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吉林大学学报（医学版） 2005年第6期31卷 843-845页

作者：潘玉琢李扬赵丹毛建华高洪文计国义王伟华赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理学教研室前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的:探讨STEAP1在中国人前列腺组织中的表达和分布情况。方法:应用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色的方法,检测STEAP1在正常前列腺、前列腺癌组织中mRNA和蛋白表达水平及其在细胞中的定位。结果:RT-PCR结果显示前列腺癌STEAP1 mRN... 详细信息

目的:探讨STEAP1在中国人前列腺组织中的表达和分布情况。方法:应用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色的方法,检测STEAP1在正常前列腺、前列腺癌组织中mRNA和蛋白表达水平及其在细胞中的定位。结果:RT-PCR结果显示前列腺癌STEAP1 mRNA高表达,正常前列腺则表达较弱;免疫印迹结果表明前列腺癌组织中STEAP1的表达水平高于正常前列腺组织的表达量;免疫组织化学染色显示阳性染色细胞主要分布在正常前列腺腺上皮细胞和前列腺癌腺上皮细胞,间质细胞、基底细胞染色阴性,着色部位主要在细胞膜及胞浆,而且在腺上皮细胞表现出一定的方向性,主要分布在前列腺腺管管腔一侧。结论:STEAP1在中国人前列腺癌组织中广泛表达,主要表达于靠近前列腺腺管一侧的前列腺上皮细胞膜,依据结构与功能相结合的原则,其表达的解剖分布与表达水平提示STEAP1与前列腺内物质代谢有关。

关键词： STEAP1 前列腺肿瘤上皮

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共表达siRNA-Stat3与GRIM-19质粒的构建及其功能研究

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吉林大学学报（医学版） 2010年第5期36卷 858-861页

作者：梁作文赵丽晶贾慧婕李馨高丽芳张灵赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理学教研室前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的:构建共表达siRNA-Stat3和GRIM-19质粒,观察其对人前列腺癌PC-3M细胞增殖能力的影响。方法:以基因重组技术构建共表达siRNA-Stat3和GRIM-19质粒;应用真核细胞转染技术转染人前列腺癌PC-3M细胞,半定量RT-PCR法检测共表达质粒Stat3和G... 详细信息

目的:构建共表达siRNA-Stat3和GRIM-19质粒,观察其对人前列腺癌PC-3M细胞增殖能力的影响。方法:以基因重组技术构建共表达siRNA-Stat3和GRIM-19质粒;应用真核细胞转染技术转染人前列腺癌PC-3M细胞,半定量RT-PCR法检测共表达质粒Stat3和GRIM-19mRNA水平的变化,细胞增殖实验观察其对前列腺癌细胞增殖能力的影响。结果:酶切鉴定证实成功构建siRNA-Stat3和GRIM-19共表达质粒;与对照组比较,实验组前列腺癌细胞Stat3mRNA表达显著降低,GRIM-19mRNA表达显著升高(P<0.01);实验组前列腺癌细胞增殖率明显降低(P<0.05)。结论:成功构建siRNA-Stat3和GRIM-19共表达质粒,其对前列腺癌细胞株具有显著的生长抑制作用。

关键词：前列腺肿瘤 Stat3 GRIM-19 基因治疗

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MMP-2和TIMP-2在肺癌组织中的表达及其与微血管密度的关系

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吉林大学学报(医学版) 2006年第6期32卷 1059-1062+1159页

作者：盛辉苑春莉周洪澜王医术吉林大学第一医院呼吸内科吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学第一医院泌尿外科 4. 吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室

目的:研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)在人肺癌组织中的表达及其与微血管密度(MVD)的关系。方法:免疫组织化学方法检测90例肺癌组织和40例癌周组织中MMP-2和TIMP-2的表达,Ⅷ因子染色计数局部MVD,分析M... 详细信息

