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高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织小窝蛋白-2表达及血脑屏障通透性的影响

中华物理医学与康复杂志 2011年第9期33卷 652-655页

作者：赵红张倩茹张海鹏陈学新中国医科大学基础医学院机能实验中心沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理生理教研室沈阳110001 中国医科大学附属第一临床医院高压氧科

目的研究高压氧（HBO）对局灶性脑缺血再灌注（I／R）大鼠脑组织小窝蛋白-2（caveolin-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达及血脑屏障（BBB）通透性的影响。方法将雄性Wistar大鼠370只分成假手术组80只、I／R组130只、HBO组80只、HBO-... 详细信息

目的研究高压氧（HBO）对局灶性脑缺血再灌注（I／R）大鼠脑组织小窝蛋白-2（caveolin-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达及血脑屏障（BBB）通透性的影响。方法将雄性Wistar大鼠370只分成假手术组80只、I／R组130只、HBO组80只、HBO-4-I／R组80只。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。HBO组和HBO＋I／R组于再灌注0，2，9，21，45，69h进入HBO舱，经0．25MPaHBO治疗5次。采用比色法、免疫组化法及Westernblot法检测BBB的通透性、caveolin-2及MMP-9的表达。结果第4，12，24，48，72小时脑组织伊文思兰（EB）的含量与0h组相比明显增加，再灌注后4h脑组织EB的含量最高。HBO＋I／R组脑组织EB的含量明显低于I／R组。HBO组与假手术组相比脑组织EB的含量无明显变化。脑缺血再灌注第24，48，72小时caveolin-2、MMP-9表达明显高于0h组。HBO十I／R组与I／R组相比脑组织caveolin-2、MMP-9表达显著减低。HBO组脑组织caveolin-2、MMP-9表达与假手术组相比无明显变化。结论HBO降低脑缺血再灌注时增高的脑微血管内皮细胞caveolin-2和MMP-9的表达，从而降低BBB通透性。

关键词：高压氧脑缺血再灌注血脑屏障小窝蛋白-2 基质金属蛋白酶-9 大鼠

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EphA2受体及其配体在浆液性卵巢癌中的表达及其临床意义

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四川大学学报（医学版） 2011年第2期42卷 179-184页

作者：韩丽萍刘娟芳刘香荣董子明索振河郑州大学第一附属医院妇产科郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理教研室郑州450052 挪威奥斯陆大学肿瘤医院病理科郑州大学河南省高校临床医学重点开放实验室郑州450052

目的探讨浆液性卵巢癌组织中EphA2及其配体EphrinA-1的蛋白表达、定位及其与临床病理学因素及生存的关系。方法应用免疫组织化学方法检测浆液性卵巢癌组织中EphA2及其配体EphrinA-1的蛋白表达、定位,并应用免疫组织化学方法、逆转录-聚... 详细信息

目的探讨浆液性卵巢癌组织中EphA2及其配体EphrinA-1的蛋白表达、定位及其与临床病理学因素及生存的关系。方法应用免疫组织化学方法检测浆液性卵巢癌组织中EphA2及其配体EphrinA-1的蛋白表达、定位,并应用免疫组织化学方法、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分析方法联合检测卵巢癌细胞系OVCAR3、SKOV3中EphA2及其EphrinA-1 mRNA及蛋白质表达水平。结果 95例浆液性卵巢癌组织中,EphA2和EphrinA-1蛋白阳性表达率分别为92.6(88/95)和97.9(93/95),高于正常卵巢组织〔40%(8/20)和30%(6/20),P=0.000〕;EphA2阳性染色定位于肿瘤区和血管内皮细胞,EphrinA-1阳性染色主要定位于肿瘤区,二者的阳性表达呈正相关(r=0.98,P=0.02);EphA2和EphrinA-1蛋白表达与浆液性卵巢癌患者的年龄、FIGO分期、残余肿瘤大小及组织分化程度均无相关性,二者强表达与患者生存差有关(P<0.05)。卵巢癌细胞系OVCAR3及SKOV3在mRNA及蛋白质水平均存在EphA2和EphrinA-1的高表达。结论 EphA2与EphrinA-1蛋白可能在浆液性卵巢癌的发展过程中起着协同促进作用,EphA2与EphrinA-1蛋白的强表达与浆液性卵巢癌患者的生存差有关,提示二者具有潜在的预后价值。

关键词： EphA2 EphrinA-1 卵巢肿瘤免疫组织化学 Western blot

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富血小板血浆对人脂肪间充质干细胞增殖及成骨分化能力的影响

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口腔医学研究 2011年第9期27卷 786-789页

作者：王悦杨旭芳周延民赵静辉朱喆马英智吉林大学口腔医院种植中心吉林长春130021 吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室牡丹江医学院病理生理学教研室空军航空大学训练基地门诊部

