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长链非编码RNA Sox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制

中华行为医学与脑科学杂志 2020年第9期29卷 785-791页

作者：陈鹏李龙刘春华张昭强孙宪昌山东第一医科大学(山东省医学科学院)基础医学院生理学教研室泰安271016 泰安市肿瘤防治院肿瘤外科 271016

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)Sox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤及PI3K/Akt通路的影响。方法选取大鼠嗜铬神经瘤细胞株(PC12),利用Aβ1-42对PC12细胞进行处理,建立AD的细胞模型。将Aβ1-42诱导前的PC12细胞设为空白组;将Aβ1-42... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)Sox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤及PI3K/Akt通路的影响。方法选取大鼠嗜铬神经瘤细胞株(PC12),利用Aβ1-42对PC12细胞进行处理,建立AD的细胞模型。将Aβ1-42诱导前的PC12细胞设为空白组;将Aβ1-42诱导后的PC12细胞分为control组、Sox2OT过表达(p-Sox2OT)组、p-Sox2OT空载体(p-NC)组、抑制Sox2OT表达(si-Sox2OT)组和si-Sox2OT空载体(si-NC)组。使用噻唑蓝(MTT)方法对细胞的增殖活性进行检测;采用流式细胞术对转染后的细胞周期和凋亡率进行检测;采用Western blot检测PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果MTT结果显示,与空白组(99.67±10.50)相比,control组(29.33±5.51)的细胞增殖率显著降低(t=10.27,P<0.05)。RT-qPCR结果显示,与control组(0.52±0.06)相比,p-Sox2OT组(2.19±0.16)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著升高(t=16.93,P<0.05),si-Sox2OT组(0.22±0.02)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著下降(t=15.28,P<0.05);与p-NC组(0.53±0.12)相比,p-Sox2OT组(2.19±0.16)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著升高(t=16.25,P<0.05);与si-NC组(0.51±0.09)相比,si-Sox2OT组(0.22±0.02)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著下降(t=16.93,P<0.05);control组与p-NC组以及si-NC组间的差异无统计学意义(P>0.05)。此外,p-Sox2OT组细胞的增殖能力(145.00±5.12)显著高于si-Sox2OT组(23.33±4.93)、control组(55.00±5.00)、si-NC组(57.33±8.51)以及p-NC组(56.00±5.57)(t=29.65,21.78,27.55,21.35,均P<0.05)。Control组与p-NC组以及si-NC组间细胞增殖率的差异不具有统计学意义(P>0.05)。细胞周期检测实验显示,p-Sox2OT组G1期的细胞数量显著低于control组和p-NC(t=9.80,8.57;均P<0.05),而p-Sox2OT组G2期的细胞数量与control组和p-NC组相比却显著升高(t=11.02,10.25;均P<0.05);si-Sox2OT组G1期的细胞数量显著高于control组和si-NC组(t=8.22,3.11,均P<0.05),而G2期的细胞数量与control组和si-NC组相比却显著下降(t=6.32,5.33;均P<0.05);control组与p-NC组以及si-NC组间的细胞周期差异无统计学意义(均P>0.05)。在S期中,只有p-Sox2OT组与control组之间的差异有统计学意义(t=1.84,P<0.05)。p-Sox2OT组细胞凋亡率[(3.66±0.26)%]低于si-Sox2OT组[(14.25±0.80)%]、control组[(8.46±0.44)%]、si-NC组[(8.78±0.44)%]以及p-NC组[(8.40±0.21)%](t=21.81,16.27,20.32,21.35,均P<0.05)。Control组与p-NC组以及si-NC组间的细胞凋亡率差异不具有统计学意义(P>0.05)。Western blot结果显示,p-Sox2OT组中p-PI3K和p-Akt蛋白的表达明显高于p-NC(P<0.05);与si-NC组相比,si-Sox2OT组PC12细胞中p-PI3K和p-Akt蛋白的表达显著下降(P<0.05)。结论lncRNA Sox2OT可以通过调控PI3K/Akt通路促进Aβ1-42诱导的PC12细胞的增殖,抑制细胞的凋亡。

关键词：长链非编码RNA Sox2OT 阿尔茨海默病 PI3K/Akt Aβ1-42

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肝细胞癌组织中GRP78和p-PERK蛋白的表达及其与临床病理特征的关系

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贵州医科大学学报 2021年第5期46卷 517-523页

作者：曾经章杨勤谢汝佳陆爽赵雪珂李璨贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院感染科贵州贵阳550004

