检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2024年第7期40卷 1197-1204页

作者：赵行宇丁思源何奇张巍吉林医药学院生化教研室吉林吉林132013

目的:探讨姜黄素(Cur)通过下调HeLa细胞腺病毒E1A相关300 kD蛋白(P300)调控HeLa细胞的活力及凋亡。方法:将对数生长期的HeLa细胞分别采用20、40、60和80μmol/L Cur处理,并以未处理组细胞作为对照,用CCK-8法检测细胞活力;选取20和40μmo... 详细信息

目的:探讨姜黄素(Cur)通过下调HeLa细胞腺病毒E1A相关300 kD蛋白(P300)调控HeLa细胞的活力及凋亡。方法:将对数生长期的HeLa细胞分别采用20、40、60和80μmol/L Cur处理,并以未处理组细胞作为对照,用CCK-8法检测细胞活力;选取20和40μmol/L Cur处理细胞,以流式细胞术检测细胞凋亡,RT-qPCR、Western blot法检测E6基因的mRNA和蛋白表达及凋亡相关蛋白、P300和组蛋白的表达;构建沉默质粒shE6和阴性对照质粒shNC转染HeLa细胞,设置shNC,shNC+Cur(40μmol/L),shE6以及shE6+Cur(40μmol/L)四组,以CCK-8、流式细胞术以及Western blot法分别检测细胞活力、凋亡以及凋亡相关蛋白的表达;构建沉默质粒siP300和阴性对照质粒siNC转染HeLa细胞,RT-PCR、Western blot法分别检测P300的mRNA和蛋白表达、E6的蛋白表达。结果:与未处理组相比,用不同浓度Cur处理HeLa细胞后能显著抑制其活力并可使早期凋亡率增高(P<0.05);Cur处理HeLa细胞后,E6的mRNA及蛋白表达均下调,而敲减E6与未敲减E6的Cur处理组相比,敲减组的早期凋亡率以及促凋亡相关蛋白表达均低于未敲减组(P<0.05);敲减P300后,HeLa细胞中E6蛋白表达降低;而单以Cur处理HeLa细胞后,P300及相关组蛋白表达均下调(P<0.01)。结论:Cur抑制HPV18阳性宫颈癌细胞的活力并促进其凋亡,机制可能与其下调P300而抑制E6蛋白乙酰化有关。

关键词：姜黄素乙酰化 HeLa细胞 P300

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肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺致小鼠生精障碍的治疗作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2014年第3期40卷 612-615,I0006页

作者：赵东海张磊张艳齐玲邹向明吉林医药学院病理学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院生化检验教研室吉林吉林132013 吉林医药学院教务处吉林吉林132013 吉林医药学院附属医院普外科吉林吉林132013

目的:探讨肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺致生精障碍小鼠的治疗作用,并初步阐明其作用机制。方法:乙醇浸提法提取肉苁蓉苯乙醇苷。40只BALB/C小鼠随机分为对照组、模型组、肉苁蓉苯乙醇苷低剂量组(50mg·kg-1)和高剂量组(100 mg·kg-... 详细信息

目的:探讨肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺致生精障碍小鼠的治疗作用,并初步阐明其作用机制。方法:乙醇浸提法提取肉苁蓉苯乙醇苷。40只BALB/C小鼠随机分为对照组、模型组、肉苁蓉苯乙醇苷低剂量组(50mg·kg-1)和高剂量组(100 mg·kg-1),每组10只。除对照组外,其余各组小鼠每天注射环磷酰胺(80mg·kg-1)连续5d,制备生精障碍小鼠模型。末次给药后,肉苁蓉苯乙醇苷低剂量组和高剂量组小鼠分别给予相应剂量灌胃,对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,连续30d。末次灌胃后24h,取小鼠睾丸组织。酶联免疫法测定小鼠睾丸组织匀浆中睾酮水平,比较各组小鼠精子密度、精子活率及精子畸形率,HE染色观察睾丸组织形态学变化。结果:与对照组比较,模型组小鼠精子密度和精子活率降低(P<0.01),精子畸形率升高(P<0.01),睾丸组织匀浆中睾酮水平降低(P<0.01);与模型组比较,肉苁蓉苯乙醇苷各剂量组小鼠精子密度和精子活率明显升高(P<0.01),精子畸形率降低(P<0.01),睾丸组织匀浆中睾酮水平升高(P<0.05或P<0.01)。组织学观察,模型组小鼠睾丸生精小管萎缩、退化,生精上皮明显变薄、生精细胞排列紊乱,腔内精子数目减少;肉苁蓉苯乙醇苷组小鼠睾丸生精上皮层数明显增多,层次分明,生精细胞排列整齐、紧密、规则,管腔内可见精子。结论:肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺所致小鼠生精障碍具有明显的治疗作用,其机制可能与改善睾丸组织中睾酮水平有关。

