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敲低TFAM通过上调ROS/ADAM17促进可溶型MICA生成抑制NK细胞杀伤人肝癌细胞的作用

细胞与分子免疫学杂志 2021年第3期37卷 257-264页

作者：吴丹何元方周幸春邢金良刘晓斌延安大学医学院免疫教研室陕西延安716000 空军军医大学基础医学院教学实验中心陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFA... 详细信息

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFAM稳定干涉及过表达的肝癌细胞株,与NKL细胞共培养,ELISA检测培养上清中可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA)水平及NK细胞活化相关细胞因子的变化;流式细胞术检测肝癌细胞膜MICA的水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测共培养的NKL细胞杀伤活性。调控共培养上清中sMICA的含量后,ELISA及LDH试验检测细胞因子及NKL细胞杀伤功能是否受到影响。调控TFAM干涉或过表达肝癌细胞内的活性氧(ROS)水平和解整合素金属蛋白酶17(ADAM17)表达,ELISA检测sMICA变化。结果与癌旁组织相比,TFAM在肝癌组织中显著低表达,且TFAM低表达肝癌患者其总生存期和无病生存期均显著低于TFAM高表达肝癌患者。敲低肝癌细胞TFAM后,细胞膜型MICA水平显著降低,而培养上清中的sMICA显著增加,细胞内ROS水平及ADAM17的表达均显著增强;肝癌细胞过表达TFAM后则相反。将TFAM稳定干涉的肝癌细胞与NKL细胞共培养后可显著降低NKL细胞活化细胞因子的分泌及杀伤功能,反之,与TFAM过表达的肝癌细胞与NKL细胞共培养后其活化相关细胞因子的表达及杀伤功能均显著增强。在肝癌细胞与NKL细胞共培养上清中加入MICA中和抗体,可显著恢复肝癌细胞TFAM干涉所导致的NKL细胞活性抑制及杀伤功能减弱;在共培养上清中加入重组MICA后,TFAM过表达所致的NK细胞活化及杀伤功能增强被显著抑制。敲低TFAM引起sMICA生成增加,但中和ROS或者敲低ADAM17后,可显著抑制sMICA生成;TFAM过表达导致sMICA生成减少,加入过氧化氢(H2O2)或者过表达ADAM17后,可显著增加sMICA生成。结论敲低TFAM上调ROS/ADAM17通路促进sMICA生成,抑制NK细胞的杀伤力。

关键词：肝细胞癌线粒体转录因子A(TFAM) 活性氧(ROS) 解整合素金属蛋白酶17(ADAM17) 可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA) 自然杀伤(NK)细胞

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维甲酸介导的线粒体片段化抑制肝癌细胞营养缺乏相关凋亡抵抗

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空军军医大学学报 2024年第7期45卷 756-762页

作者：杜钰璐陈佳琪高铭舒李佳颖廖达文王星琛张志刚黄启超季乐乐空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032 西北大学生命科学学院陕西西安710069 空军军医大学基础医学院教学实验中心陕西西安710032

目的探索代谢物和线粒体如何在营养缺乏环境中调控肝癌细胞存活及其相关机制。方法通过分析肝动脉栓塞化疗(TACE)治疗敏感及耐受肝癌样本的转录组数据,鉴定肝癌细胞抵抗营养缺乏的关键通路;在营养剥夺耐受(HLF、Huh7)和敏感(Hep3B、HLE... 详细信息

