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华南农业大学学报 2024年第2期45卷 266-272页

作者：丁艳哲杜立财孙卓杨利民韩忠明王云贺刘子君张浩吉林农业大学中药材学院/省部共建生态恢复和生态系统管理国家重点实验室培育基地吉林长春130118 吉林参王植保科技有限公司吉林白山134504 吉林吉隆东北沙棘产业有限责任公司吉林大安131300 辽宁盘锦检验检测中心辽宁盘锦124010

【目的】筛选对刺五加黑斑病具有生防潜力的细菌菌株。【方法】采用平板对峙法从健康刺五加根际土壤中分离筛选对刺五加黑斑病菌具有拮抗作用的菌株,基于形态学、生理生化鉴定及16S rDNA结合gyrB测序分析进行菌种分类鉴定,测定其抗菌谱... 详细信息

【目的】筛选对刺五加黑斑病具有生防潜力的细菌菌株。【方法】采用平板对峙法从健康刺五加根际土壤中分离筛选对刺五加黑斑病菌具有拮抗作用的菌株,基于形态学、生理生化鉴定及16S rDNA结合gyrB测序分析进行菌种分类鉴定,测定其抗菌谱;并通过叶面定殖及盆栽防效试验进一步评价该菌的生防潜力。【结果】分离得到419株细菌,其中,菌株YZ-375鉴定为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis。菌株YZ-375对刺五加黑斑病菌的拮抗效果较好,无菌滤液的抑制率为65.85%,且对人参立枯丝核菌Rhizoctonia solani、人参链格孢菌Alternaria panax、人参茄腐皮镰孢菌Fusarium solani、人参核盘菌Sclerotinia ginseng、人参毁灭柱孢菌Cylindrocarpon destructans、五味子尖镰孢菌Fusarium oxysporum均具有拮抗效果,抑制率为69.21%~77.44%。在鲜叶定殖35 d后,菌株YZ-375菌量仍能保持在每克鲜叶103CFU。菌株YZ-375对刺五加黑斑病防效达72.31%,与枯草芽孢杆菌、苯醚甲环唑防效无显著差异。【结论】贝莱斯芽孢杆菌YZ-375具有良好的生防潜力,具有一定的开发应用前景。

关键词：刺五加黑斑病贝莱斯芽孢杆菌分类鉴定叶面定殖生物防治

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长白山区参后地生态恢复与再利用模式及其存在的问题

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吉林农业大学学报 2004年第5期26卷 546-549,553页

作者：杨利民陈长宝王秀全张连学田义新吉林农业大学中药材学院吉林省生态恢复与生态系统管理省部共建国家重点实验室长春130118 吉林省现代中药用生物制药基地建设办公室长春130041

人参和西洋参的连作障碍一直是困扰长白山区参业持续发展和森林生态保护的重大科学技术与社会发展问题之一。多年来,针对这一重大问题,科研工作者开展了大量的研究工作,但到目前为止这一问题仍未得到根本解决。文中在分析目前参地开发... 详细信息

人参和西洋参的连作障碍一直是困扰长白山区参业持续发展和森林生态保护的重大科学技术与社会发展问题之一。多年来,针对这一重大问题,科研工作者开展了大量的研究工作,但到目前为止这一问题仍未得到根本解决。文中在分析目前参地开发和参后地生态恢复与再利用现状、人参和西洋参忌连作的可能因素、参地开发的林分条件、现有参后地地形条件及参后地生态恢复的长期性等基础上,提出了以地形条件为基础的参后地生态恢复与再利用模式,包括较陡坡地模式、缓坡地模式和岗平地模式;提出了目前参后地生态恢复与再利用急需解决的几个关键问题,包括制定合理的参后地生态恢复与再利用总体规划、参后地还林与再利用政策的调整、提高参后地生态恢复与再利用的科技含量,以及充分探讨和研究参后地6～10年轮作制的可行性等。

关键词：参后地连作障碍生态恢复再利用模式

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刺五加黑斑病菌生防细菌分离与鉴定

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分子植物育种 2022年

作者：丁艳哲杜立财王铁马锋敏韩忠明王云贺杨利民吉林农业大学中药材学院省部共建生态恢复和生态系统管理国家重点实验室培育基地吉林参王植保科技有限公司吉林查干湖国家级自然保护区管理局

为获得对刺五加黑斑病致病菌细极链格孢(Alternaria tenuissima (Fr) Wiltshire)具有生防作用的菌株，从健康刺五加根际土壤中分离纯化419株细菌；采用平板对峙法，筛选获得14株对细极链格孢抑菌率60%以上的菌株，其中菌株YZ-323的抑菌...

