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北京口腔医学 2013年第5期21卷 241-244页

作者：付晓茹杜娟范志朋首都医科大学口腔医学院口腔医学研究所全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室北京100050 北京市丰台区铁营医院

目的研究组蛋白去甲基化酶FBXL11对牙髓干细胞定向分化能力的影响。方法成骨分化诱导培养基诱导牙髓干细胞体外成骨/成牙本质分化。逆转录病毒转染构建过表达FBXL11的牙髓干细胞稳定转染细胞,进行FBXL11获得性功能研究。碱性磷酸酶活性... 详细信息

目的研究组蛋白去甲基化酶FBXL11对牙髓干细胞定向分化能力的影响。方法成骨分化诱导培养基诱导牙髓干细胞体外成骨/成牙本质分化。逆转录病毒转染构建过表达FBXL11的牙髓干细胞稳定转染细胞,进行FBXL11获得性功能研究。碱性磷酸酶活性实验及碱性磷酸酶染色检测成骨/成牙本质分化早期分化指标-碱性磷酸酶活性。茜素红染色及钙离子定量分析检测牙髓干细胞体外成骨/成牙本质分化能力。实时定量RTPCR检测FBXL11及成骨/成牙本质分化相关基因-骨涎蛋白、骨桥蛋白和骨钙素的表达。结果成骨诱导牙髓干细胞抑制FBXL11的表达。过表达FBXL11明显抑制牙髓干细胞的碱性磷酸酶活性、牙髓干细胞体外矿化能力以及骨涎蛋白和骨桥蛋白的表达。结论组蛋白去甲基化酶FBXL11具有抑制牙髓干细胞成骨和成牙本质分化的潜能。

关键词：组蛋白去甲基化酶牙髓干细胞成骨成牙本质分化 FBXL11

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口腔遗传病与罕见病生物样本库建设及相关样本保存编码专家共识

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中华口腔医学杂志 2023年第8期58卷 749-758页

作者：阮文彦张燕丽郑树国孙瑶范志朋宋亚玲孙宏晨王文梅代杰文赵震锦张婷婷陈栋潘永初蒋月桂王旭东郑黎薇朱庆林何淼许宝山贾仲林韩冬段小红第四军医大学口腔医院口腔罕见病与遗传病门诊/口腔生物学教研室、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔医学重点实验室西安710032 北京大学口腔医学院·口腔医院预防科、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100081 同济大学口腔医学院·附属口腔医院口腔种植科、上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 首都医科大学口腔医学院、全牙再生与口腔组织功能重建北京市重点实验室北京100050 武汉大学口腔医(学)院、口颌系统重建与再生全国重点实验室、口腔生物医学教育部重点实验室、口腔医学湖北省重点实验室武汉430079 吉林大学口腔医院口腔病理学教研室长春130021 南京大学医学院附属口腔医院·南京市口腔医院口腔黏膜病科南京210008 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科、上海交通大学口腔医学院、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011 中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院第一门诊、辽宁省口腔疾病重点实验室沈阳110002 天津医科大学口腔医院口腔颌面外科天津300070 郑州大学第一附属医院口腔综合科郑州450052 南京医科大学附属口腔医院口腔正畸科、江苏省口腔疾病研究重点实验室、江苏省口腔转化医学工程研究中心南京210029 西安交通大学口腔医院牙体牙髓病科西安710004 四川大学华西口腔医院儿童口腔科、口腔疾病研究国家重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心成都610041 第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔医学重点实验室西安710032 武汉大学口腔医(学)院儿童口腔科武汉430079 中山大学附属口腔医院口腔颌面外科·中山大学光华口腔医学院·广东省口腔医学重点实验室广州510080 四川大学华西口腔医院唇腭裂外科、口腔疾病研究国家重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心成都610041 北京大学口腔医学院·口腔医院修复科、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100081

口腔遗传病与罕见病生物样本极其珍贵,收集保存此类样本有助于阐明此类疾病的发病机制以及提高诊治水平,而针对此类疾病生物样本库的标准化建设是实现这些目的的重要基石。目前有关口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的文献信息非常少,... 详细信息