目的观察人类肝细胞癌(HCC)组织中内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)蛋白的表达变化及其与临床病理特征的关系。方法收集手术切除的HCC组织(HCC组)及其癌旁组织(癌旁组)标本各40例,... 详细信息

目的观察人类肝细胞癌(HCC)组织中内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)蛋白的表达变化及其与临床病理特征的关系。方法收集手术切除的HCC组织(HCC组)及其癌旁组织(癌旁组)标本各40例,HCC组根据病理分化类型分为高(n=12)、中(n=15)及低分化组(n=13),收集HCC组患者的年龄、性别、术前甲胎蛋白(AFP)水平、肿瘤大小及病理分化类型等临床特征资料;采用免疫组织化学法检测2组标本GRP78和p-PERK的阳性定性表达,Western blot法检测GRP78和p-PERK蛋白的半定量表达,采用Pearson相关分析GRP78和p-PERK蛋白的表达与临床病理特征的关系。结果HCC组标本中GRP78和p-PERK蛋白的阳性染色呈现弥散分布的黄褐色颗粒,高、中、低分化组标本中GRP78和p-PERK蛋白的阳性表达均分别较癌旁组增高,且阳性表达与HCC分化程度有关(P<0.05);与癌旁组相比,高、中、低分化组中GRP78、p-PERK表达水平增高(P<0.05),且GRP78、p-PERK的蛋白表达水平和肿瘤的分化程度有关(P<0.05);GRP78阳性表达率与AFP水平、肝脏肿瘤大小有关,AFP高水平及肿瘤直径增大,表达率增高(P<0.05);随着肝癌的分化程度降低,GRP78、p-PERK蛋白的阳性表达率逐渐增高(P<0.05);GRP78和p-PERK蛋白表达之间呈正相关(r=0.482,P=0.012)。结论GRP78和p-PERK蛋白在HCC组织中的表达高于癌旁组织,且与HCC分化程度有关,该两项指标可望成为临床检测HCC及判断预后的肿瘤标志物。

关键词：未折叠蛋白反应肝细胞癌内质网应激葡萄糖调节蛋白78 蛋白激酶R样内质网激酶临床病理因素

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芥子碱硫氰酸盐抑制胶质瘤T98细胞的增殖、迁移与侵袭并促进其凋亡

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肿瘤 2020年第10期40卷 687-695页

作者：谢明曾智锐陈鹏周璐朱俊德贵州医科大学基础医学院人体解剖学教研室贵州贵安550025 贵州医科大学基础医学院生理学教研室贵州贵安550025 贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州贵安550025 贵州医科大学临床医学院贵州贵阳550004

目的:探讨芥子碱硫氰酸盐(sinapine thiocyanate,ST)对人胶质瘤T98细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭,以及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:以不同浓度(0、50、100和200μmol/L)的ST处理人胶质瘤T98细胞,分别采用CCK-8法和FC... 详细信息

目的:探讨芥子碱硫氰酸盐(sinapine thiocyanate,ST)对人胶质瘤T98细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭,以及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:以不同浓度(0、50、100和200μmol/L)的ST处理人胶质瘤T98细胞,分别采用CCK-8法和FCM法检测不同浓度的ST对T98细胞增殖率和凋亡率的影响。划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测T98细胞的迁移和侵袭能力。计算机分子对接法分析ST与Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin的结合情况。最后采用蛋白质印迹法检测不同浓度ST处理后T98细胞中β-catenin蛋白的表达水平、凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达水平,以及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的表达水平。结果:不同浓度的ST能抑制T98细胞的增殖,并诱导细胞凋亡(P值均<0.05);ST还能明显抑制胶质瘤T98细胞的迁移和侵袭(P值均<0.05)。ST能与β-catenin的活性口袋稳定结合。ST可明显抑制T98细胞中β-catenin、Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平,而上调Bax蛋白的表达水平(P值均<0.05)。结论:ST可能通过结合Wnt/β-catenin信号通路关键分子β-catenin,抑制胶质瘤T98细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词：神经胶质瘤芥子碱硫氢酸盐细胞凋亡细胞运动 Wnt/β-catenin信号通路

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细胞色素P4502A13野生型/突变体稳定表达Flp-In^(TM)CHO细胞系的建立

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郑州大学学报（医学版） 2021年第2期56卷 191-195页

作者：郑丹丹李靖王永林李勇军刘亭贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵阳550025 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550025 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004

