检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉

作者：崔映宇同济大学医学院再生医学系细胞生物学教研室

大学课堂教学不仅承担着传承知识、更肩负着创新知识的使命。而创新知识的前提是教育主体必须要有创新性思维。实际上,与其说"创新性或原创性思维",毋宁说"批判性思维"更准确,因为任何创新性思维乃至成果的获得,都... 详细信息

大学课堂教学不仅承担着传承知识、更肩负着创新知识的使命。而创新知识的前提是教育主体必须要有创新性思维。实际上,与其说"创新性或原创性思维",毋宁说"批判性思维"更准确,因为任何创新性思维乃至成果的获得,都是基于前人认知基础,对相关成果批判性继承并进一步发展和提高的智慧结晶。批判性思维泛指能理性决定相信什么或不相信什么的一种思维,

关键词：批判性思维有丝分裂减数分裂文理融通式授课法求"同"与求"异"

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GMFB在高糖处理的Müller细胞中的表达及其对Müller细胞的影响

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神经解剖学杂志 2017年第5期33卷 511-518页

作者：姜晓曼樊峻晟崔莲朱彤张介平王娟高芙蓉田海滨金彩霞徐晶莹张敬法徐国彤吕立夏同济大学医学院再生医学系生物化学与分子生物学教研室上海第十人民医院眼科上海200092

目的:利用高糖处理Müller细胞,研究高糖条件下胶质细胞成熟因子B(glia maturation factor-β,GMFB)的表达情况和GMFB对Müller细胞的影响,揭示GMFB细胞在糖尿病视网膜病变中可能的作用机制,为糖尿病视网膜病变的治疗提供新的... 详细信息

目的:利用高糖处理Müller细胞,研究高糖条件下胶质细胞成熟因子B(glia maturation factor-β,GMFB)的表达情况和GMFB对Müller细胞的影响,揭示GMFB细胞在糖尿病视网膜病变中可能的作用机制,为糖尿病视网膜病变的治疗提供新的策略。方法:(1)用25mmol/L葡萄糖处理Müller细胞0,1,2,4和6 h,采用Western Blot检测GMFB的表达;(2)用自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)感染Müller细胞后,1μg/ml重组蛋白GMFB处理Müller细胞0,2,4,8,12 h,采用Western Blot和免疫荧光检测自噬情况;(3)1μg/ml GMFB处理Müller细胞24 h为实验组,以未处理组作为对照组,进行RNAseq,检测其基因差异表达谱,选取其中表达差异大于1.5倍且P<0.05的基因作为差异表达的基因,对其进行基因本体论(gene ontology,GO)分析及京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。结果:(1)经高糖处理的Müller细胞早期出现GMFB表达上调,以2 h处理组的GMFB上调最为显著,提示高糖刺激早期能引起Müller细胞的GMFB表达升高;(2)重组蛋白GMFB处理Müller细胞后,Western Blot在第4 h检测到自噬被诱导,但很短暂。我们在24 h用免疫荧光检测,没有发现红绿荧光强度变化,提示双标自噬系统检测未检测到自噬发生,可能与不同检测方法的敏感性不同有关。(3)对GMFB处理24 h的Müller细胞抽提总RNA,进行RNAseq检测,显示在被检测的14411个基因中,实验组和正常组间有显著差异表达的基因有152个。与对照组相比,实验组基因表达显著上调的有103个,下调的有44个。通过GO分析表明,GMFB与细胞代谢、细胞催化等生物过程相关。KEGG分析进一步发现GMFB与细胞黏附分子、轴突导向和胞质DNA感受通路等多条信号通路密切相关。同时,炎症基因IL-33表达降低,提示GMFB有神经保护的作用。结论:GMFB在高糖诱导的Müller细胞中表达明显上调,说明GMFB可能影响细胞间连接,参与炎症反应信号通路等。该工作为理解GMFB在糖尿病视网膜病变中的作用机制提供了有益的线索。GMFB在糖尿病视网膜病变的作用机制需要进一步验证。

关键词：高血糖胶质细胞成熟因子B Müller细胞

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生命科学整合实验课程建设与实践

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中华医学教育探索杂志 2013年第9期12卷 879-881页

作者：吕立夏李姣邵志华李丽徐磊李思光彭鲁英徐国彤同济大学医学院再生医学系生物化学教研室上海200092 细胞生物学教研室遗传学教研室

生命科学综合实验面向医学生开设，融合细胞生物学、生物化学、遗传学、分子生物学、分子遗传学、免疫学等学科知识与技能。同济大学医学院2010年起实施以课程整合为特点的新课程体系，现从实验教学理念、教学内容、教学方法、师资队伍... 详细信息

生命科学综合实验面向医学生开设，融合细胞生物学、生物化学、遗传学、分子生物学、分子遗传学、免疫学等学科知识与技能。同济大学医学院2010年起实施以课程整合为特点的新课程体系，现从实验教学理念、教学内容、教学方法、师资队伍等方面探讨实施“整合生命科学”实验教学课程的效果及意义。

关键词：生命科学实验课程教学改革

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学生批判性思维能力在细胞生物学教学过程中的培养(Ⅰ)-求"同"与求"异":以"有丝分裂"与"减数分裂"的比较为倒

学生批判性思维能力在细胞生物学教学过程中的培养(Ⅰ)-求"同"与...