为获得对刺五加黑斑病致病菌细极链格孢(Alternaria tenuissima (Fr) Wiltshire)具有生防作用的菌株，从健康刺五加根际土壤中分离纯化419株细菌；采用平板对峙法，筛选获得14株对细极链格孢抑菌率60%以上的菌株，其中菌株YZ-323的抑菌活性最强，其抑菌率和抑菌带宽分别81.30%和7.58 mm，基于形态学、生理生化特性、16S rDNA及gyrB测序，菌株YZ-323鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。菌株YZ-323对立枯丝核菌Rhizoctonia solani、茄腐皮镰孢菌Fusarium solani等多种病原真菌均具有较好拮抗作用，具有良好的广谱抑菌能力，本研究筛选获得的菌株YZ-323具有良好的生防活性，为生防菌剂的开发奠定了基础。

关键词：

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防风根腐病拮抗真菌的筛选鉴定及生防作用研究

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中国生物防治学报 2022年第5期38卷 1288-1295页

作者：韩忠明孙卓王妍张福军马峰敏罗秋菊杨利民吉林农业大学中药材学院/省部共建生态恢复和生态系统管理国家重点实验室培育基地长春130118 集安市太王镇林业工作站集安134200 吉林查干湖国家级自然保护区管理局松原131111

从防风根际土壤中筛选得到1株对根腐病具有良好防治效果的拮抗菌株MR-47,基于形态学、ITS序列分析方法对菌株MR-47进行鉴定,确定该菌株为桃色顶孢霉Acremonium persicinum(GenBank No OK287149.1)。通过对峙培养、显微镜观察,探究了菌株... 详细信息

从防风根际土壤中筛选得到1株对根腐病具有良好防治效果的拮抗菌株MR-47,基于形态学、ITS序列分析方法对菌株MR-47进行鉴定,确定该菌株为桃色顶孢霉Acremonium persicinum(GenBank No OK287149.1)。通过对峙培养、显微镜观察,探究了菌株MR-47对木贼镰刀菌Fusarium equiseti的抑菌机理;基于盆栽试验,明确菌株MR-47的定殖能力及防病促生效果。结果表明,菌株MR-47对木贼镰刀菌抑菌率达69.26%,病原菌菌丝出现缢缩、膨大、扭曲、畸形等现象;对尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌等多种病原真菌表现出了良好的广谱抑菌活性;在土壤中定殖35 d内,最大定殖量为8.38×10~6 CFU/g,最低为5.57×10~6 CFU/g;MR-47对防风根腐病防效达75.05%。因此,桃色顶孢霉MR-47在防风根腐病的病害管理方面具有较好的开发价值及应用潜力。

关键词：防风桃色顶孢霉木贼镰刀菌生物防治促生作用

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遮荫对东北铁线莲生长、生理特性及质量的影响

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吉林农业大学学报 2021年第3期43卷 303-309页

作者：韩忠明田新张福军王云贺韩梅杨利民吉林农业大学中药材学院省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室培育基地长春130118 德惠市第十九中学长春130325 集安市太王镇林业工作站集安134200

以3年生东北铁线莲为试验材料,设置全光照、30%遮荫2个不同处理,研究遮荫对东北铁线莲株高、茎粗、生物量、保护酶活性、丙二醛(MDA)及齐墩果酸含量的影响,探讨东北铁线莲对不同光照强度的生理响应机制。结果表明:遮荫促进东北铁线莲株... 详细信息

