检索结果-内蒙古大学图书馆

吉林大学学报（医学版） 2010年第6期36卷 1030-1034页

作者：陈晗刘艳波梁作文邵晨刘喜春张键赵丽晶赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021 南方医科大学珠江医院广东广州510515 北华大学基础医学院病理生理学教研室吉林吉林132013

目的:探讨人参二醇组皂苷(PDS)对内毒素休克大鼠心肌的保护作用,并揭示其保护作用与水通道蛋白1(AQP1)表达的关系。方法:40只Wistar大鼠分为空白对照组(CTR)、模型组(LPS)、地塞米松组(DEX)及PDS组。LPS(5mg·kg-1)舌下静脉注射复... 详细信息

目的:探讨人参二醇组皂苷(PDS)对内毒素休克大鼠心肌的保护作用,并揭示其保护作用与水通道蛋白1(AQP1)表达的关系。方法:40只Wistar大鼠分为空白对照组(CTR)、模型组(LPS)、地塞米松组(DEX)及PDS组。LPS(5mg·kg-1)舌下静脉注射复制内毒素休克模型,监测大鼠平均动脉压(MAP)及动脉压下降的百分数,测量休克240min大鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量及心肌组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化,Western blotting方法检测心肌组织AQP1表达情况。结果:以血压下降至基础血压(0min)的2/3判定为休克状态,注射LPS5min后各组动物均进入休克状态,20min后平均动脉压(MAP)代偿性回升,于休克第60min时,LPS组MAP进行性下降,而PDS和DEX组MAP维持稳定而持久的代偿变化;休克240min时,PDS和DEX组血清AST、CK和LDH含量显著低于LPS组(P<0.05),心肌组织匀浆SOD活性高于LPS组(P<0.05),MDA含量低于LPS组(P<0.05)。Western blotting结果显示:与CTR组比较,LPS组AQP1表达显著降低(P<0.05),PDS组和DEX组AQP1表达水平明显高于LPS组(P<0.05)。结论:PDS对内毒素休克大鼠心肌具有保护作用,其机制可能是通过增强内毒素血症时心肌毛细血管内皮细胞AQP1蛋白表达,抑制心肌间质水肿而发挥作用。

关键词：人参二醇组皂苷内毒素性休克心肌细胞水通道蛋白1

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20(s)-原人参二醇诱导体外培养Siha细胞凋亡的作用

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吉林大学学报（医学版） 2010年第2期36卷 345-348,I0005,F0003页

作者：赵丽晶许多梁作文程宏郭亚雄李德隆韩向北赵丽娟董妍吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021 美国杜兰大学细胞生物学教研室美国新奥尔良la70062

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞凋亡的作用,阐明其抗肿瘤作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)、阳性对照组(40μg.L-1顺铂)及PPD10、20和40μmol.L-1组。分别用乙醇、顺铂和... 详细信息

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞凋亡的作用,阐明其抗肿瘤作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)、阳性对照组(40μg.L-1顺铂)及PPD10、20和40μmol.L-1组。分别用乙醇、顺铂和PPD处理细胞48h后,利用光学显微镜观察细胞形态学改变,采用AnnexinV-EGFP/PI双染色法、TUNUL染色法检测细胞凋亡情况,分别采用RT-PCR、Westernblotting方法检测bax基因的转录及蛋白表达情况。结果:不同剂量的PPD处理后,Siha细胞变圆回缩并出现碎片,AnnexinV-EGFP/PI染色呈现不同程度的绿染和红染,TUNUL染色可见绿色荧光,bax基因的转录与蛋白表达升高。结论:PPD可诱导人宫颈癌Siha细胞出现凋亡,其作用与bax基因表达上调有关。

关键词： 20(s)-原人参二醇宫颈肿瘤 Siha细胞细胞凋亡

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蛋白酶体抑制剂Lactacystin对胶质瘤C6细胞的增殖抑制作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2010年第2期36卷 276-280页

作者：王海峰钟加滕王伟伟葛鹏飞李文臣罗毅男吉林大学第一医院神经外科吉林长春130021 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:通过观察蛋白酶体抑制剂Lactacystin(LAC)对C6细胞增殖率的影响,探讨LAC引起胶质瘤细胞增殖率发生改变的机制,为临床上治疗胶质瘤提供理论依据。方法:体外培养大鼠胶质瘤C6细胞,选择处于对数生长期的细胞,实验分为对照组、LAC2.5μ... 详细信息

