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中国老年学杂志 2023年第8期43卷 1847-1851页

作者：周庆辉黄秀峰黄昌盛马福维杨园园王金花右江民族医学院基础医学院人体解剖学教研室广西百色533000 右江民族医学院组织胚胎学教研室广西百色533000

目的研究膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)基因单核苷酸多态性与广西壮族绝经后女性骨质疏松的关系。方法用超声骨密度仪测量广西地区518例壮族绝经后女性左侧跟骨超声振幅衰减(BUA),并根据中国人骨质疏松建议诊断标准分骨量正常、骨量... 详细信息

目的研究膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)基因单核苷酸多态性与广西壮族绝经后女性骨质疏松的关系。方法用超声骨密度仪测量广西地区518例壮族绝经后女性左侧跟骨超声振幅衰减(BUA),并根据中国人骨质疏松建议诊断标准分骨量正常、骨量减少和骨质疏松组;MT1-MMP基因的4个单核苷酸多态性(SNP)位点(rs1003349、rs3751488、rs2236303和rs743257)的分型采用多重单碱基延伸SNP分型技术(Multiplex SNaPshot)。结果 4个位点单核苷酸多态性与BUA变异无相关性(P>0.05)。rs743257位点TT基因型在骨量减少组和骨质疏松组中的分布频率明显比骨量正常组低,CT基因型则相反;在对骨质疏松危险因素的有序Logistic回归分析显示,壮族绝经后女性个体携带rs2236303 CT基因型发生骨质疏松的风险比TT基因型的低(OR=0.532,95%CI:0.308~0.917,P=0.023),携带rs743257 CT基因型发生骨质疏松的风险比TT基因型的高(OR=1.873,95%CI:1.159~3.027,P=0.010)。结论 MT1-MMP基因rs2236303 C/T和rs743257 C/T的基因多态性可能与广西壮族绝经后女性骨质疏松相关,rs2236303 TT基因型和rs743257 CT基因型可能是增加骨质疏松风险的因素。

关键词：膜型基质金属蛋白酶-1 单核苷酸多态性骨质疏松绝经后女性壮族

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骨质疏松差异miRNA表达及靶基因分析

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中国老年学杂志 2023年第15期43卷 3701-3705页

作者：杨一秋解继胜右江民族医学院研究生学院广西百色533000 右江民族医学院基础医学院组织胚胎学教研室广西百色533000

目的通过GEO数据库分析骨质疏松患者血清及髋骨组织中差异miRNA的表达变化,并对差异miRNA的靶基因进行GO、KEGG功能富集分析、转录因子预测和蛋白网络调控图绘制,探讨这些差异基因在疾病发生、发展过程中的作用,为研究骨质疏松的发病机... 详细信息

目的通过GEO数据库分析骨质疏松患者血清及髋骨组织中差异miRNA的表达变化,并对差异miRNA的靶基因进行GO、KEGG功能富集分析、转录因子预测和蛋白网络调控图绘制,探讨这些差异基因在疾病发生、发展过程中的作用,为研究骨质疏松的发病机制、治疗及预防骨质疏松性骨折提供依据。方法下载GEO数据库中的骨质疏松差异miRNA数据集作为研究对象,第一组为GSE91033数据集,包括1例正常对照组和2例骨质疏松患者的血清miRNA表达谱;第二组为GSE74209数据集,包括6例正常对照组和6例骨质疏松患者髋骨组织miRNA表达谱。使用GEO数据库中GEO2R分析工具,筛选两组数据中调整后P<0.05,logFC>1或logFC<-1的差异miRNA作为研究对象。通过SangerBox工具绘制差异miRNA火山图,TargetScan数据库预测差异miRNA的靶基因,FunRich软件、DAVID在线数据库对靶基因进行GO、KEGG功能富集分析、转录因子预测,最后使用Cytoscape软件进行蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI)蛋白网络调控图绘制并确定核心蛋白。结果在GSE91033数据集中,筛选出骨质疏松患者外周血中有204个差异miRNA(164个上调miRNA,40个下调miRNA);在GSE74209数据集中,筛选出骨质疏松患者髋骨组织中有138个差异miRNA(39个上调miRNA,99个下调miRNA)。通过GO、KEGG功能富集分析,得到GO生物过程包括三酰甘油合成过程、细胞分裂、细胞对DNA损伤刺激的反应、成纤维细胞迁徙的正向调控、骨重建等。KEGG富集分析得到缺氧诱导因子(HIF)-1信号通路、细胞外基质(ECM)受体相互作用、肌动蛋白细胞骨架的调节、E-钙黏蛋白(cadherin)信号通路等。通过cytohubba插件分析得到20个关键基因(Hub),其中处于枢纽地位的有丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)1、着丝粒相关蛋白(DSN)1、UBE203三个基因。结论骨质疏松患者外周血和骨组织有多个上调的差异miRNA,这些上调的差异miRNA可能通过靶向枢纽基因MAPK1、DSN1、UBE203经多种途径参与骨质疏松的进程。

