检索结果-内蒙古大学图书馆

毒理学杂志 2019年第1期33卷 7-11页

作者：于洋徐路刘师兵李松岩徐冶吉林医药学院医学科研实验室吉林吉林132013 吉林医药学院基础医学院组织与胚胎学教研室吉林吉林132013

目的观察ABT737作用于人卵巢癌顺铂耐药SKOV3/DDP细胞后,细胞凋亡和自噬的发生,探讨抑制自噬后对凋亡的影响。方法体外培养SKOV3/DDP细胞,按ABT737药物终浓度0、2.5、5.0和10.0μmol/L分为4组,分别作用12和24 h。流式细胞术检测各组细... 详细信息

目的观察ABT737作用于人卵巢癌顺铂耐药SKOV3/DDP细胞后,细胞凋亡和自噬的发生,探讨抑制自噬后对凋亡的影响。方法体外培养SKOV3/DDP细胞,按ABT737药物终浓度0、2.5、5.0和10.0μmol/L分为4组,分别作用12和24 h。流式细胞术检测各组细胞凋亡率,分别采用免疫荧光和免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达水平。将细胞分为对照组、ABT737组、3-Ma组和联合用药组,分别以细胞培养基、ABT737(5.0μmol/L)、3-Ma(1.0 mmol/L)和ABT737联合3-Ma作用于SKOV3/DDP细胞,Western blot法检测12和24 h后凋亡相关蛋白active Caspase-3和cyto C的表达水平。结果与对照组比较,12和24 h各剂量ABT737组细胞凋亡率均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01)。间接免疫荧光法检测LC3和Beclin-1蛋白表达,结果显示随着ABT737药物终浓度增加和作用时间的延长,两蛋白阳性表达亮度均越来越强,提示蛋白表达增强。Western blot检测LC3和Beclin-1蛋白表达水平,结果显示随着ABT737药物终浓度增加和作用时间的延长,细胞中LC3(F=10.878,F=13.256,P<0.05)和Beclin-1(F=6.589,F=7.365,P<0.05)蛋白表达水平均逐渐升高。3-Ma抑制自噬后,与ABT737组相比,联合用药组active Caspase-3 12和24 h表达水平明显增强,12和24 h cyto C表达水平也明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ABT737诱导人卵巢癌顺铂耐药SKOV3/DDP细胞凋亡的同时伴随着自噬的发生,抑制自噬能够促进凋亡。

关键词： ABT737 凋亡自噬 3-Ma SKOV3/DDP细胞

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杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞自噬的诱导作用及线粒体分裂的促进作用

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吉林大学学报（医学版） 2017年第4期43卷 685-689,I0002页

作者：于洋刘师兵李松岩徐路徐冶吉林医药学院医学科研实验室吉林吉林132013 吉林医药学院基础医学院组织与胚胎学教研室吉林吉林132010

目的:观察杨梅素作用于人卵巢癌SKOV3细胞后细胞自噬的发生和线粒体分裂程度,探讨杨梅素对其线粒体分裂的影响及自噬的诱导作用。方法:体外培养SKOV3细胞,杨梅素给药剂量按0、20、40和60g·L^(-1)分为对照组和低、中、高剂量杨梅素... 详细信息

目的:观察杨梅素作用于人卵巢癌SKOV3细胞后细胞自噬的发生和线粒体分裂程度,探讨杨梅素对其线粒体分裂的影响及自噬的诱导作用。方法:体外培养SKOV3细胞,杨梅素给药剂量按0、20、40和60g·L^(-1)分为对照组和低、中、高剂量杨梅素组,均作用12h。流式细胞术检测各组细胞线粒体膜电位变化,MitoTracker Red荧光探针特异性标记线粒体观察其形态,Western blotting法检测动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)和自噬相关蛋白LC3-Ⅰ及LC3-Ⅱ蛋白表达水平,采用间接免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3表达强度。结果:与对照组比较,各剂量杨梅素组细胞线粒体膜电位下降比例明显升高(t=3.27,t=6.85,t=5.49,P<0.05)。与对照组比较,各剂量杨梅素组细胞中线粒体数目增加,且线粒体砂砾感增强。与对照组比较,各剂量杨梅素组细胞中Drp1(t=4.35,t=3.28,t=6.17,P<0.05)和Fis1(t=8.32,t=6.74,t=9.27,P<0.05)蛋白表达水平明显升高,中和高剂量杨梅素组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显升高(t=3.28,t=4.21,P<0.05)。间接免疫荧光检测,与对照组比较,随着杨梅素给药剂量增加,LC3表达强度逐渐增强。结论:杨梅素能够诱导人卵巢癌SKOV3细胞发生自噬,并对线粒体动分裂有明显促进作用。

