检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2019年第1期46卷 147-156页

作者：谷巍孙明杰王丽荣陈振曾佳佳陈静徐海燕王春凤吉林农业大学动物科学与技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心长春130118 山东宝来利来生物工程股份有限公司山东省动物微生态制剂省级重点实验室泰安271000

试验旨在研究4味中药对免疫抑制小鼠免疫功能和肠道菌群的影响,选取70只6周龄雌性昆明小鼠(18～20g),随机分为7组,分别为空白对照组、模型组、玉屏风组、乌梅组、蒲公英组、党参组、石榴皮组。采用环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)构建免... 详细信息

试验旨在研究4味中药对免疫抑制小鼠免疫功能和肠道菌群的影响,选取70只6周龄雌性昆明小鼠(18～20g),随机分为7组,分别为空白对照组、模型组、玉屏风组、乌梅组、蒲公英组、党参组、石榴皮组。采用环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)构建免疫抑制病理模型,从喂药的第3天起,2～7组以75mg/kg体重腹腔注射Cy,每隔1天注射1次,共注射4次,注射期间正常给药,模型组灌胃0.9%生理盐水,直至停止注射Cy的第2天,共给药7d。检测4味中药对免疫抑制小鼠体重、脾脏和胸腺指数、血液指标、分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、IgG及肠道菌群的影响。结果显示,与模型组相比,党参、乌梅、蒲公英、石榴皮可显著提高免疫抑制小鼠体重(P<0.05),其中乌梅组效果最好;显著提高免疫抑制小鼠免疫器官指数(P<0.05),但不能达到正常水平,其中蒲公英组脾脏指数最高;各中药组可提高白细胞数目(WBC)、显著提高红细胞数目(RBC)(P<0.05),但不能达到正常水平;各中药组可显著提高免疫球蛋白数量(P<0.05),党参组sIgA、IgG显著高于空白对照组(P<0.05),且和玉屏风组差异不显著(P>0.05);各中药组可显著降低大肠杆菌数量(P<0.05),显著增加双歧杆菌和乳酸杆菌数量(P<0.05),提高免疫抑制小鼠肠道菌群的丰富性和多样性,其中党参和蒲公英组小鼠肠道菌群的丰富度和多样性较好。综上说述,乌梅、蒲公英、石榴皮、党参均能够颉颃Cy对小鼠体重、免疫功能及肠道菌群的影响,可用于免疫增强类药物的开发。

关键词：中药环磷酰胺免疫抑制小鼠肠道菌群免疫功能

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嗜酸乳杆菌发酵复方中药成分变化对腹泻小鼠的影响

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中国预防兽医学报 2019年第5期41卷 520-525页

作者：谷巍孙明杰王丽荣陈振曾佳佳陈静徐海燕单宝龙王春凤山东宝来利来生物工程股份有限公司山东省动物微生态制剂省级重点实验室山东泰安271000 吉林农业大学动物科学与技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118

为对比研究中药复方经发酵前后其成分变化对小鼠腹泻的影响,本研究采用高效液相色谱检测中药复方发酵前后成分的变化,以大肠杆菌K88所致腹泻小鼠为动物模型,对比研究中药复方发酵液与中药复方水提液对腹泻小鼠腹泻率、腹泻指数、免疫器... 详细信息

为对比研究中药复方经发酵前后其成分变化对小鼠腹泻的影响,本研究采用高效液相色谱检测中药复方发酵前后成分的变化,以大肠杆菌K88所致腹泻小鼠为动物模型,对比研究中药复方发酵液与中药复方水提液对腹泻小鼠腹泻率、腹泻指数、免疫器官指数、肠道菌群及细胞因子IFN-γ、IL-4的影响。结果显示,中药复方发酵液中保留时间为16 min处的主要特征吸收峰消失,主要成分发生了转变,产生了一种新的特征吸收峰。饲喂试验显示发酵组小鼠腹泻指数与腹泻率显著低于中药水提组(p<0.05);中药复方发酵液在降低小鼠盲肠内大肠杆菌数量,提高双歧杆菌及嗜酸乳杆菌数量方面优于中药复方水提液;发酵组小鼠胸腺指数与肝脏指数显著高于水提组(p<0.05)。中药复方发酵液在提高IFN-γ/IL-4比值方面优于中药复方水提液。结果表明,中药复方经过发酵后成分发生了变化,形成了新的物质,对腹泻小鼠产生了有益的影响,应用效果优于中药复方水提液,为其在治疗腹泻方面的应用奠定基础。