关键词： miRNA 骨质疏松功能富集分析 GEO数据库

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基于Wnt/β-catenin信号通路的葛根素对骨质疏松症作用的研究进展

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解剖科学进展 2025年第2期 274-277+280页

作者：李兰杨一秋解继胜周兰岛右江民族医学院研究生学院右江民族医学院组织胚胎学教研室右江民族医学院附属医院脊柱骨病关节外科

骨质疏松症已成为全球性的公共健康问题和前沿研究难题，其发病机制复杂，目前的信号通路研究尚不能完全解释其具体的发病机制。从葛根中提取的单体葛根素，具有抑制炎症、改善骨骼微环境、治疗骨质疏松等多种药理作用。Wnt/β-catenin...

骨质疏松症已成为全球性的公共健康问题和前沿研究难题，其发病机制复杂，目前的信号通路研究尚不能完全解释其具体的发病机制。从葛根中提取的单体葛根素，具有抑制炎症、改善骨骼微环境、治疗骨质疏松等多种药理作用。Wnt/β-catenin信号通路对骨骼发育和维持内环境稳定至关重要。Wnt信号通路的激活在骨疾病的治疗中发挥合成代谢和抗分解代谢的双重作用，Wnt/β-catenin信号通路的激活已成为治疗骨质疏松症的一种新方法，并可通过靶向Wnt/β-catenin信号通路促进骨生长。本文就葛根素对Wnt/β-catenin信号通路在骨质疏松症中的最新研究进行综述，以期为下一步的实验研究和临床用药提供参考。

关键词：

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脂多糖抑制海马神经前体细胞增殖

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中国老年学杂志 2023年第1期43卷 82-88页

作者：梁倩高虹李海广西医科大学附属武鸣医院广西南宁530100 宁波卫生职业技术学院医学技术学院基础医学教研室右江民族医学院组织学与胚胎学教研室

目的探讨脂多糖(LPS)对大鼠海马齿状回(DG)的神经发生的影响及机制。方法大鼠腹腔注射LPS(1 mg/ml)后,用免疫组织化学方法检测海马DG的颗粒下层5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的阳性细胞和诱发的钙接头蛋白分子Iba1蛋白的表达;用免疫荧光双标的方... 详细信息

目的探讨脂多糖(LPS)对大鼠海马齿状回(DG)的神经发生的影响及机制。方法大鼠腹腔注射LPS(1 mg/ml)后,用免疫组织化学方法检测海马DG的颗粒下层5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的阳性细胞和诱发的钙接头蛋白分子Iba1蛋白的表达;用免疫荧光双标的方法检测BrdU和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、双皮质醇(DCX)的共表达;新生大鼠海马分离培养神经干细胞,采用免疫细胞法检测神经上皮干细胞蛋白(Nestin)的表达,检测LPS对神经前体细胞分化的影响和LPS受体Toll样受体(TLR)4的表达。结果LPS能使青少年雄性大鼠发育迟缓,体重增长延迟;急性抑制成年大鼠DG区的神经发生。结论LPS可能通过激活TLR4途径抑制神经前体细胞的增殖。

