检索结果-内蒙古大学图书馆

中国细胞生物学学报 2021年第5期43卷 963-970页

作者：龚朵云胡凯范克瑞陈琨张力沈宜重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学实验教学管理中心重庆400016

该文主要研究4-辛基衣康酸对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的保护效应。C57BL/6实验小鼠分为空白对照组、衣康酸药物对照组、DSS模型组和衣康酸+DSS干预组。每天观察小鼠体质量、便血情况、粪便性状... 详细信息

该文主要研究4-辛基衣康酸对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的保护效应。C57BL/6实验小鼠分为空白对照组、衣康酸药物对照组、DSS模型组和衣康酸+DSS干预组。每天观察小鼠体质量、便血情况、粪便性状。PAS染色和TUNEL染色观察小鼠肠黏液分泌和肠上皮细胞凋亡情况。Western blot检测核因子E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)和醌氧化还原酶1(quinine oxidoreductase 1,NQO1)的表达。结果显示,与DSS模型组相比,衣康酸干预处理后,小鼠的体质量降低、便血、粪便黏稠和结肠缩短等病理损伤情况明显改善;肠黏膜分泌的黏液增多,肠上皮细胞凋亡数量减少;小鼠体内的抗氧化蛋白水平显著升高。从体质量下降、结肠缩短、疾病活动指数评分和肠黏膜损伤等方面进行评价,证实4-辛基衣康酸可在DSS诱导的结肠炎中发挥保护效应,其机制可能与Nrf2抗氧化通路的上调有关。

关键词：溃疡性结肠炎衣康酸氧化应激

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肝细胞生长因子与肝再生的研究进展

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吉林医学 2021年第4期42卷 983-985页

作者：李璇吴敏超段伟娜张海峰内蒙古医科大学基础医学院生理学教研室内蒙古呼和浩特010100

肝脏是人体内部器官中少数能自然更新的组织。近年来,关于探索参与肝再生过程的细胞因子一直是人们研究的热点。肝细胞生长因子,又称作“散射因子”是一种小分子的多肽生长因子,其被发现是由于能刺激肝细胞的增殖,它也是当下已知最强的... 详细信息

肝脏是人体内部器官中少数能自然更新的组织。近年来,关于探索参与肝再生过程的细胞因子一直是人们研究的热点。肝细胞生长因子,又称作“散射因子”是一种小分子的多肽生长因子,其被发现是由于能刺激肝细胞的增殖,它也是当下已知最强的肝再生促进剂。肝细胞生长因子在肝细胞移植、重型肝炎的发病、肝再生和肝癌的发展中都发挥着重要的作用。目前发现相关因子的有肝细胞生长因子、肿瘤坏死因子、白细胞介素、表皮生长因子、转化生长因子等。1984年Wang Haiyu等从部分肝脏切除后的大鼠血清中发现一种能促进肝细胞DNA合成与增殖的细胞因子,这个因子不仅能刺激原代培养中肝细胞的生长和合成,而且源于肝脏,所以将这个因子命名为肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)[1]。目前发现它是一种可以调节多种细胞生长、运动和形态发生的多功能因子[2]。

关键词：肝再生肝细胞生长因子 c-Met

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YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌拉帕替尼耐药中的作用

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第三军医大学学报 2020年第7期42卷 692-698页

作者：陈鹏徐婷郭丹黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院三腺外科重庆400016

目的建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞株,探讨Hippo通路中YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及机制。方法采用逐步增加剂量与高浓度反复间歇诱导乳腺癌细胞株Skbr3对拉帕替尼耐药,耐药株命名为Skbr3-LR。用拉帕替尼同时处理... 详细信息

