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2004年肝病实验室诊断与临床研究专题学术会议

作者：顾颖夏宁邵葛胜祥黄果勇李少伟朱子恒何志强陈毅歆王颖彬张军 361005 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室广西壮族自治区痰病控制中心

戊型肝炎(戊肝)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的一种胃肠道传播的急性肝炎。本研究从E2蛋白制备出的多株mAb中成功鉴定出两株中和mAb,分别识别HEV ORF2上的两个不同表位区域,从而首次证实HEV ORF2上至少存在2个不同的中和表位区域,并为HEV... 详细信息

戊型肝炎(戊肝)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的一种胃肠道传播的急性肝炎。本研究从E2蛋白制备出的多株mAb中成功鉴定出两株中和mAb,分别识别HEV ORF2上的两个不同表位区域,从而首次证实HEV ORF2上至少存在2个不同的中和表位区域,并为HEV疫苗、诊断、病毒感染机制等相关研究提供了重要的工具.

关键词：戊型肝炎病毒单克隆抗体病毒感染中和性

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戊型肝炎诊断中血清学检测和核酸检测的意义研究

戊型肝炎诊断中血清学检测和核酸检测的意义研究

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2004年肝病实验室诊断与临床研究专题学术会议

作者：张军夏宁邵葛胜祥黄果勇李少伟何志强王颖彬郑英杰顾颖吴文翰 361005 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室南宁广西状族自治区痰病控制中心

戊型肝炎病毒(HEV)是流行性和散发性急性病毒性肝炎的主要病原体之一.由于缺乏可靠的病毒组织培养方法,HEV感染的诊断主要依赖于病毒RNA和/或特异血清抗体的检出.利用HEV开放读码框架(ORF)2和3编码蛋白(前者为HEV衣壳蛋白,后者功能不明... 详细信息

戊型肝炎病毒(HEV)是流行性和散发性急性病毒性肝炎的主要病原体之一.由于缺乏可靠的病毒组织培养方法,HEV感染的诊断主要依赖于病毒RNA和/或特异血清抗体的检出.利用HEV开放读码框架(ORF)2和3编码蛋白(前者为HEV衣壳蛋白,后者功能不明)研制的合成肽或重组蛋白为抗原研制的商业化试剂已应用多年,但仍存在众多问题.这些试剂检出的抗-HEVIgG抗体应答多出现在疾病急性期后,而当疾病恢复后许多患者的抗体会明显减弱或者消失,但同时也有许多患者的抗体会持续多年,这就使得检测结果的临床意义描述十分困难.因此,可靠的戊肝IgM以及IgG诊断试剂的研制在戊肝发现近20年后仍是一个世界范围内急待解决的问题.本文即对戊型肝炎诊断中血清学检测和核酸检测的意义进行了研究。

关键词：戊型肝炎血清学检测核酸检测

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献血员戊型肝炎病毒亚临床感染情况调查

献血员戊型肝炎病毒亚临床感染情况调查

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2004年肝病实验室诊断与临床研究专题学术会议

作者：高东英彭耿朱家明孙丽郑英杰张军 100088 北京红十字血液中心北京万泰生物药业有限公司厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室

戊型肝炎(戊肝)是一种由戊型肝炎病毒(HEV)引起的主要经肠道传播的急性肝炎,临床表现类似甲型肝炎.戊肝主要以亚临床感染为主,急性戊肝在感染期间可出现病毒血症。为了解北京地区义务献血员中戊肝亚临床感染的情况,以及戊肝感染与献血... 详细信息

戊型肝炎(戊肝)是一种由戊型肝炎病毒(HEV)引起的主要经肠道传播的急性肝炎,临床表现类似甲型肝炎.戊肝主要以亚临床感染为主,急性戊肝在感染期间可出现病毒血症。为了解北京地区义务献血员中戊肝亚临床感染的情况,以及戊肝感染与献血员中原因不明转氨酶(ALT)异常之间的关系,以初步评估输血传播HEV的可能性,本研究对北京地区7113名义务献血员进行了HEV感染的血清流行病学调查.

