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2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会

作者：李许演蒋宏伟黄奕华凌均棨同济大学口腔医学院和附属口腔医院牙体牙髓教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院广东省口腔医学重点实验室

目的:探索细胞骨架调节蛋白肌切蛋白Adseverin对体外培养人牙髓细胞形态的影响。材料与方法:改良组织块法体外培养人牙髓细胞,构建小干扰RNA si-h-Adseverin,以Lipofectamine RNAi Max转染至人牙髓细胞,瞬时沉默Adseverin表达,RT-PCR及W... 详细信息

目的:探索细胞骨架调节蛋白肌切蛋白Adseverin对体外培养人牙髓细胞形态的影响。材料与方法:改良组织块法体外培养人牙髓细胞,构建小干扰RNA si-h-Adseverin,以Lipofectamine RNAi Max转染至人牙髓细胞,瞬时沉默Adseverin表达,RT-PCR及Western blot验证转染效率。F-actin荧光探针染色后,以激光共聚焦检测Adseverin沉默对成牙本性向分化诱导前后人牙髓细胞形态的影响。结果:未经成牙本质向分化诱导的人牙髓细胞呈典型的梭形结构,F-actin整齐排列,与细胞长轴平行。经成牙本质向分化诱导7d后,人牙髓细胞内F-actin进行了广泛重组,排列方向紊乱,细胞胞体增大,由梭形转变为立方形或多角形,Adseverin与F-actin共表达于成牙本质细胞突起。Adseverin si RNA干扰的人牙髓细胞呈短棒状,经成牙本质向分化诱导后,胞体变圆,难以形成成牙本质细胞突起结构。定量分析结果显示,成牙本质向诱导分化前,干扰组牙髓细胞的胞体长度和表面积明显小于空载体组或空转染组(p<0.05),但细胞宽度无明显改变(p>0.05);成牙本质向分化诱导可促进正常牙髓细胞胞体长度、宽度及表面积增加(p<0.05),但对Adseverin干扰组牙髓细胞的胞体长度和表面积无明显影响(p>0.05),即Adseverin干扰组牙髓细胞经成牙本质向诱导分化后,胞体长度和表面积明显低于空载体组或空转染组(p<0.05),但细胞宽度无显著差异(p>0.05)。结论:Adseverin影响人牙髓细胞形态,提示Adseverin可能在牙髓细胞形态维持及功能改建中发挥重要作用。

关键词：肌切蛋白牙髓细胞成牙本质向分化细胞骨架

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锥形束CT在牙内陷诊断中的应用

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口腔颌面外科杂志 2019年第3期29卷 164-168页

作者：施雄李生娇周剑萍张利李百龙海军军医大学舰船辐射医学防护教研室上海200433 同济大学口腔医学院和附属口腔医院放射科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:探讨牙内陷的锥形束CT影像特征。方法:收集同济大学附属口腔医院就诊的40例患者其49枚牙内陷患牙的锥形束CT影像资料,对其影像特征进行分析归纳。结果:40例患者中共发现49枚牙内陷患牙,按Oehlers分型其中Ⅰ型35枚、Ⅱ型13枚、Ⅲ型1... 详细信息

目的:探讨牙内陷的锥形束CT影像特征。方法:收集同济大学附属口腔医院就诊的40例患者其49枚牙内陷患牙的锥形束CT影像资料,对其影像特征进行分析归纳。结果:40例患者中共发现49枚牙内陷患牙,按Oehlers分型其中Ⅰ型35枚、Ⅱ型13枚、Ⅲ型1枚;发生于上颌侧切牙46枚,上颌切牙2枚,上颌尖牙1枚。49枚患牙的内陷畸形均发生于所涉及患牙的舌侧;47枚牙有1个凹陷,2枚牙有两个凹陷;3例患牙并发根尖周炎。CBCT图像显示:患牙在内陷层面,Oehlers分型为Ⅰ型的35枚和Ⅱ型13枚,在矢状面、冠状面均可见盲管征;OehlersⅢ型见双轨征;上述3型在横断面均见圆环征;大部分凹陷壁的密度与牙釉质的密度一致。结论:锥形束CT能准确诊断牙内陷,并为指导临床治疗提供可靠的影像学依据。

