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1 篇 南京农业大学
1 篇 路易斯安那州立大...
1 篇 南京师范大学
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作者

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检索条件"机构=吉林大学动物医学学院药理与毒理学实验室"

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千日红水/醇提物对APAP诱导的急性肝损伤的作用机制研究

千日红水/醇提物对APAP诱导的急性肝损伤的作用机制研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：覃海燕邓旭明冯海华吉林大学动物医学学院药理与毒理学实验室

[目的]急性肝损伤是多种疾病发生、发展及最终导致肝功能衰竭的始动环节和共同途径。对乙酰氨基酚(APAP)是通过活性氧或活性氮引起药物性肝损伤的典型代表物。本研究是为探讨千日红粗提物对APAP所致小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制... 详细信息

[目的]急性肝损伤是多种疾病发生、发展及最终导致肝功能衰竭的始动环节和共同途径。对乙酰氨基酚(APAP)是通过活性氧或活性氮引起药物性肝损伤的典型代表物。本研究是为探讨千日红粗提物对APAP所致小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制。[方法]千日红(Gomphrena globosa L.)水/醇提物是千日红研磨成粉末状后用水或梯度乙醇(95%、75%、15%)浸泡72小时后提取。通过给小鼠灌胃的方式连续七天给药,第七天给药一小时后用APAP对其刺激,三小时后处死。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6 (IL-6)含量;应用蛋白免疫印迹(western blot)检测AMPK/Nrf2信号通路的活化;测定肝组织中髓过氧化物酶(MPO)含量,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及谷胱甘肽(GSH)水平;并测定血清中的AST和ALT活性。[结果]在APAP诱导的小鼠急性肝损伤模型中,千日红水/醇提物可显著降低血清中AST和ALT活性,减少肝组织中TNF-α、IL-6的表达水平,并呈现一定剂量依赖性,同时下调MPO含量,上调了肝组织中SOD、GSH-Px及GSH水平。Western blot实验结果显示肝内AMPK磷酸化水平提高,Nrf2蛋白入核,HO-1和GCLC、GCLM基因表达上调。[结论]综上所述,千日红水/醇提物缓解APAP诱导的小鼠急性肝损伤的效果显著,对其具有保护作用,其机制主要可能是通过激活AMPK/Nrf2通路。

关键词：千日红急性肝损伤 AMPK/Nrf2 对乙酰氨基酚(APAP)

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桃叶珊瑚苷对小鼠和3T3-L1细胞脂代谢的作用研究

桃叶珊瑚苷对小鼠和3T3-L1细胞脂代谢的作用研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：沈冰玉田野武林李铮韩璐张巧玲冯海华吉林大学动物医学学院药理与毒理学实验室长春130062

[目的]本实验通过桃叶珊瑚苷预处理apoC-Ⅲ诱导的小鼠前脂肪细胞(3T3-L1)和泰洛沙泊刺激小鼠模型，观测桃叶珊瑚苷对小鼠动脉粥样硬化及相关脂质代谢影响的作用。[方法]在体外实验中，采用apoC-Ⅲ诱导的小鼠前脂肪细胞(3T3-L1)模型，通... 详细信息

[目的]本实验通过桃叶珊瑚苷预处理apoC-Ⅲ诱导的小鼠前脂肪细胞(3T3-L1)和泰洛沙泊刺激小鼠模型，观测桃叶珊瑚苷对小鼠动脉粥样硬化及相关脂质代谢影响的作用。[方法]在体外实验中，采用apoC-Ⅲ诱导的小鼠前脂肪细胞(3T3-L1)模型，通过观测细胞释放炎性因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的含量和mRNA表达情况，应用蛋白免疫印迹法(westernblot)检测核转录因子E2相关因子2/血红素氧合酶1(Nrf2/HO-1)信号通路的活性，并通过油红染色切片观察桃叶珊瑚苷对分化成熟的3T3-L1细胞脂质化的影响，进而确定桃叶珊瑚苷的作用和分子机制。

关键词：桃叶珊瑚苷动脉粥样硬化 Nrf2 载脂蛋白CⅢ

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桑色素对油酸诱导的Hepg2细胞脂肪变性的作用研究

桑色素对油酸诱导的Hepg2细胞脂肪变性的作用研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：武林沈冰玉田野李铮韩璐张巧玲冯海华吉林大学动物医学学院药理与毒理学实验室长春130062