目的探索代谢物和线粒体如何在营养缺乏环境中调控肝癌细胞存活及其相关机制。方法通过分析肝动脉栓塞化疗(TACE)治疗敏感及耐受肝癌样本的转录组数据,鉴定肝癌细胞抵抗营养缺乏的关键通路;在营养剥夺耐受(HLF、Huh7)和敏感(Hep3B、HLE)细胞中检测维甲酸含量;利用维甲酸或维甲酸受体抑制剂处理肝癌细胞,MTS、流式细胞术等检测细胞在营养剥夺下的生长及凋亡情况;利用透射电镜和激光共聚焦显微镜观察维甲酸对肝癌细胞线粒体数目、形态变化的影响。结果转录组分析提示TACE治疗耐受与敏感肝癌组织差异基因主要富集在视黄醇代谢通路。进一步发现与营养剥夺敏感肝癌细胞相比,耐受肝癌细胞中视黄醇代谢产物维甲酸显著降低(P<0.01)。HLF细胞在营养剥夺情况下补充维甲酸,线粒体呈片段化且细胞死亡增加(P<0.01);而在Hep3B细胞中抑制维甲酸受体,线粒体片段化减少,细胞死亡减少(P<0.01)。结论补充维甲酸可通过诱导肝癌细胞线粒体片段化抑制肝癌细胞在营养缺乏环境下的凋亡抵抗,而低水平维甲酸可通过增强线粒体融合,促进营养缺乏诱导的肝癌细胞凋亡抵抗。

关键词：维甲酸肝癌线粒体片段化营养剥夺

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LncRNA GATA3-AS1促进乳腺癌细胞的增殖迁移及其机制

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医学新知 2022年第2期32卷 127-137页

作者：江琪习一清魏蕾武汉大学基础医学院病理生理学教研室武汉430071 武汉大学中南医院甲乳外科武汉430071

目的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)与多种肿瘤的发生发展密切相关。本研究旨在探讨LncRNA GATA3-AS1在乳腺癌进展中的生物学作用及其机制。方法使用starBase等在线数据库预测GATA3-AS1的下游靶基因GATA3,采用qRT-PCR技... 详细信息

目的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)与多种肿瘤的发生发展密切相关。本研究旨在探讨LncRNA GATA3-AS1在乳腺癌进展中的生物学作用及其机制。方法使用starBase等在线数据库预测GATA3-AS1的下游靶基因GATA3,采用qRT-PCR技术检测正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中LncRNA GATA3-AS1的表达水平,通过在线数据库预测其表达与乳腺癌不同临床病理特征的关系。利用质粒转染实验获得低表达GATA3-AS1的细胞株,使用Cell Counting Kit-8(CCK8)实验、划痕实验、Transwell实验评估GATA3-AS1在乳腺癌进展中的功能,并采用蛋白印迹实验验证GATA3-AS1和GATA3的表达相关性。结果 GATA3-AS1在乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7中显著高表达,通过bc-GenExMiner数据库在线分析,GATA3-AS1在年龄> 51岁、人类表皮生长因子受体2阴性(HER2-)、雌激素受体阳性(ER+)、孕激素受体阳性(PR+)、激素受体A阳性型(luminal A)的乳腺癌患者中表达量更高,且GATA3-AS1的表达与乳腺癌的总生存期呈显著负相关。体外实验表明,沉默GATA3-AS1可显著降低乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7的增殖迁移能力。此外,在MDA-MB-231和MCF-7细胞系中敲低GATA3-AS1后,GATA3蛋白水平显著升高,提示GATA3-AS1的促癌作用可能是通过其蛋白编码基因GATA3的表达来介导。结论 LncRNA GATA3-AS1可能通过调节GATA3的表达促进乳腺癌肿瘤细胞的增殖与迁移。

关键词：长链非编码RNA GATA3-AS1 乳腺癌增殖迁移调控机制

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合并心血管疾病的高血压患者强化降压治疗研究进展

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新医学 2024年第4期55卷 248-254页

作者：张茸祯贾敏娄豆豆王霄霄王亮王汝涛陶凌空军军医大学西京医院心内科西安710000 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室西安710032 济南市章丘区人民医院心内科济南250200

