检索结果-内蒙古大学图书馆

2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：王梅梅马红霞吉林农业大学生命科学学院长春130118 吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

[目的]大肠杆菌诱导家蝇幼虫SSH文库筛选得到家蝇防御素基因，通过BLASTn软件分析显示，其与家蝇防御素mRNA全序列(AY260152.1)相似性为91％，与家蝇防御素前体mRNA序列(EF175879.1)相似性为93％，进一步对该基因进行cDNA和全长基因的... 详细信息

[目的]大肠杆菌诱导家蝇幼虫SSH文库筛选得到家蝇防御素基因，通过BLASTn软件分析显示，其与家蝇防御素mRNA全序列(AY260152.1)相似性为91％，与家蝇防御素前体mRNA序列(EF175879.1)相似性为93％，进一步对该基因进行cDNA和全长基因的克隆，并在大肠杆菌中表达，为研究该蛋白的生物学、免疫学活性奠定基础.[方法]：利用RACE技术获取家蝇防御素基因的全长序列，设计特异性引物，通过PCR方法对该基因进行扩增，以pET-32a(+)为载体构建重组质粒，并转化到表达宿主菌大肠杆菌BL21中，经异丙基-3-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达，用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对表达产物进行分析.[结果]：获得目的片段大小327bp的家蝇抗菌肽防御素基因，经双酶切鉴定及DNA测序结果显示，目的基因已成功连接到表达载体pET-32a(+)上，经SDS-PAGE分析，重组蛋白在大肠杆菌BL21中表达，蛋白大小约为30KDa.[结论]：扩增出了家蝇防御素全长基因，并成功构建重组蛋白表达系统.融合蛋白以包涵体形式在大肠杆菌BL21中表达.

关键词：家蝇抗菌肽防御素基因克隆原核表达

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大豆凝集素的分离纯化及活性鉴定

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吉林大学学报（理学版） 2012年第5期50卷 1041-1044页

作者：车东升刘飞飞穆成龙张海全孙泽威秦贵信吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室动物科学技术学院长春130118

以D-半乳糖胺为配基、FF-sepharose 4B为固定相,制备大豆凝集素亲和层析填料.分离和纯化大豆中的大豆凝集素蛋白,测定其纯度、免疫原性和凝集活性,并与美国Sigma公司的标准品比较.结果表明:每毫升GalN-FF-Sepharose-4B层析填料能结合10... 详细信息

以D-半乳糖胺为配基、FF-sepharose 4B为固定相,制备大豆凝集素亲和层析填料.分离和纯化大豆中的大豆凝集素蛋白,测定其纯度、免疫原性和凝集活性,并与美国Sigma公司的标准品比较.结果表明:每毫升GalN-FF-Sepharose-4B层析填料能结合10 mg大豆凝集素;纯化获得的大豆凝集素分子量为30 000;SDS-PAGE测定纯度大于98%;Western blot结果为阳性;1 mg/mL SBA血集效价为1/210;其纯度、免疫原性和凝集活性等指标与大豆凝集素标准品相同,与理论值相符.

关键词：大豆凝集素纯化亲和层析

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体外培养猪小肠上皮细胞大豆凝集素结合位点的标记

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畜牧兽医学报 2012年第5期43卷 735-739页

作者：车东升穆成龙刘飞飞张海全孙泽威秦贵信动物生产及产品质量安全教育部重点实验室(吉林农业大学) 长春130118 吉林农业大学动物科学技术学院长春130118

本研究旨在获得体外培养状态下的猪小肠上皮细胞,研究猪小肠上皮细胞与大豆凝集素的结合情况。选取新生未哺乳健康仔猪,取小肠组织对小肠上皮细胞进行分离培养,并进行纯化。纯化后的细胞以角蛋白抗体-8为一抗进行细胞免疫化学试验鉴定,... 详细信息