目的建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞株,探讨Hippo通路中YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及机制。方法采用逐步增加剂量与高浓度反复间歇诱导乳腺癌细胞株Skbr3对拉帕替尼耐药,耐药株命名为Skbr3-LR。用拉帕替尼同时处理亲本细胞和耐药细胞株,CCK-8法检测其耐药指数;结晶紫染色和平板克隆形成实验检测细胞的存活状况;定量PCR检测上皮-间质化改变。定量PCR及Western blot检测YAP、TAZ的表达。以维替泊芬阻断耐药细胞株Skbr3-LR中YAP下游通路的激活,CCK-8法检测其细胞活性的改变并计算IC50值的变化;结晶紫染色检测细胞存活数量的变化。定量PCR及Western blot检测YAP表达的改变。结果与亲本细胞比较,结晶紫染色和平板克隆形成实验结果均显示,耐药株存活细胞数量明显增多。亲本细胞耐药指数为3.61μmol/L,耐药株耐药指数上升约8倍,为29.26μmol/L。PCR结果显示,与亲本细胞比较,耐药细胞株的上皮标志物E-cadherin表达降低,而间质标志物Twist、Vinemtin和N-cadherin表达上升,YAP/TAZ表达上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,耐药细胞株中总YAP和磷酸化YAP表达均较亲本细胞显著上升(P<0.05)。以维替泊芬阻断耐药细胞株YAP下游通路的激活后,其耐药指数为2.98μmol/L,较未处理的Skbr3-LR耐药指数下降约4倍;其存活细胞数量明显降低,YAP表达也明显降低(P<0.05)。结论成功建立了拉帕替尼获得性耐药的乳腺癌细胞模型,其耐药机制可能与Hippo信号通路下游的关键效应因子YAP表达异常有关。

关键词：拉帕替尼乳腺癌 Hippo YAP

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依维莫司协同拉帕替尼降低HER2^+乳腺癌对拉帕替尼耐药

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基因组学与应用生物学 2020年第5期39卷 2411-2417页

作者：徐婷陈鹏郭丹黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院三腺外科重庆400016

研究依维莫司(Everolimus)联合拉帕替尼(Lapatinib)对HER2^+乳腺癌耐药细胞的影响。CCK-8法测定乳腺癌亲本细胞(skbr3)和耐药细胞(skbr3-LR)的细胞活性、半数抑制浓度(Half inhibitory concentration,IC50);CompuSyn软件计算联合作用指数(combined effect index,CI)值;流式细胞术检测对照组实验组skbr3-LR的周期;Western blotting方法检测各组AKT、m TOR、S6相关蛋白的表达量。依维莫司联合拉帕替尼使skbr3-LR对拉帕替尼的IC50从(27.13±0.3)下降到(6.79±0.04);20 nmol/L依维莫司联合5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L拉帕替尼CI指数分别为0.24367、0.27861、0.28219、0.36679、0.41667;拉帕替尼联合依维莫司组G1期细胞百分数(69.84±0.93)%显著大于对照组(52.91±1.64)%(p<0.001),也显著高于拉帕替尼组(59.77±0.52)%(p<0.001)和依维莫司组(58.73±0.64)%(p<0.001);Western blotting结果显示skbr3-LR中p-mTOR比skbr3表达上调(p<0.001),20 nmol/L依维莫司或10μmol/L拉帕替尼单独处理skbr3-LR,以及联合用药组与skbr3-LR组相比p-mTOR均有显著下调(p<0.001,p<0.01,p<0.001)。依维莫司联合拉帕替尼可协同抑制skbr3-LR增殖,降低其拉帕替尼耐药性,其作用机制部分是通过下调AKT/mTOR/S6通路实现的。

关键词：依维莫司拉帕替尼乳腺癌 mTOR

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Perilipin 2在小鼠肝脏CGI-58特异性敲除所致肝脏微泡型脂肪变性中的作用

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陆军军医大学学报 2024年第15期46卷 1701-1712页

作者：张艺馨李杰万小勤蒋孝清陈江慧邓芳李旻典张倩包鑫余张志辉陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院心血管内科代谢生物钟与心血管疾病中心重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院老年心脑血管疾病教育部重点实验室重庆400038 重庆医科大学基础医学院重庆400016 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系病理生理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全科医学科重庆400038

目的探究Perilipin 2(Plin2)在肝脏CGI-58特异性敲除所致脂肪肝的作用,并比较Plin2和Plin3在脂滴生成和脂质蓄积的作用效能。方法将20只7周龄CGI-58^(Flox/Flox)小鼠(雄鼠10只,雌鼠10只)根据性别采用完全随机分组法分为对照组(NC组,n=5... 详细信息

