检索结果-内蒙古大学图书馆

HLB-1 functions as a new regulator for the organization and function of neuromuscular junctions in nematode Caenorhabditis elegans

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Neuroscience Bulletin 2009年第2期25卷 75-86页

作者：王大勇汪洋发育与疾病相关基因教育部重点实验室东南大学医学院遗传与发育系南京210009

Objective To study the role of HLB-1 in regulating the organization and function of neuromuscular junctions in nematode Caenorhabditis elegans. Methods To evaluate the functions of HLB-1 in regulating the organization and function of neuromuscular junctions, effects of hlb-1 mutation on the synaptic structures were revealed by uncovering the expression patterns of SNB-1 ：：GFP and UNC-49：GFP, and pharmacologic assays with aldicarb and levamisole were also used to test the synaptic functions. Further rescue and mosaic analysis confirmed HLB-1＇s role in regulating the organization and function of neuromuscular junctions. Results Loss of HLB-1 function did not result in defects in neuronal outgrowth or neuronal loss, but caused obvious defects of SNB-1：：GFP and UNC-49：：GFP puncta localization, suggesting the altered presynaptic and postsynaptic structures. The mutant animals exhibited severe defects in locomotion behaviors and altered responses to an inhibitor of acetylcholinesterase and a cholinergic agonist, indicating the altered presynaptic and postsynaptic functions. Rescue and mosaic analysis experiments suggested that HLB-1 regulated synaptic functions in a cell nonautonomously way. Moreover, HLB- 1 expression was not required for the presynaptic active zone morphology. Genetic evidence further demonstrated that hlb-1 acted in a parallel pathway with syd-2 to regulate the synaptic functions. Conclusion HLB-1 appeared as a new regulator for the organization and function of neuromuscular junctions in C. elegans.

关键词： HLB-1 synaptic function neuromuscular junction SYD-2 Caenorhabditis elegans

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UNC-64 and RIC-4,the plasma membrane-associated SNAREs syntaxin and SNAP-25,regulate fat storage in nematode Caenorhabditis elegans

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Neuroscience Bulletin 2010年第2期26卷 104-116页

作者：武秋立芮琪贺可文沈露露王大勇发育与疾病相关基因教育部重点实验室东南大学医学院遗传与发育系南京210009

Objective To investigate whether genes required for synaptogenesis and synaptic function are also involved in fat storage control in Caenorhabditis elegans. Methods Fat storage was examined in mutants of genes affecting the synaptogenesis and synaptic function. In addition, the genetic interactions of SNAREs syntaxin/unc-64 and SNAP-25/ric-4 with daf-2, daf-7, nhr-49, sbp-1 and mdt-15 in regulating fat storage were further investigated. The tissue-specific activities of unc-64 and ric-4 were investigated to study the roles of unc-64 and ric-4 in regulating fat storage in the nervous system and/or the intestine. Results Mutations of genes required for the formation of presynaptic neurotransmission site did not obviously influence fat storage. However, among the genes required for synaptic function, the plasma membrane-associated SNAREs syntaxin/unc-64 and SNAP-25/ric-4 genes were involved in the fat storage control. Fat storage in the intestinal cells was dramatically increased in unc-64 and ric-4 mutants as revealed by Sudan Black and Nile Red strainings, although the fat droplet size was not significantly changed. Moreover, in both the nervous system and the intestine, expression of unc-64 significantly inhibited the increase in fat storage observed in unc-64 mutant. And expression of ric-4 in the nervous system completely restored fat storage in ric-4 mutant. Genetic interaction assay further indicated that both unc-64 and ric-4 regulated fat storage independently of daf-2 [encoding an insulin-like growth factor-I （IGF-I） receptor], daf-7 [encoding a transforming growth factor-β （TGF-β） ligand], and nhr-49 （encoding a nuclear hormone receptor）. Besides, mutation of daf-16 did not obviously affect the phenotype of increased fat storage in unc-64 or ric-4 mutant. Furthermore, unc-64 and ric-4 regulated fat storage probably through the ARC105/mdt-15- and SREBP/sbp-1-mediated signaling pathways. In addition, fat storage in unc-64; ric-4 was higher than that in either

关键词： fat storage synaptic function UNC-64 RIC-4 Caenorhabditis elegans

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Regulation of aging by unc-13 and sbt-1 in Caenorhabditis elegans is temperature-dependent

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Neuroscience Bulletin 2009年第6期25卷 335-342页

