目的探讨丹参素干预心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)大鼠的作用及其机制。方法采用左前降支动脉闭塞30 min后再灌注3 h构建MIRI大鼠模型。将60只大鼠随机分为假手术组、模型组及丹参素5、15、25 mg/kg组,每组12只。假手术组大鼠进行相同的手术操作,LAD穿线但不结扎。丹参素组在再灌注开始时ip丹参素5、15、25 mg/kg,每天1次,连续给药14 d。将另外60只大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参素(25 mg/kg)组、erastin组和丹参素+erastin组,每组12只。丹参素组大鼠在再灌注开始时ip丹参素25 mg/kg,erastin组在MIR手术前1 h ip erastin 10μmol/L,丹参素+erastin组大鼠在再灌注开始时ip丹参素25 mg/kg,在MIR手术前1 h ip erastin 10μmol/L,每天1次,连续给药14 d。采用试剂盒检测心肌组织中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽活性(GSH)和丙二醛(MDA)的活性,铁的含量,炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和胶原蛋白Ⅱ(CollagenⅡ)水平;通过心电图检测血流动力学参数左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室压力最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室压力最大下降速率(−dp/dtmax)水平;采用苏木精–伊红(HE)染色观察心肌病理变化,TUNEL染色观察心肌细胞情况,Masson染色观察心肌纤维化程度;蛋白免疫印迹法检测心肌损伤关键蛋白酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)和核Nrf2表达水平。结果与模型组相比,丹参素组SOD及GSH活性明显升高,MDA活性和铁含量明显降低(P<0.01);IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显降低(P<0.01);CK和LDH水平显著降低(P<0.01);α-SMA和CollagenⅡ水平显著降低(P<0.01);LVEDP水平显著降低,LVSP、+dp/dtmax和−dp/dtmax水平显著升高(P<0.01);丹参素可以有效改善细胞死亡状态,显著升高ACSL4、Nrf2、HO-1以及核Nrf2表达水平(P<0.01),显著降低GPX4表达水平(P<0.01)。结论丹参素通过Nrf2/HO-1通路抑制缺血/再灌注诱导的铁死亡从而减轻心肌损伤。
暂无评论