关键词：肉苁蓉苯乙醇苷环磷酰胺生精障碍小鼠,BALB C

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增强型绿色荧光蛋白融合对Ano1钙激活Cl-通道生理特性的影响

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生理学报 2015年第6期67卷 623-628页

作者：郑锴许会静藏雨轩侯毅鞠张丽杨海鸥朱洁方芳郝峰吉林医药学院生物化学检验教研室吉林132013 吉林医药学院临床血液学检验教研室吉林132013

本研究旨在探讨融合在Ano1钙激活Cl^-通道(anoctamin1)C末端的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对Ano1生理特性的影响。分别构建融合和未融合EGFP的Ano1真核表达载体,通过脂质体介导分别将这两类真核表达载体转染至Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(F... 详细信息

本研究旨在探讨融合在Ano1钙激活Cl^-通道(anoctamin1)C末端的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对Ano1生理特性的影响。分别构建融合和未融合EGFP的Ano1真核表达载体,通过脂质体介导分别将这两类真核表达载体转染至Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞,倒置荧光显微镜下观察融合和未融合EGFP的Ano1在FRT细胞中的表达与定位;荧光淬灭动力学检测Ano1转运I^-的能力。结果显示,融合和未融合EGFP的Ano1均表达于FRT细胞膜上,且均能被Ca^(2+)激活,融合和未融合EGFP的Ano1转运I^-的能力无明显差异。以上结果提示,Ano1和EGFP-Ano1具有相似的生理特性。

关键词：融合蛋白增强型绿色荧光蛋白 Ano1 生理特性钙激活Cl^-通道

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anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞中的表达及其离子通道特性

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吉林大学学报（医学版） 2014年第6期40卷 1226-1231,1337页

作者：郝峰王皓许会静方青张丽朱杭飞张雲乔鞠晓红吉林医药学院生物化学检验教研室吉林吉林132013 吉林医药学院实验中心吉林吉林132013 吉林医药学院病原教研室吉林吉林132013

目的:探讨anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达情况,分析其离子通道特性,为研究钙激活氯离子通道的生理功能提供实验依据。方法:PCR方法获得anoctamin 1编码区基因,构建pcDNA3.1-anoctamin 1真核表达载体。脂质体转染anoctamin ... 详细信息

目的:探讨anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达情况,分析其离子通道特性,为研究钙激活氯离子通道的生理功能提供实验依据。方法:PCR方法获得anoctamin 1编码区基因,构建pcDNA3.1-anoctamin 1真核表达载体。脂质体转染anoctamin 1至CHO中,抗生素筛选获取稳定表达anoctamin 1的CHO株。应用RT-PCR技术和倒置荧光显微镜检测anoctamin 1于CHO中的表达和分布情况。应用卤族元素敏感的黄色荧光蛋白双突变体YFP-H148Q/I152L检测anoctamin 1离子通道的功能。以加入calcimycin和高浓度碘离子的PBS缓冲液的为实验组,未加入calcimycin和高浓度碘离子的PBS缓冲液的为对照组。结果:限制性内切酶酶切后的琼脂糖凝胶电泳和测序,目的基因anoctamin 1克隆至真核表达载体pcDNA3.1;RT-PCR和倒置荧光显微镜观察,CHO在mRNA和蛋白水平表达anoctamin 1,且anoctamin 1蛋白主要表达于CHO膜上;荧光淬灭动力学实验,CHO表达的anoctamin 1具有转运碘离子的作用,且实验组碘离子转运速度显著高于对照组(P<0.05)。结论:anoctamin 1可高效表达于CHO膜;CHO表达的anoctamin 1具有经典钙激活氯离子通道特性。

关键词： anoctamin 1 离子通道卵巢细胞中国仓鼠

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芩丹颗粒对微波辐射大鼠POMC衍生肽含量及海马CA1区结构的影响

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中国中西医结合杂志 2016年第4期36卷 471-475页

作者：管兰芳李亚巍徐俊杰钟秀宏张红朱文赫吕士杰吉林医药学院教务处吉林132013 吉林医药学院药学教研室吉林132013 吉林医药学院生化教研室吉林132013 吉林医药学院病理教研室吉林132013