以3年生东北铁线莲为试验材料,设置全光照、30%遮荫2个不同处理,研究遮荫对东北铁线莲株高、茎粗、生物量、保护酶活性、丙二醛(MDA)及齐墩果酸含量的影响,探讨东北铁线莲对不同光照强度的生理响应机制。结果表明:遮荫促进东北铁线莲株高的生长,限制了茎粗生长和生物量积累。遮荫初期,不同处理下超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛含量均呈增加趋势,30%遮荫处理下SOD、POD、CAT 3种酶活性低于全光照处理;全光照条件下,丙二醛(MDA)含量7月20日达到最高值,显著高于遮荫处理。进入8月之后,全光照条件下,SOD酶活性在9月5日出现最高值,CAT酶活性在8月20日达到最高,MDA含量相对比较稳定;而在遮荫条件下,8月20日之后,SOD和CAT酶活性一直下降;而POD酶活性9月5日下降到最低点之后开始上升;9月5日MDA含量最高。7月5日至7月20日东北铁线莲齐墩果酸含量较高,并且与MDA含量呈显著正相关;植物进入生长末期,2种处理东北铁线莲体内齐墩果酸相对比较稳定,但均呈下降趋势。因此,在东北铁线莲栽培过程中,若不采收种子,建议在8月末至9月初进行采收,此时收获的东北铁线莲药材质量较高。

关键词：东北铁线莲遮荫保护酶丙二醛齐墩果酸

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代谢组学在人参研究中的应用进展

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上海中医药杂志 2022年第11期56卷 84-90页

作者：史帧婷刘丽鸽韩梅杨利民吉林农业大学中药材学院省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室吉林长春130118

阐述代谢组学的定义和研究方法。从基源鉴定、生长环境、采收时期、炮制方法、药理活性几方面综述人参的代谢组学研究进展,并归纳总结代谢组学在人参研究中的问题及未来发展方向,为人参的深入研究提供思路。

关键词：人参人参皂苷代谢组学有效成分研究进展中药研究

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发根农杆菌诱导黄芩毛状根的形成与质量研究

发根农杆菌诱导黄芩毛状根的形成与质量研究

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2016首届中国中药资源大会暨CSNR中药及天然药物资源研究专业委员会第十二届学术年会

作者：郭双双程林杨利民韩梅吉林农业大学中药材学院省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室

药用植物在全人类健康的医疗保障中起着极为重要的作用,其次生代谢产物是药材品质,生物活性和临床疗效的物质基础,也是人类药物的重要来源.因此,从分子生物学,植物理学和分子生态学等多学科角度,对药效成分合成,转化和积累的机制进行研... 详细信息

药用植物在全人类健康的医疗保障中起着极为重要的作用,其次生代谢产物是药材品质,生物活性和临床疗效的物质基础,也是人类药物的重要来源.因此,从分子生物学,植物理学和分子生态学等多学科角度,对药效成分合成,转化和积累的机制进行研究,试图阐明其分子机制,对于推动药材质量控制,实现中药材的"安全,有效,稳定,可控"具有重要的意义.黄芩为我国传统大宗药材之一,其主要活性成分为黄酮类化合物,具有多种药理活性,研究其药效成分合成分子机制,对药材质量调控具有重要作用.本文利用发根农杆菌诱导黄芩毛状根及克隆黄芩葡萄糖醛酸水解酶,从而研究不同条件下黄芩毛状根中黄芩苷和黄芩素含量以及葡萄糖醛酸水解酶的表达量,以期为研究黄芩苷生物合成途径和黄芩质量调控提供理论依据.成功诱导出黄芩毛状根,与传统的诱导方法相比有以下两点优势：首先,缩短共培养时间,且共培养后用含500mg/L氨苄西林钠无菌蒸馏水侵泡外植体能很好的清除和抑制外植体表面的发根农杆菌生长.其次,向诱导培养基中加入外源激素,有利于在诱导过程中外植体的存活.从黄芩毛状根中提取总RNA,利用RT-PCR技术克隆了葡萄糖醛酸水解酶基因(β-Glucuronidase gene,sbGUS)的全长(GeneBank登录号KR364726).该基因全长1584bp,含有一个完整的开放阅读框,编码527个氨基酸,为不稳定亲水蛋白.生物信息学分析结果显示sbGUS编码蛋白分子质量为58.7248 kD,等电点pI5.55,含有信号肽和1个跨膜区,具有一个水解酶超级家族结构域一个未整合的转移糖苷酶催化结构域.二级结构中α-螺旋(Alpha helix)占25.62％,延伸链(Extended strand)占28.84％,β-转角(Beta turm)占13.28％,无规卷曲(Random coil)占32.26％.序列比对和系统进化分析表明,sbGUS基因与黄芩(BAA97804.1)核苷酸相似性为98.93％、氨基酸相似性为98.29％,在9个位置氨基酸不同.这为进一步鉴定sbGUS的功能及开展黄芩素的合成生物学研究奠定基础.通过研究不同温度条件下和光照有无对黄芩毛状根中黄芩苷和黄芩素含量sbGUS酶活性及基因表达量三者之间的关系,可以得出几点结论：首先,随着培养温度的升高黄芩苷含量逐渐增加,因此说明培养温度的升高有利于黄芩苷的积累.其次,在黑暗条件下有利于黄芩毛状根中黄芩素的积累,光照条件下有利于黄芩毛状根中黄芩苷的积累.最后,由于sbGUS基因控制黄芩苷向黄芩素转化,因此正常情况下黄芩素的含量与sbGUS酶活性和基因表达量呈正比例关系,而黄芩苷含量与sbGUS酶活性和基因表达量呈反比例关系.