本研究旨在获得体外培养状态下的猪小肠上皮细胞,研究猪小肠上皮细胞与大豆凝集素的结合情况。选取新生未哺乳健康仔猪,取小肠组织对小肠上皮细胞进行分离培养,并进行纯化。纯化后的细胞以角蛋白抗体-8为一抗进行细胞免疫化学试验鉴定,鉴定后的猪小肠上皮细胞以FITC-SBA为探针进行细胞凝集素荧光标记化学试验,对猪小肠上皮细胞大豆凝集素结合位点进行标记。结果表明:试验分离纯化的细胞经角蛋白抗体-8鉴定为阳性,所分离纯化的细胞为猪小肠上皮细胞,经检测其纯度达90%以上,猪小肠上皮细胞FITC-SBA标记结果为阳性。体外培养的猪小肠上皮细胞表面存在大量的大豆凝集素结合位点,进一步明确了猪小肠上皮细胞是大豆凝集素结合的主要细胞类型之一,为单胃动物大豆凝集素抗营养机制研究提供理论依据。

关键词：大豆凝集素猪小肠上皮细胞荧光标记

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Glycinin在不同食性鱼类肠道分布规律的比较

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吉林农业大学学报 2012年第4期34卷 437-442页

作者：赵晗吴莉芳秦贵信赵元鲍男王洪鹤吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

以草鱼(Cyprinus idellus)、鲤鱼(***)和埃及胡子鲇(***)幼鱼为试验对象,添加鱼粉组为对照组,添加6%提纯的大豆球蛋白(Glycinin)组为试验组,设计成2种等氮(草鱼30.06%,鲤鱼36.02%,埃及胡子鲇40.05%)、等能(草鱼16.15 MJ/kg,鲤鱼15.26 MJ... 详细信息

以草鱼(Cyprinus idellus)、鲤鱼(***)和埃及胡子鲇(***)幼鱼为试验对象,添加鱼粉组为对照组,添加6%提纯的大豆球蛋白(Glycinin)组为试验组,设计成2种等氮(草鱼30.06%,鲤鱼36.02%,埃及胡子鲇40.05%)、等能(草鱼16.15 MJ/kg,鲤鱼15.26 MJ/kg,埃及胡子鲇15.86 MJ/kg)的半精制饲料。饲养6周后,解剖鱼体,迅速固定肠道的前、中、后段,制作肠道组织切片。用免疫组织化学方法染色、Olympus显微镜采集图像、Image pro-plus 6.0分析图像中的累积光密度。结果表明:Glycinin在草鱼前肠累积光密度显著高于中肠(P<0.05),与后肠差异不显著(P>0.05);鲤鱼前肠累积光密度显著高于中肠(P<0.05),后肠累积光密度极显著高于中肠(P<0.01),前肠与后肠差异不显著(P>0.05);埃及胡子鲇中肠累积光密度显著高于前肠(P<0.05),后肠与前肠、中肠差异均不显著(P>0.05)。Glycinin在草食性和杂食性鱼类前、中、后肠分布规律呈先下降后上升的趋势,肉食性鱼类前、中、后肠分布规律呈先上升后下降的趋势;草食性、杂食性、肉食性鱼类同一部位的Glycinin的含量呈现逐渐升高的趋势。

关键词：大豆球蛋白草鱼鲤鱼埃及胡子鲇分布规律累积光密度

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鹅皮肤BMP4基因mRNA表达研究

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吉林农业大学学报 2012年第3期34卷 334-338页

作者：杨童奥吴伟牟玉婷吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

采用荧光定量PCR方法研究BMP4基因mRNA在吉林白鹅胚胎期和生后期皮肤中表达变化规律,并采集21~29胚龄胎毛及40~130日龄鹅背部羽毛,观察羽毛生长发育规律及羽毛分支。结果表明：BMP4基因mRNA在鹅皮肤毛囊发育的整个过程中都有表达,胚胎期... 详细信息

