检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2024年第10期40卷 2219-2222,2228页

作者：孙金梅石春卫杨桂连杨文涛王春凤吉林农业大学动物医学院动物科学技术学院吉林省重点实验室动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

单细胞转录组测序技术是以单个细胞为研究对象,对每个转录本的基因表达水平以及细胞间的异质性进行统计分析,在一定程度上弥补了传统测序技术的缺陷。自身免疫病是自身免疫耐受状态或自身免疫细胞调节异常时所致的自身组织细胞损伤或功... 详细信息

单细胞转录组测序技术是以单个细胞为研究对象,对每个转录本的基因表达水平以及细胞间的异质性进行统计分析,在一定程度上弥补了传统测序技术的缺陷。自身免疫病是自身免疫耐受状态或自身免疫细胞调节异常时所致的自身组织细胞损伤或功能异常。本文综述了近年来关于单细胞转录组测序技术在自身免疫病中应用的研究成果,为尽早实现精准医疗提供有价值的线索。

关键词：单细胞转录组测序自身免疫病研究进展

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猪源植物乳杆菌调节猪肠上皮细胞对鼠伤寒沙门氏菌感染的抑制

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经济动物学报 2023年第3期27卷 189-195页

作者：刘芮含韩永林石彧萌孙安琪汤正旭胡静涛吉林农业大学动物科学技术学院/动物医学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室喀喇沁旗农牧局吉林省科普服务中心

为探究猪源植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）对鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）的防治效果，以仔猪肠道内容物中筛选到的猪源植物乳杆菌LP13为研究对象，将LP13与猪肠上皮细胞（IPEC-J2cell）分别按照细菌数与细胞数比... 详细信息

为探究猪源植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）对鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）的防治效果，以仔猪肠道内容物中筛选到的猪源植物乳杆菌LP13为研究对象，将LP13与猪肠上皮细胞（IPEC-J2cell）分别按照细菌数与细胞数比值（感染复数MOI）为10和100进行体外共培养1 h。通过CCK-8检测LP13对IPEC-J2细胞增殖的影响，流式细胞术检测LP13对IPEC-J2细胞凋亡的影响，利用荧光显微镜和平板计数法评价CFSE标记的LP13对IPEC-J2的黏附效果，并确定LP13与IPEC-J2共培养的最佳比例。添加与LP13相同CFU的鼠伤寒沙门氏菌，通过排斥抑制、置换抑制和竞争抑制试验，进一步明确植物乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌感染的抑制效果。结果显示，LP13对IPEC-J2细胞的增殖与凋亡无显著影响；且在MOI为100时，其对细胞的黏附率更高；在排斥抑制（既预先将LP13于IPEC-J2共培养）时，LP13针对鼠伤寒沙门氏菌对IPEC-J2的黏附和侵袭有一定的抑制作用。试验为植物乳杆菌调节猪肠上皮细胞，预防沙门氏菌感染的研究奠定基础。

关键词：植物乳杆菌鼠伤寒沙门氏菌猪肠上皮细胞细胞增殖细胞凋亡

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表面展示基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白胞外区细菌样颗粒的构建与鉴定

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中国兽医学报 2020年第12期40卷 2298-2304页

作者：赵建伟姜昊妍杨锐张舒博王建忠王春凤吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为了构建及鉴定表面展示新城疫病毒F蛋白胞外区细菌样颗粒。首先应用RT-RCR和PCR技术分别扩增F蛋白胞外区编码基因片段和乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)基因片段,通过融合技术将F蛋白胞外区编码基因与PA基因融合,然后利用... 详细信息

为了构建及鉴定表面展示新城疫病毒F蛋白胞外区细菌样颗粒。首先应用RT-RCR和PCR技术分别扩增F蛋白胞外区编码基因片段和乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)基因片段,通过融合技术将F蛋白胞外区编码基因与PA基因融合,然后利用pET-30a(+)质粒构建重组原核表达质粒,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,获得目的蛋白;用热酸处理乳酸乳球菌获得裸露的细菌样颗粒(BLPs),通过透射电镜进行鉴定;最后将复性后的F-PA蛋白与BLPs颗粒结合,经过SDS-PAGE、Western blot、细菌间接免疫荧光进行结合鉴定,并分析其结合效果灰度值判断其结合效率。结果显示,目的蛋白均能正确表达,成功制备出裸露的BLPs,目的蛋白复性后可与BLPs进行结合,其结合效率为1 U的BLPs与130 μg的F-PA蛋白结合。成功构建出表面展示基因Ⅶ新城疫病毒F蛋白胞外区BLPs,为后续研究新城疫亚单位黏膜疫苗奠定了基础。