关键词：脂多糖神经发生齿状回 5溴脱氧尿嘧啶(BrdU) 双皮质醇(DCX) 胶质纤维酸性蛋白(GFAP)

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山茶籽对雌激素缺乏AD大鼠脑组织形态、β淀粉样蛋白及学习行为能力的影响

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中国老年学杂志 2021年第5期41卷 1051-1054页

作者：周善金李海顾建忠韦福相邱迎均潘春玲黎飚方晓燕右江民族医学院组织胚胎学教研室广西百色533000

目的了解山茶籽提取物对雌激素缺乏AD大鼠脑组织结构和记忆辨别能力、相应脑组织区域β淀粉蛋白(Aβ)的影响。方法5月龄雌性大鼠32只,分成4组(n=8):对照组、模型组、山茶籽组、雌二醇组。山茶籽组用相当生药5 g/g山茶籽的水溶液定时定... 详细信息

目的了解山茶籽提取物对雌激素缺乏AD大鼠脑组织结构和记忆辨别能力、相应脑组织区域β淀粉蛋白(Aβ)的影响。方法5月龄雌性大鼠32只,分成4组(n=8):对照组、模型组、山茶籽组、雌二醇组。山茶籽组用相当生药5 g/g山茶籽的水溶液定时定量灌胃[10 ml/(kg·d)];雌二醇组用雌二醇皮下注射200μg/kg,2次/w。对照组和模型组用等容量生理盐水[10 ml/(kg·d)]灌胃。造模后给药第12周各组取8只大鼠,称体重后,进行水迷宫实验,水迷宫实验完成后麻醉取血5 ml,并处死大鼠取脑。观察左侧大脑常规组织片;右侧大脑低温条件下匀浆后提取Aβ。结果模型组学习行为能力明显下降(P<0.01),大脑海马区Aβ沉积明显增加,山茶籽组和雌二醇组的学习行为能力较模型组明显提高(P<0.01),大脑海马CA1 Aβ阳性细胞计数明显减少(P<0.01),相应Aβ电泳带光密度值显著变小(P<0.01)。结论山茶籽有植物性雌激素作用,可以减少AD大鼠脑海马区Aβ沉积,减少其对大脑学习记忆区组织损害,提高学习行为能力,对雌激素缺乏AD大鼠有明显防治效果。

关键词：山茶籽阿尔茨海默病雌激素缺乏 β淀粉样蛋白学习行为能力

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山茶籽与葛根素对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用比较

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中国老年学杂志 2021年第2期41卷 343-345页

作者：方晓燕李海顾建忠邱迎均韦福相陈建海黎飚右江民族医学院组织胚胎学教研室广西百色533000

目的探讨山茶籽与葛根素对去卵巢大鼠的骨组织形态结构、骨密度和碱性磷酸酶的影响。方法5月龄雌性大鼠32只,分成4个试验组(每组8只):(1)假手术(Sham)组;(2)去卵巢模型(OVX)组;(3)山茶籽治疗(Ts)组:山茶籽醇提物灌胃,10 ml/kg,1次/d(5 ... 详细信息

目的探讨山茶籽与葛根素对去卵巢大鼠的骨组织形态结构、骨密度和碱性磷酸酶的影响。方法5月龄雌性大鼠32只,分成4个试验组(每组8只):(1)假手术(Sham)组;(2)去卵巢模型(OVX)组;(3)山茶籽治疗(Ts)组:山茶籽醇提物灌胃,10 ml/kg,1次/d(5 g/g生药);(4)葛根素治疗(Pr)组:皮下注射葛根素,50 mg/kg,1次/d。各试验组在4、12 w,麻醉大鼠采血测定碱性磷酸酶,12 w后处死右侧股骨切片染色镜观骨组织结构,右侧股骨烘干测量骨密度,数据常规计算分析。结果与Sham组比较,OVX组骨组织镜下观骨质疏松明显,血碱性磷酸酶升高明显(P<0.01)。Ts组、Pr组、Sham组骨切片组织结构、骨密度和碱性磷酸酶差异无统计学意义(P>0.05)。结论山茶籽和葛根素对去卵巢大鼠的骨质疏松有防治作用,疗效相近。