目的探究Perilipin 2(Plin2)在肝脏CGI-58特异性敲除所致脂肪肝的作用,并比较Plin2和Plin3在脂滴生成和脂质蓄积的作用效能。方法将20只7周龄CGI-58^(Flox/Flox)小鼠(雄鼠10只,雌鼠10只)根据性别采用完全随机分组法分为对照组(NC组,n=5,注射靶向肝脏实现过表达Cre蛋白及对照Micro-RNA的腺相关病毒)和实验组(Mi-KD组,n=5,注射靶向肝脏实现过表达Cre蛋白及靶向Plin2的Micro-RNA的腺相关病毒),记录小鼠体质量变化,检测小鼠代谢相关表型和肝脏病理学的差异,RT-qPCR检测小鼠肝脏脂质代谢和胆固醇代谢相关基因的改变;以AML-12小鼠肝细胞作为细胞模型,构建SiRNA实现AML-12细胞Plin2/Plin3敲低,Bodipy染色和酶比色法检测对比正常培养和OA诱导下Plin2/Plin3敲低后AML-12细胞脂滴生成和脂质蓄积。结果Mi-KD小鼠肝脏中的PLIN2蛋白水平降低了99%以上;Mi-KD缓解了CGI-58特异性敲除雌鼠的肝肿大(P=0.0195)和肝细胞损伤(P=0.0004),降低了组织学NAS评分(P=0.0002)和肝脏甘油三酯含量(P=0.0166),显著改善了肝脏CGI-58特异性敲除所致的肝脏微泡型脂肪变性;敲低Plin2使AML-12细胞内甘油三酯含量呈下降趋势,敲低Plin3显著降低AML-12细胞内甘油三酯含量(P=0.0014);在OA诱导下,Plin2/Plin3敲低均显著降低OA诱导的AML-12细胞内甘油三酯的蓄积(P<0.05)。结论肝脏Plin2在CGI-58敲除所致的微泡型脂肪变性的发展过程中至关重要,Plin2和Plin3均参与肝细胞脂滴生成与脂质蓄积,且Plin3的作用强于Plin2。

关键词：肝脏微泡型脂肪变性围脂滴包被蛋白2 比较鉴定基因-58 钱林-多尔夫曼综合征脂滴

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柚子皮挥发油减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用

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岭南急诊医学杂志 2021年第3期26卷 221-225页

作者：田鑫悦谢露王文艳邹鑫森赵高阳袁张莉莫燕资张波陈蒙华广西医科大学第二附属医院ICU 530007 广西医科大学基础医学院生理学教研室

目的:探讨柚子皮挥发油(PPVO)对于局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法:40只健康雄性大鼠按随机分为假手术(SH)组、模型(NS)组、甘油溶剂组(GL)组、低剂量(LP)组(10 mg/kg)和高剂量(HP)组(30mg/kg),n=8/组。SH组仅行手术操作,余各组均... 详细信息

目的:探讨柚子皮挥发油(PPVO)对于局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法:40只健康雄性大鼠按随机分为假手术(SH)组、模型(NS)组、甘油溶剂组(GL)组、低剂量(LP)组(10 mg/kg)和高剂量(HP)组(30mg/kg),n=8/组。SH组仅行手术操作,余各组均建立短暂性大脑中动脉堵塞/再灌注(tMCAO/R)模型,并于再灌注时立即腹腔注射药物。观察再灌注24 h后神经功能学评分,通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测梗死面积,HE染色、尼氏染色观察病理形态学变化,免疫荧光染色观察星形胶质细胞标志物酸性胶质纤维蛋白(GFAP)和小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白1(Iba 1)的表达情况。结果:再灌注24 h后,与NS组相比,HP组大鼠NDS明显下降,梗死面积显著减小,病理损伤改善,正常神经元明显增多,胶质细胞激活减少(P<0.05)。结论:PPVO(30mg/kg)可减轻局灶性脑缺血后病理损伤,减少梗死面积,并抑制星形和小胶质细胞的激活。

关键词：柚子皮挥发油星形胶质细胞小胶质细胞局灶性脑缺血缺血再灌注损伤

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五味子甲素协同吉西他滨抑制肝癌细胞HepG2增殖

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中国药理学通报 2020年第4期36卷 550-555页

作者：薛燕曾智锐雷珊孙远梅兰金芝张金娟杨宇石徐澍陈腾祥贵州医科大学基础医学院生理学教研室贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州省再生医学重点实验室基础医学院机能实验室临床医学院病理学教研室贵州贵阳550004

目的探究五味子甲素(deoxyschizandrin)联合吉西他滨(gemcitabin,GEM)对肝癌细胞HepG2增殖的影响及其可能的作用机制。方法CCK8法和克隆平板实验检测五味子甲素单药、GEM单药及联合用药对肝癌细胞HepG2增殖能力的影响;流式细胞术检测单... 详细信息