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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：崔映宇同济大学医学院再生医学系细胞生物学教研室中国上海200092

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TMEFF2基因对人胚肾细胞生物学行为的影响

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同济大学学报（医学版） 2019年第6期40卷 801-808页

作者：常换换李姣贾松许洁吕立夏徐磊同济大学医学院再生医学系生物化学与分子生物学教研室

目的探究TMEFF2基因对人胚肾细胞生物学行为的影响及可能的机制。方法构建基因低表达载体shRNA-TMEFF2,将实验组shRNA-TMEFF2、对照组NC-TMEFF2的DNA分别转染进入HEK293细胞;采用qPCR和Western印迹法检测TMEFF2的表达;用CCK-8检测细胞... 详细信息

目的探究TMEFF2基因对人胚肾细胞生物学行为的影响及可能的机制。方法构建基因低表达载体shRNA-TMEFF2,将实验组shRNA-TMEFF2、对照组NC-TMEFF2的DNA分别转染进入HEK293细胞;采用qPCR和Western印迹法检测TMEFF2的表达;用CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;用RNA-seq分析TMEFF2基因低表达对HEK293细胞基因表达谱的影响;划痕法和Transwell法检测细胞迁移、侵袭能力的变化。结果实验组中mRNA及蛋白水平明显降低;细胞增殖能力显著降低;细胞周期阻滞在G1期且凋亡率增高;细胞迁移、侵袭的能力均受到抑制,差异均具有统计学意义(P均<0.05);RNA-seq显示实验组共有4769个基因表达差异有统计学意义,其中2355个基因上调,占49.4%,2414个基因下调,占50.6%。结论 TMEFF2基因低表达能抑制HEK293细胞的增殖,抑制HEK293细胞迁移、侵袭的能力,可能促进细胞的凋亡,其作用机制可能与RGCC及ADGRL1-FLRT信号通路有关。

关键词： TMEFF2基因 HEK293 增殖细胞周期凋亡迁移

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EET在人体细胞蛋白互作研究中的应用

EET在人体细胞蛋白互作研究中的应用

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细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉

作者：崔映宇 Jung-Sik Kim Todd Waldman 同济大学医学院再生医学系细胞生物学教研室乔治城大学医学院隆巴迪综合癌症研究中心

利用腺病毒介导的人体细胞基因打靶技术(human somatic cell gene targeting),以工具细胞人HCT116细胞为模型,给感兴趣的靶基因ubr4第一个外显子的起始密码子(ATG)后成功地敲入(knock in)一个FLAG的编码序列,进行内源表位标记(endogenou... 详细信息

利用腺病毒介导的人体细胞基因打靶技术(human somatic cell gene targeting),以工具细胞人HCT116细胞为模型,给感兴趣的靶基因ubr4第一个外显子的起始密码子(ATG)后成功地敲入(knock in)一个FLAG的编码序列,进行内源表位标记(endogenous epitope tag,EET),建立HCT116 ubr4 flag KI细胞系;利用anti-FLAG抗体,结合IP/MS技术,筛选出与UBR4蛋

关键词： EET 人体细胞基因打靶基因敲入 IP/MS分析蛋白互作分析

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美国加州大学洛杉矶分校医学整合课程的启示

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基础医学教育 2014年第9期16卷 744-746页

作者：吕立夏李国霞李姣邵志华徐磊徐国彤同济大学医学院再生医学系生物化学与分子生物学教研室上海200072 天津医科大学国际医学院

来华留学生医学教育已经成为除汉语语言外的第二大专业,教育部-美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)医学教育项目主要是加强来华留学医学英语授课师资队伍的建设,包括对教师进行教学理念、整合课程及先进的教学方式的培训。课程整合是医学教... 详细信息

来华留学生医学教育已经成为除汉语语言外的第二大专业,教育部-美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)医学教育项目主要是加强来华留学医学英语授课师资队伍的建设,包括对教师进行教学理念、整合课程及先进的教学方式的培训。课程整合是医学教育改革的趋势。文章将对医学整合课程的背景、UCLA的整合课程进行介绍,体会到高质量的师资队伍及强有力的顶层设计是实施整合课程的有效的保证。

关键词：课程整合师资队伍顶层设计

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HSPA13在ARPE19细胞氧化应激中的作用

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同济大学学报（医学版） 2019年第5期40卷 554-562页

