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重组人促卵泡激素对雄激素致不孕大鼠局灶性脑缺血脑皮质RAS相关基因表达的影响

吉林大学学报（医学版） 2009年第2期35卷 238-241页

作者：周家文张勇王皓李洪岩石国英钟加滕李扬孙连坤康劲松吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021 吉林大学中日联谊医院妇产科吉林长春130033 吉林大学

目的:探讨体内性激素的改变对局灶性脑缺血脑皮质肾素-血管紧张素(RAS)相关基因表达的影响。方法:建立雄激素致不孕大鼠(ASR)模型,给予果纳芬(rhFSH)后应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。大鼠随机分为ASR+假手术(sham)组、AS... 详细信息

目的:探讨体内性激素的改变对局灶性脑缺血脑皮质肾素-血管紧张素(RAS)相关基因表达的影响。方法:建立雄激素致不孕大鼠(ASR)模型,给予果纳芬(rhFSH)后应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。大鼠随机分为ASR+假手术(sham)组、ASR+rhFSH+sham组、ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组,每组12只。2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测大脑的缺血面积;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑皮质血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素受体1(AT1)和血管紧张素受体2(AT2)的mRNA表达。结果:TTC染色显示,ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组大鼠大脑均可见苍白色的缺血区域。ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组脑梗死面积均明显大于ASR+sham组及ASR+rhFSH+sham组(P<0.05),但ASR+rhFSH+MCAO组脑组织梗死面积明显小于ASR+MCAO组(P<0.05)。与ASR+sham组比较,ASR+rhFSH+sham组的AGT、ACE、AT1及AT2mRNA表达均无明显改变(P>0.05);而ASR+MCAO组大脑皮质缺血侧ACE、AT1及AT2mRNA的表达均明显增高(P<0.05),但AGT未见明显改变。与ASR+rhFSH+sham组比较,ASR+rhFSH+MCAO组缺血侧大脑皮质AGT、ACE、AT1及AT2mRNA的表达均无明显改变(P>0.05)。结论:雄激素的增高通过激活RAS系统参与了缺血性神经细胞的损伤,而rhFSH通过下调RAS系统减轻脑缺血损伤。

关键词：梗死大脑中动脉雄激素致不孕大鼠肾素-血管紧张素系统

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TRPV6在人参二醇组皂苷(PDS)减轻LPS休克脑损伤中表达的变化及意义

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中国老年学杂志 2009年第16期29卷 2050-2052页

作者：王皓钟加滕刘宁马晋彤王伟伟石国英康劲松孙连坤于春艳吉林大学第一临床医学院吉林长春130021 吉林大学基础医学院病理生理学教研室北华大学基础医学院

目的通过观察人参二醇组皂苷(PDS)对TRPV6蛋白的影响,探讨PDS对LPS诱导休克时脑损伤的保护机制。方法将大鼠随机分为对照组、LPS休克(LPS)组、地塞米松(LPS+Dex)组、PDS低剂量(LPS+PDSL)组、PDS中剂量(LPS+PDSM)组及PDS大剂量(LPS+PDSH... 详细信息

目的通过观察人参二醇组皂苷(PDS)对TRPV6蛋白的影响,探讨PDS对LPS诱导休克时脑损伤的保护机制。方法将大鼠随机分为对照组、LPS休克(LPS)组、地塞米松(LPS+Dex)组、PDS低剂量(LPS+PDSL)组、PDS中剂量(LPS+PDSM)组及PDS大剂量(LPS+PDSH)组。大鼠静脉注射LPS(4 mg/kg)4 h后,观察各组大鼠生存期,计算生存率,Western Blot检测大脑皮质中TRPV6和Bcl-2的蛋白表达。结果与对照组相比,LPS组大鼠生存率降低达50%,脑皮质中TRPV6的蛋白表达水平明显降低,Bcl-2/Bax蛋白表达的比值降低;而与LPS组相比,LPS+Dex组和LPS+PDS各组大鼠生存率增加,脑皮质中TRPV6的蛋白表达水平明显增高,Bcl-2/Bax比值也增高。结论PDS减轻LPS诱导的脑损伤,可能与上调脑皮质中TRPV6蛋白有关。

关键词：脂多糖(LPS) 人参二醇组皂苷(PDS) TRPV6 Bcl-2 Bax

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人乳头瘤病毒16型L1基因真核表达载体的构建及表达

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中国实验诊断学 2009年第11期13卷 1488-1490页

