检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2019年第5期49卷 619-624页

作者：张赞刘晶高兴刘洋姜延龙王春凤杨桂连吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为了研究表达pgsA′-EtMIC2融合蛋白的侵入型乳酸菌的免疫特性,将pgsA′-EtMIC2基因片段插入到载体pSIP409-FnBPA中,得到pSIP409-FnBPA-pgsA′-EtMIC2重组质粒,并用电转化的方式转入植物乳杆菌NC8感受态细胞中,构建表面展示EtMIC2蛋白... 详细信息

为了研究表达pgsA′-EtMIC2融合蛋白的侵入型乳酸菌的免疫特性,将pgsA′-EtMIC2基因片段插入到载体pSIP409-FnBPA中,得到pSIP409-FnBPA-pgsA′-EtMIC2重组质粒,并用电转化的方式转入植物乳杆菌NC8感受态细胞中,构建表面展示EtMIC2蛋白的侵入型乳酸菌。通过检测免疫雏鸡外周血淋巴细胞中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞的发育情况,血清中EtMIC2抗体、IL-4、IL-18、IFN-γ的含量以及肠道灌洗液中IgA的分泌量来评价该侵入型乳酸菌对雏鸡的免疫特性。结果显示,成功构建出携带pSIP409-FnBPA-pgsA′-EtMIC2质粒的重组乳酸菌;雏鸡免疫后外周血淋巴细胞中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞含量明显升高;EtMIC2抗体、IL-18、IFN-γ细胞因子及IgA产生的水平均显著上升,表明该侵入型乳酸菌具有一定的免疫效力,为后期研究抗球虫的免疫保护效果奠定了基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫 EtMIC2 FnBPA 侵入型乳酸菌免疫特性

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产肠毒素大肠杆菌K88ac-STa-LTB嵌合抗原多克隆抗体制备及植物乳杆菌表面表达研究

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黑龙江畜牧兽医 2019年第1期 13-17+25+175页

作者：刘琼刘永仕尚晓敏李桂玲姜延龙王春凤吉林工程技术师范学院食品工程学院吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心/教育部动物生产和产品质量安全重点实验室

为了研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,***)表面表达黏附素-肠毒素(K88ac-STa-LTB)嵌合抗原的可行性,试验利用原核表达载体pET28a表达纯化此嵌合抗原,蛋白复性后免疫Babl/c小鼠制备多克隆抗体,以制备的多克隆抗体作为一抗,采用We... 详细信息

为了研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,***)表面表达黏附素-肠毒素(K88ac-STa-LTB)嵌合抗原的可行性,试验利用原核表达载体pET28a表达纯化此嵌合抗原,蛋白复性后免疫Babl/c小鼠制备多克隆抗体,以制备的多克隆抗体作为一抗,采用Western-blot、流式细胞术及间接免疫荧光试验研究此嵌合抗原在植物乳杆菌表面表达情况。结果表明:K88ac-STa-LTB嵌合抗原在大肠杆菌中以包涵体形式表达,纯化并复性的重组蛋白大小约为32.5 ku,制备的抗体效价为12lb。重组菌株NC8-pLP1261-8576表达的K88ac-STa-LTB嵌合抗原经Western-blot分析,能被鼠抗LTB单克隆抗体及自制的鼠抗K88ac-STa-LTB多克隆抗体识别,流式细胞术及荧光显微镜观察证明此嵌合抗原在菌体表面表达。

关键词：植物乳杆菌产肠毒素大肠杆菌黏附素-肠毒素嵌合抗原多克隆抗体表面表达

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猪源植物乳杆菌调节猪肠上皮细胞对鼠伤寒沙门氏菌感染的抑制

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经济动物学报 2023年第3期27卷 189-195页

作者：刘芮含韩永林石彧萌孙安琪汤正旭胡静涛吉林农业大学动物科学技术学院/动物医学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室喀喇沁旗农牧局吉林省科普服务中心

