检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2024年第10期40卷 2219-2222,2228页

作者：孙金梅石春卫杨桂连杨文涛王春凤吉林农业大学动物医学院动物科学技术学院吉林省重点实验室动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

单细胞转录组测序技术是以单个细胞为研究对象,对每个转录本的基因表达水平以及细胞间的异质性进行统计分析,在一定程度上弥补了传统测序技术的缺陷。自身免疫病是自身免疫耐受状态或自身免疫细胞调节异常时所致的自身组织细胞损伤或功... 详细信息

单细胞转录组测序技术是以单个细胞为研究对象,对每个转录本的基因表达水平以及细胞间的异质性进行统计分析,在一定程度上弥补了传统测序技术的缺陷。自身免疫病是自身免疫耐受状态或自身免疫细胞调节异常时所致的自身组织细胞损伤或功能异常。本文综述了近年来关于单细胞转录组测序技术在自身免疫病中应用的研究成果,为尽早实现精准医疗提供有价值的线索。

关键词：单细胞转录组测序自身免疫病研究进展

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猪源植物乳杆菌调节猪肠上皮细胞对鼠伤寒沙门氏菌感染的抑制

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经济动物学报 2023年第3期27卷 189-195页

作者：刘芮含韩永林石彧萌孙安琪汤正旭胡静涛吉林农业大学动物科学技术学院/动物医学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室喀喇沁旗农牧局吉林省科普服务中心

为探究猪源植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）对鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）的防治效果，以仔猪肠道内容物中筛选到的猪源植物乳杆菌LP13为研究对象，将LP13与猪肠上皮细胞（IPEC-J2cell）分别按照细菌数与细胞数比... 详细信息

为探究猪源植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）对鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）的防治效果，以仔猪肠道内容物中筛选到的猪源植物乳杆菌LP13为研究对象，将LP13与猪肠上皮细胞（IPEC-J2cell）分别按照细菌数与细胞数比值（感染复数MOI）为10和100进行体外共培养1 h。通过CCK-8检测LP13对IPEC-J2细胞增殖的影响，流式细胞术检测LP13对IPEC-J2细胞凋亡的影响，利用荧光显微镜和平板计数法评价CFSE标记的LP13对IPEC-J2的黏附效果，并确定LP13与IPEC-J2共培养的最佳比例。添加与LP13相同CFU的鼠伤寒沙门氏菌，通过排斥抑制、置换抑制和竞争抑制试验，进一步明确植物乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌感染的抑制效果。结果显示，LP13对IPEC-J2细胞的增殖与凋亡无显著影响；且在MOI为100时，其对细胞的黏附率更高；在排斥抑制（既预先将LP13于IPEC-J2共培养）时，LP13针对鼠伤寒沙门氏菌对IPEC-J2的黏附和侵袭有一定的抑制作用。试验为植物乳杆菌调节猪肠上皮细胞，预防沙门氏菌感染的研究奠定基础。

关键词：植物乳杆菌鼠伤寒沙门氏菌猪肠上皮细胞细胞增殖细胞凋亡

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抗大口黑鲈(Micropterus salmoides)蛙虹彩病毒药效模型的构建及其抗病毒中药筛选

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海洋与湖沼 2022年第6期53卷 1513-1522页

作者：李秋语黄小红郝贵杰胡大雁张成赛牛晨袁雪梅黄雷于喆姚嘉赟杨桂连姜建湖吉林农业大学动物科学与技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118 浙江省淡水水产研究所农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省鱼类健康与营养重点实验室浙江湖州313001 湖州市农业科技发展中心浙江湖州313001

大口黑鲈蛙虹彩病毒(LMBV)是一种严重危害大口黑鲈养殖的病害,但目前缺乏有效的防控手段。通过研究水温、鱼体大小以及攻毒剂量等条件对大口黑鲈感染蛙虹彩病毒的影响,构建体内抗病毒药效筛选模型,同时利用MTT法构建体外药物筛选模型,... 详细信息