目的:研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)在人肺癌组织中的表达及其与微血管密度(MVD)的关系。方法:免疫组织化学方法检测90例肺癌组织和40例癌周组织中MMP-2和TIMP-2的表达,Ⅷ因子染色计数局部MVD,分析MMP-2和TIMP-2与MVD的关系。结果:免疫组织化学染色结果经IPP软件分析显示,肺癌组织MMP-2的表达值高于癌周组织(P<0.001),腺癌高于鳞癌(P<0.05),小细胞癌最高(P<0.05),并发淋巴结转移的肺癌组织高于无转移组(P<0.001);肺癌组织TIMP-2的表达低于癌周肺组织(P<0.001),在各种不同病理类型肺癌中的表达差异无显著性(P>0.05),并发淋巴结转移的肺癌组织表达较低(P<0.05)。MMP-2表达强度随着MVD的增高而增强,TIMP-2表达程度随着MVD的增高而减弱(P<0.05)。结论:MMP-2在各种不同病理类型的肺癌组织中有不同程度的表达,MMP-2和TIMP-2的表达水平与肺癌局部的MVD有关。

关键词：癌,非小细胞肺明胶酶A 金属蛋白酶2组织抑制剂微血管密度

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人乳头瘤病毒16型L1基因真核表达载体的构建及表达

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中国实验诊断学 2009年第11期13卷 1488-1490页

作者：赵丽晶赵淑华许多刘艳波梁作文张灵赵雪俭吉林大学白求恩医学院病理生理教研室吉林长春130021 吉林大学第二医院妇产科北华大学基础医学院病理生理学教研室

目的从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建表达载体,并验证目的蛋白的表达。方法根据基因全长设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pMD18T为克隆载体,构建重组质粒进... 详细信息

目的从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建表达载体,并验证目的蛋白的表达。方法根据基因全长设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pMD18T为克隆载体,构建重组质粒进行亚克隆,再以pcDNA3.1(+)为载体构建表达质粒,转染至人肝细胞系H7702,提取蛋白,采用Western Blot方法检测HPV16-L1蛋白的表达。结果从长春地区宫颈癌临床标本克隆到的HPV16型L1蛋白编码序列与Genebank报道序列高度同源,其真核表达产物与特异性抗体能够特异性结合。结论成功构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-HPV16-L1,为进一步研制HPV预防性疫苗创造基础条件。

关键词：人乳头瘤病毒 L1基因真核表达载体

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人前列腺癌多药耐药细胞系的建立

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吉林大学学报（医学版） 2007年第4期33卷 651-654,F0002页

作者：潘玉琢赵燕颖赵雪俭李扬吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系。方法:以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P... 详细信息

目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系。方法:以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P-gP)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达。结果:经顺铂诱导建立的人前列腺癌细胞系PC3M/CDDP对顺铂、丝裂霉素、阿霉素、5-氟尿嘧啶、长春新碱等药物的50%抑制浓度(IC50)分别为(0.603±0.102)、(0.201±0.056)、(0.267±0.067)、(1.676±0.321)和(0.657±0.227)mg·L-1,与PC3M细胞系比较差异有显著性(P<0.05);免疫细胞化学染色结果显示,PC3M/CDDP细胞系MRP、P-gP表达强度明显大于PC3M细胞系(P<0.05);PC3M/CDDP细胞系的细胞倍增时间为40.5h,与PC3M细胞系(48.6h)比较差异无显著性(P>0.05)。结论:成功建立稳定的人前列腺癌PC3M/CDDP细胞系,该细胞系具有对多种抗癌药耐药及细胞增殖未受影响的特点,可应用于下游实验。

关键词：人前列腺癌细胞多药耐药相关蛋白质类 P-糖蛋白抗肿瘤药

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CEA特异性RNAi增强基因工程腺病毒H101治疗人食管癌裸鼠皮下移植瘤

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基础医学与临床 2009年第8期29卷 785-788页

作者：郑红赵国强杨洪艳赵继敏王尧河董子明郑州大学基础医学院病理及病理生理学教研室河南郑州450052 郑州大学基础医学院微生物免疫学教研室河南郑州450052 郑州大学基础医学院病理学教研室河南郑州450052

目的研究癌胚抗原(CEA)特异性基因沉默对基因工程腺病毒H101杀伤食管癌EC9706细胞作用的影响,以探讨影响H101敏感性的内在因素。方法利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对人食管癌EC9706细胞的CEAsiRNA载体,通过基因转染,在EC9706细胞中建立... 详细信息

