检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2002年第4期18卷 386-389页

作者：洪志刚王迪浔金肆张晋王晓良叶笃筠华中科技大学同济医学院病理生理学教研室卫生部呼吸系疾病重点实验室武汉430030 中国协和医科大学.中国医学科学院药物研究所北京100050

目的　研究 3、4 二羟基苯乙酮 (3、4 Dihydroxyace tophenone,DHAP)对钾通道的作用。方法　建立大鼠肺内动脉平滑肌全细胞膜片钳方法并观察 3、4 二羟基苯乙酮对大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾离子通道的作用。结果　①将平滑肌细胞钳制... 详细信息

目的　研究 3、4 二羟基苯乙酮 (3、4 Dihydroxyace tophenone,DHAP)对钾通道的作用。方法　建立大鼠肺内动脉平滑肌全细胞膜片钳方法并观察 3、4 二羟基苯乙酮对大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾离子通道的作用。结果　①将平滑肌细胞钳制在 - 4 0mV ,给予从 - 30mV复极化至 +6 0mV、阶跃电压为 10mV、脉冲时间是 30 0ms的去极化刺激10次时 ,可记录到时间及电压依赖性的延迟整流钾电流。②在指令电位 +5 0mV、+6 0mV时 ,细胞外给予 10 -6mol·L-1DHAP 5min后 ,可使该电流由用药前 (12 97± 2 4 5 )、(16 83± 3 2 8)pA/pF ,增加至 (18 2 9± 2 6 3)、(2 2 90±3 2 1)pA/pF ,增加百分比为 4 1%和 36 % (P <0 0 5 ,n =6 )。结论　DHAP可能通过开放钾通道而舒张肺内动脉平滑肌细胞 ,这可能是其降低肺动脉高压的重要机制之一。

关键词：中药有效成分 3、4-二羟基苯乙酮大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流

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钾离子通道在大鼠慢性低氧所致肺血管低反应中的作用

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中国病理生理杂志 2001年第10期17卷 960-963页

作者：洪志刚王迪浔胡清华陈琪玲孙秉庸同济医科大学卫生部呼吸系疾病重点实验室病理生理室湖北武汉430030 第三军医大学病理生理学教研室重庆630038

目的与方法 :采用阻断剂及离体肺内动脉血管环方法 ,研究不同类型钾离子通道对慢性低压低氧的大鼠模型的低氧性肺血管收缩反应 (HPV)的作用 ,旨在探讨钾离子通道在慢性低氧肺血管低反应机制中的作用。结果 :①慢性低氧 15d、3 0d可降低... 详细信息

目的与方法 :采用阻断剂及离体肺内动脉血管环方法 ,研究不同类型钾离子通道对慢性低压低氧的大鼠模型的低氧性肺血管收缩反应 (HPV)的作用 ,旨在探讨钾离子通道在慢性低氧肺血管低反应机制中的作用。结果 :①慢性低氧 15d、3 0d可降低肺血管对急性低氧的收缩反应。②分别阻断正常对照组、慢性低氧组大鼠肺血管钙激活性钾通道 (KCa)、ATP敏感的钾通道 (KATP) ,均使其HPV反应明显增强 ,其中慢性低氧组增强幅度显著高于正常对照组 (P <0 0 1)。③阻断正常对照组、慢性低氧组大鼠肺血管延迟整流性钾通道 (KDR)对其HPV均无明显影响。结论 :KCa、KATP在HPV反应起着重要的调节作用 ,慢性低氧可使此调节作用显著加强 ,这可能是导致肺血管低反应一个重要机制。

关键词：低氧肺动脉钾离子通道大鼠 HPV

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过氧化氢诱导人血管内皮细胞凋亡及HSP70和Bcl-2基因蛋白表达的研究

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中国危重病急救医学 2001年第2期13卷 79-82页

作者：刘立新王迪浔韩德五山西医科大学第一医院山西太原030001 同济医科大学卫生部呼吸系疾病重点实验室湖北武汉430030 山西医科大学病理生理教研室山西太原030001