为探究猪源植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）对鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）的防治效果，以仔猪肠道内容物中筛选到的猪源植物乳杆菌LP13为研究对象，将LP13与猪肠上皮细胞（IPEC-J2cell）分别按照细菌数与细胞数比... 详细信息

为探究猪源植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）对鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）的防治效果，以仔猪肠道内容物中筛选到的猪源植物乳杆菌LP13为研究对象，将LP13与猪肠上皮细胞（IPEC-J2cell）分别按照细菌数与细胞数比值（感染复数MOI）为10和100进行体外共培养1 h。通过CCK-8检测LP13对IPEC-J2细胞增殖的影响，流式细胞术检测LP13对IPEC-J2细胞凋亡的影响，利用荧光显微镜和平板计数法评价CFSE标记的LP13对IPEC-J2的黏附效果，并确定LP13与IPEC-J2共培养的最佳比例。添加与LP13相同CFU的鼠伤寒沙门氏菌，通过排斥抑制、置换抑制和竞争抑制试验，进一步明确植物乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌感染的抑制效果。结果显示，LP13对IPEC-J2细胞的增殖与凋亡无显著影响；且在MOI为100时，其对细胞的黏附率更高；在排斥抑制（既预先将LP13于IPEC-J2共培养）时，LP13针对鼠伤寒沙门氏菌对IPEC-J2的黏附和侵袭有一定的抑制作用。试验为植物乳杆菌调节猪肠上皮细胞，预防沙门氏菌感染的研究奠定基础。

关键词：植物乳杆菌鼠伤寒沙门氏菌猪肠上皮细胞细胞增殖细胞凋亡

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表面展示基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白胞外区细菌样颗粒的构建与鉴定

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中国兽医学报 2020年第12期40卷 2298-2304页

作者：赵建伟姜昊妍杨锐张舒博王建忠王春凤吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为了构建及鉴定表面展示新城疫病毒F蛋白胞外区细菌样颗粒。首先应用RT-RCR和PCR技术分别扩增F蛋白胞外区编码基因片段和乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)基因片段,通过融合技术将F蛋白胞外区编码基因与PA基因融合,然后利用... 详细信息

为了构建及鉴定表面展示新城疫病毒F蛋白胞外区细菌样颗粒。首先应用RT-RCR和PCR技术分别扩增F蛋白胞外区编码基因片段和乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)基因片段,通过融合技术将F蛋白胞外区编码基因与PA基因融合,然后利用pET-30a(+)质粒构建重组原核表达质粒,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,获得目的蛋白;用热酸处理乳酸乳球菌获得裸露的细菌样颗粒(BLPs),通过透射电镜进行鉴定;最后将复性后的F-PA蛋白与BLPs颗粒结合,经过SDS-PAGE、Western blot、细菌间接免疫荧光进行结合鉴定,并分析其结合效果灰度值判断其结合效率。结果显示,目的蛋白均能正确表达,成功制备出裸露的BLPs,目的蛋白复性后可与BLPs进行结合,其结合效率为1 U的BLPs与130 μg的F-PA蛋白结合。成功构建出表面展示基因Ⅶ新城疫病毒F蛋白胞外区BLPs,为后续研究新城疫亚单位黏膜疫苗奠定了基础。

关键词：基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白细菌样颗粒亚单位疫苗

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表达鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原TATA4与鸡IL-IL-2的侵入型乳酸菌构建及鉴定

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中国家禽 2019年第10期41卷 20-25页

作者：刘洋姜延龙刘晶张赞高兴王春凤杨桂连吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118 动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为探究鸡柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)表面抗原TA4在植物乳杆菌NC8的表达情况,使用PCR扩增TA4片段,同时使用细胞因子ChIL-2作为免疫佐剂,应用猪圆环病毒2A肽(P2A)序列使抗原与免疫佐剂共表达,连接有金黄色葡萄球菌的纤连蛋白结合蛋白A(Fn... 详细信息