采用荧光定量PCR方法研究BMP4基因mRNA在吉林白鹅胚胎期和生后期皮肤中表达变化规律,并采集21~29胚龄胎毛及40~130日龄鹅背部羽毛,观察羽毛生长发育规律及羽毛分支。结果表明：BMP4基因mRNA在鹅皮肤毛囊发育的整个过程中都有表达,胚胎期21~29胚龄表达量相对较低,40~70日龄时,鹅背部皮肤中BMP4mRNA表达量呈线性快速增加,在70日龄时BMP4mRNA相对表达量为2.575,是40日龄时相对表达量0.931的2.77倍,70~90日龄BMP4mRNA表达量有所下降,90~130日龄表达量呈线性快速增加,BMP4相对表达量在130日龄时达到了4.943,是40日龄时的5.31倍,是90日龄时相对表达量1.814的2.73倍。羽毛的长和直径以及羽小枝长和直径增长速度在90日龄后减慢,呈平稳增长状态。可见,BMP4基因在鹅羽毛快速发育时期低表达,在羽毛发育速度较慢的时期高表达,且在片羽分支阶段高表达,可能与羽毛分支有一定关系。

关键词：鹅胚胎期生后期 BMP4 基因表达

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大豆凝集素单克隆抗体的制备及鉴定

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中国畜牧兽医 2012年第9期39卷 79-82页

作者：张海全车东升刘飞飞穆成龙谷琳琳孙泽威秦贵信吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

为获得分泌抗大豆凝集素(SBA)单克隆抗体的杂交瘤细胞,以纯化的SBA为抗原,免疫BALB/c小鼠,加强免疫3d后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,应用有限稀释法和间接ELISA方法克隆筛选出2株分泌抗SBA单克隆抗体的杂交瘤细胞系A7、F12。... 详细信息

为获得分泌抗大豆凝集素(SBA)单克隆抗体的杂交瘤细胞,以纯化的SBA为抗原,免疫BALB/c小鼠,加强免疫3d后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,应用有限稀释法和间接ELISA方法克隆筛选出2株分泌抗SBA单克隆抗体的杂交瘤细胞系A7、F12。细胞上清抗体效价均在1∶2×103以上,腹水抗体效价均为1∶1×106,单抗亚型鉴定结果均为IgG2b型,分子质量为189.6ku,亲和常数为7.1×107 mol/L,Western blotting结果表明,2株单抗具有较高的特异性。该McAb的制备为建立SBA定量检测方法奠定了基础。

关键词：大豆凝集素单克隆抗体制备鉴定

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宰前短期添加镁对PIC育肥猪肉色和pH值的影响

引用

饲料工业 2012年第16期33卷 42-45页

作者：谷琳琳姜海龙张海全秦贵信吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室.吉林长春130118 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

试验研究了宰前短期添加不同剂量镁对PIC育肥猪肉质的影响。试验以PIC育肥猪为研究对象,共分4个处理,每个处理4头。分别在限饲基础日粮基础上每日补饲0、2、4、6 g镁。结果表明:每头添加镁2 g/d有提高色素含量趋势(P>0.05),添加4 g/... 详细信息

试验研究了宰前短期添加不同剂量镁对PIC育肥猪肉质的影响。试验以PIC育肥猪为研究对象,共分4个处理,每个处理4头。分别在限饲基础日粮基础上每日补饲0、2、4、6 g镁。结果表明:每头添加镁2 g/d有提高色素含量趋势(P>0.05),添加4 g/d可极显著提高肌肉色素含量7.41%(P<0.01),添加6 g/d显著提高肌肉色素含量(P<0.05);肉色评分随添加剂量的增加而提高,2 g/d可以显著提高肉色评分(P<0.05),4、6 g/d可极显著提高肉色评分(P<0.01);随镁添加量的增加,肌肉pH值显著提高(P<0.05),6 g/d添加组与对照组相比较差异极显著(P<0.01)。宰前5 d补镁可增加肉色,显著提高肌肉pH值,改善猪肉品质。

关键词：猪肉肉色 pH值

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大豆抗原蛋白β-伴大豆球蛋白抗酶解肽的分离纯化及其免疫活性鉴定

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中国畜牧杂志 2012年第23期48卷 53-56页

作者：王俊潘丽赵元鲍男秦贵信吉林农业大学动物科学技术学院动物生产及产品质量安全省部共建教育部重点实验室吉林长春130118

β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)是引起动物过敏反应的主要致敏原之一,经消化酶降解后仍存在具有免疫活性的抗酶解物质,目前它对动物的致敏机理和强度还没有确切定论。试验旨在分离纯化出β-伴大豆球蛋白抗酶解肽,为后续的体外试验提... 详细信息