目的:探讨富血小板血浆(PRP)对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)增殖、分化及成骨能力的影响。方法:脂肪组织体外分离获得hADSCs,2次离心制备PRP,氯化钙加人凝血酶激活PRP。倒置相差显微镜观察成骨诱导实验中PRP对细胞增殖、分化状况的影响,... 详细信息

目的:探讨富血小板血浆(PRP)对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)增殖、分化及成骨能力的影响。方法:脂肪组织体外分离获得hADSCs,2次离心制备PRP,氯化钙加人凝血酶激活PRP。倒置相差显微镜观察成骨诱导实验中PRP对细胞增殖、分化状况的影响,钙-钴法检测PRP作用下hADSCs矿化结节形成,碱性磷酸酶(ALP)检测PRP对细胞活性及分化能力的影响。CCK-8法检测成骨诱导组和非成骨诱导组加PRP培养后2、4、6、8、16d细胞活性变化。结果:成骨诱导实验中50%PRP30μL组细胞密集、数量最多,且有剂量依赖性;钙-钴法检测见PRP原液组细胞染色最深,且有浓度依赖性;碱性磷酸酶显色见PRP原液组细胞活性最强,染色最深。CCK-8检测显示无论有无成骨诱导,各浓度PRP均可促进细胞增殖,且有浓度依赖性。结论:适宜浓度的PRP可明显促进hADSCs增殖,并有浓度及剂量依赖性。

关键词：人脂肪间充质干细胞富血小板血浆成骨诱导增殖分化

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蛛网膜下腔出血大鼠脑干组织叉头框蛋白的表达及尼莫地平的影响

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中风与神经疾病杂志 2011年第5期28卷 402-406页

作者：吴冰康劲松王贺元晞欣邱海洋王伟伟罗祺吉林大学白求恩第一医院神经外科吉林长春130021 吉林大学中日联谊医院神经外一科吉林长春130033 吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室吉林长春130021 吉林大学白求恩第一医院内分泌科吉林长春130021

目的研究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B[protein Kinase B,PKB(AKT)]、叉头框蛋白[forkhead box(FOXO),FKHR]在大鼠蛛网膜下腔出血脑血管痉挛动物模型中早期(1d)的表达、活化情况及应用尼莫地平的影响。方法将Wistar大鼠分为假手术组(对照组)... 详细信息

目的研究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B[protein Kinase B,PKB(AKT)]、叉头框蛋白[forkhead box(FOXO),FKHR]在大鼠蛛网膜下腔出血脑血管痉挛动物模型中早期(1d)的表达、活化情况及应用尼莫地平的影响。方法将Wistar大鼠分为假手术组(对照组)、SAH模型组、SAH后给尼莫地平治疗组(治疗组)。经颅多普勒超声(TCD)检测大鼠基底动脉的最大血流速度(Maximum velocity of Basilar artery blood flow,Vmba)。脑干组织进行免疫组化染色。结果 SAH模型组与对照组相比基底动脉血流加快(P<0.05)。治疗组比SAH模型组基底动脉血流速度慢(P<0.05)。在对照组AKT、P-AKT(磷酸化-AKT)、FKHR、P-FKHR(磷酸化-FKHR)均可见阳性细胞表达。在SAH模型组:AKT表达增多,但与对照组比较差异无显著性(P>0.05);P-AKT表达减少,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。在治疗组AKT、P-AKT表达较对照组和SAH模型组均增加,差异具有显著性(P<0.05)。在SAH模型组FKHR表达增加,P-FKHR表达减少,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);在治疗组FKHR表达较对照组和SAH模型组均减少,P-FKHR表达较对照组和SAH模型组均增加,差异具有显著性(P<0.05)。结论 PKB/AKT介导的磷酸化能够诱导FOXO蛋白从细胞核到细胞质的重新定位,诱导FOXO蛋白的活性发生改变,并参与了大鼠SAH后早期(1d)CVS的形成。尼莫地平具有缓解SAH后早期(1d)CVS的作用。

关键词：蛛网膜下腔出血大鼠脑干叉头框蛋白尼莫地平

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人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达

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郑州大学学报（医学版） 2011年第4期46卷 572-574页

作者：桑建中田芳娄卫华金红军袁林林郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

目的:检测人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达。方法:采用免疫组化法检测80例喉鳞状细胞癌和30例声带息肉组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达,分析两蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系及二者表达的关联性。结果... 详细信息