作者：赵丽晶赵淑华许多刘艳波梁作文张灵赵雪俭吉林大学白求恩医学院病理生理教研室吉林长春130021 吉林大学第二医院妇产科北华大学基础医学院病理生理学教研室

目的从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建表达载体,并验证目的蛋白的表达。方法根据基因全长设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pMD18T为克隆载体,构建重组质粒进... 详细信息

目的从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建表达载体,并验证目的蛋白的表达。方法根据基因全长设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pMD18T为克隆载体,构建重组质粒进行亚克隆,再以pcDNA3.1(+)为载体构建表达质粒,转染至人肝细胞系H7702,提取蛋白,采用Western Blot方法检测HPV16-L1蛋白的表达。结果从长春地区宫颈癌临床标本克隆到的HPV16型L1蛋白编码序列与Genebank报道序列高度同源,其真核表达产物与特异性抗体能够特异性结合。结论成功构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-HPV16-L1,为进一步研制HPV预防性疫苗创造基础条件。

关键词：人乳头瘤病毒 L1基因真核表达载体

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CEA特异性RNAi增强基因工程腺病毒H101治疗人食管癌裸鼠皮下移植瘤

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基础医学与临床 2009年第8期29卷 785-788页

作者：郑红赵国强杨洪艳赵继敏王尧河董子明郑州大学基础医学院病理及病理生理学教研室河南郑州450052 郑州大学基础医学院微生物免疫学教研室河南郑州450052 郑州大学基础医学院病理学教研室河南郑州450052

目的研究癌胚抗原(CEA)特异性基因沉默对基因工程腺病毒H101杀伤食管癌EC9706细胞作用的影响,以探讨影响H101敏感性的内在因素。方法利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对人食管癌EC9706细胞的CEAsiRNA载体,通过基因转染,在EC9706细胞中建立... 详细信息

目的研究癌胚抗原(CEA)特异性基因沉默对基因工程腺病毒H101杀伤食管癌EC9706细胞作用的影响,以探讨影响H101敏感性的内在因素。方法利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对人食管癌EC9706细胞的CEAsiRNA载体,通过基因转染,在EC9706细胞中建立稳定的CEA基因沉默体系,并以空载体转染和未进行转染的EC9706细胞作对照,建立人食管癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,H101瘤内注射。用RealTimePCR和免疫组化法检测CEA在移植瘤中的表达,测量肿瘤体积。结果降低CEA在mRNA和蛋白质水平的表达,对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤成瘤时间和大小无明显影响,H101瘤内注射后,干扰组肿瘤体积显著小于空载体组和对照组(P<0·05)。结论抑制食管癌EC9706细胞中CEA的表达,能增强H101的敏感性。

关键词：癌胚抗原基因工程腺病毒 EC9706 裸鼠

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人脂肪干细胞向脂肪细胞的定向分化

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吉林大学学报（医学版） 2009年第6期35卷 987-991,F0002页

作者：杨旭芳何旭何牮张丽红李玉林吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室吉林长春130021 牡丹江医学院病理生理学教研室黑龙江牡丹江157011

目的:分离和培养人脂肪干细胞(hADSCs),并在体外定向诱导hADSCs分化为脂肪细胞。方法:利用胶原酶消化法和贴壁筛选法从人脂肪组织中分离、培养及扩增hADSCs;应用地塞米松、吲哚美辛、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤及胰岛素定向诱导hADSCs分化... 详细信息

目的:分离和培养人脂肪干细胞(hADSCs),并在体外定向诱导hADSCs分化为脂肪细胞。方法:利用胶原酶消化法和贴壁筛选法从人脂肪组织中分离、培养及扩增hADSCs;应用地塞米松、吲哚美辛、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤及胰岛素定向诱导hADSCs分化为脂肪细胞。结果:体外分离、培养出高度同源性的hADSCs,hADSCs具有相对特异的细胞表面标志,即CD29、CD73、CD105及CD166呈阳性表达,而CD31及HLA-DR呈阴性表达;hADSCs具有典型的干细胞增殖特点,大部分处于静息期,只有少数细胞处于增殖活跃期;hADSCs能被诱导分化为脂肪细胞。结论:成功地分离、培养出高度同源性的、未分化的hADSCs;体外定向诱导hADSCs可分化为脂肪细胞。

关键词：干细胞流式细胞术脂肪细胞

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氯沙坦对肾衰大鼠RAS基因表达的影响

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中国生物制品学杂志 2009年第10期22卷 983-985页

作者：王辉李洪岩康劲松张雷姜海荣郑花于春艳吉林大学中日联谊医院超声科长春130033 吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室长春130021 北华大学基础医学院吉林吉林132013

