检索结果-内蒙古大学图书馆

厦门大学学报（自然科学版） 2003年第4期42卷 416-420页

作者：王颖彬葛胜祥林鉴程通李少伟何志强欧山海张军夏宁邵厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

用PCR方法,人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因,并构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40％以上,主要以可溶形式存在。用SARS患者急性期血清进行蛋白印迹检测,表明可... 详细信息

用PCR方法,人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因,并构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40％以上,主要以可溶形式存在。用SARS患者急性期血清进行蛋白印迹检测,表明可溶形式和包含体形式均有明显活性。包含体形式的重组蛋白经纯化后纯度可达90％以上,活性与纯化前相当,可作为SARS抗体诊断试剂盒的抗原原料。

关键词：传染性非典型肺炎病毒核蛋白基因表达活性检测原核表达载体 SARS-CoV

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一起戊型肝炎暴发的血清流行病学调查

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中华实验和临床病毒学杂志 2003年第4期17卷 361-364页

作者：谈春荣陈敏葛胜祥张军胡梅孙焕英陈岩彭耿沈巍张曼夏宁邵北京铁路总医院临床检验中心 100038 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室

目的了解一起戊型肝炎暴发的血清学特点。方法对某单位在10 d内先后发病的5例急性黄疸性肝炎患者、在该单位食堂就餐的1 675人(暴发人群)及未就餐的邻近单位883人(对照人群)的血清在首发病例26 d后进行抗-HEV IgM和IgG检测,数据进行... 详细信息

目的了解一起戊型肝炎暴发的血清学特点。方法对某单位在10 d内先后发病的5例急性黄疸性肝炎患者、在该单位食堂就餐的1 675人(暴发人群)及未就餐的邻近单位883人(对照人群)的血清在首发病例26 d后进行抗-HEV IgM和IgG检测,数据进行统计学分析。结果5例患者抗-HEV IgM和IgG均为阳性。暴发人群抗-HEV IgM和IgG的阳性率分别为8.7％和38.4％,而对照人群仅分别为0.1％和28.6％,差别均有非常显著意义。暴发人群145例抗-HEV IgM(+)中,ALT增高32例,明显高于IgM(-)及对照;而抗-HEV IgM(-)的ALT增高比例并不高于对照人群。4例患者系列血清检测见抗-HEV IgM逐渐下降,感染后4个月多数转阴,而IgG在感染后第2-3个月达高峰,随后缓慢下降。暴发人群中抗-HEV IgM(+)的IgG平均水平最高,IgM(-)而IgG(+)的IgC平均水平亦明显高于对照,提示暴发人群中既往感染者受到了免疫加强。暴发人群中抗-HEV IgM(+)者在性别及年龄组间差异无显著意义,但其中ALT增高男性的比例显著高于女性,而与年龄无关。结论本次急性黄疸性肝炎的暴发由戊型肝炎病毒引起,与食源有关;抗-HEV IgM和IgG不仅可用于临床病例诊断,也可用于人群调查;感染危险性与年龄及性别无关,但男性ALT增高更常见。

关键词：戊型肝炎血清流行病学肝炎病毒抗体诊断

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大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒ORF2多肽对恒河猴的免疫保护研究

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微生物学报 2003年第1期43卷 35-42页

作者：葛胜祥张军黄果勇逄淑强周开姣夏宁邵厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 广西壮族自治区卫生防疫站南宁430021

在大肠杆菌中表达的一段戊型肝炎病毒 (HEV)结构蛋白NE2 ,纯化后以弗氏佐剂 ,按0d ,1 0d ,30d的方案 1 0 μg 针的剂量免疫 3只恒河猴 ,在第 2周抗体阳转 ,第 6周时 1只滴度达 1∶1 0 0 0 0 0 ,另 2只滴度 1∶2 0 0 0 0 ,此时以 1 0 6PC... 详细信息