关键词：发酵中药成分变化小鼠腹泻

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调控表达LacI蛋白的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd株的构建

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黑龙江畜牧兽医 2019年第21期 11-17页

作者：许可刘晶高兴胡译文杨桂连王春凤姜延龙吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心/动物生产与产品质量安全教育部重点实验室

为了构建具有asd基因缺失和LacI蛋白表达调控的猪霍乱沙门氏杆菌C500株,试验以猪霍乱沙门氏杆菌C500株为载体,对其基因组进行改造,使沙门氏杆菌asd基因缺失,随后将araC PBADLacI序列置于其中,构建包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱... 详细信息

为了构建具有asd基因缺失和LacI蛋白表达调控的猪霍乱沙门氏杆菌C500株,试验以猪霍乱沙门氏杆菌C500株为载体,对其基因组进行改造,使沙门氏杆菌asd基因缺失,随后将araC PBADLacI序列置于其中,构建包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株以及包含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP,并验证是否有LacI蛋白表达。结果表明:试验成功构建出包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株,以及包含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP;Western-blot检测验证了突变菌在阿拉伯糖存在的条件下可大量表达LacI蛋白,而当pYA4514-EGFP质粒上的Ptrc启动子受到抑制时,EGFP蛋白不表达;用IPTG诱导后可以消除LacI对Ptrc启动子的抑制作用,EGFP蛋白表达。说明试验成功构建了调控表达LacI蛋白的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株。

关键词：猪霍乱沙门氏杆菌C500株 C500Δasd基因突变株 araC PBAD启动子 LacI蛋白表达

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表达结核分枝杆菌ESAT-6-Ag85A基因的侵入型乳酸菌免疫特性研究

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中国免疫学杂志 2019年第1期35卷 10-14页

作者：刘晶张赞刘洋杨桂连姜延龙王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响。方法:将真核表达载体p Valac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸... 详细信息

目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响。方法:将真核表达载体p Valac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸菌p Valac-ES85A/409和p Valac-ES85A/Fn BPA。将其免疫BALB/c小鼠,检测表达ES85A的侵入型乳酸菌对小鼠树突状细胞(DCs)亚群CD80和CD83的影响以及血清中细胞因子的表达水平。结果:Western blot和免疫荧光证明ES85A蛋白成功表达;与空载体组相比,在小鼠免疫表达ES85A的侵入型乳酸菌后,小鼠脾细胞中CD11^+CD80^+(P<0. 001)和CD11^+CD83^+(P<0. 01)以及血清中细胞因子IL-4(P<0. 05)的表达都有所增加。结论:表达ES85A的侵入型乳酸菌能促进小鼠体内DCs的分化和成熟以及提高血清中细胞因子IL-4的表达,为后期研制抗结核分枝杆菌的DNA疫苗制剂奠定了基础。

关键词： ES85A 细胞转染 FnBPA 树突状细胞

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乳酸菌介导巨噬细胞极化作用的研究进展

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中国免疫学杂志 2019年第3期35卷 363-367页

作者：邵丽娜杨文涛王春凤胡静涛吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益... 详细信息

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益生菌与免疫细胞之间有着不可分割的关系,尤其是巨噬细胞。它通过各种途径与巨噬细胞作用,使巨噬细胞产生细胞因子,并向不同的表型极化,参与模式识别受体包括Toll样受体(TLRs)、Notch、核因子κB(NF-κB)信号通路等,从而降低机体的炎症反应。在这过程中,乳酸菌在机体调节中发挥重要作用。本文主要对乳酸菌介导巨噬细胞产生免疫调节的作用机制进行阐述。