目的 :探讨过氧化氢 (H2 O2 )对血管内皮细胞 (VEC)损伤机制和细胞凋亡的调控。方法 :通过人脐静脉内皮细胞株 (ECV 30 4)体外培养 ,采用流式细胞技术、原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法和分子生物学分析相结合的方法观察 H2 O2 对 VEC... 详细信息

目的 :探讨过氧化氢 (H2 O2 )对血管内皮细胞 (VEC)损伤机制和细胞凋亡的调控。方法 :通过人脐静脉内皮细胞株 (ECV 30 4)体外培养 ,采用流式细胞技术、原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法和分子生物学分析相结合的方法观察 H2 O2 对 VEC中热休克蛋白 70 (HSP70 )和 Bcl 2基因蛋白表达及细胞凋亡的影响。结果 :两种检测方法细胞凋亡率变化趋势一致 :10 0、30 0和 5 0 0 mm ol/ L H2 O2 刺激后 ,VEC中 HSP70蛋白表达由(12 .15± 3.0 3) %分别增至 (2 3.80± 8.74) %、(35 .35± 6 .6 8) %和 (35 .85± 5 .83) % ,差异显著 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;而 Bcl 2表达下调 ,由 (2 4.90± 2 .95 ) %分别下降至 (19.35± 3.36 ) %、(18.75± 3.33) %和 (13.0 5±2 .93) % (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。 H2 O2 可诱导 VEC发生凋亡 ,并在一定范围内呈量效关系。结论 :细胞凋亡是血管内皮细胞受损的主要方式之一 ,HSP70与 Bcl 2表达改变可能共同参与了急性呼吸窘迫综合征的发病。

关键词：过氧化氢内皮热休克蛋白70 BCl-2基因 ARDS

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慢性缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞Kv1.3、Kv2.1、Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时表达变化的影响

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 249-250页

作者：洪志刚孔炜王迪浔同济医科大学卫生部呼吸疾病重点实验室病理生理室!湖北武汉430030

我们的研究发现肺动脉平滑肌细胞(PASMC)上某些钾通道基因也是缺氧反应基因,急性缺氧可使其表达发生改变.慢性缺氧对PASMC中Kv1.3、 Kv2.1、 Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时基因表达变化的影响,尚无文献报道,本文就此进行研究.

关键词：急性缺氧慢性缺氧 Kv1.3 Kv2.1 Kv3.1 钾通道肺内平滑肌表达变化大鼠动脉细胞基因

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K~+通道在正常与慢性缺氧大鼠缺氧性肺血管收缩反应中的作用

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 250-251页

作者：金肆王迪浔孙秉庸同济医科大学病理生理教研室卫生部呼吸系疾病重点实验室!湖北武汉430030 第三军医大学病理生理教研室!重庆400038

目的方法:探讨K+通道在慢性缺氧致缺氧性肺血管收缩反应降低中的作用,采用离体肺灌流方法,探讨了4-AP(4-aminopyridine, 电压依赖性K+通道-Kv阻滞剂)、TEA(tetraethylamonium, Ca2+激活性K+通道-Kca阻滞剂)、GLIB(glibenclaminde, ATP... 详细信息

关键词：慢性缺氧肺血管收缩缺氧性大鼠反应

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前列腺素在慢性低氧降低肺血管反应性中的作用

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同济医科大学学报 2000年第2期29卷 93-96页

作者：洪志刚王迪浔刘声远张少华孙秉庸同济医科大学卫生部呼吸系疾病重点实验室病理生理室武汉430030 第三军医大学病理生理学教研室重庆400038

探讨了慢性低压低氧对大鼠肺血管反应性的影响 ,以及前列腺素在其中的作用。结果表明 :1离体肺动脉在急性低氧时先收缩后舒张。大鼠经慢性低氧 15 d、 30 d后离体肺动脉对急性低氧所致收缩反应 (+Δ TIH)较各自对照组均明显降低 [(10 .1... 详细信息