为探究鸡柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)表面抗原TA4在植物乳杆菌NC8的表达情况,使用PCR扩增TA4片段,同时使用细胞因子ChIL-2作为免疫佐剂,应用猪圆环病毒2A肽(P2A)序列使抗原与免疫佐剂共表达,连接有金黄色葡萄球菌的纤连蛋白结合蛋白A(FnBPA)的409载体,构建两株重组侵入型乳酸菌NC8 pSIP 409-FnBPA-pgsA′-TA4和NC8 pSIP 409-FnBPA-pgsA′-TA4-IL2。使用自制多克隆抗体通过Western blot检测重组菌的蛋白表达情况。结果表明,两种侵入型目的蛋白TA4和IL-2使用多克隆抗体检测均可成功检测到蛋白表达,为后期动物试验及益生菌口服疫苗的制备奠定了基础。

关键词：侵入型乳酸菌鸡柔嫩艾美耳球虫 TA4 ChIL-2

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3种乳酸菌菌株防御鼠伤寒沙门菌感染的比较

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动物医学进展 2020年第12期41卷 7-12页

作者：廖野段冰洁陈晓雷刘芮含胡静涛王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林农业大学吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118 吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

对植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和鼠李糖乳杆菌防御鼠伤寒沙门菌作用进行了比较研究。通过将此3株乳酸菌菌株灌胃SPF级C57BL/6小鼠后,感染鼠伤寒沙门菌,通过监测小鼠体重及存活率、肠道病理组织学观察、沙门菌器官荷菌数及肠黏膜SIgA的分... 详细信息

对植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和鼠李糖乳杆菌防御鼠伤寒沙门菌作用进行了比较研究。通过将此3株乳酸菌菌株灌胃SPF级C57BL/6小鼠后,感染鼠伤寒沙门菌,通过监测小鼠体重及存活率、肠道病理组织学观察、沙门菌器官荷菌数及肠黏膜SIgA的分泌初步评价其抗沙门菌效应;利用Illumina MiSeq测序平台对小鼠盲肠菌群多样性进行高通量测序分析。结果显示,植物乳杆菌与鼠李糖乳杆菌干预后,均能抑制沙门菌引起的小鼠体重下降,提高小鼠存活率,缓解沙门菌引起的肠道损伤,抑制沙门菌向肝脏、脾脏及肠系膜淋巴结的侵袭;植物乳杆菌的作用效果更为显著;菌群多样性分析表明,植物乳杆菌与鼠李糖乳杆菌均能明显改善沙门菌感染后引起的菌群紊乱,恢复厚壁菌门、拟杆菌门等优势菌群与变形菌门之间的平衡,且能够显著提高厚壁菌门中乳酸杆菌属、毛螺旋菌属等有益菌数量,降低变形菌门中志贺氏菌、沙门菌等致病菌数量,而罗伊氏乳杆菌对沙门氏菌感染几乎无保护作用。表明植物乳杆菌对鼠伤寒沙门菌感染具有较好的防御作用。

关键词：乳酸菌鼠伤寒沙门菌防御效果

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细菌基因敲除策略及其在维氏气单胞菌研究中的应用

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中国生物制品学杂志 2019年第6期32卷 698-702页

作者：康元环杨滨僮单晓枫钱爱东(校) 吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118 长春科技学院吉林长春130600

基因敲除技术是20世纪80年代发展起来的一种分子生物学技术,目前已广泛应用于微生物基因功能等相关领域的研究中。维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A. veronii)是气单胞菌科气单胞菌属的一种,近年来,该菌引发疾病的报道逐年增多,因此,... 详细信息

基因敲除技术是20世纪80年代发展起来的一种分子生物学技术,目前已广泛应用于微生物基因功能等相关领域的研究中。维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A. veronii)是气单胞菌科气单胞菌属的一种,近年来,该菌引发疾病的报道逐年增多,因此,对其致病机制的研究显得尤为重要。本文对细菌不同基因敲除策略及其在A. veronii基因功能研究中的应用作一综述,旨在为A. veronii致病机制的深入研究提供参考。