目的探究五味子甲素(deoxyschizandrin)联合吉西他滨(gemcitabin,GEM)对肝癌细胞HepG2增殖的影响及其可能的作用机制。方法CCK8法和克隆平板实验检测五味子甲素单药、GEM单药及联合用药对肝癌细胞HepG2增殖能力的影响;流式细胞术检测单药组及联合用药组中HepG2细胞的凋亡比例;Western blot法检测各组细胞中BCL2、BAX、pro-caspase3、cleaved-caspase3、pro-caspase9、cleaved-caspase9、β-catenin和TCF-4的表达。结果五味子甲素、GEM及联合用药对细胞HepG2的增殖均具有抑制作用,促进其凋亡,且联合用药组对HepG2细胞的作用明显强于单药组(P<0.05);Western blot结果表明,与对照组相比,五味子甲素、GEM和联合用药对pro-caspase3、pro-caspase9表达无明显影响,显著减少BCL2、β-catenin及TCF-4蛋白的表达(P<0.05),上调BAX、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白的表达(P<0.05)。其中,联合用药比单药更为显著(P<0.05)。结论五味子甲素协同GEM抑制肝癌细胞HepG2中β-catenin/TCF-4通路,进而减少细胞增殖,诱导其凋亡。

关键词：五味子甲素吉西他滨肝癌 HepG2 增殖凋亡 β-catenin/TCF4通路

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孕期酒精暴露致DNA甲基化异常对子代小鼠心脏发育相关基因表达的影响

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中国循环杂志 2020年第3期35卷 299-304页

作者：罗孝美韩笑彭昌邓玲黄丽欣遵义医科大学基础医学院生理学教研室贵州省遵义市563000 遵义医科大学附属医院小儿内科

目的:探讨DNA甲基化修饰失衡在孕期酒精暴露致子代小鼠心脏发育相关基因表达异常中的作用,为防治孕期饮酒所致的心脏发育畸形提供新思路。方法:选取24只健康昆明孕鼠按照随机数字表法等分为四组:正常组、对照组、酒精组、干预组。从孕期... 详细信息

目的:探讨DNA甲基化修饰失衡在孕期酒精暴露致子代小鼠心脏发育相关基因表达异常中的作用,为防治孕期饮酒所致的心脏发育畸形提供新思路。方法:选取24只健康昆明孕鼠按照随机数字表法等分为四组:正常组、对照组、酒精组、干预组。从孕期0.5 d^16.5 d,酒精组每日给予56%酒精(5 ml/kg)灌胃1次,干预组在上述酒精灌胃基础上给予每日1次腹腔注射DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂5-氮杂胞苷(2.5 mg/kg),对照组给予等量生理盐水灌胃和等量二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射,正常组未予任何处理。于胎龄16.5 d收集各组子代小鼠心脏进行以下检测:(1)比色法检测DNMT活性;(2)甲基化测序检测心脏核心转录因子心肌细胞增强因子2A(MEF2A)启动子区CpG岛DNA甲基化水平,实时荧光定量PCR检测MEF2A转录水平;(3)染色质免疫共沉淀(ChIP)检测MEF2A对心脏结构基因心房利钠肽(ANP)、β肌球蛋白重链(β-MHC)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)的调控作用;(4)蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心脏结构基因ANP、β-MHC及cTnT的蛋白表达水平。结果:(1)比色法结果显示,酒精组及干预组胎鼠心肌组织中DNMT活性较对照组和正常组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);(2)心脏核心转录因子MEF2A启动子区CpG岛DNA甲基化水平在酒精组及干预组较对照组和正常组均显著降低(P<0.05);(3)实时荧光定量PCR结果显示,心脏核心转录因子MEF2A转录水平在酒精组及干预组较对照组和正常组显著升高(P<0.05);(4)ChIP结果表明,心脏核心转录因子MEF2A可结合心脏结构基因ANP、β-MHC及cTnT启动子区域直接参与上述基因的表达调控;(5)Western blot结果表明,酒精组和干预组小鼠心肌组织中ANP、β-MHC及cTnT的蛋白表达水平较对照组和正常组显著升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:酒精介导的DNA低甲基化可能参与了孕期酒精暴露所致的子代心脏发育相关基因表达异常。

关键词： DNA甲基化心脏核心转录因子胎鼠酒精

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鼓室内显微注射慢病毒转染小鼠耳蜗的技术改良

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听力学及言语疾病杂志 2020年第2期28卷 172-176页

作者：赵若轩芦冬博梁瑞杨若函屈东昊林宇涵许涛刘双月王爱梅锦州医科大学基础医学院生理学教研室锦州121000 锦州医科大学生命科学研究院

目的改良经鼓室内显微注射慢病毒转染小鼠耳蜗的实验技术。方法将30只BALB/c小鼠随机分为3组:1μl/min组(12只)和20μl/min组(12只)小鼠经腹侧入路鼓室内分别以1μl/min和20μl/min的速度显微注射5μl的携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒(LV... 详细信息

