检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2025年第2期52卷 859-874页

作者：石伟雄# 高飞苏磊中国医学科学院医学实验动物研究所国家人类疾病动物模型资源库北京100021 吉林大学动物科学学院(实验动物中心) 吉林长春130062

【背景】实验动物中不断发现干扰科学研究的新病原体,库氏棒杆菌(Corynebacterium kutscheri)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)作为影响实验动物健康的病原微生物,是国标中要求的必检微生物。本研究从吉林大学实验动物中心饲养... 详细信息

【背景】实验动物中不断发现干扰科学研究的新病原体,库氏棒杆菌(Corynebacterium kutscheri)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)作为影响实验动物健康的病原微生物,是国标中要求的必检微生物。本研究从吉林大学实验动物中心饲养的无特定病原体(specific pathogen-free,SPF)级小鼠体内分离到1株疑似库氏棒杆菌和1株疑似铜绿假单胞菌。【目的】鉴定这些病原微生物的种类、生物学特性、系统发育关系及基因组特征,为该病原微生物标准物质的研制及检测评价技术体系的建立提供生物资源并奠定基础。【方法】采用革兰氏染色、药敏试验、生理生化等方法对病原生物学特征进行鉴定;结合PCR鉴定、系统发育分析、全基因组测序、生物信息学等技术明确该菌的遗传学特征。【结果】形态观察、16S rRNA基因序列、基因组分析及系统发育分析证实,该分离菌株分别被鉴定为库氏棒杆菌CCPM-B-B-019-2402-1和铜绿假单胞菌CCPM-B-B-013-2402-3;药敏试验表明,库氏棒杆菌CCPM-B-B-019-2402-1对苯唑西林、呋喃妥因和苄青霉素耐药,铜绿假单胞菌CCPM-B-B-013-2402-3对替卡西林/克拉维酸和替加环素耐药,对头孢他啶、环丙沙星、左氧氟沙星等9种抗生素敏感;全基因组测序结果表明,库氏棒杆菌CCPM-B-B-019-2402-1携带有fagA、fagB、fagC、fagD等重要毒力基因,铜绿假单胞菌CCPM-B-B-013-2402-3携带有plcB、tse6、tse5等毒力基因。【结论】对SPF级小鼠气管组织和盲肠内容中分离出的2株病原菌进行了鉴定,并对2株病原菌进行了基因组特征分析,该研究为实验动物病原细菌标准株的建立,以及实验动物病原标准物质的研制和实验动物的质量控制提供了重要资源和支撑。

关键词：库氏棒杆菌铜绿假单胞菌生物学特征基因组特征系统发育分析

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屏障环境中IVC系统内使用脏垫料哨兵小鼠监测螨虫和鞭毛虫感染

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实验动物科学 2025年第1期42卷 69-73页

作者：王美芳于小亚李志满孙广杰孙占微杨永广孙丽光吉林大学第一医院实验动物中心长春130021 吉林省科技创新平台管理中心长春130021 人类疾病动物模型国家地方联合工程实验室长春130021

目的验证屏障环境中的IVC系统内不同类型(玉米芯和刨花)脏垫料条件下的哨兵小鼠监测螨虫和鞭毛虫感染的有效时间和敏感度,以探讨其实际监测能力。方法将42只哨兵小鼠(4周龄雌性ICR小鼠)随机分为6组,间接添加螨虫和鞭毛虫双阳性小鼠的100... 详细信息

目的验证屏障环境中的IVC系统内不同类型(玉米芯和刨花)脏垫料条件下的哨兵小鼠监测螨虫和鞭毛虫感染的有效时间和敏感度,以探讨其实际监测能力。方法将42只哨兵小鼠(4周龄雌性ICR小鼠)随机分为6组,间接添加螨虫和鞭毛虫双阳性小鼠的100%饲养脏垫料(玉米芯或刨花)给哨兵小鼠使用,或直接放置哨兵小鼠到螨虫和鞭毛虫双重感染的小鼠饲养笼内,暴露不同时间后检测哨兵小鼠的感染情况。结果6周后,添加玉米芯和刨花脏垫料的哨兵小鼠螨虫感染率分别为为20%和60%,但两组哨兵鼠鞭毛虫检测均为阴性。8周后,添加玉米芯和刨花脏垫料的哨兵小鼠螨虫感染率分别为33.33%和83.33%,但只有玉米芯饲养组鞭毛虫呈阳性(感染率为16.67%)。与螨虫和鞭毛虫双阳性小鼠共饲养在同一个笼内的哨兵小鼠在接触25 d时100%感染了螨虫和鞭毛虫。结论玉米芯脏垫料暴露在监控螨虫感染时不及刨花脏垫料敏感,提示刨花脏垫料暴露法对于种群不容易扩大的鼠群有借鉴意义。