[目的]本实验通过桑色素预处理油酸诱导的人肝癌细胞(Hepg2)脂肪变性细胞模型，观测桑色素对人肝癌细胞(Hepg2)脂肪变性影响的作用。[方法]在细胞实验中，通过油酸诱导人肝癌细胞(Hepg2)制造细胞脂肪变性模型，应用酶联免疫吸附实验(ELI... 详细信息

[目的]本实验通过桑色素预处理油酸诱导的人肝癌细胞(Hepg2)脂肪变性细胞模型，观测桑色素对人肝癌细胞(Hepg2)脂肪变性影响的作用。[方法]在细胞实验中，通过油酸诱导人肝癌细胞(Hepg2)制造细胞脂肪变性模型，应用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞释放炎性因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-lβ(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的含量，细胞内甘油三酯(TG)含量，应用蛋白免疫印迹法(western blot)检测核转录因子NF-kB以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的活性，并通过油红染色切片观察桑色素对油酸诱导的Hepg2细胞脂肪变性的影响。

关键词：桑色素脂肪肝 NF-kB MAPK

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黄芩苷对LPS诱导的小鼠急性肺损伤作用的研究

黄芩苷对LPS诱导的小鼠急性肺损伤作用的研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：沈冰玉田野武林李铮韩璐张巧玲冯海华邓旭明吉林大学动物医学学院药理与毒理学实验室长春市130062

[目的]本实验通过黄芩苷预处理LPS诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)模型和A549细胞模型，观察黄芩苷对ALI及相关肺部损伤性疾病的作用。[方法]在体外实验中，采用LPS刺激A549细胞，观测细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-a)、白介素-1β(IL-1β)和... 详细信息

[目的]本实验通过黄芩苷预处理LPS诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)模型和A549细胞模型，观察黄芩苷对ALI及相关肺部损伤性疾病的作用。[方法]在体外实验中，采用LPS刺激A549细胞，观测细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-a)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的释放量和mRNA表达情况，应用蛋白免疫印迹法(westernblot)检测NF-κB、MAPK和TLR4信号通路的活性，并通过免疫荧光观察黄芩苷对NF-κB p65入核的影响，进而确定黄芩苷的作用和分子机制。

关键词：黄芩苷 ALI NF-κB LPS

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姜黄素对小鼠和Hepg2细胞脂肪变性的作用研究

姜黄素对小鼠和Hepg2细胞脂肪变性的作用研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：武林沈冰玉田野李铮韩璐张巧玲冯海华邓旭明吉林大学动物医学学院药理与毒理学实验室长春市130062

[目的]本实验通过姜黄素预处理油酸诱导的人肝癌细胞(Hepg2)脂肪变性细胞模型和泰洛沙泊刺激小鼠模型，观测姜黄素对小鼠动脉粥样硬化及相关脂质代谢影响的作用。[方法]在细胞实验中，通过油酸诱导人肝癌细胞(Hepg2)制造细胞脂肪变性模... 详细信息

[目的]本实验通过姜黄素预处理油酸诱导的人肝癌细胞(Hepg2)脂肪变性细胞模型和泰洛沙泊刺激小鼠模型，观测姜黄素对小鼠动脉粥样硬化及相关脂质代谢影响的作用。[方法]在细胞实验中，通过油酸诱导人肝癌细胞(Hepg2)制造细胞脂肪变性模型，应用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞释放炎性因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的含量，细胞内甘油三酯(TG)含量，应用蛋白免疫印迹法(western blot)检测核转录因子NF-kB 以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的活性，并通过油红染色切片观察姜黄素对油酸诱导的Hepg2细胞脂肪变性的影响。

关键词：姜黄素动脉粥样硬化 NF-kB MAPK

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异鼠李素通过下调NF-κB通路缓解炎症反应

异鼠李素通过下调NF-κB通路缓解炎症反应

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李扬沈冰玉田野邓旭明冯海华吉林大学动物医学学院药理与毒理实验室

异鼠李素,来源于胡颓子科植物沙棘的果实,属于黄酮类物质。有关报道指出异鼠李素具调节免疫反应,抗氧化等多种治疗作用。本实验从体外和体内两个方面对异鼠李素的抗炎作用进行了研究。体外试验在LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞... 详细信息