关键词：杨梅素 SKOV3细胞自噬线粒体分裂

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脂多糖通过调节iNOS表达影响人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性的研究

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毒理学杂志 2017年第5期31卷 350-354页

作者：于洋刘师兵李松岩徐路徐冶吉林医药学院医学科研实验室吉林吉林132013 吉林医药学院基础医学院

目的观察脂多糖诱导的SKOV3/DDP细胞内分泌型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化对人卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂耐药性的影响,并初步探讨机制。方法体外培养SKOV3/DDP细胞,分为对照组、顺铂组、脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)组和联合用药组... 详细信息

目的观察脂多糖诱导的SKOV3/DDP细胞内分泌型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化对人卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂耐药性的影响,并初步探讨机制。方法体外培养SKOV3/DDP细胞,分为对照组、顺铂组、脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)组和联合用药组共4组,对照组给予常规不加血清培养基,顺铂组给予10μg/ml顺铂,LPS组给予浓度为1μg/ml的LPS,联合用药组给予10μg/ml顺铂和1μg/ml LPS,均作用24 h。MTT法检测各组细胞活力;蛋白免疫印迹法观察各组iNOS表达;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;间接免疫荧光法观察各组细胞激活型Caspase-3表达。结果联合用药组细胞活力明显低于顺铂组(P<0.05);顺铂组与对照组iNOS表达差异无统计学意义(P>0.05),LPS组和联合用药组iNOS表达水平明显高于对照组(P<0.05),且联合用药组高于LPS组(P<0.05);流式细胞术结果显示联合用药组细胞凋亡率明显高于顺铂组(P<0.05),且通过间接免疫荧光法显示联合用药组细胞激活型Caspase-3表达高于顺铂组(P<0.05)。结论 LPS能够降低人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性,这可能与其提高SKOV3/DDP细胞内iNOS表达水平有关。

关键词：脂多糖顺铂耐药性 i NOS SKOV3/DDP细胞

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Ca^(2+)在顺铂诱导人卵巢癌SKOV3细胞自噬反应中的作用

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中国癌症杂志 2016年第4期26卷 313-319页

作者：曾林川邓慧敏陈君窦茗瀚徐冶吉林医药学院公共卫生学院吉林吉林132013 吉林医药学院医学科研实验室吉林吉林132013

背景与目的:Ca^(2+)在维持细胞生物活性方面扮演着很重要的角色,其在细胞内的储存、释放和摄取主要受内质网调节,细胞内Ca^(2+)浓度的稳态是维持细胞生物能量代谢、蛋白质折叠和分泌的基础条件。本研究探讨Ca^(2+)在顺铂诱导SKOV3细胞... 详细信息