关键词：哨兵小鼠屏障环境 IVC系统寄生虫感染

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犬瘟热病毒重组核蛋白间接ELISA方法的建立

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畜牧与兽医 2008年第5期40卷 37-40页

作者：王琛袁宝任文陟张嘉保吉林大学农学部实验动物中心

将已构建成功的重组质粒pGEX-4T-1-N转化大肠杆菌BL21株,在最佳诱导条件下获得犬瘟热病毒(CDV)重组N蛋白。将表达产物纯化后进行SDS-PAGE和W estern-b lot分析,与CDV标准阳性血清呈阳性反应。本研究初步建立了以纯化的N蛋白为包被抗原... 详细信息

将已构建成功的重组质粒pGEX-4T-1-N转化大肠杆菌BL21株,在最佳诱导条件下获得犬瘟热病毒(CDV)重组N蛋白。将表达产物纯化后进行SDS-PAGE和W estern-b lot分析,与CDV标准阳性血清呈阳性反应。本研究初步建立了以纯化的N蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,经初步试验证实,该方法敏感、特异。试验结果表明,大肠杆菌中表达的CDV N蛋白在免疫原性上与天然核衣壳蛋白具有较高相似性,可作为诊断用抗原。

关键词：犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因原核表达间接ELISA

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马立克病潜伏期L-meq基因对CEF细胞p53 mRNA转录水平的影响

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中国生物制品学杂志 2008年第1期21卷 26-29页

作者：王志平李兆辉陈健文力正罗翔丹潘风光吉林大学农学部人兽共患病研究所吉林大学农学部实验动物中心长春130062

目的研究鸡马立克病(MD)潜伏期L-meq基因对鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)p53mRNA转录水平的影响,并探讨L-meq基因与端粒酶活性的关系。方法构建真核转染质粒pcDNA-L-meq,转染CEF细胞,采用实时荧光相对定量RT-PCR法检... 详细信息

目的研究鸡马立克病(MD)潜伏期L-meq基因对鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)p53mRNA转录水平的影响,并探讨L-meq基因与端粒酶活性的关系。方法构建真核转染质粒pcDNA-L-meq,转染CEF细胞,采用实时荧光相对定量RT-PCR法检测MD潜伏期L-meq基因对CEF细胞p53mRNA转录水平的影响,并用改进的TRAP法检测端粒酶活性。结果质粒pcDNA-L-meq经PCR及双酶切鉴定,均可见大小为1200bp的特异性片段。L-meq基因能激活CEF细胞中p53mRNA的转录,在转染后48和72h,p53mRNA的转录水平较相应的内参照升高,但在转染后72h,p53mRNA转录水平降低,其RQ值由48h的0.15下降为72h的0.05。转染L-meq基因48和72h后,CEF细胞中端粒酶活性均比对照组稍微升高,但在48h的端粒酶活性比72h的稍高。结论鸡马立克病潜伏期L-meq基因能微弱地刺激端粒酶活性和p53mRNA转录。

关键词：马立克病 L-meq基因 p53基因转录端粒酶活性

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小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库的构建

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中国生物制品学杂志 2011年第9期24卷 1013-1015,1021页

作者：张磊升高巍赵魁贺文琦宋德光陆慧君高丰吉林大学畜牧兽医学院长春130062 吉林大学农学部实验动物中心长春130062

目的构建小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库。方法用Trizol试剂提取原代小鼠神经细胞总RNA,分离、纯化mRNA,经反转录合成其双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,用内切酶EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,以形成两端分别带有... 详细信息

目的构建小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库。方法用Trizol试剂提取原代小鼠神经细胞总RNA,分离、纯化mRNA,经反转录合成其双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,用内切酶EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,以形成两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ黏性末端的双链cDNA。经Mini Column进行纯化,收集大小在300 bp以上的双链cDNA片段,将其连接于含有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7Select 10-3b载体上,体外包装后经BLT5403菌株增殖,进行文库扩增。结果所构建的文库库容量为含有3.04×107个重组子,原始滴度为2.8×107 pfu/ml,重组率为92%,扩增后文库滴度为3.5×1010 pfu/ml。对随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,88%的插入片段大于300 bp。结论成功构建了小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库。

关键词：小鼠神经元细菌噬菌体T7 基因文库

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兔荧光扩增片段长度多态性分析体系的建立

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军医进修学院学报 2007年第3期28卷 199-200页

作者：郭雄明任文陟张嘉保解放军总医院医学实验动物中心北京100853 吉林大学农学部实验动物中心长春130062

目的:建立兔荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)分析方法并对其在实验动物科学中应用进行探讨。方法:本实验以5个品种(系)兔为实验材料,对DNA提取、预扩增和选择性扩增等步骤进行... 详细信息

目的:建立兔荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)分析方法并对其在实验动物科学中应用进行探讨。方法:本实验以5个品种(系)兔为实验材料,对DNA提取、预扩增和选择性扩增等步骤进行优化并对结果进行检测。结果:5个品种(系)兔的扩增片段数均在120条以上,各品种(系)特异性条带均能找出,5个品种(系)兔能据此进行区分。结论:fAFLP是一种以PCR为基础的DNA指纹技术,为兔的指纹分析提供了一种快速高效的方法,可用于兔的遗传质量检测。

