检索结果-内蒙古大学图书馆

东北农业科学 2016年第5期41卷 83-87页

作者：张佳诗徐文静杜茜隋丽赵宇张正坤李启云农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室/吉林省农业微生物重点实验室/吉林省农业科学院植物保护研究所吉林公主岭136100

对球孢白僵菌(Beauveria bassiana(Bais.)Vuill)D1-5菌株的3种分生孢子气生孢子、芽生孢子和深层孢子进行电镜观察,并利用双向凝胶电泳技术对3种孢子的特异性表达蛋白进行分析与筛选。结果显示,电镜下气生分生孢子呈球形,外周有棒状结... 详细信息

对球孢白僵菌(Beauveria bassiana(Bais.)Vuill)D1-5菌株的3种分生孢子气生孢子、芽生孢子和深层孢子进行电镜观察,并利用双向凝胶电泳技术对3种孢子的特异性表达蛋白进行分析与筛选。结果显示,电镜下气生分生孢子呈球形,外周有棒状结构包裹,具有明显的疏水特性;芽生孢子为圆柱形,大小不均一,表面光滑;深层孢子球形透明,大小均一,表面粗糙,3种分生孢子孢子壁厚度差异不明显。经双向凝胶电泳对3种分生孢子进行特异性表达蛋白分离后,使用PDquest软件对结果进行分析,深层分生孢子与芽生分生孢子蛋白表达图谱相比较,有20个蛋白质表达量发生2倍以上改变,其中8个蛋白质表达量上调,12个蛋白质表达量下调;气生分生孢子与芽生分生孢子蛋白表达图谱相比较,有57个蛋白质表达量发生2倍以上改变,其中43个蛋白质表达量上调,14个蛋白质表达量下调;深层分生孢子与气生分生孢子蛋白表达图谱相比较,有66个蛋白质表达量发生2倍以上改变,其中8个蛋白质表达量上调,58个蛋白质表达量下调。

关键词：球孢白僵菌孢子形态电镜观察双向电泳特异性蛋白

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球孢白僵菌植物内生性及其应用研究进展

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东北农业科学 2016年第1期41卷 73-77页

作者：路杨徐文静隋丽汪洋洲张正坤李启云吉林省农业科学院植物保护研究所农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室吉林省农业微生物重点实验室吉林公主岭136100

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是世界上研究和应用最多的昆虫病原真菌之一,已在害虫生物防治方面发挥了重要的作用。近年研究表明,球孢白僵菌具有植物内生性,能够在自然状态下或采用不同人工接种方式定殖在植物中,对多种植物害虫、病... 详细信息

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是世界上研究和应用最多的昆虫病原真菌之一,已在害虫生物防治方面发挥了重要的作用。近年研究表明,球孢白僵菌具有植物内生性,能够在自然状态下或采用不同人工接种方式定殖在植物中,对多种植物害虫、病原菌有很好的抑制作用,可以提高寄主作物的抗病虫能力和促进作物生长,因此,其具有双重生防活性和促生作用。本文在介绍白僵菌植物内生性的基础上对植物内生白僵菌在植物保护中的应用进行综述,对利用植物内生菌防治植物病虫害存在的问题及未来发展前景进行了讨论。

关键词：球孢白僵菌植物内生菌双重生防活性促生作用

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不同区域野生大豆SMV的检测及遗传结构分析

不同区域野生大豆SMV的检测及遗传结构分析

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中国植物病理学会2016年学术年会

作者：李小宇王永志张春雨李启云尤晴张淋淋吉林省农业科学院植物保护研究所农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室吉林省农业微生物重点实验室

为调查研究野生大豆资源中大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus,SMV）感染情况和遗传结构,本研究通过建立SMV通用型检测方法,对来源于我国和朝鲜的共14个地区的3 524份野生大豆样品进行ELISA分析,通过对病毒分离物NIb、CP基因的克隆、... 详细信息

为调查研究野生大豆资源中大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus,SMV）感染情况和遗传结构,本研究通过建立SMV通用型检测方法,对来源于我国和朝鲜的共14个地区的3 524份野生大豆样品进行ELISA分析,通过对病毒分离物NIb、CP基因的克隆、测序和序列进化分析,初步阐明野生大豆花叶病毒感染状况和遗传结构。黑龙江省野生大豆SMV阳性率比其他省份较低,且阳性率呈现由北向南逐渐升高的趋势,其他省份（吉林、辽宁、朝鲜、）野生大豆SMV阳性率均达到60%以上,说明野生大豆的总体带毒率较高。野生大豆SMV带毒率呈现出随纬度降低而升高的趋势,这可能是由于气候、传播宿主的变化引起,需要进一步的深入研究加以阐明。从系统进化数据上看,野生大豆SMV具有明显的地域差异,在野生大豆资源的异位保护中,要注意预防病毒的交叉侵染。本研究发现野生大豆中广泛存在SMV隐症感染。这一现象对抗性鉴定和毒株分离提出新的要求。