目的探讨高强度微波辐射对大鼠下丘脑—垂体—肾上腺轴(hypothalamo-pituitary-adrenal axis,HPAA)活动和海马CA1区结构的影响及芩丹颗粒对辐射损伤大鼠的保护作用。方法 Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组、照射后1、7、10d组、预防给... 详细信息

目的探讨高强度微波辐射对大鼠下丘脑—垂体—肾上腺轴(hypothalamo-pituitary-adrenal axis,HPAA)活动和海马CA1区结构的影响及芩丹颗粒对辐射损伤大鼠的保护作用。方法 Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组、照射后1、7、10d组、预防给药7、10d组、治疗给药7、10d组,共计8组,每组6只。预防组首先分别给予芩丹颗粒药液1mL/100g体重(4.75g生药)灌胃7d和10d,然后给予照射,再与正常对照组、照射后1d组一起统计药物对辐射损伤的预防效果;治疗组先进行照射,然后分别给予芩丹颗粒药液(用量同预防组)灌胃7d和10d,再与正常对照组、照射后7d和10d组一起统计药物对辐射损伤的治疗效果。检测各组大鼠促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)含量,光镜下观察海马CA1区神经元形态结构变化。结果与正常对照组比较,各照射组大鼠垂体CRH、β-EP含量明显降低,照射后1、7d组血清ACTH和β-Ep含量显著升高(P<0.05)。与照射组比较,预防组垂体、血清β-EP含量显著增加,血清ACTH含量显著降低(P<0.05);治疗组垂体CRH、β-EP含量显著增加,治疗给药7d组血清ACTH、β-EP和HSP70含量比照射后7d组显著降低(P<0.05)。形态学观察,照射组海马CA1区锥体神经元排列紊乱,细胞肿胀,胞核变小、浓缩,胞质深染,结构不清,部分区域血管扩张瘀血,组织水肿、疏松;预防组和治疗组海马CA1区组织病理损伤明显减轻,神经元排列较规则,肿胀、固缩或脱失神经元数目较少,血管扩张充血减轻。结论芩丹颗粒可以影响高强度微波辐射大鼠HPAA功能活动,调整HPAA部分生物活性肽及激素的合成与释放,改善海马CA1区组织病理损伤程度,对微波辐射损伤大鼠具有一定的预防和治疗作用。

关键词：微波辐射芩丹颗粒促肾上腺皮质激素海马

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TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究

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中国病理生理杂志 2014年第9期30卷 1633-1639页

作者：郝峰白雪松鞠晓红方芳藏雨轩朱杭飞向国艳张雲乔袁忠海吉林医药学院生物化学检验教研室吉林吉林132013 吉林医药学院营养教研室吉林吉林132013 吉林医药学院病原教研室吉林吉林132013

目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效... 详细信息

目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效率和表达效果,杀稻瘟菌素(blasticidin)进行抗生素筛选,获取稳定表达TMEM16A的FRT细胞株。RT-PCR和免疫荧光检测TMEM16A于FRT细胞的表达情况;倒置荧光显微镜下观察TMEM16A在FRT细胞中的表达和定位;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFPH148Q/I152L检测TMEM16A钙激活氯离子通道的功能。结果:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切的琼脂糖凝胶电泳和测序结果表明目的基因TMEM16A成功克隆到真核表达载体pUB6/V5中;RT-PCR和免疫荧光实验结果表明经杀稻瘟菌素筛选后的FRT细胞在mRNA和蛋白水平表达TMEM16A,倒置显微镜下观察结果表明TMEM16A在FRT细胞膜上有表达;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L证实稳定表达于FRT细胞的TMEM16A具有经典的钙激活氯离子通道特性。结论:FRT细胞可高效表达TMEM16A。TMEM16A是钙激活氯离子通道的分子基础。

关键词：跨膜蛋白16A 钙激活氯离子通道膜片钳术 Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞

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胡桃醌通过促进c-Myc泛素化降解抑制宫颈癌细胞的生长和促进凋亡

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南方医科大学学报 2022年第7期42卷 1026-1031页

作者：赵行宇杨昆宋梓桐何涵张巍吉林医药学院生化教研室吉林吉林132013 延边大学基础医学院生化教研室吉林延边133000

目的观察c-Myc蛋白在宫颈癌HeLa细胞中的表达,探讨胡桃醌通过影响c-Myc蛋白泛素化降解进而影响HeLa细胞的增殖与凋亡。方法培养人宫颈癌HeLa细胞,分为对照组:正常培养;10、20、50μmol/L胡桃醌组:培养液中分别加入对应浓度的胡桃醌。以W... 详细信息