关键词：毛状根生物信息学分析葡萄糖醛酸水解酶黄芩苷

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生态因子对人参皂苷合成关键酶基因表达及皂苷含量的影响

生态因子对人参皂苷合成关键酶基因表达及皂苷含量的影响

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2016首届中国中药资源大会暨CSNR中药及天然药物资源研究专业委员会第十二届学术年会

作者：张涛杨利民韩梅吉林农业大学中药材学院省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室

人参是东北重要的道地性药材,人参皂苷为其主要药效成分,人参皂苷的生物合成受到环境因子和合成途径中关键酶基因的共同调控.由于人参栽培年限长、连作障碍、病虫害严重,很大程度影响了人参产量和质量.野生人参资源又非常稀少,天然资源... 详细信息

人参是东北重要的道地性药材,人参皂苷为其主要药效成分,人参皂苷的生物合成受到环境因子和合成途径中关键酶基因的共同调控.由于人参栽培年限长、连作障碍、病虫害严重,很大程度影响了人参产量和质量.野生人参资源又非常稀少,天然资源受到限制,而传统的的田间种植栽培已经很难满足日益增长的人参市场需求,导致人参资源短缺.为进一步揭示人参皂苷生物合成的生理生态机制,本研究利用分子生物技术手段对人参皂苷生物合成关键酶基因进行克隆、生物信息学分析,利用HPLC法测定不同生长时期人参皂苷含量,Real-time PCR法测定关键酶基因表达量,并分析生态因子与关键酶基因表达量和皂苷含量之间的关系.为阐明人参皂苷生物合成的生理生态机制提供理论依据.主要研究内容如下：1.从人参中克隆出人参皂苷合成途径中下游的CYP716A52v2和CYP716A53v2基因,并对其进行初步生物信息学分析.分析表明：CYP716A52v2基因全长序列为1779 bp,开放式阅读框长1445 bp,起始密码子位于93 bp处,终止密码子位于1523 bp处,编码481个氨基酸.CYP716A53v2基因全长序列为1506 bp,起始密码子位于16 bp,终止密码子位于1423 bp,开放式阅读框长1410bp,编码470个氨基酸.2.以不同生长时期不同组织部位五年生人参为试验材料,对其CYP716A52v2和CYP716A53v2基因的相对表达量进行测定.结果表明：CYP716A52v2基因表达量从展叶期到果后参根生长期逐渐升高,果后参根生长期与展叶期差异最大.CYP716A53v2基因表达量在展叶期相对较低,果后参根生长期达到最高.CYP716A53v2基因表达量从展叶期到红果期茎和叶显著高于根中,而果后参根生长期则显著低于根中.根据试验结果推测单体皂苷Rg1可能在叶中合成,经由茎运输到根部.CYP716A52v2基因在展叶期各组织表达差异不显著,而绿果期到果后参根生长期根中表达量均显著高于其他组织部位.推测可能是由于下游合成途径单体皂苷Ro的后续官能团的修饰是在根中合成.为后续研究人参皂苷合成奠定基础.3.以五年生人参单株根器官为试验材料,测定不同生长时期人参单体皂苷及总皂苷的含量,结果表明：皂苷间存在协同增减趋势,其中单体皂苷Ro与总皂苷之间呈显著负相关.可能与人参皂苷生物合成代谢途径中下游关键酶基因的功能有关,为后续研究生态因子及关键酶基因表达量相关性研究奠定基础.4.对生态因子与基因表达量和皂苷含量进行相关性分析,结果表明：CYP716A52v2基因表达量与平均温度、土壤含水量和单体皂苷Ro呈显著正相关,与Rg1、Re及总皂苷呈现显著的负相关,平均降雨量、相对湿度、日照时数与皂苷含量相关性不显著;随着平均温度和土壤含水量的升高,CYP716A52v2基因表达量随之升高,导致Ro含量上调而Rg1、Re及总皂苷含量下调.CYP716A53v2基因表达量与平均温度呈显著负相关,而与土壤含水量呈现正相关,与Rg1及总皂苷含量显著正相关.随着温度升高CYP716A53 v2基因表达量下调,随着土壤含水量的升高CYP716A53v2基因表达量和Rg1及总皂苷含量上调.土壤含水量和月平均温度对人参皂苷的生物合成影响较大,月平均降雨量、相对湿度、日照时数对人参皂苷的生物合成影响较小.