关键词：葛根素山茶籽去卵巢骨质疏松

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氯化钴诱导破骨细胞体外缺氧模型的建立

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中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生 2022年第12期 293-297页

作者：赵娜解继胜右江民族医学院研究生学院广西百色533000 右江民族医学院基础医学院组织胚胎学教研室广西百色533000

观察氯化钴( CoCl2 )对体外培养的破骨细胞的影响,探索合适的体外化学模拟缺氧模型。方法用20ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、50ng/ml核因子κB受体激活因子配体(RANKL)诱导培养RAW264.7细胞。通过TRAP染色鉴定破骨细胞,然后用不... 详细信息

观察氯化钴( CoCl2 )对体外培养的破骨细胞的影响,探索合适的体外化学模拟缺氧模型。方法用20ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、50ng/ml核因子κB受体激活因子配体(RANKL)诱导培养RAW264.7细胞。通过TRAP染色鉴定破骨细胞,然后用不同浓度CoCl2处理,观察细胞活力水平,Western blot和qRT-PCR检测破骨细胞中低氧诱导因子1α(HIF 1α)的蛋白及mRNA表达。结果 100、200、300、400μmol/L的CoCl2浓度可促进破骨细胞增殖(P < 0.05),而超过500μmol/L的CoCl2浓度降低破骨细胞的细胞活力;100μmol/LCoCl2浓度刺激24h后,HIF 1α蛋白及mRNA表达显著上调。结论 CoCl2对破骨细胞的增殖与浓度有关;100μmol/LCoCl2可建立体外培养破骨细胞缺氧诱导模型。

关键词：破骨细胞氯化钴低氧低氧诱导因子1α

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破骨细胞建模方法的探索

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右江民族医学院学报 2021年第3期43卷 306-309页

作者：杨一秋李兰解继胜右江民族医学院研究生学院广西百色533000 右江民族医学院基础医学院组织胚胎学教研室广西百色533000

目的探索RAW264.7细胞向破骨细胞分化的最佳条件,为后续的实验研究提供一个可靠的破骨细胞建模方式。方法将RAW264.7细胞以每孔2×10^(4)个、每孔3×10^(3)个分别接种到6孔板、24孔板中,待贴壁24 h后更换为含20 ng/ml的巨噬细... 详细信息

目的探索RAW264.7细胞向破骨细胞分化的最佳条件,为后续的实验研究提供一个可靠的破骨细胞建模方式。方法将RAW264.7细胞以每孔2×10^(4)个、每孔3×10^(3)个分别接种到6孔板、24孔板中,待贴壁24 h后更换为含20 ng/ml的巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、50 ng/ml的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的诱导液诱导培养,每隔2 d换液一次,待镜下观察到较多破骨细胞时进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色并利用实时荧光定量PCR检测活化T-细胞核因子1(NFATc1)、TRAP、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的mRNA表达水平。结果经过诱导培养3 d时破骨细胞开始聚集生长,出现多个核,但整体阳性破骨细胞不是太多,待诱导至4~6 d时,可见到较大面积的破骨细胞,细胞核增多达数十个,细胞质也非常丰富;与对照组相比,诱导组NFATc1、TRAP、MMP-9的mRNA表达水平上调。NFATc1、MMP-9与对照组的差异有统计学意义(P<0.05),但是TRAP与对照组的差异没有统计学意义。结论RAW264.7细胞在20 ng/ml的M-CSF、50 ng/ml的RANKL这两种细胞因子存在的条件下经过4~6 d培养可以被诱导为破骨细胞。