异鼠李素,来源于胡颓子科植物沙棘的果实,属于黄酮类物质。有关报道指出异鼠李素具调节免疫反应,抗氧化等多种治疗作用。本实验从体外和体内两个方面对异鼠李素的抗炎作用进行了研究。体外试验在LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)内,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测异鼠李素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β)的表达量的影响。体内试验通过建立LPS诱发的小鼠急性肺损伤模型,采用ELISA法测定小鼠支气管肺泡灌洗液(BAIF)中的TNF-α,IL-6和IL-1β的浓度。应用免疫蛋白印迹法(Western blot)测定异鼠李素对p65和IκBα的磷酸化作用的影响。此外,为了进一步检验异鼠李素是否是通过NF-κB信号通路来减缓LPS引起的炎症,我们运用了NF-κB通路的抑制剂PDTC。体外试验结果表明:在LPS刺激的RAW264.7细胞内,异鼠李素显著地降低了LPS诱导细胞产生的TNF-α,IL-6及IL-1β的表达水平。体内试验结果表明:异鼠李素显著地抑制了小鼠肺泡灌洗液内TNF-α,IL-6及IL-1β的产生,Western blot检测结果表明异鼠李素也抑制了LPS刺激引起的p65和IκB的磷酸化作用。特定抑制剂的干扰表明异鼠李素介导的细胞因子和蛋白的抑制确实是通过NF-κB信号通路产生的。此外,异鼠李素还减弱了由LPS刺激导致的小鼠肺部组织的病理变化。以上试验结果综合表明异鼠李素在体外和体内均具有一定的抗炎作用,并且在未来可能作为新的抗炎药物来发挥对各种炎症的治疗作用。

关键词：异鼠李素细胞因子 NF-κB 小鼠急性肺损伤抗炎作用

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桃叶珊瑚苷通过Nrf2/AMPK信号通路对NAFLD的作用及分子机制

桃叶珊瑚苷通过Nrf2/AMPK信号通路对NAFLD的作用及分子机制

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：沈冰玉邓旭明冯海华吉林大学动物医学学院兽医药理与毒理学研究室

[目的]非酒精性脂肪肝(NAFLD)是慢性肝病最常见的病因,最终能发展为肝纤维化甚至肝细胞癌。桃叶珊瑚苷(AU)是桃叶珊瑚的主要活性成分,具有抗炎、保肝等多种作用。本研究探讨了桃叶珊瑚苷对泰洛沙泊诱导的NAFLD小鼠及载脂蛋白C-Ⅲ(apoC-... 详细信息

[目的]非酒精性脂肪肝(NAFLD)是慢性肝病最常见的病因,最终能发展为肝纤维化甚至肝细胞癌。桃叶珊瑚苷(AU)是桃叶珊瑚的主要活性成分,具有抗炎、保肝等多种作用。本研究探讨了桃叶珊瑚苷对泰洛沙泊诱导的NAFLD小鼠及载脂蛋白C-Ⅲ(apoC-Ⅲ)诱导的3T3-L1细胞的作用及分子机制。[方法]体内实验中,应用桃叶珊瑚苷刺激泰洛沙泊(300mg/kg)诱导的C57BL/6小鼠,24小时后取血清测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、高密度脂蛋白(HDL)、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、血管细胞黏附因子1(VCAM-1)、细胞间黏附因子1 (ICAM-1)、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、载脂蛋白CⅢ(ApoC3)含量;取肝脏制作H&E和油红切片;测定肝脏中Nrf2/HO-1和AMPK/AKT信号通路相关蛋白表达情况;体外实验中,桃叶珊瑚苷预处理apoC-Ⅲ诱导的分化成熟的3T3-L1细胞,通过CCK-8实验检测不同浓度桃叶珊瑚苷(35、70、140μg/ml)对细胞增殖的影响并确定有效无毒浓度;ELISA检测细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6 (IL-6)的释放量和mRNA表达;蛋白免疫印迹法(western blot)检测核转录因子E2相关因子2/血红素氧合酶1 (Nrf2/HO-1)和AMPK/AKT信号通路相关蛋白表达。[结果]桃叶珊瑚苷能通过影响血清中TC、TG、LDL、VLDL、MPO、SOD、TNF-α、IL-1β和IL-6抑制NAFLD过程中的氧化应激和炎症;并激活了细胞内Nrf2、PPARα、PPARγ和HO-1,促进了AMPKα、AMPKβ、ACC和AKT的磷酸化。[结论]桃叶珊瑚苷通过其明显的抗炎和抗氧化作用,起到降血脂作用,并有望成为一种NAFLD的靶向新药。

关键词：桃叶珊瑚苷 NAFLD 泰洛沙泊 Nrf2

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黄芩素抑制单增李斯特菌感染及机制

黄芩素抑制单增李斯特菌感染及机制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：卢葛锦邓旭明吉林大学动物医学学院兽医药理与毒理学研究室