关键词：野生大豆大豆花叶病毒遗传结构

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三种马铃薯Y病毒属病毒通用型单克隆抗体的鉴定

三种马铃薯Y病毒属病毒通用型单克隆抗体的鉴定

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中国植物病理学会2016年学术年会

作者：王永志李小宇张春雨李启云宋景荣尤晴张淋淋吉林省农业科学院植物保护研究所农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室吉林省农业微生物重点实验室呼伦贝尔市农业科学研究所

鉴定和分析马铃薯Y病毒属的三种病毒病,即大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus,SMV）、马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）、三叶草黄脉病毒（Clover yellow veinvirus,CLYVV）的通用型单克隆抗体。提取PVY感染的马铃薯叶片和SMV感染的... 详细信息

鉴定和分析马铃薯Y病毒属的三种病毒病,即大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus,SMV）、马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）、三叶草黄脉病毒（Clover yellow veinvirus,CLYVV）的通用型单克隆抗体。提取PVY感染的马铃薯叶片和SMV感染的大豆叶片总RNA,RT-PCR克隆PVY和SMV的Coat protein（CP）基因,利用已有的CLYVV CP基因,构建原核表达载体pET28-PVY CP、pET28-SMV CP和pET28-CLYVV CP。诱导、表达和纯化PYV、SMV和CLYVV的CP蛋白。采用ELISA方法,用9株实验室制备的单克隆抗体对PVY、SMV、CLYVV的病毒悬液和表达并纯化的重组CP蛋白进行检测分析。成功表达并纯化了PYV、SMV和CLYVV CP蛋白。ELISA检测表明,9株单克隆抗体均识别SMV病毒,2D3、4F9、4G12和6E7 4株单克隆抗体能够识别PVY病毒,4F9和4G12能够识别CLYVV病毒,但PVY、CLYVV病毒与抗体的亲和力低于SMV病毒;对于重组表达的衣壳蛋白:SMV、CLYVV与2D3、4F9、4G12和6E7四株抗体反应强烈,PVY与4F9和4G12两株抗体反应稍强。综上,本研究鉴定出能识别PVY、SMV、CLYVV的通用单克隆抗体4F9和4G12,为马铃薯Y病毒病毒的检测研究提供了一种广谱性的抗体材料。

关键词：马铃薯Y病毒大豆花叶病毒三叶草黄脉病毒 CP蛋白抗体鉴定

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链霉菌769胆固醇氧化酶基因克隆、表达及生物学活性分析

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中国生物防治学报 2015年第6期31卷 889-896页

作者：佟雨航谭笑杜茜张正坤徐文静路杨李启云吉林农业大学农学院长春130118 吉林省农业科学院植物保护研究所/农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室/吉林省农业微生物重点实验室公主岭136100

胆固醇氧化酶（cholesterol oxidase,EC 1.1.3.6）是胆固醇降解代谢过程中的关键酶,在食品开发、医疗保健、临床检测、生物农药等方面具有广泛的应用价值。通过PCR方法从链霉菌Streptomyces ahygroscopicus 769的基因组中扩增得到769_Ch... 详细信息

胆固醇氧化酶（cholesterol oxidase,EC 1.1.3.6）是胆固醇降解代谢过程中的关键酶,在食品开发、医疗保健、临床检测、生物农药等方面具有广泛的应用价值。通过PCR方法从链霉菌Streptomyces ahygroscopicus 769的基因组中扩增得到769_Ch OA基因（Gen Bank accession ***290994）。该基因全长为1578 bp,编码一个由525 aa组成的蛋白质,蛋白理论分子量为57 k Da,等电点为6.29。769_Ch OA与来源于***的胆固醇氧化酶基因的同源性为91%。构建了硫氧还蛋白-769_Ch OA融合的表达载体p ET32a：：769_Ch OA,以Escherichia coli Origami B（DE3）为表达宿主,获得了能可溶性表达的胆固醇氧化酶重组菌。经Ni亲和层析纯化得到的酶蛋白比活力为5.90 U/mg。酶学性质分析表明,该酶对胆固醇的催化活性最高,对测定的7种胆固醇类似物也都具有一定的催化能力。酶的最适温度和p H范围为20~40℃和p H 6.0~8.5,其活性均高于80%,且在30℃和p H 7.0时表现出最大的活性,酶活分别达到6.83和6.44 U/mg。酶在低于40℃和弱碱性条件下具有很好的稳定性。该酶对鳞翅目害虫亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis（Guenée）和水稻二化螟Chilo suppressalis（Walker）幼虫具有很强的杀虫活性,半致死浓度分别为27.4和17.1μg/m L。