目的:检测人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达。方法:采用免疫组化法检测80例喉鳞状细胞癌和30例声带息肉组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达,分析两蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系及二者表达的关联性。结果:喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的阳性表达率分别为67.5%和52.5%,声带息肉组织中未见阳性表达,2组相比差异有统计学意义(P<0.001)。c-myc蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期、分化程度、淋巴结转移及5a生存率均有关(χ2=4.268、6.419、5.673和6.180,P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中二者的表达呈正关联(rP=0.241,P=0.026)。结论:喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白呈高表达,二者可能在喉鳞状细胞癌的发生中起协同作用。

关键词：喉鳞状细胞癌 c-myc cyclinD1 细胞周期

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Survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒的构建

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2011年第2期18卷 63-66页

作者：文连姬高丽芳汲坤富东娜金春顺管国芳赵雪俭吉林大学第二医院耳鼻咽喉科吉林长春130041 沈阳维康医院耳鼻咽喉科辽宁沈阳110021 沈阳医学院病理生理教研室辽宁沈阳110034 齐齐哈尔医科大学生化教研室黑龙江齐齐哈尔161006 吉林大学基础医学院病理生理教研室吉林长春130021

目的构建survivin小干涉RNA和干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated with retinoid interferon induced mortality-19,GRIM-19)共表达质粒为探讨联合基因对喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础。方法以survivin... 详细信息

目的构建survivin小干涉RNA和干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated with retinoid interferon induced mortality-19,GRIM-19)共表达质粒为探讨联合基因对喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础。方法以survivin小干涉RNA重组质粒pGCsilencer-siRNA-survivin(简称psi-survivin)为模板设计PCR引物,PCR产物经测序后与线性化pCDNA3.1-GRIM-19(简称p-GRIM-19)连接,构建survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒pCDNA3.1-siRNA survivin/GRIM-19(简称p-siRNA survivin/GRIM-19)。将质粒用脂质体lipofetamine2000包裹转入人喉癌Hep-2细胞中,用半定量RT-PCR检测survivin和GRIM-19 mRNA的含量。结果构建的survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒p-siRNA survivin/GRIM-19经酶切电泳和测序证实碱基序列的正确性,p-siRNA survivin/GRIM-19转染人喉癌Hep-2细胞,从mRNA水平能降低survivin的表达,抑制率55.9%,同时增加GRIM-19表达,表明共表达质粒的构建是成功的。结论构建的siRNA survivin和GRIM-19共表达质粒从mRNA水平能降低survivin的表达,同时增加GRIM-19表达,为进一步实验奠定了基础。

关键词： RNA干扰喉肿瘤凋亡抑制蛋白类生存素 GRIM-19基因

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高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织小窝蛋白-1、基质金属蛋白酶-9表达的影响

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中国康复医学杂志 2011年第6期26卷 550-554页

作者：赵红张倩茹卢晓梅张海鹏陈学新中国医科大学基础医学院机能实验中心沈阳市和平区北二马路92号110001 中国医科大学基础医学院病理生理教研室中国医科大学附属第一临床医院高压氧科

目的:研究高压氧(HBO)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织小窝蛋白-1(Cav-1)、MMP-9表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠,随机分成假手术组、脑缺血再灌注组(IR)、IR+HBO、HBO组。复制局灶性脑缺血再灌注模型。HBO和IR+HBO组经0.25MPaHBO治疗... 详细信息

目的:研究高压氧(HBO)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织小窝蛋白-1(Cav-1)、MMP-9表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠,随机分成假手术组、脑缺血再灌注组(IR)、IR+HBO、HBO组。复制局灶性脑缺血再灌注模型。HBO和IR+HBO组经0.25MPaHBO治疗5次。采用比色法、免疫组化法及Western印迹法检测血脑屏障的通透性和Cav-1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达。结果:IR组第4、12、24、48、72小时脑组织伊文思蓝(EB)的含量与第0小时组相比明显增加,再灌注后第4小时EB的含量最高。IR+HBO组脑组织EB的含量明显低于IR组。IR组第4、12、24、48、72小时Cav-1、MMP-9蛋白表达明显高于0小时组。IR+HBO组与IR组相比脑组织Cav-1、MMP-9蛋白表达显著减低。结论:HBO降低了脑缺血再灌注时增高的脑微血管内皮细胞Cav-1蛋白和MMP-9的表达。这可能是HBO对脑缺血再灌注时血脑屏障通透性起保护作用的机制之一。

关键词：高压氧脑缺血再灌注小窝蛋白-1 基质金属蛋白酶-9

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食管癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-2的表达及其意义

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激光杂志 2011年第3期32卷 58-60页

作者：綦俊余和平余畅重庆市肿瘤研究所胸外科重庆400030 重庆医科大学附属第一医院康复科重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理教研室重庆400016