大口黑鲈蛙虹彩病毒(LMBV)是一种严重危害大口黑鲈养殖的病害,但目前缺乏有效的防控手段。通过研究水温、鱼体大小以及攻毒剂量等条件对大口黑鲈感染蛙虹彩病毒的影响,构建体内抗病毒药效筛选模型,同时利用MTT法构建体外药物筛选模型,进而通过体外和体内药效模型,对29种中草药进行抗病毒药效评价,对筛选出药效最佳的2种中药进行体外和体内抗病毒药效评价。结果表明:水温和鱼体大小是影响体内药效模型的2个关键因子,最佳体内药效模型条件为:水温为25℃,鱼体大小20 g,攻毒剂量为0.1 mL 10^(9.33) TCID_(50)/mL。结合体内和体外药效模型结果,筛选出紫花地丁和黄连这2种中药具有较好的抗病毒效果的中草药。体内药效结果表明:黄连和地丁的添加量为0.6 g/kg和1.2 g/kg时,其对大口黑鲈的保护率最高均达到40%,而两者用药后病毒在肝组织的抑制率分别可达71.5%和67.0%。组织病理学结果表明,当药物使用浓度为0.6 g/kg和1.2 g/kg时,可有效降低因大口黑鲈蛙虹彩病毒感染所导致的肝和肾等组织的病理学损伤。上述结果表明,黄连和地丁均具有较好的抗蛙虹彩病毒的作用。

关键词：大口黑鲈(Micropterus salmoides) 蛙虹彩病毒抗病毒模型紫花地丁黄连

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大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

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水产科学 2022年第4期41卷 670-675页

作者：张成赛尹文林李明曹铮蔺凌云潘晓艺沈锦玉王春凤姚嘉赟杨桂连吉林农业大学动物科学与技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118 浙江省淡水水产研究所农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省鱼类健康与营养重点实验室浙江湖州313001 金华市水产技术推广站浙江金华321051

利用饱和硫酸铵盐析法和亲和柱层析法提取制备大口黑鲈血清的免疫球蛋白,进而通过常规方法4次免疫BALB/c小鼠,取脾脏组织细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞进行融合,经杂交瘤细胞筛选和单克隆化细胞培养制备单克隆抗体,并利用酶联免疫吸附法测... 详细信息

利用饱和硫酸铵盐析法和亲和柱层析法提取制备大口黑鲈血清的免疫球蛋白,进而通过常规方法4次免疫BALB/c小鼠,取脾脏组织细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞进行融合,经杂交瘤细胞筛选和单克隆化细胞培养制备单克隆抗体,并利用酶联免疫吸附法测定其抗体效价、灵敏度以及特异性反应。制备甲醛灭活大口黑鲈虹彩病毒疫苗进而免疫大口黑鲈,利用制备的单克隆抗体检测免疫后的抗体水平。制备获得2株大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞A9E7和C9B9,其腹水抗体效价可达1∶2.187×10^(6)和1∶7.29×10^(5),两者对大口黑鲈免疫球蛋白的灵敏度为20ng和10ng,交叉反应试验结果表明,A9E7和C9B9均能与大口黑鲈免疫球蛋白特异性结合,A9E7与花鲈血清可发生交叉反应,而C9B9可与鳜血清发生交叉反应,且两者与鲫、草鱼、团头鲂、翘嘴鲌、黄颡鱼、光唇鱼、黄鳝、泥鳅等血清免疫球蛋白无交叉反应。免疫大口黑鲈虹彩病毒后,大口黑鲈体内抗体水平显著增加并于35d时达到峰值,其抗体效价可达1∶1280。具有特异性强、灵敏度高的大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体可用于大口黑鲈病害的早期病害监测、免疫应答规律研究和疫苗研发。

关键词：大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体抗体效价

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轮状病毒NSP1和NSP3蛋白真核表达载体构建、表达及其调控Ⅰ型干扰素信号通路的功能

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西南农业学报 2022年第2期35卷 469-474页

作者：李凤迪王嘉瑞刘新宇黄海岩叶丽萍曾艳曹欣西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室兰州730030 西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730030 吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心长春130118

【目的】旨在构建轮状病毒(Rotavirus,RV)非结构蛋白1(NSP1)和3(NSP3)真核表达载体,并在人胚肾上皮HEK239T细胞中表达,随后研究轮状病毒NSP1和NSP3在体外初步影响IFN-β/ISRE报告基因活性。【方法】首先合成猿轮状病毒SA11株NSP1、NSP3... 详细信息

