检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2025年第3期65卷 1137-1147页

作者：刘世博唐新月张晓茜张莹辉靳继惠孙伟峰彭小薇李俊平中国兽医药品监察所国家动物布鲁氏菌病参考实验室北京吉林农业大学动物医学院吉林长春北京三元集团畜牧兽医总站北京

【目的】研发一种安全、有效且可鉴别的新型疫苗。【方法】以S2作为亲本株,利用同源重组技术构建S2Δbp26基因缺失株,并对缺失菌株的稳定性、安全性和有效性进行全面评价。【结果】构建了S2Δbp26缺失株,该缺失株在体外连续传代20代后... 详细信息

【目的】研发一种安全、有效且可鉴别的新型疫苗。【方法】以S2作为亲本株,利用同源重组技术构建S2Δbp26基因缺失株,并对缺失菌株的稳定性、安全性和有效性进行全面评价。【结果】构建了S2Δbp26缺失株,该缺失株在体外连续传代20代后其表型和基因型均未发生改变。小鼠和豚鼠的安全性试验结果表明,缺失株在生物安全性方面与S2疫苗株无显著差异。不同代次的S2Δbp26缺失株和S2亲本株接种豚鼠后,每克脾脏分菌数量均小于2×10^(5)个,表明该缺失株毒力较低。残余毒力试验数据表明,接种缺失株的小鼠半数痊愈时间比S2亲本株更短。同时,免疫S2Δbp26菌株的小鼠可以成功抵御2×10^(5) CFU/只剂量的M28野毒株攻毒。【结论】本研究构建的S2Δbp26基因缺失株展现出优异的安全性和免疫保护力,为布鲁氏菌病可鉴别诊断疫苗的研发提供了技术储备。

关键词：布鲁氏菌疫苗 S2Δbp26 生物学特性

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2024年度肉牛牦牛产业与技术发展报告

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中国畜牧杂志 2025年第3期61卷 399-402页

作者：曹建民吕文发郭爱珍王之盛张一敏陈昭辉曹兵海李俊雅吉林农业大学经济管理学院吉林长春130118 吉林农业大学动物科学/动物医学学院吉林长春130118 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 四川农业大学动物营养研究所四川雅安625014 山东农业大学食品科学与工程学院山东泰安271018 中国农业大学动物科学技术学院北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

本文基于对2024年肉牛牦牛产业特点及存在问题的分析,展望了2025年肉牛牦牛产业发展趋势,并提出了肉牛牦牛产业发展的相关建议。

关键词：肉牛牦牛产业展望建议

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非洲马瘟病毒和西尼罗病毒多酶恒温核酸快速扩增检测方法的建立

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动物医学进展 2025年第3期46卷 12-16页

作者：钱佳豪刘丹周师众张博源高建帅许霄峰李慧彤丁家波王春凤沈青春吉林农业大学动物医学院吉林长春130118 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方)北京100193

为了建立一种方便快捷的非洲马瘟病毒(AHSV)和西尼罗病毒(WNV)的检测方法,将GenBank中非洲马瘟病毒VP7序列以及近3年世界范围内流行的西尼罗病毒序列进行比对,选择保守区域,并按照需求设计引物与探针。通过反应条件的优化,以及特异性与... 详细信息

为了建立一种方便快捷的非洲马瘟病毒(AHSV)和西尼罗病毒(WNV)的检测方法,将GenBank中非洲马瘟病毒VP7序列以及近3年世界范围内流行的西尼罗病毒序列进行比对,选择保守区域,并按照需求设计引物与探针。通过反应条件的优化,以及特异性与敏感性试验,建立了一种能够同时检测非洲马瘟病毒和西尼罗病毒的多酶恒温核酸快速扩增(MIRA)方法。结果表明该方法操作简便、灵敏度高、特异性强,反应时间仅需20 min。该检测方法可应用于非洲马瘟和西尼罗热的快速诊断和现场监测,为疫情控制和流行病学研究提供技术支持。