关键词：胆固醇氧化酶克隆表达活性分析

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吉林省球孢白僵菌遗传多样性与亚洲玉米螟化性相关性分析

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中国生物防治学报 2015年第6期31卷 836-844页

作者：张正坤孟鑫睿张佳诗徐文静李启云冯树丹吉林省农业科学院植物保护研究所/吉林省农业微生物重点实验室/农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室公主岭136100 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院哈尔滨150025

利用ITS序列分析和ISSR分子标记对吉林省玉米主产区的49株寄生亚洲玉米螟的球孢白僵菌进行了遗传多样性分析。ITS序列分析表明,各菌株间的亲缘关系与其地理来源无关。分别根据9个采集地,以及寄主化性类型划分供试菌株类群,利用ISSR分子... 详细信息

利用ITS序列分析和ISSR分子标记对吉林省玉米主产区的49株寄生亚洲玉米螟的球孢白僵菌进行了遗传多样性分析。ITS序列分析表明,各菌株间的亲缘关系与其地理来源无关。分别根据9个采集地,以及寄主化性类型划分供试菌株类群,利用ISSR分子标记技术进一步分析表明,不同地理类群中榆树地区的遗传多样性最高,双辽地区最低;双辽和通化地区间的遗传分化系数最高,梨树和通化地区间的遗传距离最大。根据寄主化性类型划分类群得出一代玉米螟分离菌株遗传多样性指数最高,一代兼二代区最低;一代兼二代区菌株遗传分化系数最高,而一代区和二代区的遗传距离最大。由此可见,吉林省球孢白僵菌遗传多样性水平较高,种群的异质性较强,遗传多样性同地理位置无关,与寄主化性类型存在相关性。

关键词：球孢白僵菌遗传多样性亚洲玉米螟化性简单重复序列区间

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国内外不同地理来源球孢白僵菌遗传多样性分析

国内外不同地理来源球孢白僵菌遗传多样性分析

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中国植物保护学会2015年学术年会

作者：张正坤孟鑫睿张佳诗徐文静李启云冯树丹吉林省农业科学院植物保护研究所农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室吉林省农业微生物重点实验室哈尔滨师范大学生命科学与技术学院

将来源于中国11个省及法国等3个国家采集分离的90株球孢白僵菌按省份和国家划分成14个类群进行研究。又针对吉林省采集分离的菌株细划分为9个不同地理来源类群,以及按照寄主化性类型的不同划分为3个类群。本研究获得以下结果。（1）ITS... 详细信息

将来源于中国11个省及法国等3个国家采集分离的90株球孢白僵菌按省份和国家划分成14个类群进行研究。又针对吉林省采集分离的菌株细划分为9个不同地理来源类群,以及按照寄主化性类型的不同划分为3个类群。本研究获得以下结果。（1）ITS序列分析:供试球孢白僵菌菌株通过ITS-PCR反应,构建系统发育树分析,表明供试菌株的亲缘关系同地理来源无相关性。（2）ISSR引物的多态性分析:10个引物共扩增得到90个清晰的位点,引物的多态位点百分率（PPL）均为100%,说明ISSR分子标记技术是适合用于分析球孢白僵菌种群遗传多样性的方法。（3）遗传多样性分析:供试球孢白僵菌种群的PPL为100%,Nei基因多样性指数（Hc）为0.325 3,Shanncm信息指数（I）为0.493 0。各类群的遗传多样性指标差异较大,其中,吉林、山东地区两类群的PPL和遗传多样性指数最高,辽宁地区类群的PPL和两个遗传多样性指数均为最低。而吉林省各类群中,榆树地区类群和玉米螟一代区类群的遗传多样性指数最高,双辽地区类群和玉米螟一代兼二代区类群的遗传多样性指数和PPL最低。（4）各类群间的遗传分化:不同地理来源各类群的遗传分化系数(G)为0.690 9,基因流（N）为0.223 6。辽宁-湖北两类群间的遗传分化系数最高。吉林省内部,双辽-通化两类群间的遗传分化系数最高;随着玉米螟化性类型由一代过渡到二代,遗传分化系数逐渐增大。该结果说明,球孢白僵菌各类群的遗传分化程度同地理位置无关,吉林省白僵菌菌株的遗传分化同寄主玉米螟化性类型有关。（5）遗传距离:不同地理来源各类群的遗传距离在0.046 4～0.526 7,河北-广东两类群间的遗传距离最大。吉林省各白僵菌类群中,梨树-通化两类群间以及一代区类群和二代区类群间的遗传距离最大。该结果同样说明,球孢白僵菌各类群的遗传距离同地理距离无关;吉林省白僵菌菌株的遗传距离同寄主玉米螟化性类型存在相关性。（6）聚类分析:不同地理来源白僵菌类群的聚类图表明,各类群白僵菌的分布不存在地理相关性。综上所述可得出结论,国内外不同地理来源供试白僵菌菌株的遗传多样性同地理距离无明显关系。吉林省不同地理来源供试白僵菌菌株的遗传多样性同地理距离无关,同寄主亚洲玉米螟化性类型存在相关性。