目的改良经鼓室内显微注射慢病毒转染小鼠耳蜗的实验技术。方法将30只BALB/c小鼠随机分为3组:1μl/min组(12只)和20μl/min组(12只)小鼠经腹侧入路鼓室内分别以1μl/min和20μl/min的速度显微注射5μl的携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒(LV3-GFP),人工外淋巴液组(6只)以1μl/min速度注入等量外淋巴液。于手术前、术后1、3、7天各组动物行听性脑干反应(ABR)测试后,进行耳蜗基底膜铺片荧光染色和耳蜗切片免疫荧光染色,并在激光共聚焦显微镜下观察慢病毒转染情况。结果各组小鼠术后1天ABR阈值均较术前明显升高(P<0.01),1μl/min组和人工外淋巴液组术后3天ABR阈值恢复正常,20μl/min组术后7天恢复正常。慢病毒转染后,1μl/min组术后1天在耳蜗毛细胞观察到慢病毒阳性表达,术后3天在耳蜗Corti器、螺旋神经节及血管纹处均可见阳性表达;术后1、3、7天耳蜗中回外毛细胞转染率平均为98.3%、98.1%和98.7%,而20μl/min组术后1天未见明显阳性表达,术后1、3、7天耳蜗中回外毛细胞的转染率分别为4.2%、20.2%和47.3%。结论鼓室内显微慢速注射法可将携带目的基因的慢病毒高效转染至耳蜗组织并表达。

关键词：慢病毒小鼠耳蜗基因转染显微注射

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衰老性骨质疏松症小鼠胫骨组织差异表达miRNA筛选及生物信息学分析

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山东医药 2021年第32期61卷 5-9页

作者：黄高翔韦灿燊苏晓雪黎婧郭蓁黎静广西医科大学基础医学院生理学教研室南宁530021 广西医科大学基础医学院人体解剖学教研室广西医科大学基础医学院转化医学研究中心长寿与老年相关疾病教育部重点实验室

目的筛选衰老性骨质疏松症小鼠胫骨组织中差异表达的miRNA,并进行生物信息学分析。方法雄性BALB/c小鼠40只,随机分为衰老组和对照组各20只,衰老组通过D-半乳糖皮下注射法建立衰老性骨质疏松症小鼠模型,对照组皮下注射等量PBS。造模3个月... 详细信息

目的筛选衰老性骨质疏松症小鼠胫骨组织中差异表达的miRNA,并进行生物信息学分析。方法雄性BALB/c小鼠40只,随机分为衰老组和对照组各20只,衰老组通过D-半乳糖皮下注射法建立衰老性骨质疏松症小鼠模型,对照组皮下注射等量PBS。造模3个月后,分别取两组小鼠胫骨组织,采用miRNA芯片技术分析miRNA表达谱变化,筛选两组差异表达的miRNA。利用DAVID在线数据库对差异表达miRNA进行GO分析和KEGG通路分析,采用STRING在线数据库及Cytospace软件完成miRNA-靶基因—蛋白网络相互作用分析。结果衰老组较对照组表达上调的miRNA有8个,分别为miR-5617-5p、miR-10a-3p、miR-3071-5p、miR-16-2-3p、miR-125b-1-3p、miR-344i、miR-181a-1-3p、miR-1934-3p;表达下调12个,分别为miR-211-3p、miR-31-3p、miR-5619-3p、miR-370-5p、miR-450b-3p、miR-96-5p、miR-5136、miR-344d-2-5p、miR-376b-3p、miR-411-5p、miR-15b-5p、miR-499-3p。靶基因主要在酶结合、蛋白结合和DNA结合等方面发挥作用,涉及细胞连接、液泡和突触等细胞组分,参与蛋白质定位、蛋白质转运和信号调节,调节MAPK信号通路、FoxO信号通路、Ras信号通路等。miR-96-5p、miR-5617、miR-15b、miR-3071与靶基因MAP2K1、UBE2G1、P4HB、VDAC1、CD164有紧密联系,这些靶基因编码蛋白具有相互作用关系。结论miRNA在衰老性骨质疏松症的发生发展过程中可能发挥重要作用,其中miR-96-5p、miR-5617、miR-15b、miR-3071可能通过调控MAP2K1、UBE2G1、P4HB、VDAC1、CD164等参与衰老性骨质疏松症的发生。

关键词：衰老骨质疏松症 miRNA 生物信息学信号通路

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