关键词：非洲马瘟病毒西尼罗热病毒多酶恒温快速扩增技术

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牛传染性鼻气管炎病毒ERA-LFD检测方法的建立与应用

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动物医学进展 2025年第2期46卷 79-85页

作者：郭衍冰侯绪森孙兴忠王军富王改丽郝良玉董航王雪磊刘杰王楠曹利利吉林省畜牧兽医科学研究院吉林长春130062 大安市疾病预防控制中心吉林大安131300 吉林农业大学动物医学院吉林长春130118 长春职业技术学院吉林长春130033

为建立可视化检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的酶促恒温扩增-侧向流动试纸(ERA-LFD)方法,根据IBRV gB基因的保守区域设计并筛选最佳引物和探针,通过优化反应条件建立IBRV ERA-LFD方法,并对其特异性、敏感性、重复性和符合性进行评估。... 详细信息

为建立可视化检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的酶促恒温扩增-侧向流动试纸(ERA-LFD)方法,根据IBRV gB基因的保守区域设计并筛选最佳引物和探针,通过优化反应条件建立IBRV ERA-LFD方法,并对其特异性、敏感性、重复性和符合性进行评估。结果显示,采用建立的方法检测牛呼吸道合胞体病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、多杀性巴氏杆菌、弓形虫均无交叉反应,特异性强;建立方法最低检出IBRV阳性质粒的量为1.63×10^(1) copies/μL,比PCR方法高100倍,敏感性高;对相同样品进行批间和批内检测,结果均一致,重复性好;ERA-LFD与PCR方法检出的符合率为96%,且测序证实ERA-LFD检测结果无误。IBRV ERA-LFD的临床样本检测结果显示阳性率为2.08%,与PCR方法的结果相一致,说明IBRV ERA-LFD方法适于临床样品检测,为IBRV的临床快速检测和流行病学调查提供了工具。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒酶促恒温扩增侧向流动试纸检测方法

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柔嫩艾美耳球虫重组鸡痘病毒的构建与免疫保护研究

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生物化学与生物物理进展 2006年第11期33卷 1099-1105页

作者：杨桂连李建华张西臣赵权尹继刚吉林大学畜牧兽医学院长春130062 吉林农业大学动物科学技术学院长春130118

以鸡柔嫩艾美耳球虫(***)杂交株F2的RNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增了杂交株F2的Rhomboid蛋白家族相关基因,将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,构建出克隆质粒pMD-Rhomboid.以KpnⅠ、PstⅠ双酶切重组质粒pMD-Rhomboid... 详细信息

以鸡柔嫩艾美耳球虫(***)杂交株F2的RNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增了杂交株F2的Rhomboid蛋白家族相关基因,将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,构建出克隆质粒pMD-Rhomboid.以KpnⅠ、PstⅠ双酶切重组质粒pMD-Rhomboid和鸡痘病毒载体质粒pUTA2,并将纯化的Rhomboid基因亚克隆至鸡痘病毒载体pUTA2复合启动子下游,构建出真核表达重组质粒pUTA-Rhomboid.采用脂质体转染技术,将该质粒转染FPV282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,通过BrdU药物加压筛选,并通过RT-PCR和蛋白质印迹等方法检测,筛选出一株球虫鸡痘重组病毒rFPV-Rhomboid.进一步经CEF扩增病毒后,免疫雏鸡,监测免疫指标.结果表明:重组病毒接种鸡外周血中的CD4+、CD8+含量显著高于非免疫对照组(P<0.05);与对照组相比,重组病毒对鸡的增重效果差异显著(P<0.05),对***的攻击具有一定的保护作用,显示出较好的应用前景.