口腔遗传病与罕见病生物样本极其珍贵,收集保存此类样本有助于阐明此类疾病的发病机制以及提高诊治水平,而针对此类疾病生物样本库的标准化建设是实现这些目的的重要基石。目前有关口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的文献信息非常少,也缺乏口腔颌面部来源生物样本分类及其编码的标准或建议,不利于口腔专病生物样本库的标准化和信息化建设。本文总结了口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的背景、必要性、原则和要点。在全国生物样本标准化技术委员会出台的团体标准《人类生物样本分类与编码》基础上,新增76种口腔颌面部来源生物样本的编码建议,以期实现口腔颌面部来源生物样本分类与编码的标准化,推动口腔专病特别是口腔遗传病与罕见病生物样本库的智慧化建设,提升我国口腔遗传病与罕见病的整体研究水平。

关键词：口腔医学生物样本库罕见病遗传病标准化信息化专家共识

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖促进人牙周膜干细胞组蛋白甲基化转移酶PRDM9的表达研究

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北京口腔医学 2020年第4期28卷 203-207页

作者：张建鹏张琛刘惠娜侯本祥首都医科大学口腔医学院牙体牙髓科北京100050 首都医科大学口腔医学研究所、全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室北京100050

目的研究牙龈卟啉单胞菌(Pg)脂多糖(LPS)对牙周膜间充质干细胞(PDLSCs)组蛋白甲基化转移酶PRDM9的作用及调控机制。方法选择不同浓度的Pg. LPS处理PDLSCs;利用实时定量RT-PCR的方法检测多种组蛋白甲基化转移酶在mRNA水平的表达变化;此外... 详细信息

目的研究牙龈卟啉单胞菌(Pg)脂多糖(LPS)对牙周膜间充质干细胞(PDLSCs)组蛋白甲基化转移酶PRDM9的作用及调控机制。方法选择不同浓度的Pg. LPS处理PDLSCs;利用实时定量RT-PCR的方法检测多种组蛋白甲基化转移酶在mRNA水平的表达变化;此外在Pg. LPS处理细胞的同时加入0.5μg/ml TLR4中和抗体,比较阻断及未阻断情况下筛选出的差异基因在mRNA水平的表达变化。结果实时定量RT-PCR结果显示PDLSCs在10μg/ml Pg. LPS刺激24 h和48 h后,组蛋白甲基化转移酶PRDM9基因表达量显著升高,具有时间相关性。选用1、5和10μg/ml的Pg. LPS处理PDLSCs,48h后检测到PRDM9表达量升高与Pg. LPS呈剂量相关性;与对照组相比阻断TLR4信号通路使得PRDM9的表达量明显下调。结论 Pg. LPS能够激活TLR4信号通路进而促进组蛋白甲基化转移酶PRDM9基因的表达。

关键词：牙龈卟啉单胞菌脂多糖组蛋白甲基化酶转移酶牙周膜干细胞 TLR4 PRDM9

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R719Q突变导致PTCH2基因抑癌功能丧失

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北京口腔医学 2013年第3期21卷 132-134页

作者：尹小楠杜娟范志朋青岛市立医疗集团口腔科 266011 首都医科大学口腔医学院研究所全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室

目的研究痣样基底细胞癌综合征(NBCCS)致病基因PTCH2突变后对肿瘤细胞的影响。方法在鳞状细胞癌细胞系SCC1中利用逆转录病毒构建PTCH2的野生型及R719Q突变型的稳定转染细胞系,利用体外细胞增殖实验及体内裸鼠皮下成瘤实验,探讨PTCH2对... 详细信息

目的研究痣样基底细胞癌综合征(NBCCS)致病基因PTCH2突变后对肿瘤细胞的影响。方法在鳞状细胞癌细胞系SCC1中利用逆转录病毒构建PTCH2的野生型及R719Q突变型的稳定转染细胞系,利用体外细胞增殖实验及体内裸鼠皮下成瘤实验,探讨PTCH2对肿瘤细胞成瘤能力的影响。结果过表达野生型PTCH2抑制SCC1细胞的体外增殖能力,并且抑制SCC1细胞的体内成瘤能力,而R719Q突变型的PTCH2则丧失了这种抑制能力。结论痣样基底细胞癌综合征致病性突变PTCH2-R719Q导致PTCH2对肿瘤细胞抑制作用的丧失。