目的:通过观察蛋白酶体抑制剂Lactacystin(LAC)对C6细胞增殖率的影响,探讨LAC引起胶质瘤细胞增殖率发生改变的机制,为临床上治疗胶质瘤提供理论依据。方法:体外培养大鼠胶质瘤C6细胞,选择处于对数生长期的细胞,实验分为对照组、LAC2.5μmol.L-1组、LAC5.0μmol.L-1组及LAC10.0μmol.L-1组,MTT法检测各组C6细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电势,RT-PCR方法检测各组细胞中Bax和bcl-2mRNA表达,Western blotting方法检测各组细胞中Bax、bcl-2和P65蛋白表达。结果:与对照组比较,LAC5.0μmol.L-1组和LAC10.0μmol.L-1组细胞增殖率、线粒体膜电势和P65蛋白表达水平降低(P<0.05),而细胞凋亡率、Bax/bcl-2mRNA和蛋白的比值增加(P<0.05)。结论:LAC通过诱导细胞凋亡抑制C6细胞的增殖率,其引起凋亡的方式可能是通过线粒体途径,此外在这个过程中NF-κB信号通路也可能影响细胞的增殖率。

关键词： Lactacystin 细胞凋亡线粒体细胞增殖

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TGF-β和P53蛋白在前列腺癌组织中的表达及其意义

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吉林大学学报（医学版） 2010年第2期36卷 364-367,I0006页

作者：苏振波梁作文赵丹王伟华吉林大学中习联谊医院泌尿外科吉林长春130033 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)和P53蛋白在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测36例前列腺癌标本组织中TGF-β和P53蛋白表达情况。结果:36例前列腺癌标本组织中高、中、低分化癌分别为10、16和10例。T... 详细信息

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)和P53蛋白在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测36例前列腺癌标本组织中TGF-β和P53蛋白表达情况。结果:36例前列腺癌标本组织中高、中、低分化癌分别为10、16和10例。TGF-β在高、中和低分化前列腺癌组织中的阳性表达率分别为30%(3/10)、37.5%(6/16)和70.0%(7/10);P53蛋白在高、中和低分化前列腺癌组织中的阳性表达率分别为20%(2/10)、25.0%(4/16)和50%(5/10)。TGF-β和P53蛋白在高、中分化前列腺癌组织中的表达强度均低于在低分化前列腺癌组织(P<0.05)。结论:TGF-β和P53蛋白阳性表达率和表达强度与前列腺癌分化程度有相反的变化趋势,提示检测TGF-β与P53蛋白的表达可协助鉴定前列腺癌分化程度并评估预后。

关键词：前列腺肿瘤转化生长因子-β P53蛋白免疫组织化学

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共表达siRNA-Stat3与GRIM-19质粒的构建及其功能研究

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吉林大学学报（医学版） 2010年第5期36卷 858-861页

作者：梁作文赵丽晶贾慧婕李馨高丽芳张灵赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理学教研室前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的:构建共表达siRNA-Stat3和GRIM-19质粒,观察其对人前列腺癌PC-3M细胞增殖能力的影响。方法:以基因重组技术构建共表达siRNA-Stat3和GRIM-19质粒;应用真核细胞转染技术转染人前列腺癌PC-3M细胞,半定量RT-PCR法检测共表达质粒Stat3和G... 详细信息

目的:构建共表达siRNA-Stat3和GRIM-19质粒,观察其对人前列腺癌PC-3M细胞增殖能力的影响。方法:以基因重组技术构建共表达siRNA-Stat3和GRIM-19质粒;应用真核细胞转染技术转染人前列腺癌PC-3M细胞,半定量RT-PCR法检测共表达质粒Stat3和GRIM-19mRNA水平的变化,细胞增殖实验观察其对前列腺癌细胞增殖能力的影响。结果:酶切鉴定证实成功构建siRNA-Stat3和GRIM-19共表达质粒;与对照组比较,实验组前列腺癌细胞Stat3mRNA表达显著降低,GRIM-19mRNA表达显著升高(P<0.01);实验组前列腺癌细胞增殖率明显降低(P<0.05)。结论:成功构建siRNA-Stat3和GRIM-19共表达质粒,其对前列腺癌细胞株具有显著的生长抑制作用。