【目的】旨在构建轮状病毒(Rotavirus,RV)非结构蛋白1(NSP1)和3(NSP3)真核表达载体,并在人胚肾上皮HEK239T细胞中表达,随后研究轮状病毒NSP1和NSP3在体外初步影响IFN-β/ISRE报告基因活性。【方法】首先合成猿轮状病毒SA11株NSP1、NSP3编码基因连接到克隆载体pUCm-T上,通过PCR技术扩增目的片段,再以真核表达载体pRK-Flag、pRK-HA为骨架构建出可特异性表达重组蛋白pRK-Flag-NSP1/pRK-HA-NSP1、pRK-Flag-NSP3/pRK-HA-NSP3的真核表达质粒,经酶切及测序鉴定正确后将质粒转染到HEK293T细胞中,通过Western blot鉴定NSP1/NSP3蛋白的表达。随后,将重组质粒pRK-Flag-NSP1/pRK-Flag-NSP3与IFN-β-Luc/ISRE-Luc质粒共转染至HEK239T细胞,经RIG-IN(RIG-I活化结构域)的刺激后利用双荧光素酶报告基因系统判定NSP1/NSP3蛋白对IFN-β/ISRE报告基因活性的影响。【结果】成功克隆了NSP1和NSP3全长基因,构建了猿轮状病毒SA11株NSP1、NSP3蛋白真核表达质粒pRK-Flag-NSP1/pRK-HA-NSP1、pRK-Flag-NSP3/pRK-HA-NSP3,并在HEK293T细胞中转染表达,Western blot确定了NSP1和NSP3蛋白成功表达。重组质粒pRK-Flag-NSP1和pRK-Flag-NSP3可显著降低RIG-IN诱导的双荧光素酶活性。【结论】NSP1和NSP3蛋白可抑制RIG-IN刺激的IFN-β和ISRE启动子活性,证明NSP3蛋白和已报道的NSP1蛋白一样具有抑制IFN-β信号通路的功能,为深入研究NSP3蛋白调控Ⅰ型干扰素信号通路的作用机制奠定理论基础。

关键词：轮状病毒 NSP3蛋白真核表达双荧光素酶报告基因 Ⅰ型干扰素

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功能性重组乳杆菌NC8-RLP对HUVEC细胞氧化应激损伤的抑制作用

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中国兽医科学 2020年第3期50卷 353-359页

作者：郝明月杨桂连王冠王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118

为探究功能性重组乳杆菌NC8-RLP在缓解细胞内氧化应激损伤中的作用,首先构建氧化应激细胞模型,使用不同浓度的NC8-RLP作用细胞模型,通过MTT方法检测细胞的存活率和NC8-RLP毒性作用,观察细胞形态的变化;检测细胞模型内ROS含量的变化;采用... 详细信息

为探究功能性重组乳杆菌NC8-RLP在缓解细胞内氧化应激损伤中的作用,首先构建氧化应激细胞模型,使用不同浓度的NC8-RLP作用细胞模型,通过MTT方法检测细胞的存活率和NC8-RLP毒性作用,观察细胞形态的变化;检测细胞模型内ROS含量的变化;采用Western-boltting检测NOX2、iNOS、Nrf2蛋白表达的情况。结果显示,成功建立氧化应激细胞模型OS-HUVEC,MTT结果发现NC8-RLP对HUVEC细胞无毒性作用,且具有一定的促进细胞增殖作用,同时可减少OS-HUVEC细胞凋亡。当NC8-RLP保护OS-HUVEC模型2 h后,细胞内的ROS含量降低,iNOS、NOX2蛋白表达量与阳性对照组相比明显减少,Nrf2蛋白表达量增加。说明NC8-RLP对缓解细胞内氧化应激损伤作用有很好的调控作用。

关键词：植物乳杆菌氧化应激人脐静脉血管内皮细胞活性氧

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乳酸菌缓解氧化应激的潜在作用及机制研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2020年第3期 44-47页

作者：王明玥王冠杨桂连赵权吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心长春130118

氧化应激是引起机体发生疾病的重要因素之一。动物经长途运输或其他外界因素刺激引起动物机体氧化应激,导致动物出现脓血症、肠炎等疾病。在研究氧化应激引起的疾病中,益生菌以潜在的天然抗氧化剂为预防和治疗不同疾病提供新的途径,因... 详细信息

氧化应激是引起机体发生疾病的重要因素之一。动物经长途运输或其他外界因素刺激引起动物机体氧化应激,导致动物出现脓血症、肠炎等疾病。在研究氧化应激引起的疾病中,益生菌以潜在的天然抗氧化剂为预防和治疗不同疾病提供新的途径,因此用天然抗氧化剂来缓解因氧化应激引发的各种疾病成为近几年国内外学者研究的热点。文章综述了目前国内外对乳酸菌缓解氧化应激的研究现状,乳酸菌对氧化应激的潜在缓解作用以及其发挥的抗氧化功能,并对其发展趋势进行了展望。