在大肠杆菌中表达的一段戊型肝炎病毒 (HEV)结构蛋白NE2 ,纯化后以弗氏佐剂 ,按0d ,1 0d ,30d的方案 1 0 μg 针的剂量免疫 3只恒河猴 ,在第 2周抗体阳转 ,第 6周时 1只滴度达 1∶1 0 0 0 0 0 ,另 2只滴度 1∶2 0 0 0 0 ,此时以 1 0 6PCR滴度的HEV病毒粪悬液攻击。对照组 3只均出现血清转氨酶 (ALT)升高 ,抗体阳转 ,粪便持续排毒 1月以上 ;疫苗组无一发病 ,未检出非疫苗来源的抗体 ,其中 1只始终未检出粪便排毒 ,另 2只仅出现短暂排毒。以一份NE2免疫后猴血清 (滴度 1∶2 0 0 0 0 )与 1 0 3PCR滴度的病毒混匀后感染 2只恒河猴 ,结果对照组 2只均持续排毒 3周以上 ,抗体阳转 ,1只ALT明显升高 ;而抗体中和组 2只猴始终未检出粪便排毒 ,抗NE2抗体缓慢下降 ,ALT正常。这些结果表明NE2具有良好的免疫原性和免疫保护性 ,有可能成为有效的戊肝疫苗。

关键词：大肠杆菌基因表达戊型肝炎病毒 ORF2多肽恒河猴免疫保护

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乙型肝炎病毒表面抗原基因在墨西哥酸浆中的表达及其免疫原性的初步研究

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病毒学报 2003年第1期19卷 31-35页

作者：高毅马英李梅程通李少伟张军夏宁邵1 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门华侨亚热带值物引种园

以墨西哥酸浆子叶作为外植体 ,与农杆菌EHA10 5 (含质粒 p130 1HBs)共培养 3天 ,通过延迟筛选的方法用潮霉素加压直接诱导成芽 ,抗性芽经诱导生根获得转化植株。经PCR、Southern点杂交等分子检测 ,证实目的基因已整合到墨西哥酸浆基因... 详细信息

以墨西哥酸浆子叶作为外植体 ,与农杆菌EHA10 5 (含质粒 p130 1HBs)共培养 3天 ,通过延迟筛选的方法用潮霉素加压直接诱导成芽 ,抗性芽经诱导生根获得转化植株。经PCR、Southern点杂交等分子检测 ,证实目的基因已整合到墨西哥酸浆基因组中。ELISA检测证实了在墨西哥酸浆中表达的HBsAg具有较好的活性。初步比较了目的基因在转化植株、不同器官的表达水平差异。取注射初免 1次但抗体水平明显下降的Babl/c小鼠 ,口服饲喂加强免疫 ,有明显的特异性抗体回升反应。表明转基因墨西哥酸浆疫苗作为口服加强免疫具有重要的理论和实用价值。

关键词：墨西哥酸浆遗传转化口服疫苗乙型肝炎病表表面抗原 HBsAg

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海洋生物抗肿瘤活性物质及其作用机理研究进展

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海洋科学 2003年第7期27卷 21-24页

作者：欧阳高亮李祺福田长海厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

海洋环境的独特性、海洋生物的多样性以及海洋生物活性物质结构的新颖性是海洋生物活性物质研究与开发的重要基础.

关键词：海洋生物抗肿瘤活性物质作用机理疗效

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抑制螺旋藻胞内核酸酶活性的研究

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海洋科学 2003年第1期27卷 34-37页

作者：柯珍恋徐虹章军厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。以供体质粒pEUTISI为酶消化底物 ,通过多种方法处理螺旋藻细胞 ,然后检测其胞内核酸酶粗提液对pEUTISI的降解作用 ,结果表明 ,2mmol/L以上的EDTA处理16h或无Mg2 +螺... 详细信息

螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。以供体质粒pEUTISI为酶消化底物 ,通过多种方法处理螺旋藻细胞 ,然后检测其胞内核酸酶粗提液对pEUTISI的降解作用 ,结果表明 ,2mmol/L以上的EDTA处理16h或无Mg2 +螺旋藻培养基培养72h以上 ,都可使处于对数生长期的螺旋藻胞内核酸酶活性显著降低 ;低于28℃(如24℃)培养也可降低螺旋藻的胞内核酸酶活性。根据实验结果 ,建议在螺旋藻转化前72h开始低温、无Mg2 +培养 ,转化前16h提高培养基中EDTA的浓度至2mmol/L,就能获得胞内核酸酶活性极低的受体藻 ,有利于外源基因的转化。