关键词：兔 AFLP fAFLP DNA指纹法

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犬传染性肝炎的诊断与防治

犬传染性肝炎的诊断与防治

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会

作者：刘燕玲袁宝任文陟吉林大学农学部实验动物中心吉林大学农学部实验动物中心吉林大学农学部实验动物中心

由犬传染性肝炎病毒(CAV-I)引起的疾病在犬、狐、熊等动物中有很强的致病性．犬传染性肝炎病毒主要引起犬传染性肝炎和熊、狐脑炎．该病毒广泛分布于全世界,是对犬业、毛皮动物养殖业危害最大的疫病之一．本文主要就CAV-I的流行状况、... 详细信息

由犬传染性肝炎病毒(CAV-I)引起的疾病在犬、狐、熊等动物中有很强的致病性．犬传染性肝炎病毒主要引起犬传染性肝炎和熊、狐脑炎．该病毒广泛分布于全世界,是对犬业、毛皮动物养殖业危害最大的疫病之一．本文主要就CAV-I的流行状况、诊断及免疫作一简介．

关键词：犬传染性肝炎诊断免疫防治

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猪肥胖基因(Ob)及其表达产物的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2006年第11期 25-26页

作者：李毅张嘉保赵志辉武霞吉林大学实验动物中心吉林长春130062 吉林大学农学部畜牧兽医分院吉林长春130062

肥胖基因（Obese，Ob）于1950年首次在小鼠体内被发现，为常染色体隐性遗传。Zhang Y等人通过定位克隆技术从C57BL／6J（B6）突变系小鼠体内获得小鼠0b基因cDNA的完整序列，从而掀起了0b基因的研究高潮。肥胖基因的产物——瘦蛋白（Lep... 详细信息

肥胖基因（Obese，Ob）于1950年首次在小鼠体内被发现，为常染色体隐性遗传。Zhang Y等人通过定位克隆技术从C57BL／6J（B6）突变系小鼠体内获得小鼠0b基因cDNA的完整序列，从而掀起了0b基因的研究高潮。肥胖基因的产物——瘦蛋白（Leptin）是由脂肪组织分泌的反映体脂含量和调节体重、摄食的重要信号因子。文章综述了最近同内外猪0b基因及其表达产物的研究进展。

关键词：表达产物肥胖基因基因cDNA 定位克隆技术猪隐性遗传常染色体完整序列

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抗犬瘟热病毒噬菌体抗体库的构建

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中国生物制品学杂志 2013年第6期26卷 813-816页

作者：马云青任文陟高娟陈健岳媛高红博高巍吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 吉林大学农学部实验动物中心吉林长春130062

目的构建抗犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)T7噬菌体单链抗体(single-chain antibody fragment,scFv)库。方法用灭活CDV经皮下注射免疫犬,共3次,每次间隔2周,第3次免疫后2周采集犬外周血,分离淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,RT-PC... 详细信息

目的构建抗犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)T7噬菌体单链抗体(single-chain antibody fragment,scFv)库。方法用灭活CDV经皮下注射免疫犬,共3次,每次间隔2周,第3次免疫后2周采集犬外周血,分离淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,RT-PCR分别扩增犬IgG重链(heavy chain,VH)和轻链(light chain,VL)基因片段,通过SOE-PCR法将VH和VL用一段linker连接组装成scFv基因,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,连接到表达载体T7 Select 10-3b上,用包装蛋白包装后,以大肠埃希菌BLT5403为宿主菌进行增殖,随机挑取50个噬菌斑,进行PCR鉴定,并测定文库滴度。结果扩增的VH和VL基因大小均与预期相符,测序结果经blast比对,扩增的片段与犬IgG的VH和VL序列匹配率达90%以上;所构建的原始文库滴度为3.2×107pfu/ml,扩增后的文库滴度为5.0×108pfu/ml。对随机挑取的50个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为94%。结论成功构建了抗CDV的T7噬菌体抗体库,为犬科动物犬瘟热的防治提供了参考。

关键词：犬瘟热病毒单链抗体噬菌体展示文库

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客车后舱门开口对发动机舱体散热的影响

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农业机械学报 2012年第9期43卷 31-36页

作者：王晶张成春张春艳任露泉吉林大学工程仿生教育部重点实验室长春130025 吉林大学农学部公共教学中心长春130062

应用数值模拟和试验相结合的方法,研究了客车发动机后舱门开口封闭前后发动机舱内流场及温度场的变化。结果表明:后舱门开口封闭后,发动机舱内流场没有发生显著变化,冷却系统的冷却能力没有减弱。尽管原开口处、离合器附近略有温升,但... 详细信息

应用数值模拟和试验相结合的方法,研究了客车发动机后舱门开口封闭前后发动机舱内流场及温度场的变化。结果表明:后舱门开口封闭后,发动机舱内流场没有发生显著变化,冷却系统的冷却能力没有减弱。尽管原开口处、离合器附近略有温升,但不会对客车性能造成不良影响。

关键词：发动机舱热流体数值模拟

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