关键词：牙内陷锥形束CT 放射学

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多巴胺转运体减少对于味觉偏好转化的影响

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口腔颌面外科杂志 2017年第4期27卷 234-240页

作者：肖凡韩雯斐孟博苏俭生上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院.同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海200072 华东师范大学脑功能基因组学教育部重点实验室上海市脑功能基因组学重点实验室上海200062

目的:通过建立小鼠味觉转化模型,研究多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)对这一行为的作用。方法:使用20只DATIRES CRE+/-的杂合小鼠和20只DATIREScre-/-的对照小鼠进行一系列味觉相关的行为学测试,通过Western Blot检测小鼠体内DA... 详细信息

目的:通过建立小鼠味觉转化模型,研究多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)对这一行为的作用。方法:使用20只DATIRES CRE+/-的杂合小鼠和20只DATIREScre-/-的对照小鼠进行一系列味觉相关的行为学测试,通过Western Blot检测小鼠体内DAT蛋白在不同脑区的表达情况。结果:DATIREScre杂合组和对照组相比,其先天性味觉选择以及营养感受与分辨没有异常,但是在味觉感受转化时,尤其是在厌恶性味觉向偏好性味觉的转化中出现异常。结论:消化后营养感受需要多巴胺系统参与,多巴胺转运体表达降低会干扰这一重要过程。这可能是临床上注意力缺失过动症儿童挑食症状的潜在机制。

关键词：多巴胺转运体味觉偏好转化营养感受注意力缺失过动症

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调控小鼠腮腺分泌中枢神经系统相关核团的分布

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口腔颌面外科杂志 2019年第3期29卷 121-130页

作者：张雨菡韩雯斐孟博苏俭生肖凡上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海200072 华东师范大学脑功能基因组学教育部重点实验室上海市脑功能基因组学重点实验室上海200062

目的:探究调控腮腺分泌的中枢神经系统内相关核团的分布。方法:选取8~12周龄C57BL/6小鼠共3只,在小鼠腮腺分3个位点注射伪狂犬病毒重组体(PRV)3μL,注射病毒5 d后荧光显微镜下观察小鼠大脑中被标记的核团分布。结果:PRV感染5 d后,被标... 详细信息

目的:探究调控腮腺分泌的中枢神经系统内相关核团的分布。方法:选取8~12周龄C57BL/6小鼠共3只,在小鼠腮腺分3个位点注射伪狂犬病毒重组体(PRV)3μL,注射病毒5 d后荧光显微镜下观察小鼠大脑中被标记的核团分布。结果:PRV感染5 d后,被标记的脑区在后脑主要包括下泌涎核、后脑区的网状结构、孤束核、三叉神经脊束核、面神经核、中缝核群、蓝斑、蓝斑下核、三叉神经上核、臂旁核等;中脑及间脑主要有中脑导水管周围灰质、中脑区的网状结构、底丘脑旁核、未定带、下丘脑外侧区、下丘脑室旁核尾部、视前内侧区等;端脑中有中央杏仁核、终纹床核、外侧隔核、背外侧内嗅皮层、颗粒状岛叶皮层、异粒状岛叶皮层、鼻周皮层、梨状皮层、无颗粒岛叶皮层尾部、初级体感皮层桶状区、次级体感皮层、初级运动皮层等。结论:本研究结果说明中枢神经系统内有广泛区域参与了对腮腺分泌的调控。

关键词：腮腺神经环路伪狂犬病毒下泌涎核唾液反射

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条件性敲除软骨组织中FGF9基因小鼠模型的建立

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中国口腔颌面外科杂志 2019年第5期17卷 412-417页

作者：翁梦佳章筱悦陈振琦上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院正畸科国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011 同济大学口腔医学院·附属口腔医院正畸科教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:利用Cre-LoxP系统建立可调控的软骨组织条件性敲除成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型。方法:构建针对小鼠Fgf9基因2号外显子的重组载体,电穿孔转染胚胎干细胞(ES细胞)。选择药物G418和Ganc,筛选阳性ES... 详细信息