关键词：球孢白僵菌遗传多样性 ITS ISSR 玉米螟化性

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恶臭白色真菌在植物病虫害生物防治中的研究进展

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吉林农业科学 2014年第6期39卷 37-42页

作者：路杨佟雨航隋丽张佳诗徐文静张正坤李启云吉林省农业科学院植物保护研究所农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室/吉林省农业微生物重点实验室吉林公主岭136100 吉林农业大学长春130118

恶臭白色真菌是近年来发现的一种能够产生多种具有生物活性的挥发性有机化合物的新型植物内生真菌。恶臭白色真菌释放的活性物质对多种植物病原菌和植物寄生害虫均具有较强的抑制作用,因而在生物防治植物病虫害方面有着广阔的应用前景... 详细信息

恶臭白色真菌是近年来发现的一种能够产生多种具有生物活性的挥发性有机化合物的新型植物内生真菌。恶臭白色真菌释放的活性物质对多种植物病原菌和植物寄生害虫均具有较强的抑制作用,因而在生物防治植物病虫害方面有着广阔的应用前景。本文从恶臭白色真菌的鉴定、挥发性物质性质及其在生物防治植物病虫害中的应用等方面进行了综述,并展望了恶臭白色真菌在植物保护中的应用前景。

关键词：恶臭白色真菌挥发性有机化合物生物防治植物病虫害

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吉林省水稻主要害虫广谱性白僵菌菌株筛选

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中国生物防治学报 2014年第5期30卷 665-671页

作者：田志来朱晓敏骆家玉路杨赵宇吉林省农业科学院植物保护研究所/农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室/吉林省农业微生物重点实验室公主岭136100 安徽省国营沙河集林业总场白米山林场滁州239060

为获得防治吉林省水稻主要害虫即水稻二化螟和稻水象甲的高毒力广谱性白僵菌菌株,通过生物测定进行初筛,分别获得靶标害虫(水稻二化螟、稻水象甲)专化性高毒力白僵菌菌株各4株,然后对该8株菌株的产孢量、孢子萌发速率、菌落生长速率3项... 详细信息

为获得防治吉林省水稻主要害虫即水稻二化螟和稻水象甲的高毒力广谱性白僵菌菌株,通过生物测定进行初筛,分别获得靶标害虫(水稻二化螟、稻水象甲)专化性高毒力白僵菌菌株各4株,然后对该8株菌株的产孢量、孢子萌发速率、菌落生长速率3项生物学指标进行测定,并交叉应用靶标害虫进行毒力测定。结果表明,菌株XJ8各项生物学指标均较好,对水稻二化螟及稻水象甲的LT50值分别为4.94和6.51 d,均高于CK菌株。菌株XJ8为吉林省水稻主要害虫(水稻二化螟、稻水象甲)高毒力广谱性白僵菌菌株。

关键词：水稻二化螟稻水象甲白僵菌菌株筛选

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水稻二化螟高毒力白僵菌菌株筛选

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吉林农业科学 2013年第5期38卷 44-47页

作者：朱晓敏路杨高悦鲍润泽高月波赵宇田志来吉林省农业科学院植物保护研究所/农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室/吉林省农业微生物重点实验室吉林公主岭136100 吉林省农院生物制剂实验厂吉林公主岭136100

从水稻田间采集自然感染白僵菌的水稻二化螟僵虫,分离纯化菌株,进行不同菌株生物学特性指标比较以及在室内对水稻二化螟3龄幼虫进行毒力测定,从中筛选出生长性状优良、对水稻二化螟毒力较强的菌株HN1、YJ2。其产孢量分别为19.03×10... 详细信息

从水稻田间采集自然感染白僵菌的水稻二化螟僵虫,分离纯化菌株,进行不同菌株生物学特性指标比较以及在室内对水稻二化螟3龄幼虫进行毒力测定,从中筛选出生长性状优良、对水稻二化螟毒力较强的菌株HN1、YJ2。其产孢量分别为19.03×107个/cm2、17.30×107个/cm2;14 h萌发率分别为93.67%、91.08%;营养生长量分别为2.822 mm/d、2.748 mm/d;对水稻二化螟3龄幼虫的校正死亡率分别为97.33%、96.00%。HN1、YJ2菌株各项生物学特性指标均显著高于实验室原有保藏菌株(CK),具有很好的生防潜力。

关键词：白僵菌菌株筛选水稻二化螟

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