目的:构建稳定表达细胞色素P4502A13(CYP2A13)野生型(CYP2A13*1)和5种突变体的Flp-In^(TM)CHO细胞系。方法:构建CYP2A13野生型、各突变体的pcDNA5/FRT重组质粒。将pcDNA5-CYP2A13*1、*2、*5、*6、*8和*9重组质粒分别转染至Flp-In^(TM)CHO细胞中,用实时荧光定量PCR、Western blot和黄曲霉毒素B1(AFB1)细胞毒性实验检测转染细胞中CYP2A13表达量及其活性,筛选稳定表达CYP2A13野生型和各突变体的Flp-In^(TM)CHO细胞。结果:和转染pcDNA5/FRT空质粒的Flp-In^(TM)CHO细胞相比,转染各CYP2A13野生型和各突变体的CHO细胞中CYP2A13 mRNA和蛋白表达水平增加,对AFB1毒性敏感度增加(P<0.05)。结论:成功建立了稳定表达CYP2A13*1、*2、*5、*6、*8和*9 Flp-In^(TM)CHO细胞系。

关键词：细胞色素P4502A13 黄曲霉毒素B1 突变体稳定表达 Flp-In^(TM)CHO细胞

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ESP虚拟仿真在机能学实验教学中的应用

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基础医学教育 2021年第1期23卷 62-63页

作者：郭建红张杨杨艳萍刘清华林茂辉山西医科大学基础医学院病理生理学教研室太原030001 上海梦之路数字科技有限公司

文章通过ESP虚拟仿真课程-急性肺水肿的开放式整合实验教学在急性肺水肿实验教学中的实施,论述了ESP虚拟仿真课程在实验教学中的应用和优势,可辅助实施早临床的医学生培养理念,实现基础知识的临床拓展,促进医学生临床思维的培养。

关键词：机能学实验教学 ESP 虚拟仿真

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复合应激性ED大鼠及伊木萨克片干预后阴茎组织差异表达蛋白的生物信息学分析

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中华男科学杂志 2019年第12期25卷 1066-1076页

作者：马文静张盼盼斯依提·阿木提毛吾兰·买买提依明阿地力江·伊明西尔艾力·买买提新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室刘文娟新疆医科大学中心实验室新疆医科大学基础医学院人体解剖教研室新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室

目的:利用iTRAQ联合LC-MS-MS技术和IPA生物信息平台寻找复合冷应激ED大鼠阴茎组织中特异性蛋白标志物以及药物干预靶点蛋白,并探讨该病的发生发展的分子机制。方法:取80只性功能正常的雄性大鼠造模,建立复合应激大鼠模型,筛选ED大鼠后,... 详细信息

目的:利用iTRAQ联合LC-MS-MS技术和IPA生物信息平台寻找复合冷应激ED大鼠阴茎组织中特异性蛋白标志物以及药物干预靶点蛋白,并探讨该病的发生发展的分子机制。方法:取80只性功能正常的雄性大鼠造模,建立复合应激大鼠模型,筛选ED大鼠后,分为正常组(N)(n=10)、ED组(n=15)和伊木萨克片干预组(伊木萨克组)(n=15)共3组,取阴茎组织,提取蛋白质,进行iTRAQ标记结合LC-MS-MS蛋白质组学筛查与鉴定,应用IPA分析平台对大鼠阴茎组织差异蛋白进行生物信息学分析。结果:ED组中获得48种差异表达蛋白,伊木萨克组获得29种差异表达蛋白。IPA分析ED组差异表达蛋白质中与血管内皮功能相关蛋白质18种;与平滑肌活动相关蛋白质5种;与炎症相关蛋白质4种;参与的生物学过程主要集中在糖代谢和酒精分解代谢等;涉及的通路主要是糖代谢通路、钙信号通路和RXR激活通路等。伊木萨克组差异表达蛋白质中与血管内皮功能相关蛋白质5种;与平滑肌活动相关蛋白质1种;与炎症相关蛋白质4种;参与的生物学过程主要为糖代谢、血管扩张和急性期反应等;涉及的信号通路为糖代谢通路、RXR激活通路和急性期反应信号通路等。ED组和伊木萨克组差异蛋白中共获得与ED疾病相关的标志物7种:胶原α-1(III)链(COL3α1)、胶原α-1(I)链(COL1α1)、胶原α-2(I)链(COL1α2)、T-激肽原-1(MAP1)、甘油醛-3磷酸脱氢酶(GAPDH)、双链蛋白聚糖(BGN)以及肌球蛋白-11(MYH11)。结论:阴茎组织中血管内皮及平滑肌功能改变可能是复合应激性ED发生发展的关键机制,并与炎症相关;获得的差异蛋白通过相互作用以及参与相关的信号通路影响阴茎的正常勃起,上述7种蛋白可作为复合应激ED大鼠阴茎组织标志物,MAP1、GAPDH、BGN和MYH11蛋白可能可以作为伊木萨克片药物干预的靶点蛋白。

