检索结果-内蒙古大学图书馆

目的探讨新近克隆出来的6次跨膜的前列腺上皮抗原——STEAP1基因的功能。方法从人前列腺癌组织钓取STEAP1基因，亚克隆入表达载体。稳定转染至甲状腺上皮细胞（FRTAP2320）。利用RT-PCR和Western印迹方法鉴定STEAP1基因和蛋白表达。采用细胞生长曲线观察细胞生长情况，二氯荧光黄双乙酸盐测定细胞内活性氧（ROS）水平。结果成功获得了稳定表达STEAP1基因的甲状腺上皮细胞系，该细胞系生长速度明显高于对照组；转染STEAP1基因的甲状腺上皮细胞内ROS水平高于对照组（P〈0．01）。结论STEAP1的高表达通过诱导细胞内ROS水平增高，促进细胞快速生长。

关键词：前列腺肿瘤 STEAP1 活性氧簇

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DIM增强去甲氧柔红霉素对人前列腺癌细胞生长的抑制作用

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中华医学杂志 2008年第10期88卷 661-664页

作者：赵燕颖周乐潘玉琢赵丽娟刘亚男于浩李扬赵雪俭吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林大学基础医学院病理生理教研室长春130021

目的观察3，3-二吲哚基甲烷（DIM）与去甲氧柔红霉素（IDA）联合应用对人前列腺癌细胞（PC-3M）的生长抑制的作用并探讨其机制。方法应用MTF法检测生长抑制率；流式细胞术及吖啶橙染色分析PC-3M细胞凋亡及细胞周期变化；分别用RT—PCR和... 详细信息

目的观察3，3-二吲哚基甲烷（DIM）与去甲氧柔红霉素（IDA）联合应用对人前列腺癌细胞（PC-3M）的生长抑制的作用并探讨其机制。方法应用MTF法检测生长抑制率；流式细胞术及吖啶橙染色分析PC-3M细胞凋亡及细胞周期变化；分别用RT—PCR和Western印迹检测凋亡相关的半胱氨酸蛋白水解酶9（caspase9）基因和蛋白的表达。结果0．5mg／L的IDA与60μmol／L的DIM联用，使0．5mg／L的IDA对肿瘤细胞生长抑制率由27．8％提高到69．9％；诱导凋亡的效应由3．2％提高到47．0％，相当10倍剂量（5mg／L）IDA产生的效应。RT—PCR和Western印迹结果显示，两药联用明显增强caspase9基因和蛋白的表达水平。结论DIM能显著增强IDA对PC-3M细胞的生长抑制作用，其机制与凋亡诱导效应有关。

关键词：前列腺肿瘤细胞凋亡 DIM 去甲氧柔红霉素

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尾叶香茶菜二萜类化合物B对小鼠前列腺癌细胞细胞周期的影响及其机制

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中国病理生理杂志 2008年第10期24卷 1916-1921页

作者：刘亚男邵月婷李晓洁汲坤邵晨李扬赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理教研室吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制。方法:MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1细胞增殖率的影响;相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响;流式细胞术分析细胞周期变化;RT-PCR和We... 详细信息

目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制。方法:MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1细胞增殖率的影响;相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响;流式细胞术分析细胞周期变化;RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后RM-1细胞p53、GRIM-19、STAT3和细胞周期相关因子CHK1、CDK2mRNA和蛋白水平的表达。结果:(1)MTT结果:DB可抑制RM-1细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性;(2)形态学观察和流式细胞术检测:经DB处理后的RM-1细胞出现生长抑制,细胞主要阻滞在G1期;(3)RT-PCR结果:DB(2mg/L,4mg/L,8mg/L)分别作用RM-1细胞12h、24h、48h后,p53、CHK1、GRIM-19mRNA的含量明显高于对照组,CDK2、STAT3mRNA的含量明显低于对照组(P<0.05);(4)Western blotting结果:DB(2mg/L,4mg/L,8mg/L)分别作用RM-1细胞12h、24h、48h后,P53、GRIM-19蛋白表达水平高于对照组,而CDK2蛋白表达水平则低于对照组。结论:DB可抑制RM-1细胞增殖,其机制可能是与细胞周期相关基因p53的上调,CDK2表达下降有关,影响了G1期进入S期,同时GRIM-19-STAT3-CDK2途径可能也参与G1期阻滞的过程。

