色素障碍性疾病及恶性黑色素肿瘤的发生与治疗有重要关系.目前,酪氨酸酶抑制剂已被用于果蔬保鲜、... 详细信息

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1,PPO),是一种含铜糖蛋白,广泛存在于自然界中.它是生物体合成黑色素的关键酶,而且与果蔬褐化、昆虫表皮鞣化、人的色素障碍性疾病及恶性黑色素肿瘤的发生与治疗有重要关系.目前,酪氨酸酶抑制剂已被用于果蔬保鲜、化妆品中的增白剂、生物农药的杀虫剂添加物.对酪氨酸酶抑制剂的研究已引起国内外的广泛重视,现已研究出许多具有新型结构的酪氨酸酶抑制剂.为了得到高效的酪氨酸酶抑制剂,对各种类型的化合物构效关系及抑制机理的研究是非常必要的.

关键词：酪氨酸酶抑制剂构效关系抑制机理应用

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NF-κB家族特征及其调控途径和生物学功能

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细胞生物学杂志 2002年第2期24卷 83-86页

作者：刘苏吴乔厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

NF-kB(nuclear factor-kB)广泛存在于机体细胞中,与细胞对外界刺激的应答、细胞生长、分化、发育、凋亡、粘附及炎症反应密切相关,是一类重要的转录调节因子.本文结合近年来的研究进展,对NF-rkB家族成员、NF-kB活化及调控途径,以及NF-k... 详细信息

NF-kB(nuclear factor-kB)广泛存在于机体细胞中,与细胞对外界刺激的应答、细胞生长、分化、发育、凋亡、粘附及炎症反应密切相关,是一类重要的转录调节因子.本文结合近年来的研究进展,对NF-rkB家族成员、NF-kB活化及调控途径,以及NF-kB生物学功能作一综述.

关键词：转录 NF-κB家族调控途径生物学功能

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利用P因子不精确剪切获得Tis11基因敲除果蝇

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厦门大学学报（自然科学版） 2007年第6期46卷 857-862页

作者：谢昌传汪雪坤李立胜田丽丽吴秀榕洪丽欣周化民厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

Tis11是哺乳动物基因TTP在果蝇中的同源物,其基因位于果蝇X染色体11B9区.它含有两个保守的顺式Cys-X8-Cys-X5-Cys-X3-His(CCCH)锌指结构.它与mRNA的稳定性有关.为了进一步从动物水平研究Tis11的生物学功能,作者利用P因子不精确剪切的特... 详细信息

Tis11是哺乳动物基因TTP在果蝇中的同源物,其基因位于果蝇X染色体11B9区.它含有两个保守的顺式Cys-X8-Cys-X5-Cys-X3-His(CCCH)锌指结构.它与mRNA的稳定性有关.为了进一步从动物水平研究Tis11的生物学功能,作者利用P因子不精确剪切的特性来获得Tis11基因敲除果蝇.以P因子插入果蝇19949为起始材料,经过一系列杂交后,挑取了700株P因子被切除的果蝇.通过PCR筛选和鉴定,从这700株果蝇中获得一株果蝇279,它的Tis11基因的第2个外显子中包括翻译起始位点的区域被删除.

关键词：果蝇 P因子不精确剪切 Tis11

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蓝藻Synechococcus *** 7942穿梭表达质粒的构建及胸腺素α_1基因的表达

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实验生物学报 2003年第1期36卷 1-4页

作者：章军秦燕欧阳青徐虹周克夫刘仁海楼士林细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院厦门361005

利用本实验室构建的含蓝藻Plectonema boryanum内源小质粒的穿梭质粒pPRS-1,改建成含热诱导启动子、泛素融合的胸腺素α_1(UB-Tα_1)目的基因、卡那霉素抗性选择标记、rbcs终止子的新的穿梭表达重组质粒pPRFUT。将这种重组质粒转化蓝藻S... 详细信息

利用本实验室构建的含蓝藻Plectonema boryanum内源小质粒的穿梭质粒pPRS-1,改建成含热诱导启动子、泛素融合的胸腺素α_1(UB-Tα_1)目的基因、卡那霉素抗性选择标记、rbcs终止子的新的穿梭表达重组质粒pPRFUT。将这种重组质粒转化蓝藻Synechococcus ***7942,通过抗性筛选获得了具卡那霉素抗性的转化藻株。经Southern-blot杂交证实,穿梭表达质粒已转入蓝藻Synechococcus sp. PCC7942细胞中;在42℃热诱导30min后,目的基因UB-Tα_1得到较高水平表达,表达量约占总蛋白量的7.5%。

关键词：蓝藻穿梭质粒胸腺素α1 基因表达

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水稻XIOsPR10蛋白的原核表达及其RNase活性研究

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中国生物工程杂志 2010年第7期30卷 39-42页

作者：郭迟鸣毛倩王丽娟李东霄杨晓坡郭立佳汪卫李敏郝国静陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

PR10(病程相关蛋白10)类蛋白与植物的抵御外来病害及系统获得性抗性(SAR)有着紧密联系,而且许多PR10类蛋白都具有RNase活性,并通过这种活性抵抗外源病害。根据获得的XIOsPR10基因,将其构建到pET28a中,通过原核表达及磁珠纯化获得目的蛋... 详细信息

PR10(病程相关蛋白10)类蛋白与植物的抵御外来病害及系统获得性抗性(SAR)有着紧密联系,而且许多PR10类蛋白都具有RNase活性,并通过这种活性抵抗外源病害。根据获得的XIOsPR10基因,将其构建到pET28a中,通过原核表达及磁珠纯化获得目的蛋白,通过RNA消化实验证实XIOsPR10重组蛋白具有RNase活性,进一步揭示了XIOsPR10蛋白的功能。