目的观察c-Myc蛋白在宫颈癌HeLa细胞中的表达,探讨胡桃醌通过影响c-Myc蛋白泛素化降解进而影响HeLa细胞的增殖与凋亡。方法培养人宫颈癌HeLa细胞,分为对照组:正常培养;10、20、50μmol/L胡桃醌组:培养液中分别加入对应浓度的胡桃醌。以Westernblot方法分析胡桃醌处理后c-Myc蛋白的表达。HeLa细胞分为对照组和20μmol/L胡桃醌组,在培养0、2、4、8 h分别用Westernblot检测c-Myc蛋白表达的变化;放线菌酮(CHX)法检测c-Myc蛋白半衰期的变化;CoIP方法检测c-Myc蛋白降解影响。HeLa细胞分为空白对照组:正常培养;胡桃醌组:20μmol/L胡桃醌培养液培养;0.5、1.0、2.0μmol/LMG132组:分别与0、1.0、2.0μmol/L蛋白酶体抑制剂MG132加20μmol/L胡桃醌培养,检测c-Myc蛋白表达的水平。将si c-Myc转染入HeLa细胞后,将细胞分siNC组:空载体组;si-NC;胡桃醌组:空载体加20μmol/L胡桃醌处理;si-cMyc组:转染Myc RNA;sicMyc20μmol/L胡桃醌组:转染Myc RNA加20μmol/L胡桃醌处理。MTT及流式细胞术检测20μmol/L胡桃醌处理后对敲除及未敲除c-Myc基因的细胞增殖及凋亡的影响。结果与对照组相比,不同浓度胡桃醌可下调c-Myc蛋白表达且曾时间及剂量依赖性(P<0.05;P<0.01);胡桃醌可缩短c-Myc蛋白的半衰期,加入不同浓度的MG132后,即可明显上调c-Myc蛋白水平(P<0.05;P<0.01)。未用胡桃醌组相比,胡桃醌可明显增加c-Myc蛋白的泛素降解水平。未敲除c-Myc组相比,敲除组在胡桃醌处理后吸光度值明显增加(P<0.05)和早期凋亡率明显下降(P<0.05)。结论胡桃醌通过影响c-Myc蛋白的泛素化降解过程,进而抑制HeLa细胞增殖并促进其凋亡的发生。

关键词：胡桃醌宫颈癌 HeLa c-Myc 泛素化

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越橘提取物花色苷对宫颈癌HeLa细胞的作用

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中国妇幼保健 2010年第14期25卷 1976-1979页

作者：姜艳霞雷钧涛吕士杰刘诗兵王程马健康吉林医药学院生化教研室吉林吉林132013 吉林医药学院药学教研室吉林医药学院科研实验室

目的:研究越橘提取物花色苷对宫颈癌Hela细胞的影响作用。方法:以不同浓度的越橘提取物花色苷作用于宫颈癌Hela细胞48h,采用MTT法观察越橘花色苷对Hela细胞的生长抑制作用,荧光染色观察细胞形态学改变,以流式细胞术观察DNA含量和细胞凋... 详细信息

目的:研究越橘提取物花色苷对宫颈癌Hela细胞的影响作用。方法:以不同浓度的越橘提取物花色苷作用于宫颈癌Hela细胞48h,采用MTT法观察越橘花色苷对Hela细胞的生长抑制作用,荧光染色观察细胞形态学改变,以流式细胞术观察DNA含量和细胞凋亡的变化情况,同时检测细胞培养上清液中IL-10、IFN-γ、TNF-α的变化。结果:Hela细胞用10、20、30、40mg/ml的越橘提取物花色苷处理48h后,随越橘花色苷浓度加大,细胞抑制率显著升高;荧光染色可见,浓染致密的颗粒状荧光,并呈现凋亡核固缩形态;流式细胞仪检测,细胞周期改变明显;IFN-γ和IL-10高于对照组,但IFN-γ与对照组有显著差别(P<0.05);各组之间TNF-α变化不明显(P>0.05)。结论:越橘提取物花色苷在体外对宫颈癌Hela细胞的生长有明显地抑制作用,可能与其改变细胞DNA周期、促进调亡有关。

关键词：花色苷细胞凋亡 Hela细胞

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桦褐孔菌多糖对微波辐射致大鼠免疫损伤的防护作用

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中国老年学杂志 2014年第23期34卷 6685-6686页