作者：贺可文沈露露周文文王大勇发育与疾病相关基因教育部重点实验室东南大学医学院遗传与发育系南京210009

Objective To investigate the role of environmental factor—temperature in the regulation of aging process by unc-13 and sbt-1 in Caenorhabditis elegans. Methods The lifespan, the speed of pharynx pumping, and the intestinal autofluorescence of unc-13 and sbt-1 mutants were examined at different temperature conditions. In addition, to exclude the possible influences from other factors in unc-13 and sbt-1 mutants, the dauer formation, the thermotaxis, the brood size and the population percentage of the mutants expressing hsp16.2-gfp were further investigated. Results Mutations of unc-13 and sbt-1 significantly increased the mean and the maximum lifespans of nematodes cultured at 20 oC and 25 oC, while no noticeable increase was found at 15 oC in either the mean or the maximum lifespan. Investigations on the speed of pharynx pumping and the intestinal autofluorescence suggested that at 20 oC and 25 oC, mutations of unc-13 and sbt-1 could slow the aging process and delay the accumulation of aging-related cellular damage. Meanwhile, mutations of unc-13 or sbt-1 did not affect the dauer formation or the thermotaxis to different temperatures in nematodes. In contrast, at 20 oC and 25 oC conditions, mutations of unc-13 and sbt-1 significantly decreased the brood size and the percentage of nematodes expressing hsp16.2-gfp, while no such differences were detected at 15 oC. Moreover, the thermotolerance of unc-13 and sbt-1 mutants could be greatly strengthened after the 16-h heat shock at 35 oC. Conclusion The regulation of aging by unc-13 and sbt-1 is temperature-dependent. And the alterations in reproduction capability and stress response may be associated with the formation of this temperature-dependent property.

关键词： aging unc-13 sbt-1 temperature-dependent synaptic function C. elegans

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Genes required for the functions of olfactory AWA neuron regulate the longevity of Caenorhabditis elegans in an insulin/IGF signaling-dependent fashion

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Neuroscience Bulletin 2010年第2期26卷 91-103页

作者：沈露露杜敏林兴凤蔡婷王大勇教育部发育与疾病相关基因重点实验室东南大学医学院遗传与发育系南京210009

Objective To investigate the interaction between the genes required for the functions of AWA olfactory neuron and insulin/IGF signaling in regulating the longevity of nematode Caenorhabditis elegans （C. elegans）. Methods The mutants that had loss-of-function mutation of the genes required for AWA, AWC, ASE, and AFD sensory neurons were employed. Lifespan, the speed of pharynx pumping, the intestinal autofluorescence, the dauer formation, and the brood size were examined. Rescue experiments were performed to confrm the role of the genes required for the functions of AWA neuron in regulating lifespan. Moreover, genetic interactions between genes required for the functions of AWA neuron and insulin/ IGF signaling were investigated. Results Mutations of odr-7, odr-2, and odr-3 genes required for the functions of AWA neuron significantly increased the mean lifespan of nematodes and slowed the accumulation of intestinal autofluorescence. Besides, these mutations were closely associated with higher pumping rates during aging. However, mutation of odr-7, odr- 2, or odr-3 did not obviously affect the brood size or the dauer formation, and the regulation of longevity by odr-7, odr-2, and odr-3 was temperature-independent. In contrast, mutations of genes required for the functions of ASE, AWC, and AFD sensory neurons did not infuence the nematode lifespan. Moreover, expression of odr-7, odr-2 and odr-3 in AWA neuron could completely or largely restore the altered lifespan in odr-7, odr-2 and odr-3 mutants. Furthermore, genetic interaction assay demonstrated that the extended lifespan in odr-7 mutant could be suppressed by daf-16 mutation and enhanced by daf- 2 or age-1 mutation, whereas mev-1 and pha-4 were not required for the long lifespan of odr-7 mutant. Conclusion The genes required for the function of AWA sensory neuron could regulate the nematode longevity in an insulin/IGF signaling-dependent fashion in C. elegans.

关键词： longevity ODR-7 AWA olfactory neuron insulin/IGF signaling genetic interaction C. elegans

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秀丽线虫中铝暴露导致的多重毒害在世代间具有可转移特性

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中华预防医学杂志 2009年第1期43卷 45-51页

作者：王大勇杨羰超汪洋东南大学医学院遗传与发育系发育与疾病相关基因教育部重点实验室南京210009

目的研究铝暴露可能导致的多重毒性是否在世代间具有可传递特性。方法利用模式生物秀丽线虫对于铝（2．5、75、200μmol／L）暴露导致的寿命、发育、生殖、运动行为、行为可塑性等多种毒性及其在世代间的可传递性进行了研究。每个参数进... 详细信息

