检索结果-内蒙古大学图书馆

黑龙江畜牧兽医 2019年第21期 11-17页

作者：许可刘晶高兴胡译文杨桂连王春凤姜延龙吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心/动物生产与产品质量安全教育部重点实验室

为了构建具有asd基因缺失和LacI蛋白表达调控的猪霍乱沙门氏杆菌C500株,试验以猪霍乱沙门氏杆菌C500株为载体,对其基因组进行改造,使沙门氏杆菌asd基因缺失,随后将araC PBADLacI序列置于其中,构建包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱... 详细信息

为了构建具有asd基因缺失和LacI蛋白表达调控的猪霍乱沙门氏杆菌C500株,试验以猪霍乱沙门氏杆菌C500株为载体,对其基因组进行改造,使沙门氏杆菌asd基因缺失,随后将araC PBADLacI序列置于其中,构建包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株以及包含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP,并验证是否有LacI蛋白表达。结果表明:试验成功构建出包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株,以及包含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP;Western-blot检测验证了突变菌在阿拉伯糖存在的条件下可大量表达LacI蛋白,而当pYA4514-EGFP质粒上的Ptrc启动子受到抑制时,EGFP蛋白不表达;用IPTG诱导后可以消除LacI对Ptrc启动子的抑制作用,EGFP蛋白表达。说明试验成功构建了调控表达LacI蛋白的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株。

关键词：猪霍乱沙门氏杆菌C500株 C500Δasd基因突变株 araC PBAD启动子 LacI蛋白表达

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表达结核分枝杆菌ESAT-6-Ag85A基因的侵入型乳酸菌免疫特性研究

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中国免疫学杂志 2019年第1期35卷 10-14页

作者：刘晶张赞刘洋杨桂连姜延龙王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响。方法:将真核表达载体p Valac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸... 详细信息

目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响。方法:将真核表达载体p Valac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸菌p Valac-ES85A/409和p Valac-ES85A/Fn BPA。将其免疫BALB/c小鼠,检测表达ES85A的侵入型乳酸菌对小鼠树突状细胞(DCs)亚群CD80和CD83的影响以及血清中细胞因子的表达水平。结果:Western blot和免疫荧光证明ES85A蛋白成功表达;与空载体组相比,在小鼠免疫表达ES85A的侵入型乳酸菌后,小鼠脾细胞中CD11^+CD80^+(P<0. 001)和CD11^+CD83^+(P<0. 01)以及血清中细胞因子IL-4(P<0. 05)的表达都有所增加。结论:表达ES85A的侵入型乳酸菌能促进小鼠体内DCs的分化和成熟以及提高血清中细胞因子IL-4的表达,为后期研制抗结核分枝杆菌的DNA疫苗制剂奠定了基础。

关键词： ES85A 细胞转染 FnBPA 树突状细胞

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乳酸菌介导巨噬细胞极化作用的研究进展

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中国免疫学杂志 2019年第3期35卷 363-367页

作者：邵丽娜杨文涛王春凤胡静涛吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益... 详细信息

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益生菌与免疫细胞之间有着不可分割的关系,尤其是巨噬细胞。它通过各种途径与巨噬细胞作用,使巨噬细胞产生细胞因子,并向不同的表型极化,参与模式识别受体包括Toll样受体(TLRs)、Notch、核因子κB(NF-κB)信号通路等,从而降低机体的炎症反应。在这过程中,乳酸菌在机体调节中发挥重要作用。本文主要对乳酸菌介导巨噬细胞产生免疫调节的作用机制进行阐述。

关键词：乳酸菌巨噬细胞免疫调节极化信号通路

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维氏气单胞菌最新研究进展

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中国人兽共患病学报 2018年第5期34卷 452-459,465页

作者：康元环张冬星杨滨僮张贺亮孙武文单晓枫钱爱东吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心/动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118 长春科技学院长春130600

维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,***)是一种重要的人、兽及水生生物共患病原菌,可引起人类胃肠炎、腹膜炎、败血症和外伤感染等,严重威胁着人类健康,而且给水产养殖业造成了巨大经济损失。本文对***的病原学、临床特征、国内外流行现... 详细信息

维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,***)是一种重要的人、兽及水生生物共患病原菌,可引起人类胃肠炎、腹膜炎、败血症和外伤感染等,严重威胁着人类健康,而且给水产养殖业造成了巨大经济损失。本文对***的病原学、临床特征、国内外流行现状以及致病机理的最新研究进展进行概述,旨在为该菌的防治提供参考。