作者：孙艳美钟秀宏吕士杰吉林医药学院检验学院吉林吉林132013 吉林医药学院病理学教研室吉林医药学院生物化学教研室

目的探讨桦褐孔菌多糖对高功率微波辐射致大鼠免疫损伤的影响。方法 18只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组、微波辐射模型组和药物预防组,每组6只。正常对照组不予任何处理,微波辐射模型组采用微波辐射装置辐射6 min,照射平均功率密度... 详细信息

目的探讨桦褐孔菌多糖对高功率微波辐射致大鼠免疫损伤的影响。方法 18只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组、微波辐射模型组和药物预防组,每组6只。正常对照组不予任何处理,微波辐射模型组采用微波辐射装置辐射6 min,照射平均功率密度为200 m W/cm2;药物预防组先用桦褐孔菌多糖溶液灌胃,每次2 ml(按400 mg/kg),1次/d,连续10 d,然后当天进行微波辐射,照射条件同微波辐射模型组。第11天全部动物乙醚麻醉,股动脉取血,检测大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及大鼠血清Ig G含量,冰浴下立即取大鼠脾脏,观察各组脾脏形态学的变化。结果与正常对照组比较,微波辐射模型组大鼠脾脏白髓和红髓结构紊乱,淋巴细胞坏死和凋亡;药物预防组与微波辐射模型组比较,大鼠脾脏形态结构上的损害较轻,大鼠红髓与白髓分界清晰,脾脏生发中心均可见。与正常对照组比较,微波辐射模型组大鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数都明显降低,血清中Ig G含量也减少(P<0.05);与微波辐射模型组比较,药物预防组大鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数都明显升高,血清中Ig G含量也增加(P<0.05)。结论桦褐孔菌多糖能提高机体的体液免疫水平和非特异性免疫能力,对微波辐射致机体的免疫功能损伤有一定的防护作用。

关键词：桦褐孔菌多糖微波辐射免疫损伤

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雌激素与山核桃油干预对去卵巢大鼠海马早老基因-1与载脂蛋白E基因表达的影响

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食品科学 2010年第15期31卷 264-267页

作者：陈默然张巍沈楠赵行宇吉林医药学院科研处吉林吉林132013 吉林医药学院生化教研室吉林吉林132013 吉林医药学院实验中心吉林吉林132013 吉林医药学院心理教研室吉林吉林132013

目的:观察雌激素干预后,核桃油对去卵巢大鼠海马组织早老基因-1(PS-1)与载脂蛋白E(aproE)基因表达及匀浆液中β淀粉样肽(Aβ)含量的变化。探讨核桃油对PS-1、aproE表达的调节与雌激素(E2)间的关系。方法:以去卵巢雌性大鼠为动物模型,实... 详细信息

目的:观察雌激素干预后,核桃油对去卵巢大鼠海马组织早老基因-1(PS-1)与载脂蛋白E(aproE)基因表达及匀浆液中β淀粉样肽(Aβ)含量的变化。探讨核桃油对PS-1、aproE表达的调节与雌激素(E2)间的关系。方法:以去卵巢雌性大鼠为动物模型,实验组灌胃给予核桃油100mg/(kgbw·d)(低剂量组)、200mg/(kgbw·d)(中剂量组)、400mg/(kgbw·d)(高剂量组)(n=16)。空白组给予相同剂量的生理盐水。各组一半的大鼠随机接受E2处理,采用RT-PCR检测大鼠海马PS-1与aproE基因表达,RIA检测海马Aβ的含量的变化,放免法测血清E2水平。结果:雌激素干预的模型鼠血清E2水平显著高予未干预组(P<0.01);海马Aβ含量空白组最高,随核桃油剂量增加Aβ含量逐渐下降,中、高剂量组更显著(P<0.05),E2干预后Aβ含量下降更明显;空白组PS-1的表达最高而apoE的表达最低,随核桃油剂量增加各剂量组PS-1的表达仅轻度下降,apoE-mRNA表达明显增加;雌激素干预后PS-1的表达有所下降,apoE基因各组间表达差异消失。结论:E2和核桃油都可以通过降低去卵巢大鼠海马的PS-1基因及增加aproE基因的表达来降低Aβ的水平;但二者对PS-1基因调节可能通过不同的途径实现,而对apoE基因可能通过相同的途径来调节。

关键词： RT-PCR PS-1 apoE Aβ 去卵巢大鼠

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