背景与目的:Ca^(2+)在维持细胞生物活性方面扮演着很重要的角色,其在细胞内的储存、释放和摄取主要受内质网调节,细胞内Ca^(2+)浓度的稳态是维持细胞生物能量代谢、蛋白质折叠和分泌的基础条件。本研究探讨Ca^(2+)在顺铂诱导SKOV3细胞内质网应激-自噬反应中的作用机制。方法:取人卵巢癌SKOV3细胞系为研究对象,按以下步骤分组:1探讨顺铂诱导内质网应激与自噬反应,用6μg/m L的顺铂处理SKOV3细胞0、6、12和24 h;2了解顺铂和毒胡萝卜内酯(thapsigargin,TG)诱导内质网应激释放的Ca^(2+)与自噬的关系,分别用TG和顺铂处理SKOV3细胞0、9和12 h;3探究Ca^(2+)对自噬的作用机制,分成对照组、顺铂组、TG组、BAPTA-AM组、顺铂联合BAPTA-AM组和TG联合BAPTA-AM组。用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测内质网应激相关蛋白GRP78和自噬标志性蛋白LC3蛋白的表达水平;用Fluo-4钙离子荧光探针检测细胞质中的Ca^(2+)浓度变化;间接免疫荧光染色后,用共聚焦显微镜检测LC3蛋白的表达情况。结果:SKOV3细胞经6μg/m L顺铂作用6 h时GRP78灰度值(1.393±0.004)与其对照组(0.679±0.011)相比显著提高(t=113.2,P=0.000),在12 h时LC3灰度值(0.072±0.002)与其对照组(0.038±0.000)相比显著提高(t=25.5,P=0.000)。间接免疫荧光结果显示,顺铂(6μg/m L)组和TG(3μmol/L)组随作用时间的延长,细胞内LC3荧光斑点会逐渐增多,并伴随着细胞质Ca^(2+)浓度上升。后经钙离子络合剂BAPTA-AM干预后,细胞内LC3荧光强度进一步增强。Westren blot结果显示,顺铂组LC3灰度值(0.039±0.000)小于顺铂联合BAPTA-AM组(0.071±0.001),TG组(0.035±0.001)小于TG联合BAPTA-AM组(0.065±0.001),差异有统计学意义(P=0.000)。结论:顺铂诱导SKOV3细胞内质网应激和自噬的发生,并伴随着细胞质内Ca^(2+)浓度的上升。络合细胞质内Ca^(2+)能增强顺铂诱导的自噬反应。

关键词：顺铂 Ca^2+ 内质网应激自噬

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人胎盘组织液对自然衰老大鼠海马区细胞凋亡和氧化应激的影响

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中国老年学杂志 2016年第2期36卷 282-284页

作者：刘师兵徐冶于洋李松岩张国昊陈彤高磊吉林医药学院基础医学院医学科研实验室吉林吉林132013 吉林医药学院临床医学院

目的探讨人胎盘组织液对自然衰老大鼠大脑海马区凋亡相关蛋白及氧化应激水平的影响及人胎盘组织液的抗衰老作用。方法将雄性SD大鼠平均分为四组,每日分别腹腔注射生理盐水和低、中、高剂量的人胎盘组织液,连续注射24 w。应用HE染色、脂... 详细信息

目的探讨人胎盘组织液对自然衰老大鼠大脑海马区凋亡相关蛋白及氧化应激水平的影响及人胎盘组织液的抗衰老作用。方法将雄性SD大鼠平均分为四组,每日分别腹腔注射生理盐水和低、中、高剂量的人胎盘组织液,连续注射24 w。应用HE染色、脂褐素染色、免疫组化技术检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,观察人胎盘组织液对Bcl-2、Bax蛋白表达量以及Bcl-2/Bax比例的变化,以及对衰老大鼠大脑细胞氧化自由基损伤的影响。结果模型组大鼠大脑海马区Bax蛋白及脂褐素表达量明显高于用药组,Bcl-2蛋白表达量明显降低;模型组SOD值低于用药组,MDA值高于用药组。结论人胎盘组织液能通过提高组织抗氧化能力和减少细胞凋亡从而延缓衰老。

关键词：人胎盘提取液海马神经元 Bcl-2 Bax

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大蒜素对衰老模型小鼠心脏和肺的保护作用

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医药导报 2016年第2期35卷 115-120页

作者：于洋刘师兵李松岩徐冶吉林医药学院医学科研实验室吉林132013

目的观察大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠心肌和肺组织氧化应激与细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法雄性昆明小鼠50只,按体质量随机分为正常对照组(C组)、模型对照组(D组)和大蒜素小剂量组(L组)、中剂量组(M组)、大剂量组(H组),每... 详细信息