关键词：基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白细菌样颗粒亚单位疫苗

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3种乳酸菌菌株防御鼠伤寒沙门菌感染的比较

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动物医学进展 2020年第12期41卷 7-12页

作者：廖野段冰洁陈晓雷刘芮含胡静涛王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林农业大学吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118 吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

对植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和鼠李糖乳杆菌防御鼠伤寒沙门菌作用进行了比较研究。通过将此3株乳酸菌菌株灌胃SPF级C57BL/6小鼠后,感染鼠伤寒沙门菌,通过监测小鼠体重及存活率、肠道病理组织学观察、沙门菌器官荷菌数及肠黏膜SIgA的分... 详细信息

对植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和鼠李糖乳杆菌防御鼠伤寒沙门菌作用进行了比较研究。通过将此3株乳酸菌菌株灌胃SPF级C57BL/6小鼠后,感染鼠伤寒沙门菌,通过监测小鼠体重及存活率、肠道病理组织学观察、沙门菌器官荷菌数及肠黏膜SIgA的分泌初步评价其抗沙门菌效应;利用Illumina MiSeq测序平台对小鼠盲肠菌群多样性进行高通量测序分析。结果显示,植物乳杆菌与鼠李糖乳杆菌干预后,均能抑制沙门菌引起的小鼠体重下降,提高小鼠存活率,缓解沙门菌引起的肠道损伤,抑制沙门菌向肝脏、脾脏及肠系膜淋巴结的侵袭;植物乳杆菌的作用效果更为显著;菌群多样性分析表明,植物乳杆菌与鼠李糖乳杆菌均能明显改善沙门菌感染后引起的菌群紊乱,恢复厚壁菌门、拟杆菌门等优势菌群与变形菌门之间的平衡,且能够显著提高厚壁菌门中乳酸杆菌属、毛螺旋菌属等有益菌数量,降低变形菌门中志贺氏菌、沙门菌等致病菌数量,而罗伊氏乳杆菌对沙门氏菌感染几乎无保护作用。表明植物乳杆菌对鼠伤寒沙门菌感染具有较好的防御作用。

关键词：乳酸菌鼠伤寒沙门菌防御效果

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调控表达LacI蛋白的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd株的构建

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黑龙江畜牧兽医 2019年第21期 11-17页

作者：许可刘晶高兴胡译文杨桂连王春凤姜延龙吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心/动物生产与产品质量安全教育部重点实验室

为了构建具有asd基因缺失和LacI蛋白表达调控的猪霍乱沙门氏杆菌C500株,试验以猪霍乱沙门氏杆菌C500株为载体,对其基因组进行改造,使沙门氏杆菌asd基因缺失,随后将araC PBADLacI序列置于其中,构建包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱... 详细信息

为了构建具有asd基因缺失和LacI蛋白表达调控的猪霍乱沙门氏杆菌C500株,试验以猪霍乱沙门氏杆菌C500株为载体,对其基因组进行改造,使沙门氏杆菌asd基因缺失,随后将araC PBADLacI序列置于其中,构建包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株以及包含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP,并验证是否有LacI蛋白表达。结果表明:试验成功构建出包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株,以及包含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP;Western-blot检测验证了突变菌在阿拉伯糖存在的条件下可大量表达LacI蛋白,而当pYA4514-EGFP质粒上的Ptrc启动子受到抑制时,EGFP蛋白不表达;用IPTG诱导后可以消除LacI对Ptrc启动子的抑制作用,EGFP蛋白表达。说明试验成功构建了调控表达LacI蛋白的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株。

关键词：猪霍乱沙门氏杆菌C500株 C500Δasd基因突变株 araC PBAD启动子 LacI蛋白表达

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表达结核分枝杆菌ESAT-6-Ag85A基因的侵入型乳酸菌免疫特性研究

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中国免疫学杂志 2019年第1期35卷 10-14页

作者：刘晶张赞刘洋杨桂连姜延龙王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响。方法:将真核表达载体p Valac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸... 详细信息

目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响。方法:将真核表达载体p Valac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸菌p Valac-ES85A/409和p Valac-ES85A/Fn BPA。将其免疫BALB/c小鼠,检测表达ES85A的侵入型乳酸菌对小鼠树突状细胞(DCs)亚群CD80和CD83的影响以及血清中细胞因子的表达水平。结果:Western blot和免疫荧光证明ES85A蛋白成功表达;与空载体组相比,在小鼠免疫表达ES85A的侵入型乳酸菌后,小鼠脾细胞中CD11^+CD80^+(P<0. 001)和CD11^+CD83^+(P<0. 01)以及血清中细胞因子IL-4(P<0. 05)的表达都有所增加。结论:表达ES85A的侵入型乳酸菌能促进小鼠体内DCs的分化和成熟以及提高血清中细胞因子IL-4的表达,为后期研制抗结核分枝杆菌的DNA疫苗制剂奠定了基础。