关键词：防御 PR10类蛋白 RNase酶活性

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含口蹄疫病毒IRES RNA病毒样颗粒表达载体的构建

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中国生物工程杂志 2007年第9期27卷 31-35页

作者：窦敏张国广于广福张红心沈明山陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

利用PCR技术扩增大肠杆菌MS2噬菌体的外壳蛋白和成熟酶蛋白基因,将其克隆到pET32a中构建中间载体pET32a-CP。将口蹄疫病毒(FMDV)的内部核糖体结合位点(IRES)保守序列连接到中间载体噬菌体基因的下游,构建原核表达载体pCPES。将重组质粒p... 详细信息

利用PCR技术扩增大肠杆菌MS2噬菌体的外壳蛋白和成熟酶蛋白基因,将其克隆到pET32a中构建中间载体pET32a-CP。将口蹄疫病毒(FMDV)的内部核糖体结合位点(IRES)保守序列连接到中间载体噬菌体基因的下游,构建原核表达载体pCPES。将重组质粒pCPES转化宿主菌BL21(DE3),1 mmol/L IPTG诱导表达。蔗糖密度梯度离心纯化表达产物。透射电镜观察到直径大约26 nm的圆形病毒样颗粒。检测病毒样颗粒的稳定性并进行RT-PCR鉴定。结果表明该病毒样颗粒含口蹄疫病毒IRES RNA序列,并且稳定性良好,构建的病毒样颗粒可以作为RNA病毒检测时的标准品和质控品使用。

关键词： MS2噬菌体外壳蛋白 RNA病毒病毒样颗粒

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双链探针同步荧光技术快速筛查C282Y点突变

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遗传 2003年第1期25卷 9-13页

作者：张永有李庆阁栾国彦梁基选厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

以荧光染料Fam和Joe分别标记野生型和突变型双链探针作为均相检测探针,以构建的DNA模板作为研究模型,采用固定波长差同步荧光分析法对PCR反应产物进行终点检测。通过对HFE基因C282Y点突变的检测,并以限制性内切核酸酶RsaI证实,该方法是... 详细信息

以荧光染料Fam和Joe分别标记野生型和突变型双链探针作为均相检测探针,以构建的DNA模板作为研究模型,采用固定波长差同步荧光分析法对PCR反应产物进行终点检测。通过对HFE基因C282Y点突变的检测,并以限制性内切核酸酶RsaI证实,该方法是一种廉价、快速、可靠的筛查遗传性血色病基因C282Y突变的方法,该法可扩展到各种基因的突变检测。

关键词：双链探针同步荧光技术快速筛查 C282Y 点突变基因突变遗传性血色病

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p38 MAPK及其抑制剂在子宫内膜异位症中的作用

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药学学报 2010年第5期45卷 548-554页

作者：周卫东陈琼华陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 厦门大学附属厦门第一医院福建厦门361004

子宫内膜异位症(EMs)是与炎症有关的雌激素依赖性疾病。p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)受性激素、炎症因子等因素的激活,在细胞凋亡、增殖、炎症、应激等多种细胞反应中起着重要的作用,并直接参与子宫内膜异位症发生发展过程的调控。p3... 详细信息

子宫内膜异位症(EMs)是与炎症有关的雌激素依赖性疾病。p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)受性激素、炎症因子等因素的激活,在细胞凋亡、增殖、炎症、应激等多种细胞反应中起着重要的作用,并直接参与子宫内膜异位症发生发展过程的调控。p38MAPK信号转导通路在性激素和炎症之间的特殊调节作用,将有助于更好地理解子宫内膜异位症错综复杂的病理假说。p38MAPK抑制剂在子宫内膜异位症的研究中发挥重要作用,且前景广阔。在信号通路水平上阻断和调控p38MAPK的表达和活性,有望成为防治子宫内膜异位症的新策略。

关键词：子宫内膜异位症 p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂雌激素

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一个NBS-LRR蛋白质基因转化水稻及其超量表达

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厦门大学学报（自然科学版） 2010年第4期49卷 552-557页

作者：郭立佳毛倩汪卫李敏彭西英陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

水稻Osxoc1334是一个编码NBS-LRR类蛋白质的基因,通过构建该基因的超量表达载体,并在农杆菌EHA105介导下转化中花11号水稻,最终获得6株再生水稻植株.对抗性愈伤组织和再生植株用GUS组织化学染色检测,结果抗性愈伤组织和6株再生水稻植株... 详细信息

水稻Osxoc1334是一个编码NBS-LRR类蛋白质的基因,通过构建该基因的超量表达载体,并在农杆菌EHA105介导下转化中花11号水稻,最终获得6株再生水稻植株.对抗性愈伤组织和再生植株用GUS组织化学染色检测,结果抗性愈伤组织和6株再生水稻植株均可染上蓝色,而野生型植株不变色,用潮霉素磷酸转移酶基因的特异引物进行PCR鉴定,再生植株均可扩增到目标条带而野生型植株则不能,表明Osxoc1334基因已随T-DNA整合到再生水稻植株基因组中.采用半定量和荧光定量PCR分析转基因水稻的Osxoc1334基因表达,结果其中3株转基因植株的Osxoc1334基因平均相对表达量明显增强,其中1株为野生型植株的23.5倍.这为进一步鉴定该基因功能奠定了基础.

关键词：抗病基因细菌性条斑病菌转基因水稻基因表达荧光定量PCR

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