目的:利用Cre-LoxP系统建立可调控的软骨组织条件性敲除成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型。方法:构建针对小鼠Fgf9基因2号外显子的重组载体,电穿孔转染胚胎干细胞(ES细胞)。选择药物G418和Ganc,筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定。利用显微注射将ES细胞注入C57BL/6J小鼠囊胚,移入假孕小鼠子宫,获得含Neo的flox杂合小鼠。该小鼠去Neo后,与ColⅡ-Cre转基因小鼠杂交,并以他莫昔芬诱导,其后代软骨细胞内flox纯合、Cre阳性小鼠的flox区域被敲除。结果:Fgf9基因flox杂合子小鼠无明显异常,可稳定繁殖。该flox小鼠与ColⅡ-Cre转基因小鼠交配后,成功建立条件性敲除软骨组织中Fgf9基因小鼠模型。结论:利用Cre-LoxP系统,可成功建立Fgf9基因条件性敲除小鼠模型,为后续研究FGF9在骨软骨发育及骨关节稳态维持中的功能奠定了基础。

关键词： FGF9 条件性基因敲除 ColⅡ-Cre转基因小鼠

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咬合改变和束缚应激中小鼠全脑神经激活的比较研究

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口腔医学 2022年第6期42卷 481-486页

作者：徐明李娟刘伟才张琪同济大学口腔医学院·口腔医院修复教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 华东师范大学心理学院上海市脑功能基因组学重点实验室上海200062

目的观察咬合改变导致小鼠焦虑情绪后全脑神经元激活情况,并与束缚应激中全脑神经元激活情况进行比较,以探索咬合改变致小鼠焦虑情绪的神经机制。方法选取成年C57BL/6J雄性小鼠随机进行实验,咬合升高后第7、8天分别进行旷场测试、高架... 详细信息

目的观察咬合改变导致小鼠焦虑情绪后全脑神经元激活情况,并与束缚应激中全脑神经元激活情况进行比较,以探索咬合改变致小鼠焦虑情绪的神经机制。方法选取成年C57BL/6J雄性小鼠随机进行实验,咬合升高后第7、8天分别进行旷场测试、高架十字迷宫测试检测动物焦虑样行为。免疫荧光染色观察小鼠在咬合升高、束缚刺激后2 h全脑cfos蛋白表达情况。结果咬合升高后1周小鼠焦虑样行为显著增加(P<0.05),咬合升高或束缚刺激2 h后全脑部分神经元激活,其中屏状核、伏隔核、外侧隔核、下丘脑室旁核、孤束核中表达cfos蛋白的神经元数目在两种刺激中均显著增加(P<0.05)。结论咬合改变与束缚刺激后小鼠全脑激活神经元存在差异,但在屏状核、伏隔核、外侧隔核、下丘脑室旁核、孤束核中共同激活。

关键词：咬合改变焦虑束缚小鼠

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介孔二氧化硅载甲硝唑复合水凝胶体外抗菌性及牙髓细胞黏附研究

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临床口腔医学杂志 2021年第4期37卷 200-204页

作者：颜燕宏祁胜财彭前崔春李学斌同济大学口腔医学院•同济大学附属口腔医院儿童口腔医学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 同济大学医学院附属上海市第十人民医学院口腔科上海200072 华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心湖北武汉430030 上海市第十人民医院崇明分院口腔科上海202157

目的:研究光固化型纳米介孔二氧化硅负载甲硝唑复合水凝胶抗菌性及对牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)黏附性。方法:合成纳米介孔二氧化硅负载甲硝唑复合水凝胶(MSNs@gGel+MTR水凝胶),通过CCK-8和活/死细菌染色分析其... 详细信息

目的:研究光固化型纳米介孔二氧化硅负载甲硝唑复合水凝胶抗菌性及对牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)黏附性。方法:合成纳米介孔二氧化硅负载甲硝唑复合水凝胶(MSNs@gGel+MTR水凝胶),通过CCK-8和活/死细菌染色分析其对粪肠球菌(***)和变形链球菌(***)的体外抗菌性。通过CCK-8分析该复合水凝胶对hDPSCs生物相容性,激光共聚焦显微镜和扫描电镜评估该复合水凝胶对hDPSCs黏附性能。结果:MSNs@gGel+MTR水凝胶对***和***浮游细菌和细菌生物膜具有显著的抗菌性能。MSNs@gGel+MTR水凝胶对hDPSCs具有良好的生物相容性,可见hDPSCs黏附在MSNs@gGel+MTR水凝胶表面,且伸展良好;hDPSCs能迁移至MSNs@gGel+MTR组水凝胶内。结论:MSNs@gGel+MTR水凝胶具备抗菌和良好的hDPSCs黏附作用,可为牙髓再生的支架材料研究提供新思路。