探讨了慢性低压低氧对大鼠肺血管反应性的影响 ,以及前列腺素在其中的作用。结果表明 :1离体肺动脉在急性低氧时先收缩后舒张。大鼠经慢性低氧 15 d、 30 d后离体肺动脉对急性低氧所致收缩反应 (+Δ TIH)较各自对照组均明显降低 [(10 .11± 9.5 6 ) mg、 (14.5 7± 10 .0 2 ) m g Vs (2 7.15± 12 .0 9) mg、 (2 7.86± 13.0 7) mg,P<0 .0 1) ];舒张反应 (-Δ TIH)较各自对照组均明显增强 [(14.18± 5 .14) mg、 (2 6 .35± 11.74) m g Vs (9.39± 7.12 ) mg、 (8.99± 7.32 ) mg]。 2慢性低氧 15 d、 30 d后单位重量肺血管对高钾收缩反应 (ΔTK0 )为 [(10 5 .4± 32 .2 ) m g、 (113.9±2 8.3) m g],分别低于各自对照组 [(132 .7± 30 .3) m g、 (133.1± 34 .2 ) mg]。 3消炎痛可增强低氧性肺血管收缩反应 ,慢性低氧 30 d组增强百分比为 (148.87± 5 7.0 8) % ,明显高于其对照组 (5 9.0 2± 2 4.5 2 ) % ,P<0 .0 1。提示 :慢性低氧降低肺血管反应性可能是由于肺血管平滑肌的收缩性降低以及前列腺素对 HPV的调节作用增强所致。

关键词：高原习服低氧性肺血管收缩反应前列腺素

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香烟烟雾提取物对小鼠气管环上皮钙粘附素表达的影响

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中国组织化学与细胞化学杂志 2000年第1期9卷 29-32页

作者：王曦吴人亮郝天玲郝春荣陈春莲同济医科大学基础医学院病理学教研室武汉430030 同济医科大学卫生部呼吸系疾病重点实验室武汉430030 同济医院病理科武汉430030

体外进行器官培养 ,通过免疫组织化学和原位杂交方法检测香烟烟雾提取物 (CSE)作用 48、 72 h,小鼠气管上皮细胞上皮钙粘附素 (E- cd)表达的变化。结果表明 ,正常对照组 E- cd分布于气管假复层纤毛柱状上皮细胞连接处的胞膜上 ,5 0 % CS... 详细信息

体外进行器官培养 ,通过免疫组织化学和原位杂交方法检测香烟烟雾提取物 (CSE)作用 48、 72 h,小鼠气管上皮细胞上皮钙粘附素 (E- cd)表达的变化。结果表明 ,正常对照组 E- cd分布于气管假复层纤毛柱状上皮细胞连接处的胞膜上 ,5 0 % CSE作用后 ,膜上 E- cd表达减少 ,随着作用时间延长 ,胞浆内 E- cd表达明显增加 (P<0 .0 5 ) ,而细胞内 E- cd m RNA含量无明显变化。提示 ,CSE对小鼠气管上皮细胞 E- cd表达的调控在翻译后水平 ,胞膜上 E- cd表达的下调与吸烟所致气道上皮细胞的损伤修复过程相关。

关键词：器官培养烟雾吸入损伤香烟烟雾提取物小鼠气管环上皮钙粘附素表达

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大鼠肺内动脉平滑肌细胞分离及穿孔膜片钳记录

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 254-254页

作者：洪志刚王迪浔同济医科大学卫生部呼吸疾病重点实验室病理生理室!湖北武汉430080

目的:肺动脉平滑肌细胞钾离子通道活性与缺氧性肺动脉高压关系是近年研究热点,改变这些钾离子通道活性能直接影响血管张力.缺氧可阻断延迟整流性钾通道或/和钙离子激活性钾通道,引起肺动脉平滑肌细胞收缩,使肺动脉压升高.目前,国内有关... 详细信息