关键词： RAW264.7细胞破骨细胞 NFATc1 TRAP MMP-9

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hsa-miR-125a的靶基因预测及生物信息学分析

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医学理论与实践 2021年第9期34卷 1444-1446页

作者：杨一秋李兰赵娜解继胜右江民族医学院免疫学专业在读硕士研究生广西百色市533000 右江民族医学院基础医学院组织胚胎学教研室

目的:通过生物信息学分析方法预测hsa-miR-125a的靶基因并对靶基因进行GO、KEGG富集分析。方法:利用miRBase数据库分析hsa-miR-125a的物种保守性;利用TargetScan、miRTarBase、miRDB数据库预测hsa-miR-125a靶基因,再将预测的靶基因利用D... 详细信息

目的:通过生物信息学分析方法预测hsa-miR-125a的靶基因并对靶基因进行GO、KEGG富集分析。方法:利用miRBase数据库分析hsa-miR-125a的物种保守性;利用TargetScan、miRTarBase、miRDB数据库预测hsa-miR-125a靶基因,再将预测的靶基因利用DAVID数据库进行基因本体(GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)生物通路富集分析。结果:hsa-miR-125a预测的交集靶基因共有122个。GO富集分析结果显示,hsa-miR-125a的靶基因主要参与细胞对DNA损伤刺激的反应、蛋白质泛素化的正调控等生物过程(均P<0.01)。KEGG信号通路富集分析结果显示,hsa-miR-125a的靶基因显著富集于endocytosis signaling pathway、adherens junction signaling pathway、TGF-βsignaling pathway、HIF-1 signaling pathway(P<0.05)。结论:hsa-miR-125a的靶基因富集的信号通路与破骨细胞生成密切相关,尤其是TGF-βsignaling pathway。

关键词：破骨细胞 hsa-miR-125a 靶基因信号通路生物信息学

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去卵巢小鼠绝经后骨质疏松模型的建立和综合评定

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右江民族医学院学报 2021年第1期43卷 6-10页

作者：李兰杨一秋解继胜右江民族医学院研究生学院广西百色533000 右江民族医学院组织胚胎学教研室广西百色533000

目的建立和评定去卵巢小鼠骨质疏松模型,以期为后期进行不同的药物干预治疗提供准确的时机和模型。方法选取10~12周龄的C57BL/6雌性小鼠10只,随机分为假手术对照(Sham)组和卵巢摘除骨质疏松模型(OVX)组,每组5只。术后8周,将小鼠取血后处... 详细信息

目的建立和评定去卵巢小鼠骨质疏松模型,以期为后期进行不同的药物干预治疗提供准确的时机和模型。方法选取10~12周龄的C57BL/6雌性小鼠10只,随机分为假手术对照(Sham)组和卵巢摘除骨质疏松模型(OVX)组,每组5只。术后8周,将小鼠取血后处死,取一侧的股骨,剔除软组织,然后进行冰冻切片,另一侧进行显微断层扫描技术(Micro CT)检查。分别检测血钙、磷、镁水平,行组织病理学以及免疫荧光观察。结果血清学检测,OVX组与Sham组的钙、磷、镁含量变化不大,OVX组碱性磷酸酶含量比Sham组的含量低(P<0.01);Micro CT检查,OVX组小鼠骨小梁数量减少,间隔大,分离度也增加,排列稀疏,组织病理学HE染色发现OVX组破骨细胞数目增加(P<0.01);OVX组以及Sham组的碱性磷酸酶染色(ALP)的变化差异不大,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP酶)表达的面积增加,颜色加深。结论C57BL/6雌性小鼠行双侧卵巢摘除法可以建立骨质疏松症模型,通过多种方法可以客观准确验证骨质疏松模型,以期为相关研究提供重要的参考依据。

关键词：骨质疏松模型,动物双侧卵巢摘除法显微断层扫描技术组织病理学免疫荧光

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