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南方医科大学学报 2013年第11期33卷 1673-1677页

作者：董博翰戴广丽戚之琳杨光吕俊章尧皖南医学院基础医学部安徽芜湖241002 芜湖市中医院安徽芜湖241000 吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春130021

目的研究B16黑色素瘤来源的MHSP65-TCL疫苗对黑色素瘤的治疗作用,以及该疫苗在疾病治疗过程中对免疫细胞活性的影响。方法利用反复冻融的方法裂解B16黑色素瘤细胞制备肿瘤细胞裂解物(TCL),将TCL同结核分支杆菌热休克蛋白65(MHSP65)联用... 详细信息

目的研究B16黑色素瘤来源的MHSP65-TCL疫苗对黑色素瘤的治疗作用,以及该疫苗在疾病治疗过程中对免疫细胞活性的影响。方法利用反复冻融的方法裂解B16黑色素瘤细胞制备肿瘤细胞裂解物(TCL),将TCL同结核分支杆菌热休克蛋白65(MHSP65)联用制备MHSP65-TCL。于不同时间点,给B16黑色素瘤荷瘤小鼠免疫MHSP65-TCL疫苗,观察该疫苗抑制黑色素细细胞瘤的情况。与此同时,为了验证MHSP65-TCL中的TCL对免疫细胞活性的影响,我们将TCL于体外作用于小鼠脾细胞,然后流式检测脾细胞CD69表达、脾细胞凋亡以及细胞培养上清液中IL-10和IFN-γ的表达情况。结果通过小鼠体内抑瘤实验发现,B16黑色素瘤来源的MHSP65-TCL疫苗在小鼠体内产生了抑制黑色素细胞瘤的作用。通过体外细胞实验发现,MHSP65-TCL中的TCL可以显著刺激体外培养的小鼠脾细胞的活化。除此之外,与这种细胞活化作用相反的,发现TCL还可以诱导一部分体外培养的小鼠脾细胞发生凋亡,并促进脾细胞分泌IL-10,同时抑制IFN-γ的分泌。结论 B16黑色素瘤来源的MHSP65-TCL疫苗对黑色素瘤具有抑制作用。这种抑制作用主要是通过活化免疫细胞产生的。MHSP65-TCL的主要成分TCL对免疫细胞还有抑制作用。这可能同TCL中存在的一些免疫细胞抑制物质有关。这些物质的明确以及去除将有助于提高MHSP65-TCL疫苗的抗肿瘤效力。

关键词：肿瘤细胞裂解物黑色素瘤抗肿瘤免疫治疗免疫细胞抑制

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肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响

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中国药理学通报 2012年第9期28卷 1262-1266页

作者：王国红郭直岳石松林李祺福新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003 厦门大学医学院基础医学部福建厦门361005

目的研究中药有效成分肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响。方法肉桂酸处理MG-63细胞前后,台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞仪检测细胞周期时相变化;光镜和电镜观察细胞形态和超微结构;VanGieson染色检测细胞Ⅰ型胶原表达;... 详细信息

目的研究中药有效成分肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响。方法肉桂酸处理MG-63细胞前后,台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞仪检测细胞周期时相变化;光镜和电镜观察细胞形态和超微结构;VanGieson染色检测细胞Ⅰ型胶原表达;茜素红染色观察钙化骨结节形成;免疫细胞化学检测骨粘素和骨钙蛋白表达。结果肉桂酸明显抑制MG-63细胞增殖,D7抑制率达54.94%±4.69%。周期分析结果显示,肉桂酸处理后G0/G1期细胞比例较对照组明显升高(P<0.01)。光镜和电镜结果显示,肉桂酸处理组MG-63细胞形态和超微结构发生明显改变,呈现相应正常细胞的形态和超微结构特征。肉桂酸促进成骨细胞分化标志物Ⅰ型胶原、骨粘素和骨钙蛋白的表达与钙沉积以及典型骨结节的形成。结论肉桂酸可抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖并诱导其向成骨细胞分化。

关键词：肉桂酸人骨肉瘤MG-63细胞增殖分化骨肉瘤成骨细胞

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大鼠骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化过程中蛋白质表达差异分析

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中华血液学杂志 2012年第1期33卷 34-37页

作者：刘丹丹陈丽琼沈建陈建仇容李玉林王悦增浙江医学高等专科学校病理学与病理生理学教研室杭州310053 杭州第一人民医院吉林大学白求恩医学部基础医学院教研室

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）体外向内皮细胞分化过程中差异性表达的蛋白质.方法用血管内皮生长因子（VEGF）联合上皮生长因子（EGF）诱导MSC向内皮细胞分化,提取细胞蛋白进行双向凝胶电泳,通过Imagemaster 5.0软件筛选差异... 详细信息