目的观察氯沙坦对肾衰大鼠肾组织肾素-血管紧张素系统(RAS)血管紧张素1型受体(AT1)、血管紧张素2型受体(AT2)、血管紧张素转化酶(ACE)及血管紧张素原(AGT)基因表达的影响,探讨RAS在慢性肾衰发生发展过程中的作用。方法复制阿霉素(ADR)... 详细信息

目的观察氯沙坦对肾衰大鼠肾组织肾素-血管紧张素系统(RAS)血管紧张素1型受体(AT1)、血管紧张素2型受体(AT2)、血管紧张素转化酶(ACE)及血管紧张素原(AGT)基因表达的影响,探讨RAS在慢性肾衰发生发展过程中的作用。方法复制阿霉素(ADR)慢性肾衰大鼠动物模型,随机分为模型(ADR)组和血管紧张素受体拮抗剂(ARB)氯沙坦(ADR+ARB)组,氯沙坦组给予氯沙坦灌胃,另设正常大鼠对照组。取各组大鼠肾组织,经HE染色进行形态学观察,半定量RT-PCR法检测AT1、AT2、ACE及AGT基因mRNA的转录水平。结果与对照组相比,ADR组大鼠肾小球和肾小管出现明显的病变,而ADR+ARB组病变明显减轻。与对照组相比,ADR组AT1﹑AGT和ACE基因表达上调,AT2基因表达下调;与ADR组相比,ADR+ARB组AT1和AGT基因表达下调;ADR+ARB组的AT2基因表达水平接近对照组,ACE基因表达下调,但仍高于对照组水平。结论慢性肾损伤的发生发展可能与AT1、AGT及ACE基因表达水平增高有关。

关键词：氯沙坦慢性肾衰肾素-血管紧张素系统

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聚肌胞对小鼠前列腺癌组织内血管生成的影响

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吉林大学学报（医学版） 2009年第6期35卷 1029-1031,I0011页

作者：田原僮钟毅曾靖赵雪俭赵丽娟赣南医学院药理学教研室江西赣州341000 江西省赣县人民医院泌尿外科江西赣县341100 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:探讨聚肌胞对小鼠前列腺癌组织内血管生成的影响,阐明其可能机制。方法:将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重随机分为对照组和聚肌胞组,分别于瘤内注射生理盐水和聚肌胞(1次·3d-1),用药7次后切除瘤灶,计算瘤重抑制率和瘤指数。... 详细信息

目的:探讨聚肌胞对小鼠前列腺癌组织内血管生成的影响,阐明其可能机制。方法:将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重随机分为对照组和聚肌胞组,分别于瘤内注射生理盐水和聚肌胞(1次·3d-1),用药7次后切除瘤灶,计算瘤重抑制率和瘤指数。肿瘤组织HE染色,镜下观察前列腺癌组织形态学变化及血管分布情况。肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白免疫组织化学染色,观察其蛋白表达情况。结果:聚肌胞组小鼠前列腺癌的瘤重抑制率为67.85%,瘤指数为(5.42±0.17)%;对照组瘤指数为(14.45±1.06)%,两组比较差异有显著性(P<0.01)。聚肌胞组和对照组前列腺癌组织中VEGF阳性染色肿瘤细胞计数占同类肿瘤细胞的比例分别为(9.64±2.90)%和(37.91±7.62)%,eNOS阳性染色肿瘤细胞计数占同类肿瘤细胞的比例分别为(22.00±8.07)%和(54.43±10.39)%,两组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:聚肌胞通过降低小鼠前列腺癌组织中VEGF和eNOS蛋白的表达,抑制小鼠前列腺癌组织内血管的生成,减少肿瘤组织供氧和养分,对小鼠前列腺癌产生间接抑制作用。

关键词：聚肌胞前列腺肿瘤血管内皮生长因子内皮型一氧化氮合酶

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五味子提取物逆转K562/DOX细胞阿霉素耐药的实验研究

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中国实验诊断学 2009年第3期13卷 306-308页

作者：邱海洋郗昕张一帆梁铁张永和宋京郁孙连坤延边大学医学部病理学教研室吉林延吉133000 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学第二临床医学院长春中医药大学临床药理研究室

目的探讨五味子提取物对阿霉素耐药细胞株K562/DOX的耐药逆转作用。方法MTT法检测单独应用阿霉素或阿霉素与五味子提取物联合作用的K562/DOX细胞的生存率;RT-PCR检测MDR1、MRP1 mRNA表达;Westernblotting检测MDR1蛋白的表达。结果与对... 详细信息