关键词：前列腺肿瘤 Stat3 GRIM-19 基因治疗

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衔接蛋白2基因siRNA表达载体的构建及鉴定

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吉林大学学报（医学版） 2010年第2期36卷 331-335页

作者：张勇刘宁周蔷李洪岩刘全吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021 吉林大学第一医院心血管内科吉林长春130021

目的:构建针对衔接蛋白2的μ2亚单位(AP2-μ2)的短链干涉RNA(si RNA)及其表达载体,转染细胞后观察其对AP2-μ2基因的干涉作用。方法:设计AP2-μ2靶向的发夹状si RNA,据此设计合成3条互补的寡核苷酸链,退火后分别连接到pSilencer3.1neo H... 详细信息

目的:构建针对衔接蛋白2的μ2亚单位(AP2-μ2)的短链干涉RNA(si RNA)及其表达载体,转染细胞后观察其对AP2-μ2基因的干涉作用。方法:设计AP2-μ2靶向的发夹状si RNA,据此设计合成3条互补的寡核苷酸链,退火后分别连接到pSilencer3.1neo H1载体,转化扩增后进行序列测定。待转染细胞分为对照组、Scramble plasmid、AP2plasmid-1、AP2plasmid-2和AP2plasmid-3组。用脂质体转染法将3组si RNA重组质粒与阴性对照质粒(Scramble plasmid)转染大鼠心肌细胞株H9C2,通过RT-PCR法检测AP2-μ2基因表达水平的变化。结果:合成的6条寡核苷酸单链凝胶电泳显示多个电泳条带,分别退火后,产物经凝胶电泳显示形成单一条带。双链DNA模板与载体质粒连接后,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切,凝胶电泳可见4300和66bp的酶切片段。DNA测序连接的核酸序列与设计序列一致,表明AP2-μ2基因的3条si RNA载体构建成功。RT-PCR检测,在AP2plasmid-1组,转染的H9C2细胞中AP2-μ2的基因表达水平较阴性对照组降低约96%。结论:成功地构建了针对AP2-μ2基因的3条si RNA载体,其中AP2plasmid-1转染细胞后可显著抑制AP2-μ2基因表达。

关键词： RNA干涉衔接蛋白2 短链干涉RNA

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RNAi沉默STAT3基因对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2010年第4期36卷 640-643,F0002页

作者：赵淑华赵凡郑晶莹高丽芳赵雪俭吉林大学第二医院妇产科吉林长春130041 吉林大学第二医院骨科吉林长春130041 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:研究pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,阐明RNA干涉技术在卵巢癌生物治疗领域中的作用。方法:应用人卵巢癌细胞系SKOV3对15例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:对... 详细信息

目的:研究pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,阐明RNA干涉技术在卵巢癌生物治疗领域中的作用。方法:应用人卵巢癌细胞系SKOV3对15例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:对照组(生理盐水)、空质粒对照组及重组质粒组(pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3)。应用电子穿孔仪将质粒转入裸鼠移植瘤内,观察重组质粒注射后第7、14、21和28天各组裸鼠皮下移植瘤体积变化。利用Westernblotting检测重组质粒对STAT3蛋白表达的影响,采用HE及TUNEL染色方法观察肿瘤组织形态变化及细胞凋亡情况。结果:重组质粒瘤内注射对SKOV3裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,与2个对照组比较,重组质粒组裸鼠移植瘤生长速度明显减慢(P<0.01)。重组质粒组瘤体内STAT3及CyclinD1、VEGF、survivin、c-myc蛋白表达明显低于2个对照组(P<0.01)。HE染色显示,重组质粒组肿瘤细胞出现大片细胞坏死,2个对照组肿瘤细胞以正常形态居多。TUNEL染色显示,重组质粒组癌组织有大量细胞凋亡,2个对照组几乎均为TUNEL阴性反应细胞。结论:pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能明显抑制人卵巢癌细胞SKOV3裸鼠皮下移植瘤的生长。

关键词： RNA干涉 SKOV3 STAT3 卵巢肿瘤

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20(S)-原人参二醇对体外培养siha细胞自噬的影响

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吉林大学学报（医学版） 2010年第6期36卷 1055-1058,1205页

作者：许多赵丽晶程宏郭亚雄韩向北鲁育铭赵丽娟董妍吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021 美国杜兰大学细胞生物学教研室美国新奥尔良la70062

