检索结果-内蒙古大学图书馆

吉林大学学报（医学版） 2007年第4期33卷 642-646页

作者：陈亚静吴秀丽王丽卫红飞王丽颖于永利吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春130021

目的:筛选一种具有增强热休克融合蛋白HSP-MUC1抗肿瘤作用的免疫佐剂。方法:将HSP-MUC1与新型CpG ODN或人源性IFNα2b混合后皮下注射MUC1阳性荷瘤小鼠,各分4组,分别是磷酸盐缓冲液(PBS)、HSP-MUC1、CpG ODN(hIFNα2b)及HSP-MUC1+CpG ODN... 详细信息

目的:筛选一种具有增强热休克融合蛋白HSP-MUC1抗肿瘤作用的免疫佐剂。方法:将HSP-MUC1与新型CpG ODN或人源性IFNα2b混合后皮下注射MUC1阳性荷瘤小鼠,各分4组,分别是磷酸盐缓冲液(PBS)、HSP-MUC1、CpG ODN(hIFNα2b)及HSP-MUC1+CpG ODN(HSP-MUC1+hIFNα2b)。观察各组肿瘤发生率及肿瘤体积变化。结果:HSP-MUC1+CpG ODN组与PBS组及HSP-MUC1组比较小鼠的肿瘤发生率及肿瘤重量均降低(P<0.05);单独应用CpG ODN组表现出与HSP-MUC1+CpG ODN组相似的抑瘤作用,与PBS组及HSP-MUC1组比较,肿瘤发生率及肿瘤的重量均降低(P<0.05);而HSP-MUC1+IFNα2b组与PBS组及HSP-MUC1组比较,小鼠肿瘤发生率及肿瘤重量差异均无显著性(P>0.05)。结论:CpG ODN是一种能增强HSP-MUC1抗肿瘤作用的免疫佐剂,人源性IFNα2b则不能增强HSP-MUC1的抗肿瘤活性。

关键词：热休克蛋白类 HSP-MUC1 CpG ODN 干扰素疫苗,合成佐剂,免疫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

男性不育症的社会心理因素

引用

医学与哲学（B） 2007年第1期28卷 70-72,77页

作者：刘杨刘睿智吉林大学基础医学院细胞生物学教研室吉林长春130021

男性不育症是一种多方面因素共同作用的综合征,在临床治疗中如果只考虑其中的一方面因素是不全面的,治标不治本。因此必须多加考虑其他影响因素,其中的社会心理因素尤为重要。针对不育症的社会心理因素加以阐述。

关键词：男性不育社会因素心理因素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用小鼠脾细胞上清抗病毒活性建立新型抑制性ODN的体外筛选方法

引用

吉林大学学报（医学版） 2009年第5期35卷 785-789页

作者：杨光孙然孙陆果万敏王莉吴秀丽胡大利王丽颖于永利吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春130021

目的：通过检测小鼠脾细胞上清抗病毒活性,建立一种体外筛选小鼠敏感的新型抑制性寡聚脱氧核苷酸（ODN）的方法,为后续小鼠体内实验提供抑制性ODN的体外筛选方法。方法：将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组,收集不同浓度（0、0.25... 详细信息