作者：李梦雯吕亚莉徐国彤吕立夏同济大学医学院再生医学系生物化学与分子生物学教研室上海200092 同济大学附属第十人民医院眼科上海200072

目的探讨HSPA13在ARPE19细胞氧化应激中的作用。方法采用CCK8法检测不同浓度H2O2对ARPE19细胞活力的影响;Western印迹法和免疫荧光检测H2O2对HSPA13表达的影响;CCK8法检测HSPA13的表达水平对氧化应激诱导的细胞活力的影响;过表达或siRN... 详细信息

目的探讨HSPA13在ARPE19细胞氧化应激中的作用。方法采用CCK8法检测不同浓度H2O2对ARPE19细胞活力的影响;Western印迹法和免疫荧光检测H2O2对HSPA13表达的影响;CCK8法检测HSPA13的表达水平对氧化应激诱导的细胞活力的影响;过表达或siRNA干扰HSPA13后,分别检测氧化应激相关指标和促炎因子的分泌;RNA测序分析空载组和HSPA13干扰组差异表达的基因,并进行GO富集及KEGG信号通路分析。结果CCK8法结果显示,与H2O2空白对照组相比,100、200、300、400μmol/L H2O2处理组细胞活力降低(P<0.05)。Western印迹法结果显示,与H2O2空白对照组相比,H2O2处理组HSPA13的表达上升(P<0.05)。CCK8法结果显示,过表达HSPA13可保护细胞活力。氧化应激相关指标和促炎因子检测结果显示,与H2O2处理组相比,过表达HSPA13加H2O2处理组中SOD1和GPX1 mRNA表达上升,MDA含量降低,GSH含量上升,IL-8、IL-2和IL-1β分泌下降;而siRNA干扰HSPA13加H2O2处理组的结果则相反,并且活性氧类含量上升(P<0.05)。RNA测序结果显示,与空载组相比,HSPA13干扰组差异基因表达上调的有64个,下调的有254个。GO富集分析表明,HSPA13与细胞代谢或多种生理过程相关。KEGG分析显示,HSPA13与PI3K-Akt信号通路、TGFβ信号通路相关。结论氧化应激诱导ARPE19细胞中HSPA13的表达上调;HSPA13在细胞氧化损伤中发挥保护作用,这为寻找年龄相关性黄斑变性新的治疗靶点提供有益的线索。

关键词：过氧化氢氧化应激应激伴侣蛋白视网膜色素上皮细胞年龄相关性黄斑变性

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目标区域测序诊断CRB1突变导致的视网膜变性

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同济大学学报（医学版） 2015年第6期36卷 13-18页

作者：王敏王娟徐鼎吕立夏王方徐国彤同济大学医学院眼科研究所临床视觉科学实验室上海200092 同济大学附属第十人民医院眼科上海200072 同济大学医学院再生医学系生物化学与分子生物学教研室上海200092

目的研究一例疑是视网膜变性的患儿,进行基因检测并作出明确的基因诊断。方法常规检查患儿和家属的眼睛,特别是视网膜的情况。收集患者及家庭成员的外周静脉血液,提取基因组DNA。通过目标区域外显子组序列捕获联合新一代测序(简称目标... 详细信息

目的研究一例疑是视网膜变性的患儿,进行基因检测并作出明确的基因诊断。方法常规检查患儿和家属的眼睛,特别是视网膜的情况。收集患者及家庭成员的外周静脉血液,提取基因组DNA。通过目标区域外显子组序列捕获联合新一代测序(简称目标区域测序),利用生物信息学分析筛选出一系列可能的突变,再通过Sanger测序和共分离研究进行验证,从而确定先证者的致病突变。最后,通过PCR和Sanger测序检测突变基因。结果患儿视力障碍严重,眼底检查所见符合视网膜变性。其他人眼睛正常。基因诊断结果表明,先证者携带CRB1基因的复合杂合性致病突变(c.3521G>C和c.1141_1142 ins TGGCT)。这两个突变分别来源于父亲(c.3521G>C,p.C1174S)和母亲(c.1141_1142ins TGGCT),为隐性遗传。患儿的弟弟(新生儿)只有一个c.1141_1142ins TGGCT突变,表明他不会发病。建议新生儿长大后在生育前要进行遗传检查和咨询。结论目标区域测序的基因诊断方法是检测视网膜变性疾病突变基因的强大工具,有利于对患者做出早期、明确、分子水平的诊断,在特定疾病的理解、预防和预后判定方面能发挥重要作用。同时为其尚无法做临床检查和诊断的新生儿弟弟进行了基因诊断,通过预测,排除了发病的可能。

关键词：基因诊断目标区域测序 CRB1基因视网膜变性

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EET在人体细胞蛋白互作研究中的应用

EET在人体细胞蛋白互作研究中的应用

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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：崔映宇 Jung-Sik Kim Todd Waldman 同济大学医学院再生医学系细胞生物学教研室中国上海200092 乔治城大学医学院隆巴迪综合癌症研究中心美国华盛顿DC20007 乔治城大学医学院隆巴迪综合癌症研究中心美国华盛顿DC20007

关键词： EET 人体细胞基因打靶基因敲入 IP/MS分析蛋白互作分析

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