关键词：介孔二氧化硅载甲硝唑复合水凝胶牙髓干细胞牙髓再生抗菌性细胞黏附

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原发性三叉神经痛中西医非手术诊疗方法的专家共识

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实用口腔医学杂志 2022年第2期38卷 149-161页

作者：侯锐翟新利方剑乔孙沫逸赵吉宏马立昌黄小瑾章燕马东张巍任媛媛马静徐礼鲜于世宾袁华柴碧芳邓中阳军事口腔医学国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心陕西省口腔疾病临床医学研究中心第四军医大学口腔医院医疗康复科西安710032 北京大学口腔医学院-口腔医院口腔颌面外科国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心浙江中医药大学附属第三医院第四军医大学口腔医院口腔颌面外科武汉大学口腔医院口腔外科中国医药教育协会石家庄埋线医学培训基地口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院中医科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院西安交通大学口腔医院口腔颌面外科第四军医大学唐都医院神经内科西安市中医医院第四军医大学西京医院中医科第四军医大学口腔医院口腔麻醉科第四军医大学口腔医院口腔解剖生理学教研室第四军医大学西京医院康复医学科广东省东莞市第九人民医院

原发性三叉神经痛(PTN)是一种在头面部、口腔内三叉神经分布区域内的阵发性剧烈疼痛。中医属于“面痛”范畴,多与外感邪气、情志不调等因素有关。西医认为本病与感觉性癫痫样发作、微血管压迫神经、解剖结构异常等有关。该病发病率不高... 详细信息

原发性三叉神经痛(PTN)是一种在头面部、口腔内三叉神经分布区域内的阵发性剧烈疼痛。中医属于“面痛”范畴,多与外感邪气、情志不调等因素有关。西医认为本病与感觉性癫痫样发作、微血管压迫神经、解剖结构异常等有关。该病发病率不高,诊断并不困难,但治疗较为棘手,疗效不够理想。为明确PTN的诊治理论知识,推广临床非手术治疗经验,提高PTN的诊疗效果,预防减少PTN的反复发作,本文参考国内外文献,结合专家经验,对PTN的病因、临床表现、辨证分型、治疗方案、疗效评价以及预防保健方面分别从西医和中医角度进行阐述并制定原发性三叉神经痛中西医非手术诊疗方法的专家共识。

关键词：原发性三叉神经痛面痛辨证施治治疗方案疗效评价

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脂多糖诱导高迁移率族蛋白B1在人牙髓细胞中转位的研究

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临床口腔医学杂志 2021年第8期37卷 464-468页

作者：颜燕宏彭前姚超兰冬梅崔春同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院儿童口腔医学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 同济大学医学院附属上海市第十人民医学院口腔科上海200072 安徽理工大学医学院安徽合肥232001 华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心湖北武汉430030

目的:观察低浓度脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导人牙髓细胞(human dental pulp cells, hDPCs)中高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)在细胞中的转位及其hDPCs细胞活性的影响。方法:采用原代组织块培养法,培养人牙髓细胞,取第3~6代细胞用于实验。分别用含不同质量浓度(0、10、50、100、500、1 000 ng/mL)LPS的培养液培养hDPCs 3 d,采用CCK-8法检测细胞活性;100 ng/mL LPS刺激hDPCs后,免疫荧光检测0 h、6 h、12 h及24 h HMGB1在hDPCs中的表达定位,RT-PCR检测各时间点hDPCs细胞TNF-α,IL-1及HMGB1的mRNA表达,ELISA试剂盒分析细胞上清中HMGB1的含量。结果:低浓度LPS刺激hDPCs后,细胞活性并无明显改变,提示hDPCs具有抵抗低浓度LPS的能力。RT-PCR结果示LPS浓度在10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL时,IL-1和HMGB1的mRNA水平无显著变化;500 ng/mL和1 000 ng/mL时,TNF-α、IL-1和HMGB1的mRNA水平显著上调。免疫荧光示LPS诱导后,在6 h、12 h及24 h均可见hDPCs细胞浆中HMGB1的表达,ELISA结果示HMGB1能分泌到细胞上清中。结论:低浓度LPS可对hDPCs活性基本无影响,且可诱导HMGB1在hDPCs中从细胞核转位到细胞浆,并释放到细胞外。