高血压是世界范围内的一个严重公共卫生问题,是心血管疾病的主要危险因素,高血压患者常合并多种心血管疾病,积极控制高血压可有效改善合并心血管疾病患者的临床预后。2023年6月《ESH高血压管理指南》发布,更新了启动降压治疗时机的推荐... 详细信息

高血压是世界范围内的一个严重公共卫生问题,是心血管疾病的主要危险因素,高血压患者常合并多种心血管疾病,积极控制高血压可有效改善合并心血管疾病患者的临床预后。2023年6月《ESH高血压管理指南》发布,更新了启动降压治疗时机的推荐,对于既往有心脑血管疾病的正常高值血压的患者,指南建议从130/80 mmHg启动降压治疗。2023版《中国高血压防治指南》也建议,心血管风险为高危和很高危的高血压患者目标血压可进一步降至130/80 mmHg以下。这提示强化血压控制在合并心血管疾病的高血压患者中可以取得更大的临床获益。近年来多项研究显示了对高血压患者强化血压控制的优势,该文总结了合并不同心血管疾病的高血压人群中强化血压控制的相关临床研究进展,为此类患者临床强化降压治疗提供依据。

关键词：高血压强化降压冠心病心力衰竭心房颤动

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利用加权基因共表达网络分析挖掘促进乳腺癌循环肿瘤细胞转移的关键基因

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武汉大学学报（医学版） 2021年第1期42卷 72-77页

作者：曾祎凡张京伟邵尤城龚鹏举陈芳芳武汉大学中南医院甲状腺乳腺外科湖北武汉430071 武汉大学基础医学院病理生理学教研室湖北武汉430071

目的:通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法筛选促进乳腺癌循环肿瘤细胞转移的基因,为乳腺癌转移的早期预警提供循环肿瘤细胞标志物,也为乳腺癌发展动态监测提供新策略。方法:利用WGCNA筛选出数据集GSE9893中与乳腺癌转移相关的基因,... 详细信息

目的:通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法筛选促进乳腺癌循环肿瘤细胞转移的基因,为乳腺癌转移的早期预警提供循环肿瘤细胞标志物,也为乳腺癌发展动态监测提供新策略。方法:利用WGCNA筛选出数据集GSE9893中与乳腺癌转移相关的基因,将所选基因与在循环肿瘤细胞数据库中高表达的基因取交集作为候选基因,最后在肿瘤基因组计划(TCGA)数据库中验证候选基因的表达水平。结果:1024个基因在伴转移的乳腺癌中高表达,WGCNA从中得到与乳腺癌转移相关的67个基因,其中ACTB和DDX5基因在乳腺癌循环肿瘤细胞中呈现出高表达的状态,并且DDX5在TCGA伴转移的乳腺癌样本中也高表达。结论:DDX5可作为乳腺癌发展动态监测的循环肿瘤细胞标志物,并可能为乳腺癌治疗提供新的靶点。

关键词：乳腺癌加权基因共表达网络分析循环肿瘤细胞转移

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肠道菌群--肝脏疾病的重要参与者

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南方医科大学学报 2020年第4期40卷 595-600页

作者：王芳昭崔茜如曾雨浓陈鹏南方医科大学基础医学院病理生理学教研室广东广州510515

肠道菌群是一个复杂且多样化的生态系统,各类菌群之间存在着特定的共生关系,同时,胃肠道与肝脏之间通过门脉循环形成紧密的解剖、功能双向联通网络,进而相互维持稳态"。肠-肝轴"理论在肝脏疾病的发病机制中具有深远意义,越来... 详细信息