关键词：氧化应激乳酸菌抗氧化剂益生菌抗氧化功能

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猪源粪肠球菌的分离与鉴定

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动物医学进展 2020年第9期41卷 123-127页

作者：石春卫谢静杨桂连王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118

从新鲜仔猪粪便中分离益生菌,筛选出适合养猪生产的益生菌株,为进一步开发猪用微生态制剂奠定基础。采集长春市双阳地区某猪场健康仔猪新鲜粪便,分离纯化粪肠球菌,通过形态学观察、体外耐酸耐胆盐性能和抑菌能力试验,筛选出益生特性的... 详细信息

从新鲜仔猪粪便中分离益生菌,筛选出适合养猪生产的益生菌株,为进一步开发猪用微生态制剂奠定基础。采集长春市双阳地区某猪场健康仔猪新鲜粪便,分离纯化粪肠球菌,通过形态学观察、体外耐酸耐胆盐性能和抑菌能力试验,筛选出益生特性的候选菌株,16S rDNA序列分析方法鉴定其种属,并对候选菌株生长情况及其对抗菌药物敏感性进行评价。成功筛选出2株(S-50、和S-4)耐酸、耐胆盐和抑菌能力较强的粪肠球菌,且具有较好的生长性能,为研发微生态制剂提了供理论依据。

关键词：仔猪粪肠球菌分离鉴定

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黄芪多糖和灭活H9N2亚型禽流感病毒对C57BL/6小鼠外周血T、B淋巴细胞影响的研究

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黑龙江畜牧兽医 2020年第3期 12-16页

作者：于潼杨文涛黄雨琳杨桂连石春卫吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 吉林省动物微生态制剂工程研究中心长春130118

为了评价黄芪多糖作为疫苗佐剂的潜力,试验用黄芪多糖和灭活的H9N2亚型禽流感病毒免疫C57BL/6小鼠,将20只小鼠均分为4组,第1组为黄芪多糖组(免疫黄芪多糖),第2组为灭活H9N2亚型禽流感病毒组(免疫灭活H9N2亚型禽流感病毒),第3组为混合组... 详细信息

为了评价黄芪多糖作为疫苗佐剂的潜力,试验用黄芪多糖和灭活的H9N2亚型禽流感病毒免疫C57BL/6小鼠,将20只小鼠均分为4组,第1组为黄芪多糖组(免疫黄芪多糖),第2组为灭活H9N2亚型禽流感病毒组(免疫灭活H9N2亚型禽流感病毒),第3组为混合组(免疫黄芪多糖和灭活H9N2亚型禽流感病毒),第4组为生理盐水组(注射生理盐水),通过淋巴细胞增殖试验和流式细胞术对C57BL/6小鼠外周血淋巴细胞的增殖反应、B淋巴细胞和T淋巴细胞的变化及T淋巴细胞亚群比值变化进行研究。结果表明:混合组对小鼠外周血淋巴细胞的增殖有促进作用,可以提高小鼠外周血B淋巴细胞和CD^+_3CD^+_4T淋巴细胞亚群比例,并对小鼠外周血T淋巴细胞亚群有调节作用。说明灭活H9N2亚型禽流感病毒与黄芪多糖混合时具有协同作用。

关键词：黄芪多糖禽流感病毒外周血增殖 T淋巴细胞 B淋巴细胞

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细菌样颗粒——新型乳酸菌表面展示技术及其应用

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微生物学报 2019年第3期59卷 411-419页

作者：王建忠赵建伟王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118

细菌样颗粒(Bacterium-like particles,BLPs)是一种新型非遗传修饰型乳酸菌表面展示技术,外源蛋白可通过锚钩蛋白锚定于经热酸处理而得的乳酸菌肽聚糖骨架表面,形成空心表面展示颗粒。因其安全性高、表面展示密度大、黏膜递送效率高,又... 详细信息

细菌样颗粒(Bacterium-like particles,BLPs)是一种新型非遗传修饰型乳酸菌表面展示技术,外源蛋白可通过锚钩蛋白锚定于经热酸处理而得的乳酸菌肽聚糖骨架表面,形成空心表面展示颗粒。因其安全性高、表面展示密度大、黏膜递送效率高,又兼有佐剂效应,BLPs广泛应用于黏膜疫苗和黏膜佐剂的开发、病毒抗原的纯化、生物催化剂的制备等领域。本文就BLPs的构建、独特优势、目前的应用及尚需解决的问题等方面进行详细综述,以期展现BLPs新型表面展示平台的广阔应用前景。

关键词：细菌样颗粒表面展示技术乳酸菌

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