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N-丁基-9 H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺通过NLRP3/Caspase-1抑制巨噬细胞泡沫化及焦亡作用

中国药理学通报 2024年第6期40卷 1035-1041页

作者：舒志云呼延子旭张文晴谢世顺成鸿源徐国兴李相军吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室吉林长春130021 吉林大学药学院药物化学教研室吉林长春130021

目的设计并合成了嘧啶并吲哚类衍生物N-丁基-9 H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺(BFPI),探讨其是否通过NLRP3/Caspase-1通路抑制巨噬细胞焦亡和泡沫化作用。方法以2,4,6-三乙氧羰基-1,3,5-三嗪和2-氨基吲哚为起始原料合成BFPI,并通过1H NMR... 详细信息

目的设计并合成了嘧啶并吲哚类衍生物N-丁基-9 H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺(BFPI),探讨其是否通过NLRP3/Caspase-1通路抑制巨噬细胞焦亡和泡沫化作用。方法以2,4,6-三乙氧羰基-1,3,5-三嗪和2-氨基吲哚为起始原料合成BFPI,并通过1H NMR、13 C NMR、ESI-MS对其结构进行表征。将体外培养的小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7分为空白组、模型组(PA)组和治疗组(BFPI)组,各组细胞用对应培养液处理24 h后,用MTT法检测其增殖活力,油红O染色检测细胞内脂滴形成情况,并用Western blot和RT-qPCR检测NLRP3、Caspase-1和MCP-1 mRNA和蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组细胞增殖活力明显下降,脂滴形成量明显增加,与模型组比较,治疗组细胞增殖活力明显增加,脂滴形成量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与空白组比较,模型组细胞NLRP3、Caspase-1和MCP-1的mRNA和蛋白表达水平均明显增加,与模型组比较,治疗组细胞上述指标表达水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论BFPI可通过抑制巨噬细胞NLRP3、Caspase-1和MCP-1的表达进而促进其增殖并抑制脂质吞噬能力,有助于延缓动脉粥化时巨噬细胞来源的泡沫细胞形成。

关键词： N-丁基-9 H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺 NLRP3 动脉粥样硬化巨噬细胞细胞泡沫化细胞焦亡

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大剂量盐酸异丙肾上腺素诱发大鼠心肌缺血性坏死模型的建立

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中国生物制品学杂志 2009年第3期22卷 288-290,296页

作者：高海成孙波苗春生高海梅任立群吉林大学药学院实验药理与毒理教研室长春130021

目的建立大剂量盐酸异丙肾上腺素(Iso)诱发大鼠心肌缺血性坏死模型。方法多点皮下注射Iso15mg/kg,建立大鼠心肌缺血坏死模型,并检测其心电图(ECG)、血清酶学指标、心肌血清羟脯氨酸含量、三磷酸腺苷(ATP)含量及HE染色结果。结果与正常... 详细信息

目的建立大剂量盐酸异丙肾上腺素(Iso)诱发大鼠心肌缺血性坏死模型。方法多点皮下注射Iso15mg/kg,建立大鼠心肌缺血坏死模型,并检测其心电图(ECG)、血清酶学指标、心肌血清羟脯氨酸含量、三磷酸腺苷(ATP)含量及HE染色结果。结果与正常对照组比较,模型组大鼠心电图各点ST段和T波均有明显的变化;注射Iso后4h,乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平达高峰;注射后6h,天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平达高峰;随着注射后时间的延长和病变程度的加重,心肌血清羟脯氨酸含量明显增加;ATP含量明显降低;注射Iso2h后,模型组即出现小的坏死灶,且随时间的延长,病变程度明显加重,坏死面积在3周达到最大,并出现明显的纤维化。结论一次性皮下多点注射15mg/kg的Iso,可成功地诱发大鼠心肌缺血性坏死,且可出现明显的纤维化。

关键词：盐酸异丙肾上腺素心肌缺血性坏死动物模型

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人皮肤成纤维细胞的体外分离、培养及鉴定

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吉林大学学报（医学版） 2008年第5期34卷 899-902,F0003页

作者：赵娟石艳孙波李相军罗继巡高海成任立群吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室吉林长春130021