肠道菌群是一个复杂且多样化的生态系统,各类菌群之间存在着特定的共生关系,同时,胃肠道与肝脏之间通过门脉循环形成紧密的解剖、功能双向联通网络,进而相互维持稳态"。肠-肝轴"理论在肝脏疾病的发病机制中具有深远意义,越来越多的研究证实肠道菌群与肝脏疾病密切相关,它们可以通过多种方式和通路影响肝脏病理生理学进程。在病理情况下,由于各种原因导致菌群生态失调、功能紊乱时,肠道菌群则会与宿主免疫系统及其他类型细胞产生多种相互作用,进而导致肝脏脂肪变性、炎症、纤维化,继而引发各类肝脏疾病,如酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、原发性硬化性胆管炎、急性肝衰竭、肝细胞癌等。越来越多关于益生元/益生菌改善肝病的报道逐渐打开了以菌治病的新世界。因此,肠道微生物群落里隐藏的潜在信息和价值是无穷的。为了更加全面地探究各类复杂疾病的病理生理机制,我们仍需继续深入了解某些特定的肠道微生物在参与肝脏损伤进程、改善疾病进程方面的重要作用,为找寻科学有效的临床治疗方法奠定基础。现有综述报道很少同时阐述肠道菌群与急性及慢性肝脏疾病的密切关系。本文以此为出发点,探讨近年来关于急性及慢性肝损伤的研究成果,并得出结论:肝脏的解剖结构促成其与肠道菌群形成彼此沟通的紧密网络,而肠道菌群则是调节肝脏生理、病理功能的重要参与者。

关键词：肠道微生物肝脏疾病 “肠-肝”轴

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线粒体DNA变异与缺血性心脏病的研究进展

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山西医科大学学报 2024年第10期55卷 1364-1368页

作者：孟庆磊殷玥练静孙铭初穆楠延安大学生命科学学院生物化学与分子生物学教研室延安716099 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室延安大学基础医学院西北工业大学医学研究院

线粒体是半自主型细胞器,含有独立的DNA分子,称为线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)。近年来越来越多的研究揭示了mtDNA变异与疾病的相关性,也证实了mtDNA变异可通过多种机制诱发冠状动脉粥样硬化和缺血性心脏病的发生。其中一些特定... 详细信息

线粒体是半自主型细胞器,含有独立的DNA分子,称为线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)。近年来越来越多的研究揭示了mtDNA变异与疾病的相关性,也证实了mtDNA变异可通过多种机制诱发冠状动脉粥样硬化和缺血性心脏病的发生。其中一些特定的mtDNA变异已被证实可作为心血管疾病的新型生物标志物。深入研究mtDNA变异在缺血性心脏病中的特征和作用机制,具有重要的研究价值和临床应用前景。本文就mtDNA变异与缺血性心脏病的相关性研究进展进行综述。

关键词：线粒体DNA DNA变异血脂水平血管老化线粒体功能障碍缺血性心脏病

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HSP60通过TREM2抑制糖氧剥夺诱导的小胶质细胞焦亡

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神经解剖学杂志 2022年第5期38卷 561-566页

作者：马磊李晓倩牛雯空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室西安710032 西安交通大学第二附属医院麻醉科西安710004 解放军总医院第二医学中心北京100853

目的:目的:探讨髓样细胞触发受体2(TREM2)选择性激动剂热休克蛋白60(HSP60)对糖氧剥夺(OGD)后小胶质细胞焦亡及炎性因子释放的影响。方法:小鼠来源的小胶质细胞系N9细胞分为对照组(control)、糖氧剥夺组(OGD)、HSP60+OGD组、TREM2-siRNA... 详细信息