关键词：维氏气单胞菌临床特征毒力因子致病机理

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单细胞转录组测序技术在自身免疫病中应用的最新研究进展

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中国免疫学杂志 2024年第10期40卷 2219-2222,2228页

作者：孙金梅石春卫杨桂连杨文涛王春凤吉林农业大学动物医学院动物科学技术学院吉林省重点实验室动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

单细胞转录组测序技术是以单个细胞为研究对象,对每个转录本的基因表达水平以及细胞间的异质性进行统计分析,在一定程度上弥补了传统测序技术的缺陷。自身免疫病是自身免疫耐受状态或自身免疫细胞调节异常时所致的自身组织细胞损伤或功... 详细信息

单细胞转录组测序技术是以单个细胞为研究对象,对每个转录本的基因表达水平以及细胞间的异质性进行统计分析,在一定程度上弥补了传统测序技术的缺陷。自身免疫病是自身免疫耐受状态或自身免疫细胞调节异常时所致的自身组织细胞损伤或功能异常。本文综述了近年来关于单细胞转录组测序技术在自身免疫病中应用的研究成果,为尽早实现精准医疗提供有价值的线索。

关键词：单细胞转录组测序自身免疫病研究进展

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基于同源重组技术的表达CRE重组酶的减毒沙门菌的构建及功能初步研究

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中国兽医科学 2018年第10期48卷 1222-1227页

作者：高兴刘晶张赞刘洋许可杨桂连姜延龙王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全省部共建教育部重点实验室

为了构建表达Cre重组酶的减毒沙门菌,本试验首先将Cre重组酶表达框插入到自杀质粒pYA3599中,构建重组自杀质粒pYA3599-Cre,电转至感受态χ7232中,经酶切鉴定与测序后,电转至χ7213感受态中,得到含有自杀质粒pYA3599-Cre的重组菌χ7213... 详细信息

为了构建表达Cre重组酶的减毒沙门菌,本试验首先将Cre重组酶表达框插入到自杀质粒pYA3599中,构建重组自杀质粒pYA3599-Cre,电转至感受态χ7232中,经酶切鉴定与测序后,电转至χ7213感受态中,得到含有自杀质粒pYA3599-Cre的重组菌χ7213。随后通过同源重组,经两步筛选,将Cre重组酶表达框整合至减毒沙门菌χ11802的基因组中,得到重组减毒沙门菌χ11802-Cre,通过Western-boltting技术检测重组酶Cre的表达,进而将报告质粒pYA4545-lox P电转至重组菌中验证Cre重组酶的功能。结果显示,成功构建了自杀质粒pYA3599-Cre,并基于同源重组技术成功将重组酶Cre表达框整合至χ11802基因组中,通过Western-blotting成功检测出重组酶Cre的表达,且报告质粒电转至重组菌中可被切除lox P位点之间序列。本试验成功构建出能表达重组酶Cre的减毒沙门菌,为后期以位点特异性重组酶Cre为基础的减毒沙门菌微环DNA疫苗的构建奠定了基础。

关键词： Cre 自杀质粒同源重组减毒沙门菌

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调节性B细胞在寄生虫感染中的免疫调节作用

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中国病原生物学杂志 2019年第4期14卷 482-484,490页

作者：谢静黄海斌赵权杨桂连吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

调节性B细胞(Regulatory B cells, Bregs)是存在于B细胞中的一类细胞亚群,该类细胞可以通过分泌细胞因子(IL-10、TGF-β和IL-35等)来抑制免疫反应。研究发现,寄生虫感染能诱导Bregs的产生,由Bregs分泌的IL-10是其发挥作用的关键因子。... 详细信息

调节性B细胞(Regulatory B cells, Bregs)是存在于B细胞中的一类细胞亚群,该类细胞可以通过分泌细胞因子(IL-10、TGF-β和IL-35等)来抑制免疫反应。研究发现,寄生虫感染能诱导Bregs的产生,由Bregs分泌的IL-10是其发挥作用的关键因子。该类细胞可抑制由寄生虫引起的过度炎症,有助于寄生虫慢性感染的建立、维持宿主和寄生虫逃避免疫反应之间的平衡,降低寄生虫感染对机体造成的病理损伤。