目的研究铝暴露可能导致的多重毒性是否在世代间具有可传递特性。方法利用模式生物秀丽线虫对于铝（2．5、75、200μmol／L）暴露导致的寿命、发育、生殖、运动行为、行为可塑性等多种毒性及其在世代间的可传递性进行了研究。每个参数进行4组平行试验分析，寿命、发育、生殖与运动行为的分析每组20条线虫，行为可塑性的分析每组100条线虫。实验结果都用SPSS13．0软件进行分析。结果数据显示，铝暴露能导致线虫出现多种表型和行为缺陷。与0μmol／L浓度处理[平均存活天数，24d；体长（1．30±0．05）mm；后代数目（278±20）个；世代时间（64．0±1．2）h；身体弯曲频率（45．8±3．0）次；头部摆动频率（109．33±7．30）次；行为可塑性（3±4）％]相比，低浓度铝（2．5Ixmol／L）暴露即可导致平均存活天数（20d）、体长[（1．12±0．02）mm；t=14．55，P〈0．01]、后代数目[（145±23）个；t=30．62，P〈0．01]、运动行为[身体弯曲频率（29．8±3．0）次；t：20．31，P〈0．01。头部摆动频率（95．8±6．2）次；t=16．43，P〈0．01]等严重缺陷，而高浓度的铝暴露还可以导致世代时间[75μmol／L，（67．0±1．7）h；t=8．92，P〈0．01。200μmol／L，（70．7±1．5）h；t=15．13，P〈0．01]与行为可塑性[75μmol／L，（16．5±3．0）％；t=27．11，P〈0．05。200μmol／L，（23．5±4．0）％；t=16．43，P〈0．01]等的严重缺陷。而且，大部分高浓度铝暴露导致的缺陷可以从暴露当代传递到后代，使后代仍然呈现出严重表型与行为缺陷。在这些后代中，各表型与行为缺陷只能得到有限的恢复（如体长、后代数目与运动行为），或没有明显的恢复（如高浓度铝暴露引起的寿命缺陷）。尤其是，铝引起的世代时间缺陷在子代中会变得更为严重。结论在秀丽线虫中，铝暴露导致的针对表型与行为的多重毒害在很大程度上可以从当代动物传递到后代个体中。

关键词：铝环境暴露毒性试验新小杆线虫漂亮

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黄色黏细菌转录因子FruA对自身基因的表达不具自调节作用

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中国生物化学与分子生物学报 2007年第3期23卷 205-211页

作者：郑颖毛晓华东南大学基础医学院发育与疾病相关基因教育部重点实验室南京210009

粘细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是粘细菌发育所必需的一种关键性转录因子,调节一系列发育相关基因的表达,本文研究FruA对自身基因是否存在反馈调节从而导致发育后期fruA表达水平的下调.以野生型粘细菌模式菌株DK162... 详细信息

粘细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是粘细菌发育所必需的一种关键性转录因子,调节一系列发育相关基因的表达,本文研究FruA对自身基因是否存在反馈调节从而导致发育后期fruA表达水平的下调.以野生型粘细菌模式菌株DK1622为基础构建fruA基因敲除突变株DK1622ΔfruA,再将fruA-lacZ转录融合载体pMF1A整合入fruA突变株染色体attB,获得重组菌株DK1622ΔfruA/pMF1A,通过检测β-半乳糖苷酶活性来确认FruA对自身基因的表达水平是否有影响.结果表明fruA调控序列完整的fruA-lacZ转录融合体β-半乳糖苷酶活性在DK1622/pMF1A和DK1622ΔfruA/pMF1A之间无明显差异,即fruA表达产物作为一种转录因子对自身基因的转录没有调节作用,黏细菌发育后期fruA表达水平的下降存在其它调节机制.

关键词：黏细菌发育 FruA 调节

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基因位置与肿瘤染色体易位的关系

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肿瘤 2012年第6期32卷 475-479页

作者：郑杰洪泽辉东南大学医学院病理学系南京210009 东南大学医学院遗传与发育生物学系教育部发育与疾病相关基因重点实验室南京210009

染色体易位在肿瘤中很常见,但其发生的分子机制复杂,目前尚未完全阐明。近年的研究显示,细胞核基因组的组织结构是高度有序的,每条染色体或染色质都有自己的位置和领地,它们相互交错,共同维持着基因转录网。肿瘤细胞染色体易位的非随机... 详细信息

染色体易位在肿瘤中很常见,但其发生的分子机制复杂,目前尚未完全阐明。近年的研究显示,细胞核基因组的组织结构是高度有序的,每条染色体或染色质都有自己的位置和领地,它们相互交错,共同维持着基因转录网。肿瘤细胞染色体易位的非随机性被认为与间期核内染色体或基因的空间位置密切相关。染色体易位通常发生在核内邻近的染色体或空间位置接近的基因。这些发现对肿瘤的早期诊断和靶向治疗具有重要意义。

关键词：肿瘤染色体易位基因位置

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以白细胞介素15拮抗剂为载体的融合毒素IL15M-PEΔ293的研制