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）体外向内皮细胞分化过程中差异性表达的蛋白质.方法用血管内皮生长因子（VEGF）联合上皮生长因子（EGF）诱导MSC向内皮细胞分化,提取细胞蛋白进行双向凝胶电泳,通过Imagemaster 5.0软件筛选差异性表达的蛋白质点,并应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱对其进行鉴定.结果诱导后的MSC高表达内皮细胞相关标志,流式细胞术检测CD31、CD34和凝血因子Ⅷ相关抗原（FⅧAg）阳性细胞率分别为56.8％、38.8％和14.5％.与培养的原代MSC比较,诱导后细胞差异表达91个蛋白质点,鉴定了其中的19个,11个表达上调,8个表达下调.主要包括肌球蛋白、肌丝蛋白、波形蛋白、钮蛋白等细胞骨架蛋白；线粒体醛脱氢酶、EROl-α、线粒体乙酰辅酶异构酶、二硫化物异构酶3、脂肪酸合成酶、烯醇酶3等细胞代谢酶；TAR脱氧核糖核酸结合蛋白、鸟苷酸结合蛋白和缺氧诱导因子1等核转录因子和血管内皮生长因子受体2（KDR）等.结论细胞骨架蛋白、细胞代谢酶类、核转录因子和KDR等均与MSC向内皮细胞分化有关。

关键词：间充质干细胞内皮细胞细胞分化蛋白质组学

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芳香化酶基因敲除小鼠肝组织PPARα表达及与肝脂肪变性的关系

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中国老年学杂志 2012年第13期32卷 2766-2769页

作者：宋汉香王淑秋吕少春户田藤巳西原利治鲁燕宋汉君佳木斯大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学基础医学院人体解剖学教研室高知大学医学部消化器内科佳木斯大学公卫学院预防医学教研室

目的研究PPARα缺乏对ArKO小鼠肝脏脂质代谢的影响。方法将实验小鼠分为WT组、ArKO组、PPARαKO组、ArKO/PPARαKO组,采用QRT-PCR法分析Gluk、PEPCK、G6pase、GLUT2、Pyrk五种基因在四组小鼠肝组织中的mRNA表达水平。结果 5月龄时,与WT... 详细信息

目的研究PPARα缺乏对ArKO小鼠肝脏脂质代谢的影响。方法将实验小鼠分为WT组、ArKO组、PPARαKO组、ArKO/PPARαKO组,采用QRT-PCR法分析Gluk、PEPCK、G6pase、GLUT2、Pyrk五种基因在四组小鼠肝组织中的mRNA表达水平。结果 5月龄时,与WT组比较,其余三组小鼠体重均不同程度增加,且肝脂肪变性程度亦较WT组严重,ArKO/PPARαKO组肝脂肪变性程度最严重。Gluk、PEPCK和G6pase在后三组小鼠肝组织中的表达水平均明显高于WT组,且ArKO/PPARαKO组均较ArKO组显著增高(P<0.05)。Gluk表达水平在ArKO组和PPARαKO组无明显差异(P>0.05);PEPCK表达水平在PPARαKO组较ArKO组明显增高(P<0.01);G6pase表达水平在ArKO组较PPARαKO组增高(P<0.05)。然而,在四组实验小鼠中,GLUT2和Pyrk基因表达水平无明显差异。结论在雌激素缺乏的小鼠体内,肝细胞的脂质代谢受益于PPARα的调节;芳香化酶基因敲除小鼠体内缺乏PPARα可加重肝脂肪变性。

关键词：芳香化酶基因敲除(ArKO)小鼠 PPARα基因敲除(PPARαKO)小鼠肝脂肪变性雌激素

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UT-B基因敲除加速腹主动脉缩窄后心功能障碍进程机制的初步探讨

UT-B基因敲除加速腹主动脉缩窄后心功能障碍进程机制的初步探讨

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会（第十一届）暨中国病理生理学会心血管专业委员会（第十四届）、受体与信号转导专业委员会（第九届）学术会议

作者：杜艳伟康乐王晓琴孙志霞王馨悦赵雪俭杨宝学孟艳吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室北京大学医学部药学系

目的:观察腹主动脉缩窄手术增加心脏后负荷对尿素通道蛋白B基因敲除(UT-B)小鼠心脏功能的影响,探讨其机制。方法:对16周的野生型小鼠及UT-B小鼠行腹主动脉缩窄术,术后4周,对各组小鼠进行超声心动图检测,检测心肌组织NO水平,应用Western ... 详细信息

目的:观察腹主动脉缩窄手术增加心脏后负荷对尿素通道蛋白B基因敲除(UT-B)小鼠心脏功能的影响,探讨其机制。方法:对16周的野生型小鼠及UT-B小鼠行腹主动脉缩窄术,术后4周,对各组小鼠进行超声心动图检测,检测心肌组织NO水平,应用Western blotting检测心肌组织eNOS及ANP表达水平,应用流式细胞术检测心肌细胞ROS水平。结果:腹