关键词：调节性B细胞寄生虫感染免疫调节综述

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重组鹅IFN-α在大肠杆菌中的表达及抗血清制备

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黑龙江畜牧兽医 2019年第19期 5-9页

作者：周游杨文涛黄科谚晋玉北冯博石春卫黄海滨王建忠姜延龙康元环杨桂连王春凤吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心/动物生产及产品质量安全省部共建教育部重点实验室

为了研究鹅α干扰素(goIFN-α)基因原核表达产物的反应原性并进行goIFN-α抗血清的制备,试验首先根据大肠杆菌偏爱密码子对goIFN-α基因进行优化,随后采用PCR方法扩增goIFN-α编码序列并进行同源性分析。将goIFN-α片段与表达载体pET-28... 详细信息

为了研究鹅α干扰素(goIFN-α)基因原核表达产物的反应原性并进行goIFN-α抗血清的制备,试验首先根据大肠杆菌偏爱密码子对goIFN-α基因进行优化,随后采用PCR方法扩增goIFN-α编码序列并进行同源性分析。将goIFN-α片段与表达载体pET-28a连接,构建重组表达质粒pET-28a-goIFN-α,然后将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot检测。通过切胶回收的方法回收目的条带,将碾碎的蛋白胶与PBS混合后注入小鼠体内,15 d后回收血清进行Western-blot检测。结果表明:试验成功扩增出goIFN-α基因;与多种IFN-α基因序列进行比较,goIFN-α基因氨基酸序列的同源性为92.5%~98.1%;随后成功构建出重组表达质粒pET-28a-goIFN-α,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,重组蛋白goIFN-α的分子质量约为18 ku,具有良好的反应原性;回收血清进行Western-blot检测,鼠抗goIFN-α血清制备成功。说明重组goIFN-α蛋白能够在大肠杆菌中表达,大小符合预期且具有良好的反应原性,并成功制备出鼠抗goIFN-α血清。

关键词：鹅基因工程干扰素α 基因克隆原核表达多克隆抗体

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表达禽流感病毒HA2-DEC205的减毒沙门菌DNA疫苗载体的构建与初步研究

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中国兽医科学 2019年第4期49卷 453-460页

作者：胡译文刘晶赵维静谢静许可杨桂连姜延龙王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

构建表达H9N2亚型禽流感病毒HA2蛋白的延迟裂解型重组减毒沙门菌χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-sec)和χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-dimer-sec),将其免疫小鼠,通过流式细胞术检测免疫细胞的变化。结果表明,沙门菌χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-dimer-sec)能够提高CD3+CD4+T细胞分泌细胞因子IL-4、IFN-γ的水平。这说明重组沙门菌免疫小鼠能够激活机体的免疫系统,诱导发生一定的免疫反应。

关键词：禽流感病毒 HA2 延迟裂解重组减毒沙门菌

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表面展示狂犬病病毒糖蛋白的重组乳酸菌的构建及其免疫原性的研究

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中国兽医科学 2019年第4期49卷 432-439页

作者：赵维静赵建伟胡译文谢静刘琼王春凤王建忠钱爱东吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为开发基于乳酸菌载体表达的新型狂犬病口服疫苗,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位区基因RVG,并通过PCR方法在其C′端融合特异性树突状细胞(DC)靶向肽编码基因后插入到乳酸菌表达载体中,以融合无关肽编码基因为对照,分别构建表达RVG基... 详细信息

为开发基于乳酸菌载体表达的新型狂犬病口服疫苗,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位区基因RVG,并通过PCR方法在其C′端融合特异性树突状细胞(DC)靶向肽编码基因后插入到乳酸菌表达载体中,以融合无关肽编码基因为对照,分别构建表达RVG基因的重组乳酸菌pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep和p SIP-409-pgsA′-RVG-ctrl。在清酒乳杆菌素的诱导下,表达产物经Western-blot和免疫荧光鉴定后,对小鼠进行口服免疫,通过流式细胞术检测免疫后小鼠脾中树突状细胞和B细胞活化效率,用ELISA检测肠道内sIgA和血清IgG分泌量。结果显示,该抗原表位区在重组乳酸菌中得到了正确表达,并且可锚定于菌体表面,pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep能有效活化小鼠脾中的树突状细胞和B细胞;与其他组相比差异显著(P<0.05),且肠道内sIgA和血清IgG分泌量显著高于其他组(P<0.05),表明重组乳酸菌pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep能够更好地激活黏膜免疫反应,具有良好的免疫原性。

关键词：乳酸菌狂犬病病毒糖蛋白 DCpep 黏膜免疫

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