目的观察大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠心肌和肺组织氧化应激与细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法雄性昆明小鼠50只,按体质量随机分为正常对照组(C组)、模型对照组(D组)和大蒜素小剂量组(L组)、中剂量组(M组)、大剂量组(H组),每组10只。D、L、M、H组小鼠注射D-半乳糖0.9%氯化钠溶液制备衰老模型,L、M和H组同时腹腔注射大蒜素注射液进行给药干预,共持续6周。通过小鼠转棒疲劳仪和小鼠跑台检测各组小鼠运动耐力;检测心肌和肺组织匀浆上清液中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化力(T-AOC);免疫组织化学法观察凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达并统计二者比值变化。结果行为学实验结果:与C组比较,D组小鼠在疲劳转棒上的停留时间和小鼠跑台上持续跑步时间均明显缩短(P<0.05),L、M、H组较D组有所延长;D组小鼠心肌和肺组织匀浆上清液中MDA含量较C组升高(P<0.05),SOD活性下降(P<0.05),T-AOC下降(P<0.05),L、M、H组较D组小鼠心肌和肺组织匀浆中MDA含量下降(均P<0.05),SOD活性升高(均P<0.05),T-AOC上升(均P<0.05),且呈现一定剂量效应关系;免疫组化结果显示:D组小鼠较C组小鼠心肌Bax表达增强,Bcl-2表达减弱,L、M、H组小鼠Bax表达较D组减弱,Bcl-2表达较D组增强,肺组织两种蛋白表达趋势同心肌组织。结论大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠心脏和肺具有保护作用,具体表现为增加衰老小鼠心肺运动耐力、减轻心肌和肺局部组织过氧化水平,并减少心肌和肺组织内的细胞凋亡。

关键词：大蒜素小鼠,衰老氧化应激凋亡

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大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠卵巢FSHR、LHR和active Caspase-3蛋白表达的影响

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吉林医药学院学报 2016年第5期37卷 321-324页

作者：于洋刘师兵李松岩徐冶吉林医药学院医学科研实验室吉林吉林132013

目的观察大蒜素对D-半乳糖所致的雌性衰老小鼠促卵泡素受体(FSHR)与促黄体素受体(LHR)表达水平的影响,结合凋亡相关蛋白active Caspase-3表达变化初步探讨原因。方法 SPF级雌性昆明小鼠40只,随机分为对照组、模型组、大蒜素组和维生素C... 详细信息

目的观察大蒜素对D-半乳糖所致的雌性衰老小鼠促卵泡素受体(FSHR)与促黄体素受体(LHR)表达水平的影响,结合凋亡相关蛋白active Caspase-3表达变化初步探讨原因。方法 SPF级雌性昆明小鼠40只,随机分为对照组、模型组、大蒜素组和维生素C组,每组10只。模型组、大蒜素组和维生素C组小鼠以100 mg/kg体重剂量皮下注射D-半乳糖生理盐水溶液,对照组小鼠注射同体积生理盐水,每日1次,同期大蒜素组以20 mg/kg剂量腹腔注射大蒜素注射液,维生素C组以50 mg/kg剂量腹腔注射维生素C,对照组及模型组腹腔注射同体积生理盐水,共持续6周。给药结束后采集标本,Western blot法检测卵巢组织FSHR与LHR表达水平,免疫荧光法观察active Caspase-3表达变化。结果与对照组相比,模型组FSHR与LHR表达水平明显升高(P<0.05),active Caspase-3表达增强,大蒜素组FSHR与LHR表达水平(与β-actin比较)分别为0.63±0.07和0.82±0.06,较模型组明显下降(P<0.05),active Caspase-3表达亦有减弱趋势。结论大蒜素能下调FSHR与LHR表达水平,提示其一定程度上延缓了D-半乳糖所致小鼠卵巢的衰老,该作用可能与其减少卵巢细胞凋亡有关。

关键词：大蒜素衰老卵巢 FSHR LHR active Caspase-3

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以糖代谢为靶向的肿瘤治疗研究进展

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吉林医药学院学报 2016年第5期37卷 372-374页

作者：王烟张丽丽曾林川李质馨徐冶吉林医药学院公共卫生学院吉林吉林132013 吉林医药学院组织学与胚胎学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院医学科研实验室吉林吉林132013

恶性肿瘤细胞和正常细胞之间的糖代谢存在本质上的差异。在常氧条件下,正常细胞通过氧化磷酸化产生ATP,而肿瘤细胞高度依赖糖酵解。全面了解肿瘤细胞独特的糖代谢方式将有助于寻找以糖代谢途径为靶点的更有效的肿瘤治疗药物,这将对肿瘤... 详细信息

恶性肿瘤细胞和正常细胞之间的糖代谢存在本质上的差异。在常氧条件下,正常细胞通过氧化磷酸化产生ATP,而肿瘤细胞高度依赖糖酵解。全面了解肿瘤细胞独特的糖代谢方式将有助于寻找以糖代谢途径为靶点的更有效的肿瘤治疗药物,这将对肿瘤治疗效果的提高产生极大的影响。本文对瓦伯格效应(Warburg effect)在肿瘤中的作用、以糖酵解途径作为肿瘤治疗靶标研究以及以氧化磷酸化途径为靶点的进展作一阐述。