目的：通过检测小鼠脾细胞上清抗病毒活性,建立一种体外筛选小鼠敏感的新型抑制性寡聚脱氧核苷酸（ODN）的方法,为后续小鼠体内实验提供抑制性ODN的体外筛选方法。方法：将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组,收集不同浓度（0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00、16.00及32.00 mg.L-1）的CpG 2216刺激上清及CpG 2216作用小鼠脾细胞不同时间（3、6、12、24、48、72及96 h）的刺激上清,通过VSV病毒保护实验检测的A578评价各组上清的抗病毒活性,确定CpG 2216的最佳作用浓度、作用时间及刺激上清稀释度;再将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组、CpG 2216＋抑制性ODN（A151）组,同上确定A151的最佳作用浓度;将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组、CpG 2216＋抑制性ODN（MAT0106）组,应用上述优化的实验条件如各ODN剂量、作用时间等处理细胞后,收集刺激上清,采用VSV病毒保护实验,观察各抑制性ODN的抑制作用,以初步判定此方法的可行性。结果：筛选方法确定为：浓度为5×10^6·mL^-1的小鼠脾细胞铺于96孔圆底细胞培养板,加入CpG 2216至终浓度2 mg·L^-1和/或抑制性ODN至终浓度16 mg·L^-1,孵箱中培养24 h后收集上清,1∶4稀释上清后加入已贴壁的L929细胞板内,共孵育18 h后弃上清,加入VSV病毒液继续培养48 h。弃净上清后结晶紫染色、脱色并检测A578。此种筛选方法可以区别本室自行设计的抑制性ODN之间的抑制活性。结论：成功建立了抑制性ODN抑制小鼠脾细胞抗病毒活性的筛选方法,抑制性ODN的小鼠体外筛选方法的建立,为后续抑制性ODN在小鼠体内的生物学活性观察提供了体外筛选平台。

关键词：抑制性寡聚脱氧核苷酸 CpGODN 小鼠近交BALBC 脾细胞抗病毒活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人卵透明带重组融合基因及其表达载体的构建

引用

中国现代医学杂志 2006年第15期16卷 2265-2268页

作者：郭焱路英丽邹冬辉赵慧王忠山吉林大学基础医学院细胞生物学教研室吉林长春130021

目的构建人卵透明带蛋白3(zonapellucida3,ZP3)/GST蛋白融合基因原核表达载体。方法利用PCR法扩增出去N端的信号肽和C端的跨膜区huZP3成熟蛋白编码基因。先将其克隆到pGEM-T载体,进行序列测定和分析,然后将huZP3核心DNA片断克隆入GST蛋... 详细信息

目的构建人卵透明带蛋白3(zonapellucida3,ZP3)/GST蛋白融合基因原核表达载体。方法利用PCR法扩增出去N端的信号肽和C端的跨膜区huZP3成熟蛋白编码基因。先将其克隆到pGEM-T载体,进行序列测定和分析,然后将huZP3核心DNA片断克隆入GST蛋白融合原核表达载体pGEX4T-1内。结果获得一个核苷酸长度约为1000bp的基因,与GenBank(NCBI:M60504)公布的ZP3基因序列有99%的同源性,DNA序列分析发现,有一个氨基酸出现变异。酶切鉴定后证明ZP3基因完整插入GST融合蛋白原核表达载体pGEX4T-1中。结论成功构建出含ZP3基因的GST融合蛋白原核表达载体。

关键词：人卵透明带蛋白3 GST融合蛋白表达载体构建

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

用MTT比色法建立B型CpGODN活性检测标准

引用

细胞与分子免疫学杂志 2008年第1期24卷 69-71页

作者：王学菊刘璟万敏王莉吴秀丽卫红飞于永利王丽颖吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021

目的:B型CpG ODN,BW006作为疫苗佐剂已进入临床试验阶段,所以需要建立稳定、安全、简便易行的活性检测方法以控制不同批次BW006的生产质量。方法:根据BW006具有刺激人PBMC和小鼠脾细胞增生的特点,选择无放射性污染的MTT比色法作为首选... 详细信息

目的:B型CpG ODN,BW006作为疫苗佐剂已进入临床试验阶段,所以需要建立稳定、安全、简便易行的活性检测方法以控制不同批次BW006的生产质量。方法:根据BW006具有刺激人PBMC和小鼠脾细胞增生的特点,选择无放射性污染的MTT比色法作为首选检测方案。用BW006刺激BALB/c小鼠脾细胞作为筛选平台,确定如下反应条件:脾细胞用量、培养板形状、BW006浓度、培养液体积和培养时间以及如何优化MTT检测过程以提高反应灵敏度。结果:用3 mg/LBW006与96孔平底板中含100 mL/LFBS的200μL无酚红RPMI1640培养的6×105个小鼠脾细胞在37℃含50 mL/L CO2孵箱中共孵育36 h。随后每孔弃100μL上清,加入MTT(5 g/L)10μL,37℃避光孵育4 h使各孔充分形成甲瓒颗粒。每孔加入DMSO 150μL,经平板振荡器振荡20 min至颗粒完全溶解,在酶标仪上检测A578值即可。结论:建立了无污染、造价低、可操作性强的BW006活性检测方法。