关键词：戊型肝炎病毒亚临床感染血清流行病学

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大肠杆菌重组颗粒性戊型肝炎候选疫苗对恒河猴的免疫保护

大肠杆菌重组颗粒性戊型肝炎候选疫苗对恒河猴的免疫保护

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2004年肝病实验室诊断与临床研究专题学术会议

作者：张军夏宁邵李益民李少伟欧山海黄果勇何志强葛胜祥鲜阳凌逄淑强 361005 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 102200 北京万泰生物药业有限公司广西壮族自治区疾病控制中心

戊型肝炎(戊肝)是一种由戊型肝炎病毒(HEV)引起的、主要经胃肠道传播的急性肝炎,主要流行于亚洲、非洲和中美洲发展中国家,是一种世界性的危害严重的传染病。本文探讨了大肠杆菌重组颗粒性戊型肝炎候选疫苗对恒河猴的免疫保护。

关键词：戊型肝炎大肠杆菌重组颗粒性疫苗免疫保护

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苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)几丁质酶的性质研究

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)几丁质酶的性质研究

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第七届全国酶学学术讨论会

作者：黄小红陈清西王君沙莉黄志鹏关雄福建农林大学农药生物化学教育部重点实验室厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室福建农林大学农药生物化学教育部重点实验室福建农林大学农药生物化学教育部重点实验室福建农林大学农药生物化学教育部重点实验室

目的:从苏云金芽孢杆菌(Bt)中分离具有辅助杀虫作用的几丁质酶。通过对该酶性质的研究,阐明其酶学特征和某些效应物对酶活力的影响。材料与方法:以苏云金芽孢杆菌为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、DEAE-32离子交换柱层析初步纯化,获得比... 详细信息

目的:从苏云金芽孢杆菌(Bt)中分离具有辅助杀虫作用的几丁质酶。通过对该酶性质的研究,阐明其酶学特征和某些效应物对酶活力的影响。材料与方法:以苏云金芽孢杆菌为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、DEAE-32离子交换柱层析初步纯化,获得比活力为150.5 U·mg-1的几丁质酶(EC3.2.1.14)制剂。研究酶的部分性质以及金属离子和有机溶剂对酶促反应的影响。

关键词：苏云金芽孢杆菌几丁质酶性质金属离子有机溶剂

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应用噬菌体随机肽库技术筛选戊型肝炎病毒中和表位模拟肽

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生物工程学报 2003年第6期19卷 680-685页

作者：顾颖张军王颖彬李少伟杨海杰罗文新夏宁邵厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

以识别戊型肝炎病毒 (HEV)构象依赖性中和表位的单克隆抗体 8C11、8H3作为固相筛选分子 ,对噬菌体随机 7肽库进行 4轮筛选后 ,随机挑取单克隆噬菌体进行测序。合成优势 7肽序列基因 ,将其插入HBcAgAA78 83位置之中 ,进行原核表达 ,所获... 详细信息

以识别戊型肝炎病毒 (HEV)构象依赖性中和表位的单克隆抗体 8C11、8H3作为固相筛选分子 ,对噬菌体随机 7肽库进行 4轮筛选后 ,随机挑取单克隆噬菌体进行测序。合成优势 7肽序列基因 ,将其插入HBcAgAA78 83位置之中 ,进行原核表达 ,所获重组蛋白经蛋白印迹实验证实可与相应单抗结合 ,电镜下可见重组蛋白能形成与HBcAg相似的类病毒颗粒。化学合成单抗 8H3筛选出的优势 7肽 ,所获 7肽经生物传感器结合实验证实与单抗8H3结合。这些结果提示用噬菌体 7肽库可以筛选出部分模拟构象性表位的短肽 ,为亚单位疫苗的研制提供了新的思路。

关键词：戊型肝炎病毒中和表位噬菌体肽库表位模拟肽

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橙色荧光蛋白——绿色荧光蛋白GFPxm的改造

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生物工程学报 2003年第1期19卷 56-62,T001页

作者：罗文新陈敏程通管宝全李少伟李少菁张军夏宁邵厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

最近报道了从大型多管水母中分离出新的gfp基因。经大肠杆菌表达并纯化出的绿色荧光蛋白 (GFPxm)具有 4 76nm的激发峰和 4 96nm的发射峰 ,但是只能在低温下成熟的缺点限制了它的应用。这里进一步报道GFPxm的 12种突变型。在大肠杆菌中... 详细信息