β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)是引起动物过敏反应的主要致敏原之一,经消化酶降解后仍存在具有免疫活性的抗酶解物质,目前它对动物的致敏机理和强度还没有确切定论。试验旨在分离纯化出β-伴大豆球蛋白抗酶解肽,为后续的体外试验提供刺激源,从而为研究抗酶解肽对机体的致敏作用及机制提供必要的条件。试验通过模拟体外环境,利用胃蛋白酶、胰蛋白酶消化β-伴大豆球蛋白,分析β-伴大豆球蛋白中主要的抗酶解肽段,并用β-伴大豆球蛋白致敏的兔血清免疫印迹试验检测抗酶解肽段的免疫活性,利用凝胶层析技术分离纯化β-伴大豆球蛋白抗酶解肽。结果表明:β-伴大豆球蛋白在胃蛋白酶、胰蛋白酶的连续消化下产生大量抗酶解的肽段,其中有3条主要的抗酶解肽段,分子量分别约为52、30、25 ku。52 ku含量相对较高,且均具有免疫活性。酶解产物经葡聚糖G-100凝胶层析分离纯化后,得到分子量为52 ku的抗酶解肽段纯品。

关键词： β-伴大豆球蛋白抗酶解肽段免疫鉴定分离纯化

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猪小肠大豆凝集素糖基化模式的研究

猪小肠大豆凝集素糖基化模式的研究

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中国畜牧兽医学会养猪学分会五届三次理事会暨生猪产业科技创新发展论坛

作者：车东升穆成龙刘飞飞张海全孙泽威秦贵信吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林农业大学动物科学技术学院

本实验利用凝集素组织化学技术以生物素标记的SBA探针对猪的十二指肠、空肠前段、空肠中段、空肠后段、回肠等各段糖基组成进行了刻画,并对部位和细胞类型的糖基化进行了比较。结果表明:生物素标记的SBA、WGA、ConA、RCA、UEA与猪的肠... 详细信息

本实验利用凝集素组织化学技术以生物素标记的SBA探针对猪的十二指肠、空肠前段、空肠中段、空肠后段、回肠等各段糖基组成进行了刻画,并对部位和细胞类型的糖基化进行了比较。结果表明:生物素标记的SBA、WGA、ConA、RCA、UEA与猪的肠道组织都有结合。凝集素结合的细胞类型主要为杯状细胞、柱状上皮细胞和少量淋巴细胞。

关键词：猪糖基化凝集素组织化学凝集素

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宰前添加镁对猪肉品质及其抗氧化机能的影响

宰前添加镁对猪肉品质及其抗氧化机能的影响

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中国畜牧兽医学会养猪学分会五届三次理事会暨生猪产业科技创新发展论坛

作者：谷琳琳姜海龙张海全秦贵信吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林农业大学动物科学技术学院

(目的)试验研究了宰前短期添加不同剂量天冬氨酸镁对育肥猪肉质及肌肉抗氧化力的影响。(方法)试验以PIC育肥猪为研究对象,共分5个处理,每个处理5头。分别在限饲基础日粮基础上每日补饲0、2、4、6、8g镁。(结果)结果发现宰前添加镁可有... 详细信息

(目的)试验研究了宰前短期添加不同剂量天冬氨酸镁对育肥猪肉质及肌肉抗氧化力的影响。(方法)试验以PIC育肥猪为研究对象,共分5个处理,每个处理5头。分别在限饲基础日粮基础上每日补饲0、2、4、6、8g镁。(结果)结果发现宰前添加镁可有效改善肉色,提高新鲜猪肉肉的评分7.95～27.20%,并显著提高24 h肌肉色素OD值(P<0.05);可以极显著提高肌肉初始PH(p<0.01),显著提高肌肉最终pH值(P<0.05)。宰前添加镁可有效改善肌肉的抗氧化机能,显著提高肌肉的T-AOC(P<0.05),并显著提高肌肉CTA活性和显著降低MDA含量(P<0.05)。(结论)试验结果表明宰前添加镁可以提高猪肉品质,并改善肌肉组织抗氧化机能。

关键词：猪肉色 pH 抗氧化力

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