关键词：实时荧光定量PCR 基因表达量生长时期生态因子相关性

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人参黑斑病拮抗细菌的筛选及鉴定

人参黑斑病拮抗细菌的筛选及鉴定

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第二届中国中药资源大会--纪念李时珍诞辰500周年学术会

作者：孙卓杨利民韩梅吉林农业大学中药材学院省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室长春130118

为明确根际细菌对人参黑斑病的生防价值,从人参根际土壤中分离出128 株菌株,采用平板对峙法筛选出对人参链格孢具有显著抑制作用的菌株SZ-22,通过室外盆栽方法研究其防病能力,并利用形态学、生理生化特征及基因分析手段确立其分类地位....

为明确根际细菌对人参黑斑病的生防价值,从人参根际土壤中分离出128 株菌株,采用平板对峙法筛选出对人参链格孢具有显著抑制作用的菌株SZ-22,通过室外盆栽方法研究其防病能力,并利用形态学、生理生化特征及基因分析手段确立其分类地位.结果显示,SZ-22 发酵滤液对人参链格孢的抑制带宽达14.30 mm.

关键词：

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干旱胁迫对黄芩苷合成代谢的影响

干旱胁迫对黄芩苷合成代谢的影响

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第二届中国中药资源大会--纪念李时珍诞辰500周年学术会

作者：程林杨利民韩梅吉林农业大学中药材学院省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室长春130118

黄芩为中国传统大宗药材,根入药,其主要生物活性成分为黄芩苷等黄酮类化合物,具有多种药理活性。本研究以2年生营养生长期黄芩植株为材料,研究干旱胁迫对黄芩苷次生代谢的影响。结果表明：黄芩苷含量在轻度干旱胁迫下升高显著,随着胁...

黄芩为中国传统大宗药材,根入药,其主要生物活性成分为黄芩苷等黄酮类化合物,具有多种药理活性。本研究以2年生营养生长期黄芩植株为材料,研究干旱胁迫对黄芩苷次生代谢的影响。结果表明：黄芩苷含量在轻度干旱胁迫下升高显著,随着胁迫程度加重黄芩苷含量降低,与此同时,PAL、C4H、4CL 和CHS 等黄芩苷合成途径关键酶活性对干旱胁迫影响模式与黄芩苷积累基本一致。本研究结果证明,在干旱胁迫下,刺激黄芩苷关键酶活性以此增加黄芩中黄芩苷的合成与积累。在实际生产中,避免在长期干旱胁迫后进行采收,建议降雨或灌溉一周后对黄芩进行采收较为合理。

关键词：

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