关键词：心功能障碍主动脉缩窄基因敲除初步探讨

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UT-B基因敲除加速腹主动脉缩窄后心功能障碍进程机制的初步探讨

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中国病理生理杂志 2012年第11期 2068-2068页

作者：杜艳伟康乐王晓琴孙志霞王馨悦赵雪俭杨宝学孟艳吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室北京大学医学部药学系

目的:观察腹主动脉缩窄手术增加心脏后负荷对尿素通道蛋白B基因敲除(UT-B-/-)小鼠心脏功能的影响,探讨其机制。方法:对16周的野生型小鼠及UT-B-/-小鼠行腹主动脉缩窄术,术后4周,对各组小鼠进行超声心动图检测,检测心肌

关键词：腹主动脉缩窄小鼠小家鼠心功能障碍 UT-B 基因敲除进程

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洛铂诱导肺腺癌HTB-56表达ERCC1及其意义初探

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中华临床医师杂志（电子版） 2012年第5期6卷 166-167页

作者：高文斌邓蓉黄剑辉王刚吕金燕李花妮马建增郑真真方今女高景山姚娜大连大学附属中山医院肿瘤内科 116001 延边大学医学部病理及病理生理学教研室大连医科大学基础医学院

目的观察洛铂(LBP)作用下诱导肺腺癌HTB-56细胞株ERCC1的表达,并初步探讨ERCC1与肺癌LBP耐药之间的关系。方法采用RT-PCR方法检测不同浓度、不同作用时间LBP干预后人肺腺癌细胞株HTB-56 ECRR1的表达情况,并与其耐顺铂(DDP)细胞株HTB-56/... 详细信息

目的观察洛铂(LBP)作用下诱导肺腺癌HTB-56细胞株ERCC1的表达,并初步探讨ERCC1与肺癌LBP耐药之间的关系。方法采用RT-PCR方法检测不同浓度、不同作用时间LBP干预后人肺腺癌细胞株HTB-56 ECRR1的表达情况,并与其耐顺铂(DDP)细胞株HTB-56/DDP进行比较,分析ERCC1与LBP耐药之间的关系。结果 8μg/ml LBP作用24 h,HTB-56细胞中ERCC1 mRNA表达开始增高,随作用时间的延长,ERCC1 mRNA的表达逐渐增高,72 h组ERCC1 mRNA表达最强,为(63.17±4.32)%,是对照组的3.3倍。浓度为8μg/ml的LBP即可刺激HTB-56细胞中ERCC1基因水平上升,随LBP浓度的增加,ERCC1mRNA水平逐渐上升,64μg/ml组达高峰,为(69.30±4.88)%,为对照组的3.7倍。结论小剂量LBP作用随时间的延长,HTB-56细胞中ERCC1 mRNA表达量增加,推测ERCC1可能参与洛铂继发耐药的发生。

关键词：肺肿瘤 HTB-56细胞株 HTB-56/DDP细胞株洛铂 ERCC1基因

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TNF-α对培养乳鼠心肌细胞的作用

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心脏杂志 2012年第3期24卷 331-334页

作者：苏兴利张鸿王爽郭玉芳霍健杨颖杨予白西安医学院基础医学部病理生理学教研室陕西西安710021 陕西省人民医院传染科陕西西安710068 西安医学院科研中心陕西西安710021 西安交通大学医学院病理生理教研室陕西西安710061

目的:探讨不同浓度肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对培养的乳鼠心肌细胞活力、蛋白合成、分泌AngⅡ及AT1受体表达的影响。方法:体外培养的SD乳鼠心肌细胞随机分为对照组和不同浓度TNF-α(20、40、60、80、100μg/L)干预组,用BCA法测定心肌细... 详细信息

目的:探讨不同浓度肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对培养的乳鼠心肌细胞活力、蛋白合成、分泌AngⅡ及AT1受体表达的影响。方法:体外培养的SD乳鼠心肌细胞随机分为对照组和不同浓度TNF-α(20、40、60、80、100μg/L)干预组,用BCA法测定心肌细胞蛋白合成总量,MTT比色法和LDH检测反映心肌细胞的活力,ELISA法检测心肌细胞培养液中AngⅡ的含量,免疫细胞化学染色法检测心肌细胞膜AT1受体表达的变化。结果:TNF-α浓度依赖性地增强乳鼠心肌细胞活力、增加蛋白合成,20、40、60、80μg/L TNF-α组细胞活力较对照组分别增加1.21(P<0.05)、1.42、1.51和1.73倍(均P<0.01),蛋白合成分别增加27.8%(P<0.05)、38.9%、46%和66.7%(均P<0.01),而LDH含量差异无显著性。100μg/L TNF-α组与对照组比较,心肌细胞活力降低18.5%(P<0.01)、蛋白合成降低18.3%(P<0.01)及心肌LDH生成增加1.48倍(P<0.01)。TNF-α浓度依赖性地增加乳鼠心肌细胞AngⅡ分泌,与对照组比较分别增加0.5、1.1、1.6、3和3.6倍(均P<0.01)。TNF-α还具有诱导AT1受体的表达的作用。结论:TNF-α可促进心肌细胞内源性AngⅡ产生,引起心肌细胞活力、蛋白合成改变,AT1受体表达上调,可能介导了心肌肥大、心肌受损等心肌改建的病理生理过程。