目的:探索和建立一种新的、适宜于人皮肤成纤维细胞(Fbs)的体外分离、培养及鉴定方法。方法:采用冷胰蛋白酶和胶原酶联合消化法对人皮肤Fbs的进行体外培养,通过生物化学、免疫细胞化学及ELISA实验技术,对人皮肤Fbs的活力检测、生长曲线... 详细信息

目的:探索和建立一种新的、适宜于人皮肤成纤维细胞(Fbs)的体外分离、培养及鉴定方法。方法:采用冷胰蛋白酶和胶原酶联合消化法对人皮肤Fbs的进行体外培养,通过生物化学、免疫细胞化学及ELISA实验技术,对人皮肤Fbs的活力检测、生长曲线、羟脯氨酸(HYP)含量及Ⅰ型胶原含量指标进行研究。结果:人皮肤Fbs原代培养时间较大鼠长。人皮肤Fbs冻存复苏后所得生长曲线与冻存前所得曲线基本相似;人皮肤Fbs培养液中,3～5d的HYP含量与1d相比有显著增加(P<0.01);2～6dⅠ型胶原含量与1d相比有显著增加(P<0.01)。结论:培养的人皮肤Fbs增殖能力强、适应性强、易培养且性状稳定,可为人类凹陷性瘢痕修复和美容除皱提供可靠的细胞来源。

关键词：皮肤成纤维细胞羟脯氨酸 Ⅰ型胶原

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胡芦巴对糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶-2活性的影响

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吉林大学学报（医学版） 2008年第1期34卷 87-89,171页

作者：苗春生石艳于晓艳李才吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室吉林长春130021

目的:探讨胡芦巴种子水煎剂(胡芦巴)对实验性糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性的影响。方法:利用链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,造模成功大鼠随机分为糖尿病模型组(DM)10只和胡芦巴组(FN)10只,另设10只正常大鼠对照组(N)... 详细信息

目的:探讨胡芦巴种子水煎剂(胡芦巴)对实验性糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性的影响。方法:利用链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,造模成功大鼠随机分为糖尿病模型组(DM)10只和胡芦巴组(FN)10只,另设10只正常大鼠对照组(N)。FN组糖尿病大鼠给予胡芦巴12周后,观察各组肾脏结构和MMP-2活性的变化。结果:光镜观察给予胡芦巴处理12周后,与DM组比较FN组肾小球病变减轻。免疫组化检测DM组肾小球ColⅣ表达明显增强,FN组ColⅣ表达明显低于DM组。FN组MMP-2活性形式酶解量为(1.41±0.18),与DM组(1.05±0.19)比较明显增多(P<0.05);与N组(1.53±0.25)比较差异无显著性。结论:胡芦巴可能通过增强肾脏MMP-2活性减轻实验性糖尿病大鼠肾脏病变的程度。

关键词：糖尿病肾病胡芦巴/药理学基质金属蛋白酶-2

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辛伐他汀对氧化型低密度脂蛋白刺激SMC增殖的抑制作用

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中国老年学杂志 2014年第18期34卷 5167-5168页

作者：刘凯严梦彤瑞塔孙波苗春生李相军任立群吉林大学药学院实验药理与毒理教研室吉林长春130021

目的探讨辛伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响。方法人主动脉SMC分为对照组、模型组、辛伐他汀低、中、高剂量组,用MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术(FCM)检测细胞周期。结果 MTT结果发... 详细信息

目的探讨辛伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响。方法人主动脉SMC分为对照组、模型组、辛伐他汀低、中、高剂量组,用MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术(FCM)检测细胞周期。结果 MTT结果发现,与ox-LDL模型组比较,辛伐他汀高、中、低剂量组细胞增殖能力均明显降低(P<0.05,P<0.01);FCM结果显示,与模型组比较,辛伐他汀高、中剂量组S期细胞所占比例明显降低(P<0.01)。结论辛伐他汀可明显抑制ox-LDL介导的人SMC S期DNA合成,从而抑制SMC过度增殖。

关键词：动脉硬化辛伐他汀氧化型低密度脂蛋白

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尾加压素Ⅱ和转化生长因子β1在糖尿病大鼠肾脏的表达及其意义

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吉林大学学报（医学版） 2007年第4期33卷 607-611,F0002页