关键词：肿瘤糖代谢靶点

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大蒜素对D-半乳糖致衰老模型大鼠学习记忆能力及脑组织氧化应激相关蛋白的影响

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解放军医学杂志 2015年第11期40卷 880-884页

作者：于洋徐冶刘师兵李松岩曾林川吉林医药学院医学科研实验室吉林省吉林市132013 吉林医药学院

目的观察大蒜素对D-半乳糖致衰老大鼠脑部衰老的影响,并从氧化应激通路入手探讨其中可能的机制。方法取50只雄性SD大鼠作为研究对象,随机分为5组(n=10):正常组(C组)、D-半乳糖组(D组)和大蒜素组,其中大蒜素组按剂量分为低剂量组(L组)、... 详细信息

目的观察大蒜素对D-半乳糖致衰老大鼠脑部衰老的影响,并从氧化应激通路入手探讨其中可能的机制。方法取50只雄性SD大鼠作为研究对象,随机分为5组(n=10):正常组(C组)、D-半乳糖组(D组)和大蒜素组,其中大蒜素组按剂量分为低剂量组(L组)、中剂量组(M组)和高剂量组(H组)。D、L、M、H组按大鼠体重以125mg/kg的剂量皮下注射D-半乳糖生理盐水溶液,C组皮下注射同体积生理盐水对照,每日8:00注射1次。同时,L、M和H组分别腹腔注射10、20和40mg/kg大蒜素注射液,C组和D组以同体积生理盐水作对照处理,每日20:00注射1次,所有大鼠均持续注射6周。通过行为学实验,观察各组大鼠学习记忆能力。处死后取各组大鼠脑组织:检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化力(T-AOC);另取部分脑组织:固定包埋后石蜡切片,采用免疫组织化学法观察海马区凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果行为学实验结果显示,与C组比较,D组大鼠学习记忆能力明显下降,而大蒜素干预的各组大鼠记忆能力有所增强。与C组比较,D组大鼠脑组织匀浆中MDA含量升高(P<0.05),SOD活性下降(P<0.05),T-AOC下降(P<0.05),大蒜素干预的各组大鼠较D组MDA含量下降(P<0.05),SOD活性增强(P<0.05),T-AOC上升(P<0.05),且呈现一定的剂量效应关系。免疫组化结果显示,与C组比较,D组Bax表达明显增加(P<0.05),Bcl-2表达明显减弱(P<0.05),大蒜素干预的L、M、H组大鼠Bax表达较D组呈减弱趋势,Bcl-2表达较D组呈增强趋势,但结果并无统计学意义。结论大蒜素可改善D-半乳糖致衰老大鼠的学习记忆能力,提高脑组织匀浆中SOD活性,降低MDA含量,增强脑组织总抗氧化力,并减轻衰老大鼠脑海马区细胞凋亡。

关键词：大蒜素衰老脑氧化应激凋亡

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浅谈医学科研实验平台建设运行与可持续发展

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实验室研究与探索 2015年第5期34卷 220-223页

作者：于洋刘师兵王晓军孙路阳曹慧玲徐冶吉林医药学院医学科研实验室吉林吉林132013

随着医学科学研究事业的发展,对于医学科研实验平台建设的要求越来越迫切,很多医疗机构或医学院校都急需建立公共科研实验平台以满足临床科研与教学科研的需要,公共医学科研实验平台建立建设能够最大限度满足实际需要的同时对可利用资... 详细信息

随着医学科学研究事业的发展,对于医学科研实验平台建设的要求越来越迫切,很多医疗机构或医学院校都急需建立公共科研实验平台以满足临床科研与教学科研的需要,公共医学科研实验平台建立建设能够最大限度满足实际需要的同时对可利用资源进行最大限度的整合,针对实验平台的前期准备、场地选择、仪器购置、人员配置到实验室的运行与发展等实际过程,从硬件建设、人员素质建设和实验室运行与发展三方面来探索公共医学科研试验平台建设运行与可持续发展的科学模式。

关键词：科研实验平台建设与管理实验室运行人员素质

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