关键词： PTCH2 痣样基底细胞癌综合征基因突变

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硝酸盐对腮腺放射损伤的治疗效果

硝酸盐对腮腺放射损伤的治疗效果

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中华口腔医学会全科口腔医学专业委员会第八次学术会议

作者：吴志芳夏登胜王松灵首都医科大学附属北京口腔医院首都医科大学口腔医学院口腔医学研究所全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室

目的:放射治疗是头颈部恶性肿瘤的常用治疗方法。但放疗引起的腮腺损伤常导致腮腺唾液分泌低下,引起口干,极大地影响了患者的生活质量。目前尚无满意的防治措施。课题组前期研究发现:硝酸盐对腮腺放射损伤具有显著的预防作用;但对其治... 详细信息

目的:放射治疗是头颈部恶性肿瘤的常用治疗方法。但放疗引起的腮腺损伤常导致腮腺唾液分泌低下,引起口干,极大地影响了患者的生活质量。目前尚无满意的防治措施。课题组前期研究发现:硝酸盐对腮腺放射损伤具有显著的预防作用;但对其治疗效果尚无研究。本课题利用与人类腮腺解剖、生理功能相近的大型动物小型猪作为动物模型,研究硝酸盐对小型猪腮腺放射损伤的治疗效果。材料与方法:采用20 Gy单次放疗建立小型猪单侧腮腺放射损伤模型,从放疗后第2月开始,给予1个月的富硝酸盐(1 mmol/kg b.w.)饮食,观察腮腺分泌功能、组织结构及局部血流、微血管状态等的变化,以研究硝酸盐对小型猪腮腺放射损伤的治疗效果。结果:(1)口服硝酸盐后,治疗组唾液和血液的硝酸盐浓度显著增加;(2)硝酸盐治疗组的腮腺唾液流率较对照组稍高,增量约为1.64ml/10min,但无明显统计学差异;(3)小叶稍萎缩,小叶中心腺泡结构破坏,被增生的纤维组织替代,但脂肪化不明显。高倍镜下,小叶周边部分腺泡结构消失,但可见大量弥散分布的腺泡细胞;结构相对完整,扩张不明显;间质中可见慢性炎性细胞浸润;而对照组腮腺:小叶萎缩严重,腺体实质大部分被脂肪和纤维组织取代;存留的导管明显多于腺泡,但多数导管出现扩张;高倍镜下可见部分残存腺泡及导管细胞坏死;间质中可见慢性炎性细胞浸润;(4)治疗组与对照组均有大量细胞凋亡,但治疗组未凋亡的内皮细胞较对照组增多;(5)给予药物加载后,治疗组血流保存率上升至64.09%,而对照组继续下降至32.33%,两组有显著统计学差异(p<0.01);但放疗后第4月及第6月无硝酸盐加载时,治疗组血流保存率回落,与对照组无统计学差异。(6)硝酸盐治疗组和对照组腮腺内微血管内膜增厚,管腔变窄,或有闭锁;(7)硝酸盐组与对照组在血常规、血生化、血清免疫及重要脏器的组织结构无显著差异。结论:本研究于小型猪腮腺放疗2月后,口服硝酸盐,观察腮腺的分泌功能、组织结构和局部血流、微血管状态等变化,研究硝酸盐对腮腺放射损伤的治疗作用。结果表明:(1)放疗2月后口服硝酸盐,能一定程度地改善腮腺唾液分泌功能,但治疗效果不显著;(2)放疗2月后口服硝酸盐,在一定程度上可减轻腮腺结构的破坏程度,但不能显著逆转。

关键词：硝酸盐放射损伤腮腺小型猪

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表皮生长因子Epiregulin促进牙周膜干细胞成骨分化

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北京口腔医学 2013年第3期21卷 125-128页

作者：曹钰杜娟范志朋首都医科大学口腔医学院综合科北京100050 首都医科大学口腔医院研究所全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室

目的研究表皮生长因子Epiregulin(EREG)对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)成骨定向分化能力的影响。方法利用EREG shRNA基因敲除EREG进行丧失性功能研究,利用重组EREG活性蛋白进行获得性功能研究。通过检测ALP活... 详细信息