关键词：心肌细胞肿瘤坏死因子α 血管紧张素II AT1受体心肌改建乳鼠

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中国南极越冬队员外周血生物钟基因Clock和Bmal1昼夜性节律表达赴南极前后对比

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南昌大学学报（医学版） 2012年第2期52卷 1-5页

作者：余万霰陈绍平夏艳芝王国卿王洁张永虹南昌大学医学实验教学部南昌330006 南昌大学第四附属医院骨科南昌330006 苏州大学医学部基础医学院生理教研室江苏苏州215123 南昌大学第二附属医院检验科南昌330006

目的观察中国南极考察队越冬队员外周血淋巴细胞钟基因Clock和Bmal 1表达昼夜节律性变化。方法在中国第25次南极考察队越冬队员中选择8名队员,平均年龄38岁,均为男性,在1个昼夜周期内设立6个时点(ZT):02:00、06:00、10:00、14:00、18:00... 详细信息

目的观察中国南极考察队越冬队员外周血淋巴细胞钟基因Clock和Bmal 1表达昼夜节律性变化。方法在中国第25次南极考察队越冬队员中选择8名队员,平均年龄38岁,均为男性,在1个昼夜周期内设立6个时点(ZT):02:00、06:00、10:00、14:00、18:00和22:00,每一时点采集外周静脉血6mL,采集赴南极前后2组血样。用实时定量RT-PCR方法,测定不同昼夜时点(ZT)样品中核心钟基因Clock和Bmal 1的mRNA表达量,通过余弦法和Clock Lab软件获取节律参数,进行赴南极前后对比。结果赴南极前,8个样本Clock和Bmal 1的mRNA表达均有显著昼夜节律特征(P<0.05),Clock的峰值相位位于-335.85±13.80,Bmal 1的峰值相位位于-307.12±8.17。赴南极后,仅2例Clock和3例Bmal 1表达还存在显著昼夜节律变化。Clock的峰值相位移位到-42.28±5.27,Bmal 1的同峰值相位移位到-184.58±29.58。结论南极特殊周期环境对人体生物钟基因表达的昼夜节律会产生影响。

关键词： Clock基因 Bmal1基因昼夜节律外周血淋巴细胞南极越冬队员,中国

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洛铂腔内灌注治疗恶性胸腹腔积液的临床观察及安全性研究

洛铂腔内灌注治疗恶性胸腹腔积液的临床观察及安全性研究

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第十五届全国临床肿瘤学大会暨2012年CSCO学术年会

作者：高文斌方今女黄剑辉张晓晨王武龙王刚吕金燕张轩高景山王若雨 116001 大连大学附属中山医院肿瘤科 133002 延边大学医学部病理及病理生理学教研室 200000 上海交通大学医学院 116000 大连医科大学基础医学院2011级临床医学英语班

本文旨在比较、观察洛铂、顺铂分别腔内灌注治疗恶性胸腹腔积液的近期临床疗效及临床安全性.对41例恶性胸腹腔积液患者,在尽可能的放尽胸腹腔内积液以后,分别腔内注入洛铂50mg/m2,或者顺铂60mg/m2,均为每3周1个周期,1周期后评价近期疗效... 详细信息

本文旨在比较、观察洛铂、顺铂分别腔内灌注治疗恶性胸腹腔积液的近期临床疗效及临床安全性.对41例恶性胸腹腔积液患者,在尽可能的放尽胸腹腔内积液以后,分别腔内注入洛铂50mg/m2,或者顺铂60mg/m2,均为每3周1个周期,1周期后评价近期疗效,生活质量以及毒副反应,同时对治疗疗效进行分层分析.结果表明洛铂和顺铂腔内灌注均可以较好的控制恶性胸腹腔积液，既往应用顺铂治疗的患者采用洛铂治疗也具有较好的有效率;洛铂腔内治疗可显著减轻患者的临床症状，改善患者生活质量，临床安全性较好，未增加化疗药的不良反应发生率。

关键词：恶性胸腹腔积液药物治疗腔内灌注临床疗效安全性分析

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