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生物工程学报 2005年第1期21卷 42-46页

作者：牛云飞郑颖毛晓华发育与疾病相关基因教育部重点实验室东南大学基础医学院发育生物学与遗传学系南京210009

IL 15及IL 15受体 (IL 15R)阳性细胞在成人T淋巴细胞性白血病 (ATL)、多发性骨髓瘤及炎症性自身免疫性疾病病理过程中起着重要作用。为研制特异的可消除IL 15受体阳性异常细胞的新型导向药物 ,将人IL 15拮抗剂 (IL 15M)基因片段与人工... 详细信息

IL 15及IL 15受体 (IL 15R)阳性细胞在成人T淋巴细胞性白血病 (ATL)、多发性骨髓瘤及炎症性自身免疫性疾病病理过程中起着重要作用。为研制特异的可消除IL 15受体阳性异常细胞的新型导向药物 ,将人IL 15拮抗剂 (IL 15M)基因片段与人工改造的绿脓杆菌外毒素 (PE)变异体 (PEΔ2 93)基因按正确的阅读框架融合 ,定向克隆在pET16b表达载体T7启动子的下游 ,得到质粒pET IL15M PEΔ2 93。从大肠杆菌相应重组菌株中通过Ni2 + NTA亲和层析纯化出融合蛋白IL15M PEΔ2 93。IL15M PEΔ2 93对IL 15R阳性红白血病细胞系K5 6 2及其多药耐药细胞系K5 6 2 AO2 均具有杀伤作用 ,对IL 15R阴性细胞系Jur kat则没有明显的杀伤作用 ,而且过量的重组IL 15可以完全阻断融合蛋白对K5 6 2的细胞毒效应 ,说明融合蛋白的细胞毒作用具有靶向性。这些结果提示本文构建的融合蛋白在与IL 15 IL 15R异常表达相关的疾病甚至耐药性肿瘤的治疗中具有潜在的应用价值。

关键词：白细胞介素15 绿脓杆菌外毒素融合蛋白

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利用模式动物线虫追踪造纸厂废水中酸碱类毒物的研究

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环境科学 2007年第4期28卷 876-880页

作者：王晓祎于红霞王大勇东南大学基础医学院发育与疾病相关基因教育部重点实验室南京210009 南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室南京210093

在毒性鉴别评价技术TIE程序中引入模式动物线虫,并通过寿命、半数致死天数、生殖速度、生殖能力、身体运动行为等指标进行造纸厂工业废水中酸碱类毒物的毒性评价研究.结果表明,对线虫生命周期的影响程度上:2号>4号>1号>3号,对... 详细信息

在毒性鉴别评价技术TIE程序中引入模式动物线虫,并通过寿命、半数致死天数、生殖速度、生殖能力、身体运动行为等指标进行造纸厂工业废水中酸碱类毒物的毒性评价研究.结果表明,对线虫生命周期的影响程度上:2号>4号>1号>3号,对世代时间的影响程度上:2号>1号>3号≈4号,对产卵数目与头部摆动频率的影响效应相当:1号≈2号>3号≈4号,对身体弯曲次数的影响程度上:1号≈2号>3号>4号,且2号水样对线虫所有指标皆呈极显著性影响(p<0.01).因此,造纸废水中的易受酸性影响的碱类毒物毒性相对最强,而易受碱性影响的酸类毒物以及颗粒状毒物只是对线虫具有一定程度的影响,或者影响某一特定的方面.

关键词：酸碱性毒物毒性鉴别评价技术线虫工业废水

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黄色黏细菌fruA mRNA 5′非翻译区正性调节其自身基因的表达

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科学通报 2004年第20期49卷 2066-2071页

作者：吴倩毛晓华东南大学基础医学院遗传与发育生物学系发育与疾病相关基因教育部重点实验室南京210009

黏细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是黏细菌发育所必需的一种转录因子,其mRNA5′端存在相当长的由235个核苷酸组成的非翻译区(5′-UTR).以lacZ为报告基因,构建保留或缺失5′-UTR的fruA-lacZ翻译融合载体并在染色体att... 详细信息

黏细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是黏细菌发育所必需的一种转录因子,其mRNA5′端存在相当长的由235个核苷酸组成的非翻译区(5′-UTR).以lacZ为报告基因,构建保留或缺失5′-UTR的fruA-lacZ翻译融合载体并在染色体attB位点定点整合.5′-UTR自+4～+220缺失后fruA-lacZ在发育阶段几乎不表达,说明完整的5-′UTR为fruA表达所必需.二级结构预测显示,该区域可形成高度稳定的3螺旋接合结构,可能是蛋白因子的结合位点或存在调节fruA表达的顺式元件.因此,fruA发育特异性表达受其5′-UTR的正性调控.

关键词：黏细菌 5′-UTR fruA 土壤菌模式生物

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