关键词：抑制螺旋藻胞内核酸酶活性低温培养 EDTA处理无Mg^2+培养基因转化

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离体受精作为技术平台在被子植物有性生殖研究中的应用

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热带亚热带植物学报 2003年第3期11卷 290-296页

作者：邱义兰郑茂钟田惠桥厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

被子植物的离体受精10a前在玉米中已获得成功,尽管目前只在玉米获得完全成功和小麦获得部分成功,但离体受精技术的研究成果非常显著。目前离体受精技术已被用于其他的研究,如用分离的精细胞和卵细胞筛选配子细胞的特异基因和蛋白质;研... 详细信息

被子植物的离体受精10a前在玉米中已获得成功,尽管目前只在玉米获得完全成功和小麦获得部分成功,但离体受精技术的研究成果非常显著。目前离体受精技术已被用于其他的研究,如用分离的精细胞和卵细胞筛选配子细胞的特异基因和蛋白质;研究合子细胞被激活的机理;用不同种植物的精、卵细胞体外融合进行新的远缘杂交尝试;利用合子细胞易分裂和胚胎发生特征探索用其作为转基因研究的受体细胞等。以离体受精技术为基础在高等植物发育生物学和生殖生物学领域的基础研究和应用探索显示了巨大潜力。介绍了离体受精技术在被子植物有性生殖的研究成果和应用前景,为研究和利用被子植物有性生殖过程中的生殖细胞特征提供线索。

关键词：被子植物有性生殖离体受精

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拟菱形藻软骨藻酸研究进展

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海洋科学 2003年第8期27卷 26-29页

作者：虞秋波高亚辉厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

1 危害事件的回顾至今,已发生了多起因海洋拟菱形藻( Pseudo- nitzschia spp.)赤潮产生软骨藻酸而引起的中毒事件.

关键词：拟菱形藻软骨藻酸赤潮中毒

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蓝藻Synechococcus *** 7942穿梭表达质粒的构建及胸腺素α_1基因的表达

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实验生物学报 2003年第1期36卷 1-4页

作者：章军秦燕欧阳青徐虹周克夫刘仁海楼士林细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院厦门361005

利用本实验室构建的含蓝藻Plectonema boryanum内源小质粒的穿梭质粒pPRS-1,改建成含热诱导启动子、泛素融合的胸腺素α_1(UB-Tα_1)目的基因、卡那霉素抗性选择标记、rbcs终止子的新的穿梭表达重组质粒pPRFUT。将这种重组质粒转化蓝藻S... 详细信息

利用本实验室构建的含蓝藻Plectonema boryanum内源小质粒的穿梭质粒pPRS-1,改建成含热诱导启动子、泛素融合的胸腺素α_1(UB-Tα_1)目的基因、卡那霉素抗性选择标记、rbcs终止子的新的穿梭表达重组质粒pPRFUT。将这种重组质粒转化蓝藻Synechococcus ***7942,通过抗性筛选获得了具卡那霉素抗性的转化藻株。经Southern-blot杂交证实,穿梭表达质粒已转入蓝藻Synechococcus sp. PCC7942细胞中;在42℃热诱导30min后,目的基因UB-Tα_1得到较高水平表达,表达量约占总蛋白量的7.5%。

关键词：蓝藻穿梭质粒胸腺素α1 基因表达

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双链探针同步荧光技术快速筛查C282Y点突变

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遗传 2003年第1期25卷 9-13页

作者：张永有李庆阁栾国彦梁基选厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

以荧光染料Fam和Joe分别标记野生型和突变型双链探针作为均相检测探针,以构建的DNA模板作为研究模型,采用固定波长差同步荧光分析法对PCR反应产物进行终点检测。通过对HFE基因C282Y点突变的检测,并以限制性内切核酸酶RsaI证实,该方法是... 详细信息

以荧光染料Fam和Joe分别标记野生型和突变型双链探针作为均相检测探针,以构建的DNA模板作为研究模型,采用固定波长差同步荧光分析法对PCR反应产物进行终点检测。通过对HFE基因C282Y点突变的检测,并以限制性内切核酸酶RsaI证实,该方法是一种廉价、快速、可靠的筛查遗传性血色病基因C282Y突变的方法,该法可扩展到各种基因的突变检测。

关键词：双链探针同步荧光技术快速筛查 C282Y 点突变基因突变遗传性血色病

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