关键词：脂多糖人牙髓细胞 HMGB1 转位

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DNA甲基化转移酶Dnmt3b调控颞下颌关节骨关节炎的表观遗传研究初探

DNA甲基化转移酶Dnmt3b调控颞下颌关节骨关节炎的表观遗传研究初探

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2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会

作者：周玥陈默李智毛剑周学东王佐林同济大学口腔医学院和附属口腔医院牙体牙髓教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心四川大学华西口腔医学院口腔疾病研究国家重点实验室哥伦比亚大学颅面再生医学中心

目的:颞下颌关节骨关节炎是在口腔医学领域较为常见的退行性关节疾病。本课题通过研究DNA甲基化转移酶Dnmt3b在颞下颌关节骨关节炎中的作用,深化表观遗传对颞下颌关节骨关节炎发病与修复机制的认识,拟寻求颞下颌关节骨关节炎治疗的新靶... 详细信息

目的:颞下颌关节骨关节炎是在口腔医学领域较为常见的退行性关节疾病。本课题通过研究DNA甲基化转移酶Dnmt3b在颞下颌关节骨关节炎中的作用,深化表观遗传对颞下颌关节骨关节炎发病与修复机制的认识,拟寻求颞下颌关节骨关节炎治疗的新靶点。方法:采用免疫组化染色检测DNA甲基化转移酶Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b在颞下颌关节髁突软骨内的表达。通过关节盘穿孔构建颞下颌关节骨关节炎的动物模型,免疫组化染色观察分析Dnmt3b在正常与骨关节炎的颞下颌关节髁突软骨中表达水平的差异。利用条件性基因敲除小鼠模型以及HE染色、番红O染色、免疫组织化学染色等方法,研究在缺乏Dnmt3b表达的情况下,相对于同窝对照小鼠,颞下颌关节髁突软骨组织变性及破坏的程度,以及软骨细胞的异常改变。体外分离培养原代髁突前软骨干细胞,检测分析Dnmt3b过表达或低表达对软骨细胞分化过程的影响。采用荧光素酶报告基因试验、免疫荧光染色及免疫组化染色检测Dnmt3b表达水平改变后细胞内Wnt/β-catenin信号通路的变化情况,探讨Dnmt3b与Wnt/β-catenin信号通路之间的相关性。通过在大鼠颞下颌关节腔内注射碘乙酸钠化学试剂,诱导大鼠颞下颌关节骨关节炎的发生,同时局部注射Dnmt3b过表达慢病毒悬液,观察软骨厚度、软骨细胞外基质及软骨细胞分化相关标志物的改善情况。结果:免疫组化染色结果显示Dnmt3b在软骨细胞分化过程中呈差异性表达,并且与正常对照组相比,Dnmt3b在颞下颌关节骨关节炎的髁突软骨中表达明显下降。相对于同窝对照小鼠,条件性Dnmt3b基因敲除小鼠罹患颞下颌关节骨关节炎,软骨细胞过度增殖和异常肥大分化。在体外髁突软骨细胞的分化过程中,Dnmt3b过表达促进ColⅡ的表达,抑制Col X的表达;Dnmt3b低表达抑制ColⅡ的表达,促进Col X的表达。同时,Dnmt3b过表达抑制β-catenin的核转录;Dnmt3b低表达促进β-catenin的核转录。碘乙酸钠诱导大鼠颞下颌关节骨关节炎的发生,局部注射Dnmt3b具有明显的治疗效果。结论:Dnmt3b参与调控软骨细胞的分化,对维持颞下颌关节软骨的稳定具有重要的作用,局部注射Dnmt3b可有效减轻颞下颌关节骨关节炎的病损。

关键词： DNA甲基化转移酶颞下颌关节骨关节炎 Wnt/β-catenin信号通路

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