关键词：柔嫩艾美耳球虫重组鸡痘病毒构建表达免疫保护

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反硝化耐冷菌Acinetobacter johnonii DBP-3的低温除磷特性

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环境科学学报 2012年第7期32卷 1557-1562页

作者：李明堂郝林琳刘梦洋赵兰坡吉林农业大学资源与环境学院长春130118 吉林大学畜牧兽医学院长春130062

通过批实验技术研究了不同条件下一株反硝化耐冷菌Acinetobacter johnonii DBP-3(Genbank登录号JN314436,保藏号CGMCC4753)的低温除磷特性.结果表明,菌株可分别利用氧气(O2)、硝酸根(NO3-)和亚硝酸根(NO2-)为电子受体吸收溶液中的磷酸盐... 详细信息

通过批实验技术研究了不同条件下一株反硝化耐冷菌Acinetobacter johnonii DBP-3(Genbank登录号JN314436,保藏号CGMCC4753)的低温除磷特性.结果表明,菌株可分别利用氧气(O2)、硝酸根(NO3-)和亚硝酸根(NO2-)为电子受体吸收溶液中的磷酸盐,不同电子受体条件下吸磷效能的大小顺序为:氧气>硝酸根>亚硝酸根.NO3-的浓度为0～150mg·L-1时,菌株对磷酸盐的吸收能力随着NO3-浓度的增加而增加.亚硝酸盐浓度为0～20mg·L-1时菌株对磷酸盐的吸收能力随NO2-浓度的增加而明显增加;浓度为20～60mg·L-1时,菌株对磷酸盐的吸收能力受NO2-浓度的影响较小;浓度达80mg·L-1时,菌株的除磷能力明显下降.不同碳源条件下厌氧培养的菌体细胞在缺氧条件下培养时对磷酸盐的去除能力大小顺序为:乙酸钠>柠檬酸钠>葡萄糖.菌株除磷的适宜pH值范围为7～9.温度为5℃时,菌株仍保持一定的除磷能力,随着温度的升高除磷能力逐渐增加,当温度达35℃时,除磷能力开始下降.菌株对盐度的耐受性在好氧培养时大于缺氧培养.缺氧培养48h,菌体细胞中磷的平均含量可达5.7%,而厌氧培养的菌体细胞中磷的最低含量为2.6%,表现出了明显的聚磷和释磷特性.研究结果可为低温富营养化水体或富氮磷污水的生物处理提供理论依据.

关键词：耐冷菌反硝化除磷电子受体碳源

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柔嫩艾美球虫杂交株F2 SO_7基因重组鸡痘病毒的构建和筛选

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第5期24卷 356-359页

作者：杨桂连张西臣赵权李建华尹继刚吉林大学畜牧兽医学院吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 吉林农业大学动物科学技术学院

目的构建柔嫩艾美球虫(***)杂交株F2SO7基因重组鸡痘病毒。方法将柔嫩艾美球虫杂交株F2SO7基因,插入到以胸苷激酶(TK)基因为侧翼的鸡痘病毒表达载体pUTA2中的复合启动子下游,获得重组表达质粒pUTA-SO7。用脂质体将重组表达质粒转染鸡痘... 详细信息

目的构建柔嫩艾美球虫(***)杂交株F2SO7基因重组鸡痘病毒。方法将柔嫩艾美球虫杂交株F2SO7基因,插入到以胸苷激酶(TK)基因为侧翼的鸡痘病毒表达载体pUTA2中的复合启动子下游,获得重组表达质粒pUTA-SO7。用脂质体将重组表达质粒转染鸡痘病毒(FPV)感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),培养、收获病毒后,用含40mg/L5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)的培养液,在TK基因阳性CEF细胞中筛选培养2代,然后用不含BrdU的培养液进行病毒噬斑纯化以筛选rFPV。结果PCR扩增可见650bp左右蛋白条带,间接荧光抗体试验(IFAT)可见重组病毒感染细胞表面有绿色荧光物质,蛋白质印迹分析(WesternBlotting),在相对分子质量(Mr)36000处有1条特异条带,证实了重组病毒在CEF中表达了SO7基因。结论成功筛选出表达***杂交株F2SO7基因的重组鸡痘病毒。

关键词：柔嫩艾美球虫 SO7 重组鸡痘病毒

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RNA干扰BC047440基因表达对HCT-8细胞增殖能力的影响