关键词：乳酸菌巨噬细胞免疫调节极化信号通路

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调节性B细胞在寄生虫感染中的免疫调节作用

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中国病原生物学杂志 2019年第4期14卷 482-484,490页

作者：谢静黄海斌赵权杨桂连吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

调节性B细胞(Regulatory B cells, Bregs)是存在于B细胞中的一类细胞亚群,该类细胞可以通过分泌细胞因子(IL-10、TGF-β和IL-35等)来抑制免疫反应。研究发现,寄生虫感染能诱导Bregs的产生,由Bregs分泌的IL-10是其发挥作用的关键因子。... 详细信息

调节性B细胞(Regulatory B cells, Bregs)是存在于B细胞中的一类细胞亚群,该类细胞可以通过分泌细胞因子(IL-10、TGF-β和IL-35等)来抑制免疫反应。研究发现,寄生虫感染能诱导Bregs的产生,由Bregs分泌的IL-10是其发挥作用的关键因子。该类细胞可抑制由寄生虫引起的过度炎症,有助于寄生虫慢性感染的建立、维持宿主和寄生虫逃避免疫反应之间的平衡,降低寄生虫感染对机体造成的病理损伤。

关键词：调节性B细胞寄生虫感染免疫调节综述

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表达禽流感病毒HA2-DEC205的减毒沙门菌DNA疫苗载体的构建与初步研究

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中国兽医科学 2019年第4期49卷 453-460页

作者：胡译文刘晶赵维静谢静许可杨桂连姜延龙王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

构建表达H9N2亚型禽流感病毒HA2蛋白的延迟裂解型重组减毒沙门菌χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-sec)和χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-dimer-sec),将其免疫小鼠,通过流式细胞术检测免疫细胞的变化。结果表明,沙门菌χ11218(pYA4545-HA2-DEC205-dimer-sec)能够提高CD3+CD4+T细胞分泌细胞因子IL-4、IFN-γ的水平。这说明重组沙门菌免疫小鼠能够激活机体的免疫系统,诱导发生一定的免疫反应。

关键词：禽流感病毒 HA2 延迟裂解重组减毒沙门菌

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表面展示柔嫩艾美耳球虫EtMIC2蛋白的侵入型乳酸菌的免疫特性研究

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中国兽医科学 2019年第5期49卷 619-624页

作者：张赞刘晶高兴刘洋姜延龙王春凤杨桂连吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为了研究表达pgsA′-EtMIC2融合蛋白的侵入型乳酸菌的免疫特性,将pgsA′-EtMIC2基因片段插入到载体pSIP409-FnBPA中,得到pSIP409-FnBPA-pgsA′-EtMIC2重组质粒,并用电转化的方式转入植物乳杆菌NC8感受态细胞中,构建表面展示EtMIC2蛋白... 详细信息

为了研究表达pgsA′-EtMIC2融合蛋白的侵入型乳酸菌的免疫特性,将pgsA′-EtMIC2基因片段插入到载体pSIP409-FnBPA中,得到pSIP409-FnBPA-pgsA′-EtMIC2重组质粒,并用电转化的方式转入植物乳杆菌NC8感受态细胞中,构建表面展示EtMIC2蛋白的侵入型乳酸菌。通过检测免疫雏鸡外周血淋巴细胞中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞的发育情况,血清中EtMIC2抗体、IL-4、IL-18、IFN-γ的含量以及肠道灌洗液中IgA的分泌量来评价该侵入型乳酸菌对雏鸡的免疫特性。结果显示,成功构建出携带pSIP409-FnBPA-pgsA′-EtMIC2质粒的重组乳酸菌;雏鸡免疫后外周血淋巴细胞中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞含量明显升高;EtMIC2抗体、IL-18、IFN-γ细胞因子及IgA产生的水平均显著上升,表明该侵入型乳酸菌具有一定的免疫效力,为后期研究抗球虫的免疫保护效果奠定了基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫 EtMIC2 FnBPA 侵入型乳酸菌免疫特性