关键词： MTY比色法脾细胞增生 BW006 活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

金属鳌合亲和层析填料的制备及其在重组六聚组氨酸融合蛋白中的应用

引用

吉林大学学报（医学版） 2008年第2期34卷 340-342页

作者：张培因王燕媚卫红飞王爱丽于永利王丽颖吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021

目的:制备Ni2+螯合金属层析填料,分离HSP65-MUC1-histag基因工程蛋白质。方法:应用Sepharose4B作为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为起始材料合成金属鳌合层析填料,同时应用5-Br-PADAP一阶导数光度法对Ni2+的吸收峰进行鉴定和定量。最后应用制... 详细信息

目的:制备Ni2+螯合金属层析填料,分离HSP65-MUC1-histag基因工程蛋白质。方法:应用Sepharose4B作为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为起始材料合成金属鳌合层析填料,同时应用5-Br-PADAP一阶导数光度法对Ni2+的吸收峰进行鉴定和定量。最后应用制备的Ni2+-Sepharose4B纯化HSP65-MUC1-histag。结果:Ni2+最佳吸收峰为574nm,凝胶中螯合的Ni2+为5.2mg.g-1,Ni2+-Sepharose4B金属螯合亲和层析纯化重组蛋白纯度≥98%,回收率≥90%。结论:制备了能应用于蛋白质亲和层析的高效金属鳌合层析填料。

关键词：金属鳌合层析填料基因工程蛋白质纯化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

共表达红光荧光蛋白及发夹RNA载体的构建及鉴定

引用

吉林大学学报（医学版） 2005年第2期31卷 163-165页

作者：魏映辉吴秀丽万敏于永利王丽颖吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021

目的 :构建共表达红光荧光蛋白及短发夹状 RNA的重组真核载体。方法 :利用亚克隆、T- A克隆和PCR技术构建 pc DNA3.0 / Ds Red- U6 - sh GFR及 pc DNA3.0 / Ds Red- U6重组载体。结果 :成功构建上述两种真核重组表达载体。结论 :这种共... 详细信息

目的 :构建共表达红光荧光蛋白及短发夹状 RNA的重组真核载体。方法 :利用亚克隆、T- A克隆和PCR技术构建 pc DNA3.0 / Ds Red- U6 - sh GFR及 pc DNA3.0 / Ds Red- U6重组载体。结果 :成功构建上述两种真核重组表达载体。结论 :这种共表达载体的构建为进一步利用 RNAi技术研究真核细胞基因功能奠定了基础。

关键词：短发夹状RNA 发光蛋白质类质粒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

C型CpG单链寡核苷酸对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用

引用

细胞与分子免疫学杂志 2007年第4期23卷 338-340,342页

作者：王学菊王智博卫红飞吴秀丽王莉于永利王丽颖吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021

目的研究C型CpG单链寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用。方法利用体外淋巴细胞增生实验和病毒保护实验确定新C型CpG ODN,采用小鼠体内抑瘤实验观察CpG ODN对肿瘤疫苗HSP65-MUC1重组蛋白抑制MUC1阳性肿瘤生长的增强作用... 详细信息

目的研究C型CpG单链寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用。方法利用体外淋巴细胞增生实验和病毒保护实验确定新C型CpG ODN,采用小鼠体内抑瘤实验观察CpG ODN对肿瘤疫苗HSP65-MUC1重组蛋白抑制MUC1阳性肿瘤生长的增强作用,并对小鼠血清中抗HSP65-MUC1抗体的类型进行了初步鉴定。结果自行设计的CpG ODN BW005能刺激人PBMC和小鼠脾细胞增生,其刺激后的培养上清具有保护Vero E6细胞免受VSV感染的作用,属于新型C型CpG ODN。将BW005与HSP65-MUC1联合应用于C57BL/6小鼠后,MUC1阳性肿瘤的发生明显延缓(平均44.8d),其终末肿瘤发生率最低(33.33%);荷瘤小鼠的生存期明显延长(平均49.5d),其终末生存率最高(66.67%)。小鼠血清中抗HSP65和抗MUC1的IgG2a抗体水平增加。结论C型CpG ODN可以增强肿瘤疫苗HSP65-MUC1的抑瘤效果,考虑与小鼠体内Th1环境的形成有关。