关键词：环境激素冷应激勃起功能障碍 IPA生物信息学分析组织标志物伊木萨克片

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基于网络药理学和分子对接探讨蒙药额尔敦-乌日勒治疗癫痫的潜在作用机制

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亚太传统医药 2022年第2期18卷 198-204页

作者：于凯卜凡李鹏苏秦夏蕾薛金晔郝雷内蒙古医科大学第一临床医学院内蒙古呼和浩特010050 内蒙古医科大学附属医院儿科内蒙古呼和浩特010050 内蒙古医科大学内蒙古临床医学院内蒙古呼和浩特010110 内蒙古医科大学基础医学院病理生理学教研室内蒙古呼和浩特010110

利用网络药理学筛选额尔敦-乌日勒抗癫痫的作用靶点及潜在作用机制,为临床治疗癫痫提供理论依据。从有关文献中确定额尔敦-乌日勒的有效成分,采用TCMSP数据库筛选出额尔敦-乌日勒的有效活性成分及靶标;通过TTD、OMIM数据库筛选癫痫的预... 详细信息

利用网络药理学筛选额尔敦-乌日勒抗癫痫的作用靶点及潜在作用机制,为临床治疗癫痫提供理论依据。从有关文献中确定额尔敦-乌日勒的有效成分,采用TCMSP数据库筛选出额尔敦-乌日勒的有效活性成分及靶标;通过TTD、OMIM数据库筛选癫痫的预测靶点,将两者靶点进行映射交集,利用STRING数据库构建蛋白互作网络图并筛选出47个核心靶点;再通过AmiGO2平台进行GO(Gene Ontology)生物过程和KEGG信号通路富集分析,利用Cytoscape 3.7.2软件构建活性成分-关键靶点-通路网络图,分子对接显示木犀草素、3-甲基环十五烷酮对MAOA、MMP9、EGFR等具有较强的亲和力。网络药理学研究提示,额尔敦-乌日勒通过降低表皮生长因子(EGF)的mRNA表达,促进癫痫凋亡因子表达和增强脑内抑制性神经递质的表达,通过多途径抑制脑内神经元的同步化放电,从而达到治疗癫痫的目的。通过探讨蒙药额尔敦-乌日勒治疗癫痫多靶点多通路的作用特点,为额尔敦-乌日勒治疗癫痫的下一步研究及临床应用提供理论依据。

关键词：额尔敦-乌日勒民族医药癫痫网络药理学分子对接

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左室收缩末期生物力学变化与舒张性心衰发病机制的相关性

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医用生物力学 2020年第6期35卷 744-749页

作者：桂艳霞司效东内蒙古科技大学包头医学院第二附属医院科研科内蒙古包头014030 内蒙古医科大学基础医学院病理生理学教研室呼和浩特010100

目的分析原发性高血压患者左心室收缩末期最大心肌劲度(max Eav)、最大弹性模量(E_(max))与二尖瓣环舒张早期与心房收缩期峰值速度比(E/A)的相关性。方法选取298例原发性高血压患者作为研究对象,计算患者的左室质量指数(left ventricula... 详细信息

目的分析原发性高血压患者左心室收缩末期最大心肌劲度(max Eav)、最大弹性模量(E_(max))与二尖瓣环舒张早期与心房收缩期峰值速度比(E/A)的相关性。方法选取298例原发性高血压患者作为研究对象,计算患者的左室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)和相对室壁厚度(relative wall thickness,RWT),并基于LVMI和RWT指标分成4组,分别为正常结构(left ventricular normal,LVN)、向心性重构(left ventricular concentric remodeling,LVCR)、离心性肥厚(left ventricular eccentric hypertrophy,LVEH)、向心性肥厚(left ventricular concentric hypertrophy,LVCH)。另选取115名健康人入对照组。对入选者进行超声心动图诊断,分析max Eav、E_(max)与E/A之间的相关性。结果LVCR、LVEH、LVCH 3组研究对象max Eav、E_(max)与E/A均呈现负相关。LVCR组、LVCH组与对照组间E/A比较,差异具有统计学意义。与对照组相比,高血压各组max Eav、E_(max)均减小,差异具有统计学意义。结论max Eav、E_(max)是判断左室舒张功能更为敏感且简便易得的指标。分析高血压左室重构合并舒张功能异常患者max Eav、E_(max)变化,探索舒张性心衰的发病机制,可以为今后预防及治疗舒张性心衰提供理论依据。