目的:探讨MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白在食管癌组织中的表达及其与肿瘤细胞侵袭转移的关系。方法:应用western-blot法检测80例食管癌组织、30例癌旁正常组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白表达情况,结合肿瘤的侵袭转移情况进行相关分析。结果... 详细信息

目的:探讨MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白在食管癌组织中的表达及其与肿瘤细胞侵袭转移的关系。方法:应用western-blot法检测80例食管癌组织、30例癌旁正常组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白表达情况,结合肿瘤的侵袭转移情况进行相关分析。结果:MMP-2蛋白在癌旁正常组织中表达较低:0.51±0.11,在食管癌组织中表达明显增高:1.72±0.15(P<0.05),MMP-9蛋白在癌旁正常组织中表达为0.324±0.13,在食管癌组织中表达为1.33±0.16,(P<0.05)二者差异有显著性。食管癌组织中TIMP-2蛋白表达明显高于癌旁正常组织,分别为0.74±0.12和0.29±0.03(P<0.05)。随着肿瘤浸润深度增加,淋巴结转移的增多,肿瘤细胞分化程度的降低和TNM分期的进展,MMP-2、MMP-9蛋白表达明显升高(P<0.05),但TIMP-2蛋白表达无明显差异,MMP-2/TIMP-2与肿瘤分期呈正相关趋势。结论:MMP-2、MMP-9蛋白在食管癌组织中表达上调,且与肿瘤分期、肿瘤浸润深度以及淋巴结转移成正相关趋势,提示该蛋白在肿瘤的侵袭转移中起重要作用。TIMP-2蛋白表达增高可能是机体抑制肿瘤细胞侵袭转移的机制之一,MMP-2与TIMP-2的对比关系在食管癌的侵袭转移中起到关键的作用。

关键词：食管癌 MMP-2 MMP-9 TIMP-2 侵袭转移

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组蛋白去乙酰酶抑制剂下调脓毒症小鼠肝内粘附分子表达

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重庆医科大学学报 2011年第1期36卷 8-11页

作者：王彬张力万敬员姜蓉闵苏重庆医科大学附属第一医院麻醉科重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆医科大学药学院药理学教研室重庆400016

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脓毒症小鼠肝内粘附分子表达及炎症细胞浸润的影响。方法:小鼠经腹腔注射组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Trichostatin A或丁酸钠)后,行盲肠结扎穿孔术以诱导小鼠脓毒症。18 h后处死小鼠并收集血清和肝组织,... 详细信息

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脓毒症小鼠肝内粘附分子表达及炎症细胞浸润的影响。方法:小鼠经腹腔注射组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Trichostatin A或丁酸钠)后,行盲肠结扎穿孔术以诱导小鼠脓毒症。18 h后处死小鼠并收集血清和肝组织,检测血清转氨酶活性及肝组织匀浆髓过氧化物酶活性;常规石蜡切片HE染色观察组织病理学改变;免疫组织化学法检测肝组织内粘附分子(细胞间粘附分子-1及E-选择素)的表达水平。结果:2种结构不相关的组蛋白去乙酰化酶抑制剂均可下调脓毒症小鼠肝组织内粘附分子的表达,而肝组织HE染色切片上也观察到组蛋白去乙酰化酶抑制剂处理组肝内炎症细胞浸润明显减轻,与此一致,组蛋白去乙酰化酶抑制剂处理组肝组织匀浆中髓过氧化物酶活性及血清转氨酶活性显著降低。结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂处理组可下调脓毒症小鼠肝内粘附分子表达,从而减轻炎症细胞浸润和肝组织损伤。

关键词：组蛋白去乙酰化酶脓毒症粘附分子炎症盲肠结扎穿孔术

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血管紧张素Ⅱ通过压力反射重调定对大鼠心率的作用

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中国药理学通报 2011年第7期27卷 1032-1033页

作者：李亘松罗丹李森邓欣王洋中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学机能实验中心辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一临床医院神经内科辽宁沈阳110001

我们以前对家兔的研究观察到了静脉输注AngⅡ对心率变异（HRV）的影响,但其具体机制并不清楚,我们推测循环血中的AngⅡ可能是通过其使压力反射发生重调定作用来影响HRV的[1-3]。本研究用苯肾上腺素（PE）产生升压作用所引起的反射性心... 详细信息

我们以前对家兔的研究观察到了静脉输注AngⅡ对心率变异（HRV）的影响,但其具体机制并不清楚,我们推测循环血中的AngⅡ可能是通过其使压力反射发生重调定作用来影响HRV的[1-3]。本研究用苯肾上腺素（PE）产生升压作用所引起的反射性心率降低,检测压力反射的功能,

关键词：血管紧张素Ⅱ Losartan(LOS) 压力反射重调定 AT1受体心率变异大鼠

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