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中国生物制品学杂志 2010年第11期23卷 1207-1209,1216页

作者：唐亮赵权宫鹏涛李建华杨举张西臣吉林农业大学动物科技学院长春130118 吉林大学畜牧兽医学院长春130062

目的探讨RNA干扰结肠癌相关基因BC047440的表达对结肠癌细胞HCT-8增殖能力的影响。方法将BC047440基因shRNA干扰质粒pGPU6/GFP/Neo-BC047440-331(a1)、pGPU6/GFP/Neo-BC047440-451(a2)、pGPU6/GFP/Neo-BC047440-615(a3)、pGPU6/GFP/Neo-BC047440-756(a4)采用脂质体法转染结肠癌细胞HCT-8,荧光显微镜观察转染效率,荧光定量PCR法检测细胞BC047440基因mRNA的表达水平,MTT法分析细胞的增殖活性。结果细胞的转染效率为53%;干扰质粒a1、a2、a3、a4转染的HCT-8细胞BC047440基因mRNA的表达水平分别下降了36.1%、47.0%、53.8%和63.3%,a4质粒的干扰效率最高;细胞的增殖能力也明显下降。结论 BC047440基因RNA干扰质粒可明显抑制HCT-8细胞BC047440基因mRNA的表达及细胞的增殖,可能成为抑制结肠癌细胞生长的新基因。

关键词： BC047440基因结肠肿瘤 RNA干扰

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胰岛素、胰高血糖素对体外培养的牛脂肪细胞HSL mRNA和ADPN mRNA丰度的影响

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中国兽医学报 2007年第5期27卷 741-743页

作者：丛立新张才车英玉刘国文王哲吉林大学畜牧兽医学院吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118

试验在单层培养的新生犊牛脂肪细胞中,分别添加胰岛素(INS)与胰高血糖素(GN),每个激素设置6个梯度3个重复,通过荧光定量PCR技术,观测2种激素对ADPN mRNA与HSL mRNA丰度的影响。结果表明,胰岛素抑制了脂肪细胞ADPN mRNA与HSL mRNA的表达... 详细信息

试验在单层培养的新生犊牛脂肪细胞中,分别添加胰岛素(INS)与胰高血糖素(GN),每个激素设置6个梯度3个重复,通过荧光定量PCR技术,观测2种激素对ADPN mRNA与HSL mRNA丰度的影响。结果表明,胰岛素抑制了脂肪细胞ADPN mRNA与HSL mRNA的表达,胰高血糖素促进了ADPN mRNA与HSL mRNA的表达,且ADPNmRNA与HSL mRNA存在相关性。

关键词：胰岛素胰高血糖素牛脂肪细胞 HSLmRNA ADPNmRNA

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不同分化时期牛脂肪细胞抵抗素mRNA丰度变化

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中国兽医学报 2008年第1期28卷 84-86页

作者：宋文华孙国权张才刘国文车英玉夏成王哲王贵吉林大学畜牧兽医学院吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118

选取犊牛大网膜脂肪组织,进行牛前脂肪细胞的单层贴壁培养,在细胞接种4、6、8、10、12、14、16d分别提取细胞总RNA,进行RT-PCR反应,以β-actin为定量内参照,对抵抗素mRNA的丰度进行定量分析,观察在犊牛前脂肪细胞向脂肪细胞分化过程中... 详细信息

选取犊牛大网膜脂肪组织,进行牛前脂肪细胞的单层贴壁培养,在细胞接种4、6、8、10、12、14、16d分别提取细胞总RNA,进行RT-PCR反应,以β-actin为定量内参照,对抵抗素mRNA的丰度进行定量分析,观察在犊牛前脂肪细胞向脂肪细胞分化过程中抵抗素mRNA的表达规律。结果表明:在犊牛前脂肪细胞分化4～12d,抵抗素mRNA丰度逐渐降低,而分化成熟后14～16d有所回升。

关键词：脂肪细胞抵抗素 mRNA丰度

来源：评论

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