关键词：二萜类尾叶香茶菜前列腺癌细胞周期 p53

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前列腺组织STEAP表达与H2O2水平的关系

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中国病理生理杂志 2008年第2期24卷 354-356页

作者：潘玉琢郭丽荣梁爽李扬赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的:探讨STEAP基因的功能。方法:应用RT-PCR、免疫印迹的方法,检测STEAP mRNA和蛋白在国人正常前列腺、前列腺癌组织中的表达水平。应用钼酸还原法检测正常前列腺内腺、外腺及前列腺癌组织H2O2水平,同时应用黄嘌呤氧化法测定3种组织中... 详细信息

目的:探讨STEAP基因的功能。方法:应用RT-PCR、免疫印迹的方法,检测STEAP mRNA和蛋白在国人正常前列腺、前列腺癌组织中的表达水平。应用钼酸还原法检测正常前列腺内腺、外腺及前列腺癌组织H2O2水平,同时应用黄嘌呤氧化法测定3种组织中SOD水平,分析其与STEAP表达的相关性。结果:国人前列腺癌STEAP mRNA和蛋白高表达;前列腺癌组织中H2O2水平及总SOD水平明显高于正常前列腺。结论:STEAP的功能之一可能是诱导内源性H2O2水平增高,促进细胞快速生长。

关键词：前列腺肿瘤过氧化氢前列腺6个跨膜上皮抗原

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减毒沙门氏菌靶向携带共表达质粒p53／siRNA-survivin抗前列腺癌的体内研究

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中国肿瘤临床 2008年第9期35卷 527-529,533页

作者：邵月婷徐德启刘亚男李晓洁邵晨李扬赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理教研室吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春市130021 美围食品与药品管理局

目的:以人减毒沙门氏菌为基因运载体,探讨其携带p53、siRNA-survivin及其共表达质粒p53/siRNA-survivin对肿瘤的靶向性及抗人前列腺癌效应。方法:复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,分别将已构建的重组表达质粒siRNA-scramble,p53,siRNA-s... 详细信息

目的:以人减毒沙门氏菌为基因运载体,探讨其携带p53、siRNA-survivin及其共表达质粒p53/siRNA-survivin对肿瘤的靶向性及抗人前列腺癌效应。方法:复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,分别将已构建的重组表达质粒siRNA-scramble,p53,siRNA-survivin及共表达质粒p53/siRNA-survivin转化到减毒人伤寒沙门菌Ty21a,制备成对应重组减毒沙门菌,通过灌胃及瘤内注射到前列腺癌荷瘤裸鼠体内,观察成瘤时间及瘤块大小;以携有绿色荧光蛋白siRNA-survivin的重组菌作为报告基因,流式细胞术检测其在肝、脾、肿瘤组织中靶向分布及基因呈递作用;应用RT-PCR,Western blot,及免疫组织化学染色方法检测治疗后肿瘤组织p53和Survivin基因及蛋白表达。结果:各治疗组均较对照组肿瘤生长缓慢,肿瘤体积小,共表达质粒组与单独基因治疗组比较,肿瘤体积明显缩小,抑瘤率高;荷瘤裸鼠肿瘤组织可测及Survivin mRNA表达下降,p53基因表达增强,p53相关基因GRIM-19mRNA和蛋白表达增强;FCM检测结果发现,减毒人沙门氏菌可在肝、脾及肿瘤组织中存活及表达,但以肿瘤中绿色荧光聚集明显且维持时间较长,其他脏器仅见极少的绿色荧光。结论:人减毒沙门氏菌可作为外源基因载体携带重组质粒,对前列腺癌移植瘤有明显的靶向性,其靶向介导的p53,siRNA-survivin及共表达基因p53/siRNA-survivin,对前列腺癌荷瘤裸鼠有治疗作用,共表达基因较单基因治疗效果好,具有显著的协同作用。

关键词： p53 Survivin RNAi减毒沙门氏菌前列腺癌

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