目的研究癌胚抗原(CEA)特异性基因沉默对基因工程腺病毒H101杀伤食管癌EC9706细胞作用的影响,以探讨影响H101敏感性的内在因素。方法利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对人食管癌EC9706细胞的CEAsiRNA载体,通过基因转染,在EC9706细胞中建立稳定的CEA基因沉默体系,并以空载体转染和未进行转染的EC9706细胞作对照,建立人食管癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,H101瘤内注射。用RealTimePCR和免疫组化法检测CEA在移植瘤中的表达,测量肿瘤体积。结果降低CEA在mRNA和蛋白质水平的表达,对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤成瘤时间和大小无明显影响,H101瘤内注射后,干扰组肿瘤体积显著小于空载体组和对照组(P<0·05)。结论抑制食管癌EC9706细胞中CEA的表达,能增强H101的敏感性。

关键词：癌胚抗原基因工程腺病毒 EC9706 裸鼠

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天冬酰胺合成酶对移植黑色素瘤APP/PS1小鼠骨骼肌减少的影响

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吉林大学学报（医学版） 2021年第4期47卷 849-856页

作者：董营吕航郭家女郑鸿郭丹王力可王丹陈昌捷孙连坤张勇于春艳北华大学基础医学院病理教研室吉林吉林132013 北华大学附属医院检验科吉林吉林132013 吉林大学基础医学院病理生理学系吉林长春130021

目的:探讨天冬酰胺合成酶(ASNS)在移植黑色素瘤模型淀粉样蛋白前体蛋白/早老素1(APP/PS1)小鼠骨骼肌减少中的作用,并阐明其作用机制。方法:C57BL/6J(C57)小鼠和APP/PS1小鼠分别移植黑色素瘤B16细胞(C57移植瘤组和APP/PS1移植瘤组),同时... 详细信息

目的:探讨天冬酰胺合成酶(ASNS)在移植黑色素瘤模型淀粉样蛋白前体蛋白/早老素1(APP/PS1)小鼠骨骼肌减少中的作用,并阐明其作用机制。方法:C57BL/6J(C57)小鼠和APP/PS1小鼠分别移植黑色素瘤B16细胞(C57移植瘤组和APP/PS1移植瘤组),同时设C57对照组和APP/PS1对照组,每组7只。取小鼠腓肠肌组织,分析天平称量小鼠腓肠肌质量,计算小鼠腓肠肌质量与体质量比值即肌肉减少症指数(SI),采用HE染色观察小鼠腓肠肌组织形态表现,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测小鼠腓肠肌组织中肌肉组织特异萎缩相关基因E3泛素连接酶1(Atrogin-1)、肌肉环指蛋白1(MuRF1)和ASNS mRNA表达水平,Western blotting法检测小鼠腓肠肌组织中ASNS及内质网应激途径相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子4(ATF4)、真核细胞起始因子2α(eIF2α)和磷酸化eIF2α(p-eIF2α)蛋白表达水平。结果:与C57对照组比较,C57移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低(P<0.05),腓肠肌细胞呈玻璃样变性,肌浆蓝染,部分细胞核可见核内移现象,小鼠腓肠肌组织中Atrogin-1、MuRF1和ASNS mRNA表达水平升高(P<0.05),ASNS蛋白表达水平升高(P<0.05),GRP78、ATF4蛋白表达水平和p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显升高(P<0.05);与APP/PS1对照组比较,APP/PS1移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低(P<0.05),腓肠肌部分肌纤维肿胀,部分肌纤维变细,细胞核内移现象多见,肌浆颜色以红色为主,腓肠肌组织中Atrogin-1、MuRF1和ASNS mRNA表达水平升高(P<0.05),ASNS蛋白表达水平升高(P<0.05),GRP78、ATF4蛋白表达水平和p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显升高(P<0.05);与C57移植瘤组比较,APP/PS1移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低(P<0.05),腓肠肌组织中Atrogin-1 mRNA表达水平升高(P<0.05),ASNS mRNA水平降低(P<0.05),ASNS蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),GRP78和ATF4蛋白表达水平及p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显降低(P<0.05)。结论:APP/PS1移植黑色素瘤模型小鼠腓肠肌更易发生肌肉减少,其机制可能与适应性反应ASNS转录水平降低有关,内质网应激PERK-eIF2a-ATF4信号途径可能参与调控ASNS转录活性。