目的探讨五味子提取物对阿霉素耐药细胞株K562/DOX的耐药逆转作用。方法MTT法检测单独应用阿霉素或阿霉素与五味子提取物联合作用的K562/DOX细胞的生存率;RT-PCR检测MDR1、MRP1 mRNA表达;Westernblotting检测MDR1蛋白的表达。结果与对照组相比,单独应用阿霉素组细胞的生存率未见明显变化;而阿霉素与五味子提取物联合作用组细胞存活率显著降低,MDR1、MRP mRNA表达降低;MDR1蛋白表达下降。结论五味子提取物可能通过下调MDR1、MRP水平进而逆转K562/DOX细胞对阿霉素的耐药性,增加肿瘤耐药细胞对化疗药物的敏感性。

关键词：多药耐药多药耐药基因五味子提取物 K562/DOX细胞

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细胞死亡调节因子GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中的表达及意义

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吉林大学学报（医学版） 2009年第1期35卷 146-149,F0003页

作者：汲坤王波李馨于浩张灵胡嘉弟赵雪俭李扬吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021 美国马里兰大学医学院马里兰州大学公园市21201

目的:探讨细胞死亡调节因子(GRIM-19)蛋白在肾脏透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达及意义,阐明GRIM-19在肾脏透明细胞癌发生发展中的抑癌作用。方法:采用免疫组织化学染色方法检测21例肾脏透明细胞癌组织和7例正常肾组织GRIM-19蛋白... 详细信息

目的:探讨细胞死亡调节因子(GRIM-19)蛋白在肾脏透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达及意义,阐明GRIM-19在肾脏透明细胞癌发生发展中的抑癌作用。方法:采用免疫组织化学染色方法检测21例肾脏透明细胞癌组织和7例正常肾组织GRIM-19蛋白的表达;RT-PCR方法检测4例正常肾组织和8例肾脏透明细胞癌组织中GRIM-19基因mRNA的表达。结果:免疫组化检测GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为52.3%(11/21),在正常肾脏组织的阳性表达率为100%(7/7),两者比较差异有显著性(P<0.05)。病理分级Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的肾脏透明癌组织中的表达率分别为100%(6/6)、40%(4/10)和20%(1/5),三种病理分级GRIM-19表达率比较差异有显著性(P<0.01)。RT-PCR检测GRIM-19基因在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为62.5%(5/8),在正常肾脏组织的阳性表达率为100%(4/4),两者比较差异有显著性(P<0.01)。结论:GRIM-19在肾脏透明细胞癌基因和蛋白水平表达明显下降,并与其病理分级存在明显的关联性,提示GRIM-19蛋白可能在肾脏透明细胞癌发生发展中发挥抑癌作用。

关键词：肾透明细胞肿瘤细胞死亡调节因子免疫组织化学逆转录聚合酶链反应

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人参二醇组皂苷增强顺铂对人前列腺癌DU145细胞凋亡的效应

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中国男科学杂志 2009年第2期23卷 12-16页

作者：刘艳波赵丽娟郭亚雄韩向北李德龙董妍赵雪俭吉林大学前列腺疾病防治研究中心长春130021 北华大学基础医学院病理生理学教研室美国杜兰大学

目的探讨人参二醇组皂苷(panoxadiol saponin PDS)与顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对DU145前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测PDS与DDP联合应用对DU145细胞增殖活力的影响;吖啶橙染色观察诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪... 详细信息

目的探讨人参二醇组皂苷(panoxadiol saponin PDS)与顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对DU145前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测PDS与DDP联合应用对DU145细胞增殖活力的影响;吖啶橙染色观察诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞周期及凋亡,并计算细胞平均凋亡率;免疫化学和Western blot技术观察细胞内激活的caspase3的表达。结果100mg/L PDS与0.2μmol/L DDP联合给药:(1)48h后可使单独应用0.2μmol/L DDP组其肿瘤细胞生长抑制率由16.35%提高到47.13%;(2)吖啶橙荧光染色可见细胞呈现明显凋亡形态,其凋亡率与2μmol/L DDP组相当;(3)流式细胞术结果显示,可使单独应用0.2μmol/L DDP组其诱导DU145细胞凋亡率从5.53%提高到19.39%,相当于其10倍剂量即2.0μmol/L DDP的诱导凋亡效应(21.05%),明显高于PDS单独应用的凋亡率;(4)免疫化学和Western blot结果显示,可使单独应用0.2μmol/L DDP组细胞内激活的caspase3阳性细胞率与2μmol/L DDP组相当。结论PDS能增强DDP对DU145前列腺癌细胞的致凋亡效应。

关键词：细胞凋亡人参二醇皂苷前列腺肿瘤细胞周期

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