检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2015年第10期47卷 89-92页

作者：孙凡婷张云张妍李晶刘菲刘杨杜锐吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林农业大学中药材学院/教育部动物生产及产品质量安全重点实验室/吉林省药用动物二级实验室吉林长春130118

为了增强重组卡介苗对牛病毒性腹泻黏膜病的免疫效果,本研究将敲除疏水氨基酸及密码子优化的E0基因与去除了C末端的疏水序列E2截短基因采用重叠延伸PCR的方法进行融合后,将其分别与p MV261/p MV361载体连接,电转化至卡介苗中,构建重组... 详细信息

为了增强重组卡介苗对牛病毒性腹泻黏膜病的免疫效果,本研究将敲除疏水氨基酸及密码子优化的E0基因与去除了C末端的疏水序列E2截短基因采用重叠延伸PCR的方法进行融合后,将其分别与p MV261/p MV361载体连接,电转化至卡介苗中,构建重组卡介苗。45℃热诱导重组卡介苗表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果证明E0-E2融合基因在卡介苗中成功表达,目的蛋白大小为66.5 ku,且具有反应原性。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 E0-E2融合基因重组卡介苗

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水貂阿留申病病毒VP2截短基因的原核表达

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动物医学进展 2015年第4期36卷 15-18页

作者：李晶时坤曾范利宋继伟杜锐吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 吉林市人民医院吉林吉林132001 教育部动物生产及产品质量安全重点实验室吉林省药用动物二级实验室吉林长春130118

为获得水貂阿留申病病毒G株(ADV-G株)VP2截短基因表达的蛋白,将ADV-G株VP2基因的主要抗原区片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,通过不同浓度的IPTG,不同诱导时间以及加入不同的化学分子伴侣(甘油、葡萄糖、蔗糖、二甲基亚砜、乙醇)进... 详细信息

为获得水貂阿留申病病毒G株(ADV-G株)VP2截短基因表达的蛋白,将ADV-G株VP2基因的主要抗原区片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,通过不同浓度的IPTG,不同诱导时间以及加入不同的化学分子伴侣(甘油、葡萄糖、蔗糖、二甲基亚砜、乙醇)进行诱导表达,确定目的蛋白表达的最佳条件。经SDS-PAGE和Western blot分析,表明终浓度为1mmol/L的IPTG诱导6h目的蛋白的表达量最高,分子质量约为53ku。SDS-PAGE分析表明,葡萄糖和乙醇抑制了目的蛋白的表达,而蔗糖、甘油和二甲基亚砜提高了目的蛋白的表达量,获得的目的蛋白具有良好的反应原性。

关键词：水貂阿留申病病毒 VP2截短基因原核表达

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结核分支杆菌Rv3117基因的克隆与原核表达

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动物医学进展 2015年第5期36卷 15-18页

作者：刘杨宋纪伟曾范利时坤李健明杜锐吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林市人民医院吉林吉林132001 吉林农业大学中药材学院吉林长春130118 教育部动物生产及产品质量安全重点实验室吉林省药用动物二级实验室吉林长春130118

以结核分支杆菌H37Rv株染色体DNA为模板,应用Rv3117基因特异性引物对该基因进行PCR扩增,获得约800bp的DNA片段。将PCR纯化产物克隆至pMD-18T Vector中,构建出重组质粒pMD-18T-Rv3117。以EcoRⅠ和SamⅠ双酶切pMD-18T-Rv3117重组载体和pGE... 详细信息

以结核分支杆菌H37Rv株染色体DNA为模板,应用Rv3117基因特异性引物对该基因进行PCR扩增,获得约800bp的DNA片段。将PCR纯化产物克隆至pMD-18T Vector中,构建出重组质粒pMD-18T-Rv3117。以EcoRⅠ和SamⅠ双酶切pMD-18T-Rv3117重组载体和pGEX-4T-1原核表达载体,并将纯化的Rv3117基因亚克隆至pGEX-4T-1中,构建出原核重组表达质粒pGEX-4T-1-Rv3117。将pGEX-4T-1-Rv3117重组质粒转化至感受态*** BL21中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约30ku目的蛋白带。Western blot分析结果显示,该蛋白能与抗结核分支杆菌阳性血清发生特异性反应。研究结果为结核病临床诊断抗原的筛选奠定了基础。

关键词：结核分支杆菌 Rv3117基因克隆原核表达

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评价蛋白质功能性质的指标及应用进展

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黑龙江畜牧兽医 2015年第12期 59-61页

作者：白明昧孙泽威钟荣珍孙会王涛刘飞飞秦贵信吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118 吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 中国科学院东北地理与农业生态研究所长春130012