关键词： CpG ODN(单链寡脱氧核苷酸) HSP-MUC1融合蛋白肿瘤免疫治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

草苁蓉多糖的抗肿瘤作用及免疫调节作用

引用

吉林大学学报（医学版） 2007年第6期33卷 1022-1025页

作者：侯元霍德胜魏艳君迟立超费瑞吉林大学基础医学院病原免疫细胞遗传实验中心吉林长春130021 吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021 吉林大学中日联谊医院急诊科吉林长春130033 吉林大学基础医学院细胞生物学教研室吉林长春130021

目的:观察草苁蓉多糖对荷瘤小鼠免疫器官的调节作用及对免疫功能的影响。方法:接种肝癌细胞H22的荷瘤小鼠随机分为50、100、200和400 ***-1.d-1草苁蓉多糖组、阴性对照组及阳性对照组(环磷酰胺组),按剂量给药。10 d后处死小鼠,分别称量... 详细信息

目的:观察草苁蓉多糖对荷瘤小鼠免疫器官的调节作用及对免疫功能的影响。方法:接种肝癌细胞H22的荷瘤小鼠随机分为50、100、200和400 ***-1.d-1草苁蓉多糖组、阴性对照组及阳性对照组(环磷酰胺组),按剂量给药。10 d后处死小鼠,分别称量脾重、胸腺重,检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数;采用MTT法测定NK细胞活性;淋巴细胞转化实验测定T淋巴细胞转化率(LTT);中性红比色法观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力;通过称量各小鼠实体瘤的重量,计算抑瘤率。结果:草苁蓉多糖能够显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达38.86%;与阴性对照组比较,实验组荷瘤小鼠的脾脏指数显著提高(P<0.01),胸腺指数则有降低趋势,T淋巴细胞的转化率、NK细胞的活性、巨噬细胞的吞噬能力显著增强(P<0.01),与给药剂量存在正相关关系。结论:草苁蓉能抑制肿瘤生长,对小鼠免疫功能具有调节作用。

关键词：草苁蓉多糖免疫活性淋巴细胞转化实验 NK细胞活性抑瘤率

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HIV-1Tat基因的融合构建及在大肠杆菌中的高效表达

引用

细胞与分子免疫学杂志 2005年第1期21卷 33-36页

作者：林剑萍王华王玲卫红飞胡晓平王丽颖于永利吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春130021

目的: 在***21(DE3)中高效表达Tat蛋白。方法: 用PCR方法构建HIV- 1Tat基因全序列, 同时将Tat基因进行定点突变(AAG28替换为CAG, AAG50替换为CAG),以消除天然Tat蛋白的转录活性。将突变的Tat基因与伴侣10(chap10)基因连接后, 共同亚克... 详细信息

目的: 在***21(DE3)中高效表达Tat蛋白。方法: 用PCR方法构建HIV- 1Tat基因全序列, 同时将Tat基因进行定点突变(AAG28替换为CAG, AAG50替换为CAG),以消除天然Tat蛋白的转录活性。将突变的Tat基因与伴侣10(chap10)基因连接后, 共同亚克隆入表达载体pET28a中,并在***中表达, 表达产物用Westernblot进行鉴定。结果: 分别通过 3轮PCR, 成功地构建了Tat基因全序列。构建的重组质粒pET28a- chap10 Tat在***21(DE3)中得到高效表达。Westernblot分析表明, 在相对分子质量 (Mr)为24 000处有 1条特异性的带。结论: chap10基因与HIV- 1Tat全基因的融合构建, 使Tat蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为其在爱滋病发病中作用研究奠定了基础。

关键词： HIV-1 Tat 伴侣10 表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：