目的:肺动脉平滑肌细胞钾离子通道活性与缺氧性肺动脉高压关系是近年研究热点,改变这些钾离子通道活性能直接影响血管张力.缺氧可阻断延迟整流性钾通道或/和钙离子激活性钾通道,引起肺动脉平滑肌细胞收缩,使肺动脉压升高.目前,国内有关肺动脉平滑肌细胞钾离子通道活性与缺氧性肺动脉高压关系的研究还很初浅,主要与肺动脉平滑肌细胞的急性分离以及膜片钳实验时细胞封接、破膜十分困难有关.大鼠肺内动脉平滑肌细胞电生理研究尚无报道,原因与其细胞分离困难更大有关.方法和结果:利用胶原酶、木瓜蛋白酶酶解消化的方法,成功地急性分离出大鼠肺内动脉平滑肌细胞,发现分离的细胞具有较高的成活率,呈舒展长梭形,边界清晰、有完整的胞膜、胞浆均匀,高倍镜下可见清晰的细胞核.细胞对苯肾上腺素有剂量依耐性收缩反应,免疫组化显示胞浆内表达细丝状的平滑肌α-actin.分离的细胞较易封接,用二性霉素B较易穿孔、破膜并记录到全细胞钾电流.结论:大鼠肺内动脉平滑肌细胞急性分离及全细胞穿孔膜片钳方法的建立,为HPV的研究提供了极其重要的实验方法.

关键词：细胞分离肺内平滑肌大鼠动脉

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红细胞生成素3'-增强子调节缺氧时内皮细胞血栓素合酶基因表达

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高原医学杂志 1998年第3期8卷 5-8页

作者：郝天玲夏若寒于江洲同济医科大学病理生理学教研室卫生部呼吸系疾病重点实验室

目的：研究缺氧对人脐静脉内皮细胞珠ＥＣ－３０４ＴＸＳ基因的影响及ＥＰＯ３′增强子在其中的作用。方法：将红细胞生成素（ＥＰＯ）３′－增强子野生片断及点突变片断，借脂质体转入人脐静脉内皮细胞株ＥＣ－３０４，用半定量ＲＴ－... 详细信息

目的：研究缺氧对人脐静脉内皮细胞珠ＥＣ－３０４ＴＸＳ基因的影响及ＥＰＯ３′增强子在其中的作用。方法：将红细胞生成素（ＥＰＯ）３′－增强子野生片断及点突变片断，借脂质体转入人脐静脉内皮细胞株ＥＣ－３０４，用半定量ＲＴ－ＰＣＲ测定常氧与缺氧条件下培养６小时的细胞血栓素合酶（ＴＸＳ）ｍＲＮＡ。结果：ＥＣ－３０４常氧培养有ＴＸＳ基因表达缺氧６小时ＴＸＳ基因表达明显增强；而细胞导入野生ＥＰＯ３′－增强子片断可阻断缺氧诱导ＴＸＳ基因表达增强，而点突变片断无此作用。结论：在ＴＸＳ基因序列中，可能存在类似ＥＰＯ３′－增强子片断，缺氧诱导ＴＸＳ基因表达增强可能主要通过缺氧诱导因子－１与ＴＸＳ基因序列中类似ＥＰＯ３′－增强子片断结合。

关键词：缺氧血栓素合酶基因表达 EC-304TXS

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冻融对分离***重组蛋白影响的实验研究

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同济医科大学学报 1997年第1期26卷 67-68页

作者：曹圣唐大椿骆建云同济医科大学基础医学院病理生理学教研室武汉430030 卫生部呼吸系疾病重点实验室分子生物学室武汉430030

以质粒PTXS11-E129D和E. coli为材料, 分别用1mmol/L异丙基-#beta#-D-硫代半乳糖苷(IPTG)或10mmol/L乳糖作诱导, 置液氮罐中冷冻2-3min后, 再置冰浴内8-10min冻融。结果: 经诱导的PTXS11-E129D/TG1(转化子)经冻融处理, 可见重组蛋白rSl... 详细信息

以质粒PTXS11-E129D和E. coli为材料, 分别用1mmol/L异丙基-#beta#-D-硫代半乳糖苷(IPTG)或10mmol/L乳糖作诱导, 置液氮罐中冷冻2-3min后, 再置冰浴内8-10min冻融。结果: 经诱导的PTXS11-E129D/TG1(转化子)经冻融处理, 可见重组蛋白rSld-E129D的纯度明显增高; 与PTXS11-E129D相比, 冻融处理明显地减少细菌自身蛋白的释放; 乳糖诱导下, 冻融处理所得的重组蛋白的相对百分含量比IPTG诱导组低, 但仍比对照组明显增高。

关键词：重组蛋白类冻融大肠杆菌分离纯化

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