目的:目的:探讨髓样细胞触发受体2(TREM2)选择性激动剂热休克蛋白60(HSP60)对糖氧剥夺(OGD)后小胶质细胞焦亡及炎性因子释放的影响。方法:小鼠来源的小胶质细胞系N9细胞分为对照组(control)、糖氧剥夺组(OGD)、HSP60+OGD组、TREM2-siRNA+HSP60+OGD组。用real time RT-PCR和Western Blot方法检测TREM2-siRNA的敲减效果,用Western Blot检测N9细胞中TREM2、剪切型半胱天冬酶1(cleaved caspase-1)和削皮素D(GSDMD)的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测N9细胞培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-18的含量。结果:TREM2-siRNA可有效降低N9细胞内TREM2 mRNA和蛋白表达(P<0.05);与对照组相比,OGD处理可上调N9细胞中cleaved caspase-1、GSDMD和培养上清中促炎因子(TNF-α、IL-1β和IL-18)水平(P<0.05),而不改变TREM2表达量;外源性HSP60可增加OGD处理细胞中TREM2蛋白表达,同时下调cleaved caspase-1、GSDMD及促炎因子(TNF-α、IL-1β和IL-18)含量(P<0.05);给予TREM2-siRNA后,外源性HSP60对cleaved caspase-1、GSDMD及促炎因子(TNF-α、IL-1β和IL-18)的作用被抑制(P<0.05)。结论:HSP60能够通过上调TREM2抑制OGD诱导的小胶质细胞焦亡,减少促炎因子释放。

关键词：热休克蛋白60 髓样细胞触发受体2 糖氧剥夺小胶质细胞焦亡

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生理学课程思政实践探析

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四川生理科学杂志 2022年第10期44卷 1872-1873,1864页

作者：肖业伟李达兵赵春玲竹梅盘强文西南医科大学基础医学院生理学教研室四川泸州646000 西南医科大学基础医学院病理生理学教研室四川泸州646000

为了增强医学生专业教育过程中的育人效果,在各专业课程教学中恰当的引入课程思政是非常有必要的。本文从生理学的历史和时事热点中挖掘思政元素,结合各章节生理学理论教学的具体内容,进行有机无缝的融合,实施春风化雨、润物无声的课程... 详细信息

为了增强医学生专业教育过程中的育人效果,在各专业课程教学中恰当的引入课程思政是非常有必要的。本文从生理学的历史和时事热点中挖掘思政元素,结合各章节生理学理论教学的具体内容,进行有机无缝的融合,实施春风化雨、润物无声的课程思政教育,正面引导大学生正确三观的形成。

关键词：生理学课程思政实践有机融合

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不同月龄APP/PS1双转基因AD小鼠海马神经元线粒体的动态变化

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重庆医科大学学报 2021年第10期46卷 1141-1146页

作者：李世杰唐俐周凡琳熊晓敏张雄李昱重庆医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室重庆400016 重庆大学附属肿瘤医院病理科重庆400030

目的:检测不同月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠海马神经元中线粒体自噬的动态变化,并探讨其意义。方法:选取20只雄性APP/PS1双转基因AD小鼠为研究对象,分为3月龄组、6月龄组、9月龄组和12月龄组,以C5... 详细信息

目的:检测不同月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠海马神经元中线粒体自噬的动态变化,并探讨其意义。方法:选取20只雄性APP/PS1双转基因AD小鼠为研究对象,分为3月龄组、6月龄组、9月龄组和12月龄组,以C57小鼠为对照组。获取海马组织,通过电镜观察海马区神经元中线粒体的形态变化,用Western blot检测自噬相关蛋白LC3和P62的表达水平;线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin和Miro1的表达水平;线粒体外膜蛋白Tom20的表达水平。结果:电镜观察结果显示:随着月龄增大,APP/PS1双转基因AD小鼠海马区神经元中线粒体损伤的病理变化呈逐渐加重的过程,即线粒体明显水肿、透明,嵴排列不规则,断裂,甚至消失。Western blot结果显示,与野生小鼠组比较,LC3、P62、PINK1和Parkin蛋白表达水平在6月龄组、9月龄组和12月龄组小鼠中明显增高(P<0.05),而Miro1蛋白却明显降低(P<0.05),Tom20的表达水平无明显差异(P>0.05)。结论:随着APP/PS1双转基因AD小鼠月龄的增加,其海马区神经元线粒体病理改变呈动态,线粒体自噬呈动态增强但伴随线粒体清除障碍。

关键词： AD小鼠不同月龄海马线粒体

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