作者：田琳李才赵岩陈素贤苗春生吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室吉林长春130021

目的:观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球的动态表达规律及其在糖尿病肾病发病中的作用。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组及糖尿病2、4、8和12周组。糖尿病大鼠模型用单次腹... 详细信息

目的:观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球的动态表达规律及其在糖尿病肾病发病中的作用。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组及糖尿病2、4、8和12周组。糖尿病大鼠模型用单次腹腔注射链脲菌素(55mg·kg-1)诱发。生化法测定血糖、血和尿肌酐、尿白蛋白和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)含量。免疫组织化学法检测肾脏UⅡ、TGF-β1、纤连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)的表达。结果:糖尿病各组大鼠的生化指标均明显高于对照组(P<0.05)。糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球可见UⅡ和TGF-β1阳性染色颗粒,对照组未见该阳性染色颗粒。与糖尿病2周时比较,糖尿病4、8和12周组UⅡ和TGF-β1表达(阳性染色肾小管数和细胞数)随着病程进展进行性增加(P<0.05),肾小管上皮细胞UⅡ的表达水平与尿NAG含量呈正相关(r=0.895,P<0.01)。糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞UⅡ与TGF-β1的表达水平呈正相关(r=0.769,P<0.01)。糖尿病8和12周组大鼠肾脏FN和ColⅣ表达明显高于对照组(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球UⅡ及TGF-β1蛋白表达均明显增加,提示其在糖尿病肾病的肾小管损害及细胞外基质积聚中可能起一定作用。

关键词：尾加压素Ⅱ 转化生长因子β 糖尿病肾病纤连蛋白类胶原Ⅳ型

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自体可注射生物复合填充材料毛发角蛋白的应用

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吉林大学学报（医学版） 2011年第5期37卷 829-832页

作者：李希宁赵娟高海成赵航李敏荆午慧任立群吉林大学药学院药理与毒理学教研室吉林长春130021 承德医学院病理学教研室河北承德067000

目的:体外培养的成纤维细胞(Fbs)与自体毛发角蛋白(HK)颗粒进行复合培养,探讨HK对Fbs的作用。方法:实验分为Fbs组、Fbs∶HK=1∶1组、Fbs∶HK=2∶1组及HK组。利用消化分离法对人Fbs进行原代培养;MTT法测定Fbs的生长曲线以及利用羟脯氨酸(... 详细信息

目的:体外培养的成纤维细胞(Fbs)与自体毛发角蛋白(HK)颗粒进行复合培养,探讨HK对Fbs的作用。方法:实验分为Fbs组、Fbs∶HK=1∶1组、Fbs∶HK=2∶1组及HK组。利用消化分离法对人Fbs进行原代培养;MTT法测定Fbs的生长曲线以及利用羟脯氨酸(HYP)试剂盒对Fbs与HK复合培养的培养液中HYP含量进行测定。结果:人皮肤Fbs生长状态良好;MTT实验表明,在Fbs与Hk的比例为2∶1时效果最为明显。在Fbs与HK的比例为2∶1时,培养液中的HYP含量最多。结论:体外培养的Fbs与Hk粒复合,可明显促进细胞分裂增殖的功能;在二者比例为2∶1时有利于促进Fbs合成胶原蛋白。

关键词：毛发角蛋白成纤维细胞羟脯氨酸

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尾加压素Ⅱ及其受体mRNA在糖尿病大鼠肾脏的表达

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中华肾脏病杂志 2007年第12期23卷 815-816页

作者：田琳李才李相军苗春生西月吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室长春 130021

尾加压素Ⅱ（urotensinⅡ,UⅡ）是迄今体内最强的缩血管活性肽,其缩血管效应是内皮素1（ET-1）的10倍以上。研究证明人体一种孤立G蛋白耦联受体GPR14是UⅡ的特异性受体,UⅡ与其受体构成UⅡ-UⅡ受体系统,二者特异性结合可产生多种生物学... 详细信息

尾加压素Ⅱ（urotensinⅡ,UⅡ）是迄今体内最强的缩血管活性肽,其缩血管效应是内皮素1（ET-1）的10倍以上。研究证明人体一种孤立G蛋白耦联受体GPR14是UⅡ的特异性受体,UⅡ与其受体构成UⅡ-UⅡ受体系统,二者特异性结合可产生多种生物学效应。本研究观察UⅡ及其受体GPR14在糖尿病大鼠肾脏的表达规律,探讨它们在糖尿病肾病肾小管损伤发生中的可能作用。