最近报道了从大型多管水母中分离出新的gfp基因。经大肠杆菌表达并纯化出的绿色荧光蛋白 (GFPxm)具有 4 76nm的激发峰和 4 96nm的发射峰 ,但是只能在低温下成熟的缺点限制了它的应用。这里进一步报道GFPxm的 12种突变型。在大肠杆菌中的表达结果表明 ,有 7种突变型在 37℃条件下产生高的荧光强度。在 2 5、32和 37℃条件下表达 6h ,GFPxm16、GFPxm18和GFPxm19的相对荧光强度均高于增强型绿色荧光蛋白 (EGFP) ,而GFPxm16和GFPxm16 3在 4 2℃高温表达时仍能保持高的荧光强度。这 7种突变型中的 4种在哺乳动物细胞中已获得良好表达。此外 ,有 6种突变型的荧光光谱红移 ,目前所达到的最长激发峰为 5 14nm、最长发射峰为 5 2 5nm。另外有 3种突变型具有包括紫外在内的两个激发峰 ,1种突变型只有单一的紫外激发峰。首次报道具有橙色荧光的突变型OFPxm ,它的激发峰为 5 0 9nm、发射峰为 5 2 3nm。 5 2 3nm属于黄绿色 ,但肉眼看到的蛋白为橙色。OFPxm在高温下可得到高水平表达且很好地成熟 ,但是因为低的量子产率而荧光强度相对较低。

关键词：橙色荧光蛋白绿色荧光蛋白 GFPxm 改造基因标记突变型荧光光谱荧光强度

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BRCA1蛋白参与DNA双链损伤应答

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细胞生物学杂志 2003年第4期25卷 210-214页

作者：刘敏欧阳高亮鲍仕登厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室

BRCA1是乳腺癌易感基因,负责维持细胞基因组的稳定性,防止调控细胞增殖和肿瘤生长的基因突变的积累。BRCA1基因蛋白产物结构复杂,功能多样,是细胞内重要的孝功能蛋白,参与执行多种生理代谢过程。本文主要探讨了BRCA1蛋白应答DNA双链损... 详细信息

BRCA1是乳腺癌易感基因,负责维持细胞基因组的稳定性,防止调控细胞增殖和肿瘤生长的基因突变的积累。BRCA1基因蛋白产物结构复杂,功能多样,是细胞内重要的孝功能蛋白,参与执行多种生理代谢过程。本文主要探讨了BRCA1蛋白应答DNA双链损伤过程中所伴随的一系列信号传导的历程,阐述了连续的生理生化反应中BRCA1蛋白所发挥的作用。

关键词： BRCA1蛋白 DNA双链损伤乳腺癌细胞增殖肿瘤生长凋亡因子

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乙肝表面抗原S_2S基因在蓝藻Synechococcus sp. PCC7942中的表达研究

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高技术通讯 2003年第8期13卷 28-32页

作者：陈天圣章军徐虹周克夫刘仁海楼士林厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

用PCR法将乙肝表面抗原基因S2 S片段从乙肝病毒中扩增得到 ,将其插入到蓝藻热休克表达载体 pEUTMT1中 ,构建成表达重组质粒 pES2ST1。将蓝藻Synechococ cussp .PCC794 2的总染色体与质粒 pES2ST1同时进行EcoRI和SacI双酶切 ,再连接构建... 详细信息

用PCR法将乙肝表面抗原基因S2 S片段从乙肝病毒中扩增得到 ,将其插入到蓝藻热休克表达载体 pEUTMT1中 ,构建成表达重组质粒 pES2ST1。将蓝藻Synechococ cussp .PCC794 2的总染色体与质粒 pES2ST1同时进行EcoRI和SacI双酶切 ,再连接构建成为系列含有蓝藻染色体DNA同源片段的供体表达质粒。经转化筛选得到蓝藻Synechococcussp .PCC794 2转化藻株。PCR和Southern杂交证明目的基因已经整合到宿主的染色体中。转化藻通过热诱导后 ,Northern blot结果呈阳性 ,用化学发光检测技术可以检测到微量目的蛋白的表达 ,检测含量约为 0 .78～ 0 .6 4ng/ml,目的蛋白约为可溶性蛋白的 1.1× 10 - 6 ～ 1.5× 10 - 6 。

关键词：蓝藻 Synechococcus-sp.PCC7942 表达 PCR法乙肝表面抗原 S2S基因

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戊型肝炎是否为人兽共患病的讨论

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中国人兽共患病杂志 2003年第6期19卷 102-105页

作者：郑英杰张军夏宁邵厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)主要通过消化道传播,在发展中国家流行,发达国家少见,患者常有去过HE流行区的旅行史.

关键词：戊型肝炎人兽共患病病毒性肝炎基因分型动物

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