[目的]单核增生性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes,LM)是重要的人兽共患、食源性机会致病菌,容易感染免疫力低下的人群,导致脑膜炎、败血症及孕妇流产等。目前临床上主要通过高剂量的β-内酰胺类和氨基糖苷类抗生素联用治疗单增李斯... 详细信息

[目的]单核增生性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes,LM)是重要的人兽共患、食源性机会致病菌,容易感染免疫力低下的人群,导致脑膜炎、败血症及孕妇流产等。目前临床上主要通过高剂量的β-内酰胺类和氨基糖苷类抗生素联用治疗单增李斯特菌病。然而,随着细菌耐药性的不断产生和全球扩散,逐渐出现了对β-内酰胺类抗生素耐药的单增李斯特菌,抗毒力策略等非传统抗菌策略应运而生,为抗细菌感染提供了新思路。[方法]通过原核表达单增李斯特菌重要毒力相关蛋白分选酶SortaseA和溶血素LLO建立体外筛选平台,建立LM感染结肠上皮细胞Caco-2、RAW264.7巨噬细胞和小鼠模型,验证黄芩素对单证李斯特菌感染的保护作用及作用机制。通过荧光共振能量转移实验和Caco-2细胞粘附试验确定黄芩素对LM粘附内化的影响;溶血实验验证抑制溶血的有效浓度;体外寡聚模拟分析、Western blot及生长曲线的绘制确定药物与溶血素蛋白的作用方式;肌动蛋白染色试验、活死细菌染色试验和胞内生长曲线绘制验证药物对LM胞内增殖逃逸的作用;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验和活死细胞染色试验验证黄芩素对LM感染导致细胞死亡的影响;小鼠腹腔注射感染LM后,口服黄芩素混悬液(0.5%羧甲基纤维素钠配制,最终浓度为100mg/kg,每日给药两次)观察给药后感染小鼠死亡率和肝、脾载菌量的变化。[结果]体外实验的结果表明,黄芩素共孵育处理可以抑制SrtA蛋白对LPETG序列的切割效率;可以在不影响细菌增殖和LLO表达的浓度下抑制溶血素溶血活性,而此作用与抑制LLO蛋白的寡聚化有关;减少了感染巨噬细胞中细菌从吞噬泡内逃逸增殖的数量,并抑制了感染导致的细胞死亡和LDH释放;体内试验的结果证明,口服黄芩素混悬液抑制了感染小鼠的死亡,并减少了细菌在小鼠肝脏和脾脏的定殖数。因此,黄芩素通过抑制LM的分选酶A及重要毒力因子LLO有效保护单增李斯特菌感染。[结论]黄芩素通过同时靶向于单核增生性李斯特杆菌SortaseA和LLO抑制细菌对细胞和小鼠的感染,也为SortaseA和LLO作为抗感染重要靶标进行新型抗菌药物研发奠定了基础。

关键词：抗毒力黄芩素感染单增李斯特菌分选酶A 溶血素

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鸢尾黄素降低产气荚膜梭菌四型菌毛介导的细胞粘附能力

鸢尾黄素降低产气荚膜梭菌四型菌毛介导的细胞粘附能力

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：刘水邓旭明吉林大学动物医学学院兽医药理与毒理学研究室

[目的]产气荚膜梭菌是一种广泛存在于自然环境及健康动物肠道中的革兰氏阳性厌氧菌,属条件致病菌。该菌在家禽中主要引发坏死性肠炎,造成巨大的经济损失。四型菌毛(TypeⅣpili,TFP)在产气荚膜梭菌定植、侵袭、生物被膜形成和滑动运动等... 详细信息