目的研究表皮生长因子Epiregulin(EREG)对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)成骨定向分化能力的影响。方法利用EREG shRNA基因敲除EREG进行丧失性功能研究,利用重组EREG活性蛋白进行获得性功能研究。通过检测ALP活性、茜素红染色、钙离子定量分析、成骨分化相关基因的表达研究牙周膜干细胞体外成骨分化能力。结果随着牙周膜干细胞向成骨分化,EREG的表达明显升高。基因敲除EREG抑制牙周膜干细胞ALP活性、体外矿化能力及成骨分化相关基因骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)和Osterix(OSX)的表达。人重组EREG活性蛋白增强牙周膜干细胞ALP活性和体外矿化能力。结论表皮生长因子EREG具有促进牙周膜干细胞成骨分化的潜能,可以作为一个候选的细胞因子用于牙周组织工程技术再生牙周组织。

关键词：表皮生长因子牙周膜干细胞成骨分化

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组蛋白去甲基化酶KDM6A促进骨髓间充质干细胞成骨分化研究

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北京口腔医学 2014年第1期22卷 5-8页

作者：高润涛范志朋首都医科大学口腔医学院口腔医院研究所全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室北京100050 首都医科大学附属北京友谊医院

目的研究组蛋白去甲基化酶KDM6A对骨髓间充质干细胞成骨定向分化能力的影响。方法构建Flag-KDM6A慢病毒表达质粒。利用慢病毒转染构建稳定过表达KDM6A的骨髓间充质干细胞。碱性磷酸酶活性实验检测成骨分化早期指标-碱性磷酸酶活性。茜... 详细信息

目的研究组蛋白去甲基化酶KDM6A对骨髓间充质干细胞成骨定向分化能力的影响。方法构建Flag-KDM6A慢病毒表达质粒。利用慢病毒转染构建稳定过表达KDM6A的骨髓间充质干细胞。碱性磷酸酶活性实验检测成骨分化早期指标-碱性磷酸酶活性。茜素红染色及钙离子定量分析检测干细胞体外矿化能力。实时定量RT-PCR检测成骨分化相关基因-骨桥蛋白和骨钙素的表达。结果过表达KDM6A促进骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶活性、骨髓间充质干细胞体外矿化能力以及骨桥蛋白和骨钙素的表达。结论组蛋白去甲基化酶KDM6A具有促进骨髓间充质干细胞成骨分化的潜能,可以作为一个候选的靶基因用于骨组织工程技术,促进骨组织再生。

关键词：组蛋白去甲基化酶骨髓间充质干细胞成骨分化 KDM6A

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组蛋白去甲基化酶KDM2B在小鼠磨牙及颌骨发育中的时空表达

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北京口腔医学 2018年第5期26卷 241-245页

作者：陈茜范志朋张琛首都医科大学口腔医学院牙体牙髓科北京100050 首都医科大学附属北京康复医院口腔科首都医科大学口腔医学院口腔医学研究所全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室

目的观察组蛋白去甲基化酶KDM2B在小鼠下颌第一磨牙及下颌骨发育过程中的时空表达模式,初步探讨其在牙齿及颌骨发育中的作用及功能。方法采用免疫组织化学方法观察KDM2B在ICR小鼠下颌磨牙及颌骨发育中的时空表达模式,并对其表达水平进... 详细信息

目的观察组蛋白去甲基化酶KDM2B在小鼠下颌第一磨牙及下颌骨发育过程中的时空表达模式,初步探讨其在牙齿及颌骨发育中的作用及功能。方法采用免疫组织化学方法观察KDM2B在ICR小鼠下颌磨牙及颌骨发育中的时空表达模式,并对其表达水平进行半定量分析。结果 E13天,KDM2B在成釉器中表达明显;E15～E19天,KDM2B在成釉器、牙乳头、牙囊普遍表达; P2天,KDM2B在成牙本质细胞中明显表达,在成釉细胞和牙乳头细胞内亦有表达; P14天,KDM2B在成熟的成釉细胞和近根尖区的成牙本质细胞中表达明显。在E13～E16天的过程中时,KDM2B在Meckel软骨内的表达由弱到强,在E16～E19天Meckel软骨内的表达趋于稳定,在周围的间充质细胞及新形成的骨基质内均有明显表达。结论 KDM2B可能参与早期成釉器细胞的增殖、晚期成釉细胞、成牙本质细胞的分化及釉质和牙本质基质的分泌,同时还可能与Meckel软骨细胞的退化、成骨细胞的分化以及骨基质的形成有关。