关键词：基因敲除技术维氏气单胞菌基因功能

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基因工程乳酸菌作为活载体表达外源蛋白及疾病防治研究进展

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中国兽医杂志 2019年第6期55卷 76-80页

作者：刘琼陈宏亮姜延龙王春凤吉林工程技术师范学院食品工程学院吉林长春130052 吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心教育部动物生产和产品质量安全重点实验室吉林长春130118

乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的兼性厌氧菌总称,包括乳球菌、乳杆菌、链球菌、片球菌和双歧杆菌等,美国食品和药品监督管理局(FDA)将许多乳酸菌定义为“食品级”微生物,极少数如化脓性链球菌,肺炎链球菌是致病菌。乳酸菌可... 详细信息

乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的兼性厌氧菌总称,包括乳球菌、乳杆菌、链球菌、片球菌和双歧杆菌等,美国食品和药品监督管理局(FDA)将许多乳酸菌定义为“食品级”微生物,极少数如化脓性链球菌,肺炎链球菌是致病菌。乳酸菌可以调节肠道菌群组成从而维持肠道稳态,提高免疫力;还可竞争型地占位,定殖在肠道表面诱导黏膜液以及肠道上皮细胞抗菌肽(AMP)的产生[1].

关键词：乳酸菌基因工程肠道上皮细胞活载体肺炎链球菌药品监督管理局防治疾病

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鼠李糖乳杆菌在防御鼠伤寒沙门菌感染中的保护作用

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中国兽药杂志 2019年第1期53卷 13-18页

作者：邵丽娜冯博廖野段冰洁杨文涛王春凤胡静涛吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

为探讨鼠李糖乳杆菌对鼠伤寒沙门菌感染的防御作用,实验拟利用鼠伤寒沙门菌诱导建立小鼠肠炎模型,采用鼠李糖乳杆菌对肠炎模型进行干预。通过检测小鼠的肠道病理变化、器官指数、沙门菌的组织荷菌数、盲肠组织细胞因子的分泌水平及小鼠... 详细信息

为探讨鼠李糖乳杆菌对鼠伤寒沙门菌感染的防御作用,实验拟利用鼠伤寒沙门菌诱导建立小鼠肠炎模型,采用鼠李糖乳杆菌对肠炎模型进行干预。通过检测小鼠的肠道病理变化、器官指数、沙门菌的组织荷菌数、盲肠组织细胞因子的分泌水平及小鼠体重和存活率,明确鼠李糖乳杆菌对沙门菌感染小鼠的保护作用。结果显示,鼠李糖乳杆菌能显著改善沙门菌造成的肠炎损伤,抑制沙门菌向脾、肝脏等器官的侵袭,促进抑炎因子IL-10的分泌,抑制炎性因子NO、IL-12的分泌从而缓解肠道炎症,并能提高感染沙门菌后小鼠的体重增加率和存活率。实验表明,鼠李糖乳杆菌在防御沙门菌感染及改善肠道损伤方面发挥了较好的保护作用。

关键词：鼠李糖乳杆菌鼠伤寒沙门菌感染防御保护作用

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乳酸菌介导巨噬细胞极化作用的研究进展

乳酸菌介导巨噬细胞极化作用的研究进展

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十三次全国学术研讨会

作者：邵丽娜杨文涛王春凤胡静涛吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益... 详细信息

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益生菌与免疫细胞之间有着不可分割的关系,尤其是巨噬细胞。它通过各种途径与巨噬细胞作用,使巨噬细胞产生细胞因子,并向不同的表型极化,参与模式识别受体(PRRs)包括ToLL样受体(TLRs)、Notch、核因子κB(NF-κB)信号通路等,从而降低机体的炎症反应。在这过程中,乳酸菌在机体调节中发挥重要作用。本文主要对乳酸菌介导巨噬细胞产生免疫调节的作用机制进行阐述。

关键词：乳酸菌巨噬细胞免疫调节极化信号通路

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