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表面展示狂犬病病毒糖蛋白的重组乳酸菌的构建及其免疫原性的研究

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中国兽医科学 2019年第4期49卷 432-439页

作者：赵维静赵建伟胡译文谢静刘琼王春凤王建忠钱爱东吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为开发基于乳酸菌载体表达的新型狂犬病口服疫苗,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位区基因RVG,并通过PCR方法在其C′端融合特异性树突状细胞(DC)靶向肽编码基因后插入到乳酸菌表达载体中,以融合无关肽编码基因为对照,分别构建表达RVG基... 详细信息

为开发基于乳酸菌载体表达的新型狂犬病口服疫苗,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位区基因RVG,并通过PCR方法在其C′端融合特异性树突状细胞(DC)靶向肽编码基因后插入到乳酸菌表达载体中,以融合无关肽编码基因为对照,分别构建表达RVG基因的重组乳酸菌pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep和p SIP-409-pgsA′-RVG-ctrl。在清酒乳杆菌素的诱导下,表达产物经Western-blot和免疫荧光鉴定后,对小鼠进行口服免疫,通过流式细胞术检测免疫后小鼠脾中树突状细胞和B细胞活化效率,用ELISA检测肠道内sIgA和血清IgG分泌量。结果显示,该抗原表位区在重组乳酸菌中得到了正确表达,并且可锚定于菌体表面,pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep能有效活化小鼠脾中的树突状细胞和B细胞;与其他组相比差异显著(P<0.05),且肠道内sIgA和血清IgG分泌量显著高于其他组(P<0.05),表明重组乳酸菌pSIP-409-pgsA′-RVG-DCpep能够更好地激活黏膜免疫反应,具有良好的免疫原性。

关键词：乳酸菌狂犬病病毒糖蛋白 DCpep 黏膜免疫

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重组鹅IFN-α在大肠杆菌中的表达及抗血清制备

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黑龙江畜牧兽医 2019年第19期 5-9页

作者：周游杨文涛黄科谚晋玉北冯博石春卫黄海滨王建忠姜延龙康元环杨桂连王春凤吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心/动物生产及产品质量安全省部共建教育部重点实验室

为了研究鹅α干扰素(goIFN-α)基因原核表达产物的反应原性并进行goIFN-α抗血清的制备,试验首先根据大肠杆菌偏爱密码子对goIFN-α基因进行优化,随后采用PCR方法扩增goIFN-α编码序列并进行同源性分析。将goIFN-α片段与表达载体pET-28... 详细信息

为了研究鹅α干扰素(goIFN-α)基因原核表达产物的反应原性并进行goIFN-α抗血清的制备,试验首先根据大肠杆菌偏爱密码子对goIFN-α基因进行优化,随后采用PCR方法扩增goIFN-α编码序列并进行同源性分析。将goIFN-α片段与表达载体pET-28a连接,构建重组表达质粒pET-28a-goIFN-α,然后将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot检测。通过切胶回收的方法回收目的条带,将碾碎的蛋白胶与PBS混合后注入小鼠体内,15 d后回收血清进行Western-blot检测。结果表明:试验成功扩增出goIFN-α基因;与多种IFN-α基因序列进行比较,goIFN-α基因氨基酸序列的同源性为92.5%~98.1%;随后成功构建出重组表达质粒pET-28a-goIFN-α,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,重组蛋白goIFN-α的分子质量约为18 ku,具有良好的反应原性;回收血清进行Western-blot检测,鼠抗goIFN-α血清制备成功。说明重组goIFN-α蛋白能够在大肠杆菌中表达,大小符合预期且具有良好的反应原性,并成功制备出鼠抗goIFN-α血清。

关键词：鹅基因工程干扰素α 基因克隆原核表达多克隆抗体

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