关键词：受体mRNA 糖尿病大鼠尾加压素Ⅱ 肾脏 G蛋白耦联受体 GPR14 血管活性肽缩血管效应

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结肠癌源性exosomes的分离及其相关免疫学性质

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中国生物制品学杂志 2012年第12期25卷 1635-1637,1643页

作者：冯业童刘朋飞吴昊昱刘迪董超吴璇周余来孙波吉林大学药学院生物工程实验中心长春130021 吉林大学药学院病理教研室长春130021

目的分离结肠癌细胞株的exosomes,并分析其在致敏抗原呈递细胞及激活相关效应细胞过程中的作用。方法差速离心法分离体外培养的正常exosomes和经热休克处理的sw1116细胞(Heat shocked sw1116,HS-sw1116)分泌的exosomes(Heat shocked exo... 详细信息

目的分离结肠癌细胞株的exosomes,并分析其在致敏抗原呈递细胞及激活相关效应细胞过程中的作用。方法差速离心法分离体外培养的正常exosomes和经热休克处理的sw1116细胞(Heat shocked sw1116,HS-sw1116)分泌的exosomes(Heat shocked exosomes,HS-Exo),并在电子显微镜下观察exosomes和HS-Exo的形态结构;SDS-PAGE初步分析exosomes和HS-Exo的蛋白组分,CCK-8法检测其促外周血单个核细胞(Peripheral blood monouclear cells,PBMCs)增殖的能力。结果电子显微镜观察,exosomes和HS-Exo的形态学结构无明显差异,其平均直径约为150 nm;exosomes和HS-Exo的蛋白条带分布情况基本相同,在高相对分子质量区域蛋白分布较多;exosomes比sw1116细胞更易引起PBMCs的增殖反应,HS-sw1116细胞和HS-Exo促PBMCs增殖的作用比sw1116细胞和exosomes更明显(P<0.05)。结论结肠癌sw1116细胞株可分泌exosomes,其比肿瘤细胞更易引起PBMCs的增殖,热休克处理可进一步增强细胞和exosomes的促PBMCs增殖的能力,exosomes在结肠癌免疫治疗方面具有重要的应用价值。

关键词：结肠癌 exosomes 热休克免疫治疗

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NaF与H_2O_2对大鼠真皮成纤维细胞血管内皮生长因子表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2012年第5期38卷 948-951,F0003页

作者：吴昊昱吴璇魏振宏刘朋飞董超冯业童刘迪石毅孙波吉林大学药学院生物工程试验中心吉林长春130021 吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室吉林长春130021

目的:比较不同剂量的氟化钠(NaF)与过氧化氢(H2O2)对成纤维细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探索促进VEGF表达的简单有效的方法,为优化组织工程真皮培养条件提供理论参考。方法:酶消化法分离大鼠皮肤成纤维细胞,以不同剂量NaF(0.0... 详细信息

目的:比较不同剂量的氟化钠(NaF)与过氧化氢(H2O2)对成纤维细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探索促进VEGF表达的简单有效的方法,为优化组织工程真皮培养条件提供理论参考。方法:酶消化法分离大鼠皮肤成纤维细胞,以不同剂量NaF(0.05和0.50 mmol.L-1)、H2O2(10 nmol.L-1和10μmol.L-1)以及两者联合(NaF 0.05mmol.L-1,H2O210μmol.L-1)分别作用于成纤维细胞,在第0、24及48h采用CCK-8法测定细胞的增殖活性,在第48小时采用ELISA法和免疫组织化学法测定其对VEGF表达的影响。结果:不同剂量NaF、H2O2以及两者联合作用对成纤维细胞增殖无抑制作用,与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);NaF实验组和H2O2实验组的VEGF表达量均明显提高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而NaF与H2O2两者联合作用效果最为明显,可提高40%(P<0.05)。结论:NaF与H2O2联合作用能在不影响成纤维细胞正常增殖的前提下,有效地促进VEGF的表达。

关键词：成纤维细胞血管内皮生长因子氟过氧化氢

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