关键词：天冬酰胺合成酶肌肉减少淀粉样蛋白前体蛋白/早老素1 移植瘤黑色素瘤B16细胞

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Poly I∶C对人前列腺癌细胞PC-3M的生长抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2007年第1期33卷 64-66,F0003页

作者：赵燕颖潘玉琢李扬刘亚男高丽芳赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的:观察聚肌胞(PolyI∶C)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3M生长的抑制作用。方法:前列腺癌PC-3M细胞经不同剂量PolyI∶C(100、200和400μg.L-1)作用后,相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞... 详细信息

目的:观察聚肌胞(PolyI∶C)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3M生长的抑制作用。方法:前列腺癌PC-3M细胞经不同剂量PolyI∶C(100、200和400μg.L-1)作用后,相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化。结果:对照组细胞呈梭形贴壁生长,细胞数目多,PolyI∶C组细胞变圆贴壁不佳,细胞数目变少。PolyI∶C 400μg.L-1组的生长抑制率最高,200μg.L-1组次之,100μg.L-1组最低,三组间比较差异有显著性(P<0.05);Poly I∶C同一剂量组生长抑制率72 h最高,48 h次之,24 h时最低,三组间比较差异有显著性(P<0.05)。流式细胞检测结果显示:PolyI∶C可诱导PC-3M凋亡,凋亡率呈剂量依赖性,分别为3.9%、27.1%和42.9%,三组间比较差异有显著性(P<0.05)。PolyI∶C组细胞处于G1期的百分率(61.4%)明显高于对照组(33.9%)(P<0.05)。结论:PolyI∶C能抑制体外培养的PC-3M细胞生长,对PC-3细胞有显著的增殖抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,其机制可能与细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡有关。

关键词：聚肌胞前列腺肿瘤凋亡细胞周期

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胰岛素样生长因子-1及其受体在肺癌中的表达

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江苏医药 2006年第9期32卷 818-820页

作者：盛辉苑春莉王医术吉林大学第一医院呼吸病科长春130021 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学基础医学院病理生物学教研室

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体在各种类型肺癌中的表达。方法应用免疫组化法对非小细胞肺癌和小细胞肺癌及其癌旁组织和正常肺组织进行IGF-1及其受体的检测。结果IGF-1及IGF-1受体在鳞癌、腺癌、小细胞癌和癌旁肺组织中均... 详细信息

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体在各种类型肺癌中的表达。方法应用免疫组化法对非小细胞肺癌和小细胞肺癌及其癌旁组织和正常肺组织进行IGF-1及其受体的检测。结果IGF-1及IGF-1受体在鳞癌、腺癌、小细胞癌和癌旁肺组织中均有不同程度的表达,在伴有淋巴结转移的肺癌组织中的表达较强。结论IGF-1及其受体在不同类型肺癌中均有表达,可能在肺癌的发生发展中发挥一定的作用。

关键词：肺癌胰岛素样生长因子-1 胰岛素样生长因子-1受体

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人参单体皂苷Rh_2诱导小鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡

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吉林大学学报（医学版） 2007年第4期33卷 655-657,777,F0002页

作者：何静春孟艳赵洪艳赵丽娟赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的：探讨人参单体皂苷Rh2抗小鼠前列腺癌细胞RM-1的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测不同浓度Rh2与RM-1细胞株存活率的关系;吖啶橙染色观察Rh2诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞凋亡周期,计算细胞平均凋亡指... 详细信息

目的：探讨人参单体皂苷Rh2抗小鼠前列腺癌细胞RM-1的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测不同浓度Rh2与RM-1细胞株存活率的关系;吖啶橙染色观察Rh2诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞凋亡周期,计算细胞平均凋亡指数。结果：RM-1细胞经Rh2处理后,细胞生长明显受抑制,当Rh2浓度为5、15、25和30mg·L^-1时,其生长抑制率分别为12.0%、36.1%、51.2%和69.3%,呈明显的浓度依赖性;吖啶橙荧光染色可见经药物处理的细胞呈现明显的凋亡形态;细胞周期G1期前出现凋亡峰,Rh2浓度为15和25mg·L^-1时,细胞凋亡率分别为41.9%和48.9%。结论：5-30mg·L^-1Rh2可诱导RM-1细胞凋亡,其具有明显的抗肿瘤作用。

关键词：细胞凋亡人参单体皂苷Rh2 前列腺肿瘤细胞周期

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