[目的]产气荚膜梭菌是一种广泛存在于自然环境及健康动物肠道中的革兰氏阳性厌氧菌,属条件致病菌。该菌在家禽中主要引发坏死性肠炎,造成巨大的经济损失。四型菌毛(TypeⅣpili,TFP)在产气荚膜梭菌定植、侵袭、生物被膜形成和滑动运动等生命过程中起关键作用,与产气荚膜梭菌引发感染的能力密切相关。本研究以TFP相关生物学表型进行了TFP抑制剂的筛选,并初步研究了受试抑制剂对TFP的抑制作用及机制。[方法]本研究通过TFP介导的滑动运动这一生物学表型,从天然化合物中筛选能够抑制产气荚膜梭菌滑动运动能力的天然化合物;进一步通过生物被膜形成试验研究了受试化合物对TFP介导的生物被膜形成的影响;随后,在细胞水平上通过细胞粘附试验研究了受试化合物对TFP介导的细菌粘附至宿主细胞能力的影响;在基因水平上通过SQ-RTPCR试验研究了受试化合物对TFP相关基因转录水平的影响。[结果]体外试验结果表明,鸢尾黄素处理后能够明显抑制产气荚膜梭菌TFP介导的滑动运动的能力,并能够剂量依赖性抑制TFP介导的生物被膜形成及粘附至Caco-2细胞的能力,且这一抑制作用不是通过抑菌或杀菌作用实现的。此外,在SQ-RTPCR试验中鸢尾黄素抑制了TFP相关基因的转录水平。[结论]以上研究结果表明,鸢尾黄素可能是一种潜在的靶向产气荚膜梭菌TFP的抑制剂。鉴于TFP在产气荚膜梭菌感染过程中的关键作用,鸢尾黄素具有开发成为靶向产气荚膜梭菌TFP生物学活性的新型抗感染药物的潜力。

关键词：产气荚膜梭菌鸢尾黄素四型菌毛滑动运动生物被膜粘附

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丁香醛通过对Ⅲ型分泌系统的抑制可保护小鼠免受伤寒沙门氏菌的影响

丁香醛通过对Ⅲ型分泌系统的抑制可保护小鼠免受伤寒沙门氏菌的影...

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：李淑芳邓旭明吉林大学动物医学学院兽医药理与毒理学研究室

[目的]通过建立沙门氏菌感染HeLa细胞模型和感染小鼠模型,对筛选到的沙门氏菌Ⅲ型分泌系统(T333)抑制剂丁香醛的体内外药物活性进行评价,并对其作用机制进行初步探究。[方法]通过沙门氏菌T3SS抑制剂筛选平台进行天然化合物筛选工作;结... 详细信息

[目的]通过建立沙门氏菌感染HeLa细胞模型和感染小鼠模型,对筛选到的沙门氏菌Ⅲ型分泌系统(T333)抑制剂丁香醛的体内外药物活性进行评价,并对其作用机制进行初步探究。[方法]通过沙门氏菌T3SS抑制剂筛选平台进行天然化合物筛选工作;结合蛋白质免疫印迹分析丁香醛对T3SS效应蛋白(sipA、sipB和sipC)表达的影响;通过生长曲线试验检测丁香醛对沙门氏菌生长的影响。体外实验中,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测丁香醛的细胞毒性;庆大霉素保护试验评价丁香醛预处理沙门氏菌后对HeLa细胞粘附、入侵和胞内复制的影响作用,并通过免疫荧光检测进行验证。体内试验,建立鼠伤寒沙门菌感染小鼠模型,统计经丁香醛(100 mg/kg体重)治疗后感染小鼠的存活率;肝脏和脾脏的细菌定植数;ELISA检测盲肠组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的释放量,并进行盲肠组织病理学评价。通过RT-PCR分析丁香醛对介导和编码T3SS毒力岛1 (SPI-1)中关键调控因子(hilD-hilC-rstA-hilA)转录水平。[结果]筛选得到的天然化合物丁香醛在较低浓度下通过阻断T3SS关键效应蛋白SipA的易位进而抑制T3SS的功能,显著降低效应蛋白(SipA、SipB和SipC)的表达水平且不影响细菌生长。体外试验表明,在有效浓度范围内丁香醛不具有细胞毒性;经丁香醛处理后,沙门氏菌侵入HeLa细胞的能力显著降低,沙门氏菌介导的细胞损伤程度显著减轻。体内试验中,经丁香醛治疗后沙门氏菌感染小鼠存活率达60%;靶器官(肝脏和脾脏)细菌定殖数显著降低;病理组织学分析显示感染小鼠盲肠病理损伤显著缓解,并且盲肠组织主要细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ的释放量显著降低。此外,通过RT-PCR分析显示丁香醛显著抑制毒力岛1 (SPI-1)主要调控因子(hilD-hilC-rstA-hilA)的转录水平。[结论]初步阐明丁香醛通过降低hilD-hilC-rstA-hilA调控因子转录水平抑制T3SS功能的作用机制,丁香醛对沙门氏菌感染小鼠提供全面保护作用,可成为治疗沙门氏菌感染的潜在化合物。

关键词：抗感染效应蛋白鼠伤寒沙门氏菌丁香醛 Ⅲ型分泌系统

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