蛋白质资源作为重要的具有吸引力的食品和饲料原料,主要依靠它的分散性、溶解性、吸水性、吸油性、持水性、持油性、凝胶性、起泡性、乳化性等功能特性。目前,对蛋白质功能特性机理的研究还鲜有报道。文章以有关蛋白质功能特性理论为基... 详细信息

蛋白质资源作为重要的具有吸引力的食品和饲料原料,主要依靠它的分散性、溶解性、吸水性、吸油性、持水性、持油性、凝胶性、起泡性、乳化性等功能特性。目前,对蛋白质功能特性机理的研究还鲜有报道。文章以有关蛋白质功能特性理论为基础,详述了蛋白质功能性质的概念、分类、评定指标及其应用进展。

关键词：蛋白质功能性质概念分类评价指标应用进展

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动物日粮淀粉消化性分析的研究进展

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饲料研究 2015年第20期38卷 14-17,32页

作者：张琳孙泽威王涛刘飞飞王贵富秦贵信吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

淀粉来源不同,颗粒结构、表面特征和组成上存在差异,这些差异对淀粉的消化具有很大影响,就淀粉颗粒的结构特性、非淀粉组分、饲料加工处理方式和动物因素等方面对淀粉消化速率的影响进行综述。

关键词：淀粉结构特性非淀粉组分饲料加工处理方式动物因素淀粉消化率

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母源效应蛋白在基因组印记维持中的作用

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遗传 2014年第10期36卷 959-964页

作者：马馨张胜杨树宝王晓晨朱屹然李子义栾维民吉林农业大学动物科技学院、动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118 吉林大学动物医学学院长春130062

基因组印记是指生殖细胞发生过程中双亲基因组发生差异表观修饰,使带有亲代印记的等位基因出现父源或母源单等位基因表达。在配子发生和早期胚胎发育过程中,基因组印记甲基化经历一个去除、重建和维持的复杂过程。这个过程中的任何环节... 详细信息

基因组印记是指生殖细胞发生过程中双亲基因组发生差异表观修饰,使带有亲代印记的等位基因出现父源或母源单等位基因表达。在配子发生和早期胚胎发育过程中,基因组印记甲基化经历一个去除、重建和维持的复杂过程。这个过程中的任何环节被干扰都将导致印记紊乱,造成胚胎发生、胎盘形成及出生后发育异常。近来研究表明,早期胚胎发育过程中一些母源效应蛋白在印记基因表观调控中起重要作用。为了更好地理解这些母源因子对印记基因建立及维持的作用与机制,文章综述了DPPA3、ZFP57、TRIM28和DNMT1等母源效应因子近年来的相关研究进展,并探讨了这些因子对基因组印记的表观调控机制。

关键词：基因组印记母源调控基因 DNA甲基化植入前胚胎

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鸡嗉囊中部分免疫细胞的分布定位研究

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畜牧兽医学报 2014年第1期45卷 136-141页

作者：李磊冯小刚刘莹 Ernest D.Yeboah 董红艳马金萍栾维民杨树宝吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

旨在应用组织学和免疫组织化学技术,观察鸡嗦囊中的免疫细胞——T淋巴细胞及其亚群、B淋巴细胞、单核细胞和抗原呈递细胞的定位分布与数量情况,在组织和细胞水平上分析鸡嗉囊的免疫功能和建立情况。结果显示:嗉囊的黏膜固有层中分布大... 详细信息

旨在应用组织学和免疫组织化学技术,观察鸡嗦囊中的免疫细胞——T淋巴细胞及其亚群、B淋巴细胞、单核细胞和抗原呈递细胞的定位分布与数量情况,在组织和细胞水平上分析鸡嗉囊的免疫功能和建立情况。结果显示:嗉囊的黏膜固有层中分布大量的淋巴组织,Bu-1b^+细胞主要分布在生发中心中,CD3^+、CD4^+、CD8^+T淋巴细胞较多地分布于弥散的淋巴组织及生发中心周围的滤泡间区域。部分CD3^+、CD8^+细胞和MHC-Ⅱ^+细胞甚至浸润到黏膜上皮与腺上皮中,使其转变为淋巴上皮。Ma^+细胞少量的分布于固有层、黏膜下层及肌层;MHG-Ⅱ^+细胞则分布于整个组织中。研究表明:嗉囊作为鸡饱腹后储存食物的场所,其以固有层黏液腺分泌黏液而起到润湿及软化食物的作用;同时,它具有参与黏膜免疫的组织和细胞基础,是肠道相关淋巴组织(GALT)的重要组成部分。

关键词：嗉囊淋巴上皮定位分布肠相关淋巴组织

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蛋鸡输卵管中肥大细胞发育情况的观察

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中国兽医科学 2014年第11期44卷 1190-1194页

