目的克隆并原核表达阴道毛滴虫TvRab11C(G3 Ras-related protein Rab11C)基因。方法利用PCR技术扩增阴道毛滴虫TvRab11C基因,与原核表达载体pET-28a连接,构建重组原核表达质粒pET-28a-TvRab11C,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-...
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目的克隆并原核表达阴道毛滴虫TvRab11C(G3 Ras-related protein Rab11C)基因。方法利用PCR技术扩增阴道毛滴虫TvRab11C基因,与原核表达载体pET-28a连接,构建重组原核表达质粒pET-28a-TvRab11C,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物的可溶性,Western blot分析表达产物的反应原性。结果重组原核表达质粒pET-28a-TvRab11C经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为30 000,主要以包涵体形式存在,可被抗阴道毛滴虫多克隆抗体识别。结论成功克隆了阴道毛滴虫TvRab11C基因,并在*** BL21(DE3)中获得了表达,为进一步研究TvRas基因和G蛋白与阴道毛滴虫寄生能力和致病性的关系奠定了基础。
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