关键词： ES85A 细胞转染 FnBPA 树突状细胞

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乳酸菌介导巨噬细胞极化作用的研究进展

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中国免疫学杂志 2019年第3期35卷 363-367页

作者：邵丽娜杨文涛王春凤胡静涛吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益... 详细信息

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益生菌与免疫细胞之间有着不可分割的关系,尤其是巨噬细胞。它通过各种途径与巨噬细胞作用,使巨噬细胞产生细胞因子,并向不同的表型极化,参与模式识别受体包括Toll样受体(TLRs)、Notch、核因子κB(NF-κB)信号通路等,从而降低机体的炎症反应。在这过程中,乳酸菌在机体调节中发挥重要作用。本文主要对乳酸菌介导巨噬细胞产生免疫调节的作用机制进行阐述。

关键词：乳酸菌巨噬细胞免疫调节极化信号通路

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调节性B细胞在寄生虫感染中的免疫调节作用

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中国病原生物学杂志 2019年第4期14卷 482-484,490页

作者：谢静黄海斌赵权杨桂连吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

调节性B细胞(Regulatory B cells, Bregs)是存在于B细胞中的一类细胞亚群,该类细胞可以通过分泌细胞因子(IL-10、TGF-β和IL-35等)来抑制免疫反应。研究发现,寄生虫感染能诱导Bregs的产生,由Bregs分泌的IL-10是其发挥作用的关键因子。... 详细信息

调节性B细胞(Regulatory B cells, Bregs)是存在于B细胞中的一类细胞亚群,该类细胞可以通过分泌细胞因子(IL-10、TGF-β和IL-35等)来抑制免疫反应。研究发现,寄生虫感染能诱导Bregs的产生,由Bregs分泌的IL-10是其发挥作用的关键因子。该类细胞可抑制由寄生虫引起的过度炎症,有助于寄生虫慢性感染的建立、维持宿主和寄生虫逃避免疫反应之间的平衡,降低寄生虫感染对机体造成的病理损伤。

关键词：调节性B细胞寄生虫感染免疫调节综述

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表达禽流感病毒HA2-DEC205的减毒沙门菌DNA疫苗载体的构建与初步研究

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中国兽医科学 2019年第4期49卷 453-460页

作者：胡译文刘晶赵维静谢静许可杨桂连姜延龙王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

构建表达H9N2亚型禽流感病毒HA2蛋白的延迟裂解型重组减毒沙门菌χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-sec)和χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-dimer-sec),将其免疫小鼠,通过流式细胞术检测免疫细胞的变化。结果表明,沙门菌χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-dimer-sec)能够提高CD3+CD4+T细胞分泌细胞因子IL-4、IFN-γ的水平。这说明重组沙门菌免疫小鼠能够激活机体的免疫系统,诱导发生一定的免疫反应。

关键词：禽流感病毒 HA2 延迟裂解重组减毒沙门菌

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表面展示狂犬病病毒糖蛋白的重组乳酸菌的构建及其免疫原性的研究

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中国兽医科学 2019年第4期49卷 432-439页

作者：赵维静赵建伟胡译文谢静刘琼王春凤王建忠钱爱东吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为开发基于乳酸菌载体表达的新型狂犬病口服疫苗,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位区基因RVG,并通过PCR方法在其C′端融合特异性树突状细胞(DC)靶向肽编码基因后插入到乳酸菌表达载体中,以融合无关肽编码基因为对照,分别构建表达RVG基... 详细信息

为开发基于乳酸菌载体表达的新型狂犬病口服疫苗,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位区基因RVG,并通过PCR方法在其C′端融合特异性树突状细胞(DC)靶向肽编码基因后插入到乳酸菌表达载体中,以融合无关肽编码基因为对照,分别构建表达RVG基因的重组乳酸菌pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep和p SIP-409-pgsA′-RVG-ctrl。在清酒乳杆菌素的诱导下,表达产物经Western-blot和免疫荧光鉴定后,对小鼠进行口服免疫,通过流式细胞术检测免疫后小鼠脾中树突状细胞和B细胞活化效率,用ELISA检测肠道内sIgA和血清IgG分泌量。结果显示,该抗原表位区在重组乳酸菌中得到了正确表达,并且可锚定于菌体表面,pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep能有效活化小鼠脾中的树突状细胞和B细胞;与其他组相比差异显著(P<0.05),且肠道内sIgA和血清IgG分泌量显著高于其他组(P<0.05),表明重组乳酸菌pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep能够更好地激活黏膜免疫反应,具有良好的免疫原性。

关键词：乳酸菌狂犬病病毒糖蛋白 DCpep 黏膜免疫

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