作者：王洋孙播东王晓晨单春兰胡庆花栾维民杨树宝吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

采用甲苯胺蓝染色,观察蛋鸡输卵管中肥大细胞的形态和分布,探究输卵管中肥大细胞的发育规律。结果显示,在56日龄首次观察到输卵管中肥大细胞;随着日龄的增长肥大细胞数目增加,210日龄时达到最大值。肥大细胞主要分布于输卵管的上皮下、... 详细信息

采用甲苯胺蓝染色,观察蛋鸡输卵管中肥大细胞的形态和分布,探究输卵管中肥大细胞的发育规律。结果显示,在56日龄首次观察到输卵管中肥大细胞;随着日龄的增长肥大细胞数目增加,210日龄时达到最大值。肥大细胞主要分布于输卵管的上皮下、黏膜固有层、肌层等部位,具有围绕血管分布的特点。漏斗部中肥大细胞数目最多,峡部最少。结果表明,输卵管中肥大细胞210日龄时达到最大值,较肠道发育晚,这一结果为预防蛋鸡生殖道疾病奠定了理论基础。

关键词：输卵管肥大细胞甲苯胺蓝染色组织化学

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2种复方中药提取物对小鼠乳腺上皮细胞增殖的影响

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中国畜牧杂志 2014年第17期50卷 67-71页

作者：高云航赵是钧赵晗旭王开娄玉杰马红霞吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 吉林农业大学动物生产与产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

研究中药复方提取物对小鼠乳腺上皮细胞增殖的影响,旨在为探明中药复方促进母畜泌乳量的机制提供试验依据。采用混合酶消化法分离成年妊娠中期的ICR小鼠乳腺上皮细胞,通过差酶消化法和相差贴壁法获得纯化后的乳腺上皮细胞,运用SDS-PAGE... 详细信息

研究中药复方提取物对小鼠乳腺上皮细胞增殖的影响,旨在为探明中药复方促进母畜泌乳量的机制提供试验依据。采用混合酶消化法分离成年妊娠中期的ICR小鼠乳腺上皮细胞,通过差酶消化法和相差贴壁法获得纯化后的乳腺上皮细胞,运用SDS-PAGE对纯化后细胞进行分析。使用水煎和醇提2种方法制备中药复方提取液,分别作用于对数生长期的乳腺上皮细胞1、3、5 d,使用MTT法检测细胞活力。结果表明:使用混合酶消化法与差酶消化法和相差贴壁法相结合可得到大量具有酪蛋白分泌功能的乳腺上皮细胞;中药复方提取物在高浓度时对乳腺上皮细胞的增殖有促进作用,在低浓度时对乳腺上皮细胞的增殖有抑制作用;促进作用随时间的增加而降低,抑制作用随时间的增加而增强。醇提的中药复方促进细胞增殖的浓度范围大于水煎的中药复方,而且醇提的中药复方作用效果远好于水煎的中药复方,可能是因为促进乳腺上皮细胞增殖的药物成份为醇溶性。

关键词：中药复方提取物乳腺上皮细胞细胞增殖小鼠

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鹿布鲁菌分型实时荧光定量PCR检测方法的建立

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中国兽医学报 2014年第11期34卷 1783-1789页

作者：郝俊伟时坤曾范利李健明王文玉杨宇航刘红娜张云张秀丽杜锐吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 吉林农业大学中药材学院吉林长春130118 教育部动物生产及产品质量安全重点实验室/吉林省药用动物二级实验室吉林长春130118

鹿布鲁菌病主要是由牛型、羊型和猪型布鲁菌引起的,其他感染型少见,本研究依据布鲁菌的特异性基因BruAB20168、BMEII0466、BR0952上的部分高度保守片段设计猪型、牛型、羊型引物和探针,用于检测并区分鹿源布鲁菌的种型,且优化了反应体系... 详细信息

鹿布鲁菌病主要是由牛型、羊型和猪型布鲁菌引起的,其他感染型少见,本研究依据布鲁菌的特异性基因BruAB20168、BMEII0466、BR0952上的部分高度保守片段设计猪型、牛型、羊型引物和探针,用于检测并区分鹿源布鲁菌的种型,且优化了反应体系,筛选出引物、探针的最优浓度配比。将扩增产物连接到pUC57载体上,制备标准品及标准曲线,建立鹿布氏菌各分型荧光定量PCR检测方法,并对其特异性、稳定性、敏感性进行评价。由标准曲线敏感性可知该方法的最低检测浓度分别可达到12、9、8copies/μL,比常规PCR灵敏度高出很多。

关键词：鹿布鲁菌分型实时荧光定量PCR

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