关键词：组蛋白去甲基化酶 KDM2B 牙发育 Meckel软骨免疫组化

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小型猪颌骨内全牙再生研究

小型猪颌骨内全牙再生研究

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2018全国口腔生物医学学术年会

作者：吴志芳夏登胜王松灵首都医科大学附属北京口腔医院首都医科大学口腔医学院口腔医学研究所全牙再生及口腔组织功能重北京市重点实验室

目的基于发育原理,采用细胞重组方法,实现大型动物小型猪颌骨内全牙再生。方法本实验以小型猪为动物模型(n=7),以胚胎猪帽状期牙胚为细胞来源,分离牙胚上皮和间充质,将其解离成单细胞后,再重组成新的组织工程牙胚;经体外三维培养后,无... 详细信息

目的基于发育原理,采用细胞重组方法,实现大型动物小型猪颌骨内全牙再生。方法本实验以小型猪为动物模型(n=7),以胚胎猪帽状期牙胚为细胞来源,分离牙胚上皮和间充质,将其解离成单细胞后,再重组成新的组织工程牙胚;经体外三维培养后,无需生物支架材料,回植于成年小型猪颌骨内,期间以骨髓间充质干细胞和阿司匹林为免疫调节介质(n=4);从影像学和组织学方面观察牙齿再生情况。结果回植150天后,影像学资料显示:在有免疫干预的4头小型猪颌骨中,有3头小型猪的回植区可见高密度影的中心有一低密度影像,类似于牙体组织;用工程软件三维重建后,发现为再生牙类似于单根牙。HE染色,发现再生牙具有非常类似于自然牙的牙体及牙周组织结构,包括牙釉质、牙本质、牙髓、牙骨质、牙周膜及牙槽骨等。免疫组织化学染色发现:再生牙阳性表达NF和CD31,即具有神经和血管结构。结论基于发育学原理,利用细胞重组技术,无需支架材料,可在大型动物颌骨内再生出具有类似于天然牙解剖结构的全牙,为将来开展人类全牙再生转化研究提供了有意义的参考依据。

关键词：小型猪细胞重组牙发育全牙再生颌骨内再生

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基于细胞重组技术的小型猪颌骨内全牙再生研究

基于细胞重组技术的小型猪颌骨内全牙再生研究

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中华口腔医学会全科口腔医学专业委员会第八次学术会议

作者：吴志芳夏登胜王松灵首都医科大学附属北京口腔医院首都医科大学口腔医学院口腔医学研究所全牙再生及口腔组织功能重北京市重点实验室

目的:基于发育原理,采用细胞重组方法,实现大型动物小型猪颌骨内全牙再生。方法:本实验以小型猪为动物模型,以胚胎猪帽状期牙胚为细胞来源,分离牙胚上皮和间充质,将其解离成单细胞后,再重组成新的组织工程牙胚;经体外三维培养后,无需生... 详细信息

目的:基于发育原理,采用细胞重组方法,实现大型动物小型猪颌骨内全牙再生。方法:本实验以小型猪为动物模型,以胚胎猪帽状期牙胚为细胞来源,分离牙胚上皮和间充质,将其解离成单细胞后,再重组成新的组织工程牙胚;经体外三维培养后,无需生物支架材料,回植于成年小型猪颌骨内,期间以骨髓间充质干细胞和阿司匹林为免疫调节介质;从影像学和组织学方面观察牙齿再生情况。结果:回植150天后,影像学资料显示,回植区可见一高密度影,中心有一低密度影像,类似于牙体组织;用工程软件三维重建后,发现为该再生牙呈水平向生长,一端较大,类似牙冠,一端较尖细,类似于单根牙牙根。获取该回植区牙槽骨进行HE染色,发现再生牙具有非常类似于自然牙的牙体及牙周组织结构,包括牙釉质、牙本质、牙髓、牙骨质、牙周膜及牙槽骨等。结论:基于发育学原理,利用细胞重组技术,无需支架材料,可在大型动物颌骨内再生出具有类似于天然牙解剖结构的全牙,为将来开展人类全牙再生转化研究提供了有意义的参考依据。

关键词：小型猪细胞重组牙发育全牙再生颌骨内再生

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