关键词：最大心肌劲度最大弹性模量原发性高血压左心室舒张功能

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经嗅觉系统预测和治疗神经精神性疾病的研究进展

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中国细胞生物学学报 2020年第11期42卷 2087-2096页

作者：方圆媛许淑婕陈子豪苗雪萌吴仟王惠缪双大黄昱程陈梓润黄智慧徐星星温州医科大学基础医学院生理学教研室温州325035 温州医科大学精神医学学院温州325035 杭州师范大学医学院杭州311121

人类嗅觉系统能感知大量化学物质。嗅觉障碍是一种常见的神经系统症状,且其患病率和严重性随年龄增长而显著增加。嗅觉系统由于缺乏血脑屏障,易成为异种生物的侵袭入口,但同样也是诊断和治疗应用的理想解剖学窗口。许多精神性疾病和神... 详细信息

人类嗅觉系统能感知大量化学物质。嗅觉障碍是一种常见的神经系统症状,且其患病率和严重性随年龄增长而显著增加。嗅觉系统由于缺乏血脑屏障,易成为异种生物的侵袭入口,但同样也是诊断和治疗应用的理想解剖学窗口。许多精神性疾病和神经退行性疾病的发病早期都能检测到嗅觉障碍,嗅觉能力的减退可被认为是某些神经退行性疾病认知能力下降的前兆。嗅觉障碍的高患病率及评估的简便性和低成本使其在临床应用方面具有极大的前景。了解嗅觉障碍与神经精神性疾病之间的联系有助于早期诊断和预测疾病进展。该文就嗅觉系统的特点、嗅觉障碍与神经精神性疾病的发病联系及可能的治疗方法作一简要综述,旨在为神经精神性疾病的早期诊断和治疗提供新的思路。

关键词：嗅觉障碍神经精神性疾病鼻内递送芳香疗法细胞移植

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琥珀酸脱氢酶抑制剂对内毒素血症大鼠心肌组织内琥珀酸代谢和炎性损伤的影响

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第三军医大学学报 2020年第19期42卷 1938-1943页

作者：漆波张翕珠江飞张鹤蔡佳君李国智江油市九〇三医院重症医学科四川江油621700 山西医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室太原030001

目的探讨琥珀酸脱氢酶抑制剂对内毒素血症大鼠心肌组织内琥珀酸代谢和炎性损伤的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠40只,体质量200~220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=10):正常对照组(C组)、琥珀酸脱氢酶抑制剂(丙二酸二甲酯)... 详细信息

目的探讨琥珀酸脱氢酶抑制剂对内毒素血症大鼠心肌组织内琥珀酸代谢和炎性损伤的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠40只,体质量200~220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=10):正常对照组(C组)、琥珀酸脱氢酶抑制剂(丙二酸二甲酯)对照组(DC组)、内毒素血症组(E组)和抑制剂+内毒素血症组(DE组)。E组和DE组腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)20 mg/kg建立内毒素血症模型,C组和DC组给予等容量生理盐水。LPS处理4 h后,DC组和DE组大鼠腹腔注射琥珀酸脱氢酶抑制剂160 mg/kg,C组和E组给予等容量生理盐水。采用ELISA检测血清肌钙蛋白I(cTnI)浓度以及心肌组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的含量。采用琥珀酸含量检测试剂盒检测心肌组织内琥珀酸的含量。采用Western blot法和免疫荧光法检测琥珀酸脱氢酶的表达。采用Western blot检测心肌组织核因子κB抑制蛋白-α(inhibitor of NF-κB,IκB-α)磷酸化程度和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达。结果与C组比较,E组和DE组大鼠血清cTnI浓度、心肌组织琥珀酸、琥珀酸脱氢酶、IκB-α磷酸化程度、HIF-α、TNF-α和IL-1β水平显著升高(P<0.05)。与E组比较,DE组大鼠血清cTnI浓度及心肌组织琥珀酸、IκB-α磷酸化程度、HIF-α、TNF-α和IL-1β水平显著降低(P<0.05)。结论内毒素血症大鼠心肌组织内琥珀酸和琥珀酸脱氢酶含量显著升高,抑制琥珀酸脱氢酶活性可有效降低琥珀酸的堆积,进而可能通过抑制NF-κB和HIF-1α通路降低心肌组织内炎性细胞因子的产生。

关键词：琥珀酸琥珀酸脱氢酶内毒素血症丙二酸二甲酯心肌损伤

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