目的:观察20(S)-原人参二醇(PPD)对人子宫颈癌siha细胞生长的抑制作用及其对自噬基因Beclin1及MAP1-LC3转录和表达的影响,探讨PPD抑制siha细胞增殖的机制。方法:体外培养人宫颈癌siha细胞分为阴性对照组(乙醇)、阳性对照组(40μmol·... 详细信息

目的:观察20(S)-原人参二醇(PPD)对人子宫颈癌siha细胞生长的抑制作用及其对自噬基因Beclin1及MAP1-LC3转录和表达的影响,探讨PPD抑制siha细胞增殖的机制。方法:体外培养人宫颈癌siha细胞分为阴性对照组(乙醇)、阳性对照组(40μmol·L-1顺铂)及PPD10、20和40μg·L-1组,分别用乙醇、顺铂和PPD处理细胞24、48、72和96h后,MTT法检测siha细胞增殖抑制率,RT-PCR、Western blotting及免疫细胞化学染色法观察各组siha细胞自噬相关基因Beclin1及MAP1-LC3的转录及蛋白表达情况。结果:与对照组比较,PPD10、20和40μg·L-1组细胞增殖抑制率明显增加(P<0.05),且随时间延长和剂量的增加而逐渐提高,自噬相关基因Beclin1及MAP1-LC3的转录水平及蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。结论:PPD可抑制体外培养siha细胞增殖,诱导siha细胞发生自噬。其机制可能与上调自噬相关基因Beclin1及MAP1-LC3表达有关。

关键词： 20S-原人参二醇 siha细胞自噬 Beclin1 MAP1-LC3

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Survivin-siRNA真核重组质粒的构建和鉴定及其对前列腺癌DU145细胞的影响

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中国老年学杂志 2010年第5期30卷 642-645页

作者：刘艳波葛贺卢丽莉赵雪俭吉林大学前列腺疾病防治研究中心北华大学基础医学院病理生理学教研室吉林吉林132013

目的应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA,并检测其对DU145细胞株内源性survivin基因和蛋白表达的影响。方法构建重组质粒shRNA-sur1和-sur2并分别转染DU145细胞株,通过半定量RT-PCR和Western印迹检测survivinm... 详细信息

目的应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA,并检测其对DU145细胞株内源性survivin基因和蛋白表达的影响。方法构建重组质粒shRNA-sur1和-sur2并分别转染DU145细胞株,通过半定量RT-PCR和Western印迹检测survivinmRNA转录水平和蛋白表达的变化。结果成功构建针对survivin干扰的两种真核表达质粒;两种重组质粒shRNA-sur1和-sur2均能明显抑制内源性survivin基因表达,其抑制率分别为72%±8%和77%±5%;两种质粒均能明显抑制survivin蛋白的表达,其抑制率分别为75%±8%和80%±6%。结论重组质粒shRNA-sur1和-sur2均可明显抑制DU145细胞内源survivin蛋白表达和mRNA转录,为survivin介导的肿瘤基因沉默提供良好的基础。

关键词： siRNA DU145细胞株 survivin基因质粒

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siRNA-STAT3对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用

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中国妇幼保健 2010年第18期25卷 2551-2553页

作者：赵淑华赵凡郑晶莹高丽芳赵雪俭吉林大学第二医院妇产科吉林长春130041 吉林大学第二医院骨科吉林大学基础医学院病理生理学教研室

目的:探讨pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法:应用人卵巢癌细胞株SKOV3对15只裸鼠构建卵巢癌移植瘤模型,随机分为生理盐水对照组、空质粒对照组、重组质粒组... 详细信息

目的:探讨pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法:应用人卵巢癌细胞株SKOV3对15只裸鼠构建卵巢癌移植瘤模型,随机分为生理盐水对照组、空质粒对照组、重组质粒组。联合电转染技术向裸鼠移植瘤内注射重组质粒,每隔5天重复注射1次,每4天测量各组裸鼠皮下移植瘤体积。采用TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡情况。结果:重组质粒瘤内注射对卵巢癌移植瘤生长有明显的抑制作用,与两个对照组比较重组质粒组裸鼠移植瘤生长速度明显减慢(P<0.01)。TUNEL染色显示重组质粒组癌组织有大量细胞凋亡。结论:pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能有效诱导人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中细胞凋亡,抑制肿瘤生长。

关键词： RNA干涉 TUNEL STAT3 卵巢癌

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